實(shí)驗(yàn)獼猴的隔離檢疫與疾病控制

徐西彬，韓紅星，王志鵬，張 恩*

（1.北京師范大學(xué)認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)與學(xué)習(xí)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100875；2.中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所腦與認(rèn)知科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100101）

靈長(zhǎng)類動(dòng)物的生物學(xué)特征（如組織結(jié)構(gòu)、解剖學(xué)、生殖和微觀生物學(xué)等）與人類最為接近，是與人的大腦在功能和結(jié)構(gòu)上最為接近的可用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[1]。獼猴有發(fā)達(dá)的大腦皮層和復(fù)雜的認(rèn)知能力，特別是大腦中樞視覺(jué)系統(tǒng)，利用獼猴這一特殊的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可以用來(lái)研究幾乎所有的認(rèn)知活動(dòng)，比如決策、情緒、知覺(jué)、學(xué)習(xí)與記憶、睡眠與覺(jué)醒等。因此，經(jīng)過(guò)特殊訓(xùn)練并能完成特定任務(wù)的獼猴是認(rèn)知科學(xué)研究領(lǐng)域最理想的測(cè)試模型[2,3]。

獼猴的隔離檢疫和疾病控制等直接關(guān)系到工作人員和動(dòng)物的安全，關(guān)系到科研實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)的真實(shí)可靠、完整可追溯。本文對(duì)獼猴檢疫和疾病控制的科學(xué)管理和倫理進(jìn)行了概括性介紹，通過(guò)加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)獼猴的福利保障，以保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物高質(zhì)量的健康狀態(tài)和工作人員的安全，從而將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用量降到最低程度，用一定數(shù)量的獼猴獲取更多實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或者使用更少量的獼猴獲得同樣多的數(shù)據(jù)，提高認(rèn)知研究結(jié)果的可靠性，為相關(guān)應(yīng)用研究提供指導(dǎo)。

1 實(shí)驗(yàn)室制度建設(shè)和人員配備

1.1 制度建設(shè)

實(shí)驗(yàn)平臺(tái)成立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)，委員會(huì)成員由從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科研研究的專業(yè)技術(shù)人員、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面專家、專職獸醫(yī)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理人員等組成，委員會(huì)制定了詳細(xì)規(guī)范的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理制度，通過(guò)制定各類應(yīng)急預(yù)案以防突發(fā)事件的發(fā)生。動(dòng)物倫理委員會(huì)定期召開(kāi)相關(guān)會(huì)議確保動(dòng)物福利和生物安全保障措施等。

1.2 人員配備

實(shí)驗(yàn)室配備經(jīng)過(guò)專業(yè)訓(xùn)練的飼養(yǎng)人員和獸醫(yī)。2名獸醫(yī)都具有本科以上動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)歷，都有執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師資格證書(shū)且具有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，有較強(qiáng)的責(zé)任心。獸醫(yī)主要負(fù)責(zé)疾病防治工作，履行相應(yīng)的巡查職責(zé)。飼養(yǎng)人員熟練掌握飼養(yǎng)基本操作規(guī)程，具有較強(qiáng)的責(zé)任心，且取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上崗證書(shū)方可上崗。

2 飼養(yǎng)環(huán)境

實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格遵照《北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》等規(guī)定進(jìn)行管理和飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。動(dòng)物房的飼養(yǎng)間專門(mén)設(shè)有緩沖觀察室以備飼養(yǎng)員和獸醫(yī)隨時(shí)觀察和記錄獼猴狀態(tài)。猴籠要有足夠的空間，動(dòng)物房或者猴籠內(nèi)設(shè)置棲息架和玩具等，供動(dòng)物攀爬和玩耍等，為其提供自由空間和舒適環(huán)境，從而保證獼猴的福利。猴籠內(nèi)有控制水閥（或定容的飲水瓶），獼猴可自由飲水。

