榛葉莢蒾化學(xué)成分的研究

馮丹萍 范 敏

大理大學(xué)藥學(xué)院，云南 大理 671000

莢蒾屬(Viburnum)為忍冬科(Caprifoliaceae)一大屬，全球約有200種，包括灌木和喬木，主要分布于北半球溫帶和亞熱帶地區(qū)。我國共有74種，廣泛分布于全國各省區(qū)，以西南部種類最多。該屬多種植物在民間作為傳統(tǒng)藥物使用，用于咳嗽、痢疾、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及腫脹等多種疾病的治療[1]?！度珖胁菟巺R編》中記載，莢蒾屬植物有祛風(fēng)清熱、祛瘀消腫、散瘀活血之功效。已有研究[2]表明該屬植物中的化學(xué)成分類型多樣，富含二萜類、三萜類、環(huán)烯醚萜類、單萜類、倍半萜類、黃酮類和木脂素類等成分，其中多個化合物具有良好的抗腫瘤和抗氧化活性，尤其vibsanin型的二萜具有良好的抗腫瘤活性[3]。基于此，近年來莢蒾屬植物多樣的藥理活性及其獨(dú)特的化學(xué)成分引起科研工作者的密切關(guān)注。榛葉莢蒾ViburnumcorylifoliumJ. D. Hooker et Thomson為落葉灌木，分布于四川、廣西東北部、貴州、湖北西部、陜西南部及印度東北部等地[4]。國內(nèi)外對該植物化學(xué)成分的研究報道較少，截止目前，僅本課題組前期從中發(fā)現(xiàn)了6個化合物[5]。為進(jìn)一步探索榛葉莢蒾的化學(xué)成分，以便為利用該植物資源提供物質(zhì)基礎(chǔ)指導(dǎo)，本課題組對其甲醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)研究，共分離鑒定出8個化合物，包括2個三萜、2個黃酮及3個酚酸類化合物。

1 儀器和材料

1D和2DNMR在Bruker AM-400，DRX-500及Bruker Avance III 600核磁共振儀上測定，TMS作為內(nèi)標(biāo)，δ為ppm,J為Hz。拌樣及柱層析用硅膠(100～200，200～300 目)，為青島海洋化工廠生產(chǎn)；反相填充材料RP-18為40～60 μm, Merk公司生產(chǎn)；MCI填充材料為MCI-gel CHP-20P；MPLC 采用EZ Purifier System 液相色譜儀(pump manager P03, detector modules P02, and fraction collector P01)。HPLC分析儀器為安捷倫1200型高效液相色譜儀，譜柱為Agilent 公司的Zorbax SB-C18 column (5 μm, 10 mm × 250 mm)。半制備色譜柱為Agilent 公司的Zorbax SB-C18, 9.4 mm × 25 cm column。顯色劑為7%濃硫酸的乙醇溶液，噴灑后適當(dāng)加熱。

榛葉莢蒾V.corylifoliumJ. D. Hooker et Thomson地上部分于2017年6月采自云南省文山州，并由中國科學(xué)院昆明植物所成曉研究員鑒定。植物標(biāo)本存放于大理大學(xué)生藥學(xué)教研室。

2 提取與分離

干燥的榛葉莢蒾地上部分7.5 kg，粉碎后用甲醇在室溫下冷浸提取三次，每次24 h，合并提取液，減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑后得粗提物，將該粗提物分配于水中，用乙酸乙酯萃取三次，得188 g浸膏。此浸膏經(jīng)MPLC(MCI gel)柱層析分離，采用甲醇-水(10%→100%)系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，減壓濃縮后得到5個餾分純化，得到化合物1(26 mg)和5(16 mg)。餾分II經(jīng)過多次正相硅膠柱層析、半制備高壓液相、以及Sephadex LH-20(純甲醇)分離得化合物3(3 mg)，4(58 mg)和6(6 mg)。餾分III經(jīng)過反復(fù)正硅膠柱層析及Sephadex LH-20(氯仿/甲醇，1∶1)分離得到化合物2(18 mg)，7(7 mg)和8(2 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1: 無色晶體，分子式C30H50O2，ESI-MSm/z: 465[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH4.77 (1H, s, H-26a), 4.50 (1H, s, H-26b), 3.16 (1H, m, H-3), 0.92 (3H, s, Me-23), 0.69 (3H, s, Me-24), 0.58 (3H, s, Me-24);13C NMR (100 MHz, CDCl3): δC36.8 (t, C-1/C-20), 27.1 (t, C-2/C-19), 78.2 (d, C-3/C-21), 38.9 (s, C-4/C-22), 57.1 (d, C-5/C-17), 22.1 (C-6/C-16), 38.7 (t, C-7/C-15), 148.2 (s, C-8/C-14), 54.5 (d, C-9/C-13), 38.9 (s, C-10/C-18), 23.7 (t, C-11/C-12), 27.8 (q, Me-23/Me-30), 15.0 (q, Me-24/Me-29), 14.1 (q, M-25/Me-28), 106.2 (d, C-26/ C-27)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]一致，鑒定該化合物為α-芒柄花醇。