動(dòng)物房每日8點(diǎn)由飼養(yǎng)人員清掃沖洗糞便和清除墊料，每天定期消毒，保持動(dòng)物房?jī)?nèi)衛(wèi)生，為獼猴提供一個(gè)舒適的生活環(huán)境。動(dòng)物房?jī)?nèi)設(shè)有通風(fēng)換氣設(shè)備，溫度設(shè)置18～25℃，濕度設(shè)置40%～60%，維持動(dòng)物房空氣流暢。應(yīng)保持冬暖夏涼，尤其注意夏天要防止動(dòng)物中暑，動(dòng)物房要有一定的降溫除濕裝置。

3 隔離檢疫

新進(jìn)獼猴首先要建立科學(xué)飼養(yǎng)管理和嚴(yán)格的隔離檢疫制度，新引進(jìn)的獼猴不能直接放入飼養(yǎng)室，必須要在檢疫房進(jìn)行1～2個(gè)月的隔離檢疫，檢疫項(xiàng)目主要包括細(xì)菌學(xué)檢查、病毒學(xué)檢查和寄生蟲(chóng)檢查等。然后在檢疫隔離期內(nèi)檢疫合格的獼猴，再經(jīng)過(guò)1～2個(gè)月適應(yīng)飼養(yǎng)期才可放入飼養(yǎng)室。

3.1 新引進(jìn)獼猴檢疫

一是接觸動(dòng)物的工作人員須穿工作服，戴好一次性醫(yī)用手套、帽子、口罩，對(duì)新進(jìn)獼猴觀察和檢查獼猴毛發(fā)、精神狀態(tài)、體表有無(wú)外傷，口咽部是否有水皰以及潰瘍，檢查頜下、腋下及腹股溝淋巴結(jié)是否有發(fā)熱腫大現(xiàn)象。

二是對(duì)新進(jìn)的獼猴進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)、B病毒檢測(cè)、微生物、體外寄生蟲(chóng)等檢查。

三是隔離觀察處于正常狀態(tài)的動(dòng)物，進(jìn)行至少3次結(jié)核菌素TB試驗(yàn)，每次間隔2周。將結(jié)核菌素OT原液1 500國(guó)際單位（0.1 ml）接種于眼瞼，以72 h的結(jié)果判定為最終標(biāo)準(zhǔn)。如果眼瞼出現(xiàn)一定程度的發(fā)紅，水腫明顯，則判定為陽(yáng)性；如果眼瞼水腫很嚴(yán)重，甚至出現(xiàn)閉合現(xiàn)象，則判定為強(qiáng)陽(yáng)性。結(jié)果為陽(yáng)性獼猴需要再次復(fù)檢。當(dāng)復(fù)檢再次出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，獼猴接種眼瞼有腫脹、發(fā)紅和化膿等癥狀，應(yīng)立即處死，尸體必須無(wú)害化處理，所使用的物品等須高壓鍋消毒。

3.2 年度檢疫

動(dòng)物房的獼猴應(yīng)實(shí)行定期檢疫，每年至少2次，上半年和下半年分別1次。動(dòng)物房管理負(fù)責(zé)人統(tǒng)一安排年度檢疫事宜，并在檢疫前一周通知獸醫(yī)和飼養(yǎng)員等做好準(zhǔn)備。

年度檢疫項(xiàng)目包括獼猴體重、獸醫(yī)觸診檢查、B病毒檢測(cè)、結(jié)核菌素試驗(yàn)和細(xì)菌、體外寄生蟲(chóng)檢查。

年度檢疫出不符合檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（微生物和寄生蟲(chóng)等）的獼猴，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行隔離觀察，待治療后符合檢疫標(biāo)準(zhǔn)后才能放回原猴籠。結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性的獼猴應(yīng)及時(shí)處死，同時(shí)對(duì)此猴所在的動(dòng)物房徹底消毒，該動(dòng)物房的全部獼猴須進(jìn)行至少3次結(jié)核菌素試驗(yàn)，連續(xù)3次檢測(cè)結(jié)果都為陰性的獼猴才能視為健康猴。

年度檢疫結(jié)果記入檔案，由獸醫(yī)出具年度檢疫總結(jié)報(bào)告。

4 疾病控制

在認(rèn)知研究中，疾病會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)獼猴的生長(zhǎng)發(fā)育和質(zhì)量品質(zhì)，甚至?xí)绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，對(duì)獼猴的疾病預(yù)防和診治具有十分重要的價(jià)值和意義。獼猴常見(jiàn)疾病有外傷、脫肛、細(xì)菌性痢疾、傳染性肺炎和體外寄生蟲(chóng)病等[4]。建立正確的疾病檢測(cè)和預(yù)防治療體系是防治獼猴各種疾病的關(guān)鍵。應(yīng)對(duì)獼猴加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，飼養(yǎng)室和檢疫室要定期消毒，保持環(huán)境衛(wèi)生以及食物營(yíng)養(yǎng)成分的合理搭配，只有獼猴抵抗能力增強(qiáng)，疾病的發(fā)生率才能降低。本文主要介紹幾種常見(jiàn)病的病因、治療護(hù)理和疾病控制等。

4.1 外傷

群養(yǎng)的獼猴主要是發(fā)生撕咬、抓傷等現(xiàn)象，導(dǎo)致身體各部位受傷，比如四肢毛皮大面積撕裂，有的下巴被撕裂。實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的動(dòng)物所引起的外傷主要有籠具毛刺或設(shè)計(jì)不合理對(duì)動(dòng)物造成的損傷、動(dòng)物逃逸與其他動(dòng)物打鬧被動(dòng)咬傷及手術(shù)等方面。輕傷猴首先給予止血處理，止血可采取壓迫、結(jié)扎、使用止血藥物等。用3%的雙氧水清洗創(chuàng)面，同時(shí)清除血凝塊和異物等。為預(yù)防感染，除了肌注抗菌消炎藥外，還要補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，認(rèn)真治療、精心護(hù)理，以保證弱勢(shì)獼猴的健康生存。

為了防止獼猴外傷，可以將病猴飼養(yǎng)在單籠環(huán)境中，在放入前將猴籠消毒，并保持猴籠的衛(wèi)生整潔，減少傷口感染。動(dòng)物房要保持良好的通風(fēng)和光照，安靜無(wú)噪音，同時(shí)避免人為因素影響獼猴休息，造成傷口恢復(fù)緩慢[5]。

4.2 脫肛

獼猴脫肛是較常見(jiàn)的疾病之一，脫肛是由于獼猴后段直腸、肛管等黏膜層或者直腸全層向下位移脫出肛門(mén)，直腸壁部分或全層全部脫出肛門(mén)則為直腸脫。人為捕捉受到驚恐、劇烈的腹瀉（如痢疾和腸炎）可以導(dǎo)致脫肛，一般體弱的老年獼猴或幼年動(dòng)物易發(fā)生。

動(dòng)物保定后，以溫生理鹽水沖洗脫出部分，小心清除腸壁上所粘附的污物，用0.1%高錳酸鉀液對(duì)脫出的腸管及肛門(mén)周圍進(jìn)行反復(fù)沖洗。對(duì)脫出時(shí)間較長(zhǎng)、出現(xiàn)充血水腫的，可針刺水腫黏膜，輕輕擠出水腫液，使腸管變軟再清洗。在脫出的腸管壁上涂抹紅霉素軟膏等，再把脫出的腸管還納腹腔。倒提獼猴來(lái)回輕微晃動(dòng)，有助腸管復(fù)位[6]。對(duì)于反復(fù)脫出的病猴，可以對(duì)肛門(mén)進(jìn)行荷包縫合，收口適度，要留有可通過(guò)糞便的口徑；嚴(yán)重壞死的要進(jìn)行切除，對(duì)患猴的腸管施行斷端吻合術(shù)，腸管縫合后還納入腹腔，注射抗生素控制感染。

4.3 細(xì)菌性痢疾

猴細(xì)菌性痢疾是由志賀氏菌屬引起的消化道傳染病，常見(jiàn)于新引進(jìn)的猴群中，任何季節(jié)均可發(fā)生，癥狀為口渴拒食，部分有嘔吐，精神萎靡不振，嚴(yán)重的患猴出現(xiàn)濃血便。該病死亡率較高且易復(fù)發(fā)，若不及時(shí)采取積極有效措施，患猴很容易死亡，不但嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品質(zhì)，而且可能會(huì)影響科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果[7]。