化合物2: 白色無定形粉末，分子式C29H52O3，ESI-MSm/z: 449[M+H]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH4.03 (1H, m, H-3a), 3.30 (s, H-6a), 1.01 (3H, s, Me-19), 0.87 (3H, d,J= 6.5 Hz, Me-21), 0.82 (3H, d,J= 6.9, Me-27), 0.80 (3H, t,J= 7.1, 7.1 Hz, Me-24), 0.78 (3H, d,J= 6.9, 26-Me), 0.59 (3H, s, Me-18);13C NMR (100 MHz, CDCl3): δC36.0 (t, C-1), 30.2 (t, C-2), 67.1 (d, C-3), 24.0 (t, C-4), 75.7 (s, C-5), 75.3 (d, C-6), 25.8 (t, C-7), 45.3 (d, C-8), 55.9 (d, C-9), 37.8 (s, C-10), 28.8 (t, C-11), 39.9 (t, C-12), 42.4 (s, C-13), 56.0 (d, C-14), 30.2 (t, C-15), 32.1 (t, C-16), 45.7 (d, C-17), 11.9 (q, C-18), 19.6 (q, C-19), 28.3 (d, C-20), 18.8 (q, C-21), 33.5 (t, C-22), 34.6 (t, C-23), 39.9 (d, C-24), 21.0 (t, C-25), 11.8 (q, C-26), 22.8 (d, C-27), 16.4 (q, C-28), 18.5 (q, C-29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]一致，鑒定該化合物為sitostane-3β-5α-6β-triol。

化合物3: 黃色無定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MSm/z: 471[M+Na]+。1H NMR (500 MHz, C5D5N): δH13.3 (1H, s, HO-5), 8.43 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-2′/H-6′), 6.70 (2H, br s, H-3′/H-5′), 6.37 (1H, d,J= 3.0 Hz, H-6), 5.77 (m, H-1 glc);13C NMR (125 MHz, C5D5N): δC157.5 (s, C-2), 135.5 (s, C-3), 178.8(s, C-4), 105.3 (s, C-4a), 162.9 (s, C-5), 99.9 (d, C-6), 166.0 (s, C-7), 94.7 (d, C-8), 157.6 (s, C-8a), 122.0 (s, C-1′), 131.9 (d, C-2′/C-6′), 116.1 (d, C-3′/5′), 161.7 (s, C-4'), 104.2 (d, C-1 glc), 76.2 (d, C-2 glc), 78.6 (d, C-3 glc), 71.6 (d, C-4 glc), 79.0 (d, C-5 glc), 62.8 (t, C-6 glc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]一致，鑒定該化合物為山奈酚3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4: 黃色無定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MSm/z: 471[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, C5D5N): δH13.3 (1H, s, H-5), 5.46 (1H, s, aromatic proton), 1.45 (d,J= 5.6 Hz, Me-6′);13C NMR (100 MHz, C5D5N): δC157.8 (s, C-2), 135.3 (s, C-3), 179.2 (s, C-4), 105.5 (s, C-4a), 163.0 (s, C-5), 99.8 (d, C-6), 165.9 (s, C-7), 94.7 (d, C-8), 158.3 (s, C-8a), 117.2 (s, C-1′), 116.2 (d, C-2′), 147.4 (s, C-3′), 150.7 (s, C-4′), 116.6 (d, C-5′), 122.4 (d, C-6′) 100.0 (d, C-1 rha), 72.3 (d, C-2 rha), 72.7 (d, C-3 rha), 73.5 (d, C-4 rha), 72.2 (d, C-5 rha), 18.5 (q, C-6 rha)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]一致，鑒定該化合物為槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

化合物5: 無色油狀物，分子式 C20H24O7，ESI-MSm/z: 399[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH6.97 (1H, d,J= 3.2 Hz, H-2), 6.83 (2H, d,J= 7.9 Hz, H-6), 6.67 (1H, d,J= 8.1 Hz, H-6′), 4.73 (1H, s, H-7), 3.90 (2H, d,J= 10.1 Hz, H-9);13C NMR (125 MHz, CDCl3): δC129.5 (s, C-1), 108.0 (d, C-2), 146.8 (s, C-3), 145.6 (s, C-4), 114.4 (d, C-5), 118.4 (d, C-6), 86.7 (d, C-7), 80.6 (s, C-8), 61.9 (t, C-9), 131.7 (s, C-1′), 110.9 (d, C-2′), 146.8 (s, C-3′), 144.2 (s, C-4′), 114.8 (d, C-5′), 121.4 (d, C-6′), 33.3 (t, C-7′), 50.2 (d, C-8′), 70.8 (t, C-9′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]一致，鑒定該化合物為berchemol。