對(duì)脫水比較明顯、糞便呈排水樣的患猴，可以采用左氧氟沙星滴注，劑量為100 ml（0.2 g）靜脈滴注，對(duì)于危重病猴，靜脈注射10%葡萄糖氯化鈉溶液，一并注射頭孢哌酮0.5 g及維生素C 0.5 g，給液劑量一般控制在50 ml以內(nèi)，以不增加心臟負(fù)擔(dān)為目的?？傊?，細(xì)菌性痢疾需要采取預(yù)防、抗菌、補(bǔ)液、補(bǔ)營(yíng)養(yǎng)等綜合治療措施，同時(shí)獸醫(yī)應(yīng)每天多次仔細(xì)觀察獼猴的飲食、糞便等，一旦發(fā)現(xiàn)可疑病猴，及時(shí)對(duì)其隔離治療，同時(shí)補(bǔ)充維生素C，在腸道恢復(fù)的同時(shí)提高病猴的免疫力，從而提高病猴的治愈率[8]。

4.4 傳染性肺炎

該病多見(jiàn)于營(yíng)養(yǎng)不良以及體質(zhì)虛弱的獼猴，癥狀主要是精神萎靡、臉部尤其是唇部發(fā)紺、咳嗽、呈喘式呼吸、鼻翼異常煽動(dòng)，體溫升高到39.5～40.3℃。

對(duì)發(fā)病獼猴進(jìn)行隔離治療。癥狀嚴(yán)重的獼猴以恩諾沙星按50 g/kg體重進(jìn)行輸液，同時(shí)輔以5%葡萄糖注射液100 ml、地塞米松注射液和維生素C等，迅速達(dá)到抗感染、抗休克以及保護(hù)心功能的作用。癥狀較輕的獼猴肌肉注射慶大霉素、阿托品，同時(shí)口服復(fù)方維生素口服液[9]。

流行季節(jié)時(shí)，采取提高飼料品質(zhì)、隔離帶菌獼猴、預(yù)防性藥物治療及環(huán)境消毒綜合性防治措施，更有效地預(yù)防和控制疾病。

4.5 阿米巴痢疾

阿米巴痢疾是內(nèi)阿米巴屬中的溶組織內(nèi)阿米巴原蟲(chóng)引起的傳染性腸道疾病，且感染后不產(chǎn)生保護(hù)性抗體，易重復(fù)感染。癥狀主要為腹部不適，腹痛腹瀉，寒顫，高熱行動(dòng)遲緩，消瘦，排黃色或褐黃色稀便，有些排濃血便，糞便腥臭，嚴(yán)重者肛門(mén)括約肌松弛，直腸脫出，臨床表現(xiàn)為水性腹瀉?？刹扇∫韵麓胧┻M(jìn)行治療和預(yù)防。一是消滅鼠、蒼蠅和蟑螂。二是加強(qiáng)獼猴營(yíng)養(yǎng)，增強(qiáng)獼猴的抵抗力，以加大獼猴的活動(dòng)量，促使其食欲增強(qiáng)，進(jìn)而提高抵抗力。三是對(duì)患病獼猴進(jìn)行靜脈注射或口服特效藥甲硝唑。在飼料中添加甲硝唑和白糖，可起到預(yù)防和治療的作用[10]。

5 結(jié)束語(yǔ)

建立正確的隔離檢疫制度和科學(xué)管理體系是監(jiān)測(cè)和控制各種獼猴疾病發(fā)生的關(guān)鍵，工作人員須有較強(qiáng)的責(zé)任心以及技術(shù)能力。此外，應(yīng)定期對(duì)獼猴進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查、病毒性檢查和寄生蟲(chóng)學(xué)檢查，同時(shí)注重環(huán)境消毒，杜絕病毒細(xì)菌的繁殖與傳播。