化合物6: 黃色無定形粉末，分子式C18H30O3，ESI-MSm/z: 295[M+H]+。1H NMR (400 MHz, C5D5N): δH7.78 (1H, dd,J= 15.5, 11.4 Hz, H-11), 6.34 (1H, d,J=15.5 Hz, H-12), 6.23 (1H, d,J= 11.4 Hz, H-10), 5.88 (1H, dt,J= 10.8, 7.6 Hz, H-9), 2.60 (1H, t, 2H, H-8), 2.50 (1H, m, H-14), 2.23 (1H, m, H-2), 1.74 (m, H-17), 1.64 (m, H-15), 1.26 (m, 2H, H-4, 5, 6, 7, 16), 0.78 (t, 3H,J= 6.6, H-18);13C NMR (100 MHz, C5D5N): δC179.8 (s, C-1), 33.3 (t, C-2), 25.8 (t, C-3), 31.7-29.2 (t, C-4,5,6,7,16), 28.5 (t, C-8), 142.7 (d, C-9), 127.5 (d, C-10), 137.1 (d, C-11), 130.3 (d, C-12), 200.4 (s, C-13), 41.31 (t, C-14), 24.6 (t, C-15), 22.8 (t, C-17), 14.2 (q, C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]一致，鑒定該化合物為(9E,11Z)-13-oxo-9,11-octadecadienoic acid。

化合物7: 白色針晶，分子式C8H8O5，ESI-MSm/z: 207[M+Na]+。1H NMR (600 MHz, C5D5N): δH7.22 (2H, s, H-2/H-6), 3.62 (3H, s, H-Me);13C NMR (150 MHz, C5D5N): δC121.5 (s, C-1), 110.6 (d, C-2/C-6), 148.1 (s, C-3/C-5), 141.6 (s, C-4), 169.4 (s, C-4a), 162.9 (s, C=O), 52.1 (q, C-Me)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]一致，鑒定該化合物為沒食子酸甲酯。

化合物8: 白色無定形粉末，分子式 C9H10O3，ESI-MSm/z: 189 [M + Na]+。1H NMR (400 MHz, CD3COCD3): δH12.70 (1H, s, H-OH), 7.62 (1H, d,J= 9.0 Hz, H-6), 6.45 (1H, dd,J= 9.0, 2.5 Hz, H-5), 6.40 (1H, d,J= 2.5 Hz, H-3), 3.83 (3H, s, H-COMe), 2.55 (3H, s, H-Me);13C NMR (100 MHz, CD3COCD3): δC114.5 (s, C-1), 166.9 (s, C-2), 101.3 (d, C-3), 165.9 (s, C-4), 107.9 (d, C-5), 133.5 (d, C-6), 203.8 (s, C-1′), 55.9 (d, C-OMe), 26.2 (q, C-COMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]一致，鑒定該化合物為丹皮酚。

4 結(jié)論

莢蒾屬植物資源豐富，具有顯著的抗腫瘤[14]、抗氧化[15]、抗炎[16]、抗菌殺蟲[17]、降血糖[18]等生物活性。迄今為止，從該屬植物中已報道了140多種化學(xué)成分[19]，但目前僅對珊瑚樹、歐洲莢蒾、地中海莢蒾、南方莢蒾等少數(shù)幾種植物的提取物或單體進(jìn)行了藥理作用研究，對榛葉莢蒾的化學(xué)成分研究較少，從中分離到的7-deacetyl suspensolide A aglycone具有較好的抗炎活性[5]。因此從榛葉莢蒾中尋找和發(fā)現(xiàn)抗炎活性成分，對該植物資源的研究和開發(fā)具有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)從榛葉莢蒾中分離得到8個已知化合物，其中食子酸甲酯(7)和丹皮酚(8)具有較好的抗炎活性[20-21]。進(jìn)一步文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，雖然從莢蒾屬植物中分離得到的化學(xué)成分種類豐富，但僅對其中的少部分成分進(jìn)行了藥理活性研究，為了豐富對莢蒾屬的進(jìn)一步認(rèn)識，有必要對榛葉莢蒾中分離的化合物進(jìn)行活性研究，以期為該屬植物的開發(fā)與利用提供依據(jù)。