藏藥七味螃蟹甲丸的定性薄層色譜鑒別研究

土旦卓瑪，聶麗娟，劉艷霞，張勇倉(cāng)

(西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院，西藏 拉薩 850000)

0 引言

藏藥七味螃蟹甲丸是藏醫(yī)治療高原地區(qū)肺臟疾病的常用藥，始載于《四部醫(yī)典》，具有清熱解毒，消炎止咳等功效，用于感冒咳嗽，氣管炎，喑啞。本品為棕黃色水丸；氣微；味甜、澀，其藥方組成包括叢菔、螃蟹甲、訶子(去核)、甘草、丁香、檀香、石灰華，其螃蟹甲、石灰華清胸?zé)?、?zhèn)咳、消炎癥；甘草、叢菔清肺止咳、祛痰；訶子、丁香調(diào)藥性及三因。目前藏藥七味螃蟹甲丸的處方中螃蟹甲(拉丁名PhlomisyounghusbandiiMukerj.)、叢菔(拉丁名Solms-Laubachiaeurycarpa (Mazim.) Botsch.)、訶子(拉丁名Terminalia chebula Retz.)沒(méi)有定性TLC 鑒別，為保證制劑臨床應(yīng)用的安全性、有效性、穩(wěn)定性、均一性，因此本文建立了針對(duì)上述藥材的薄層色譜鑒別方法。在定性薄層色譜中均能檢測(cè)出螃蟹甲、叢菔、訶子三味藥材，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照溶液無(wú)干擾[1-2]。本文所建立的方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、專(zhuān)屬性強(qiáng)，可用于藏藥七味螃蟹甲丸的質(zhì)量控制[3-8]。本文的研究為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了較為可靠的依據(jù)[9]。

1 儀器與材料

1.1 儀器

FA2004B 分析天平：上海精密科學(xué)儀器有限公司。DK-600D 電子數(shù)碼超聲波清洗機(jī)(得康超聲)，恒溫干燥箱DHG-9240：上?？莆鰞x器成套公司。ZF-2 型三用紫外分析儀：上海市安亭電子儀器廠。

1.2 材料

沒(méi)食子酸對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院110831-201906)，精氨酸對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院140685-201707)，螃蟹甲對(duì)照藥材(中國(guó)食品藥品檢定研究院121407-200401)，硅膠板：規(guī)格50mm×100mm，厚度0.20-0.25mm，青島中科宏遠(yuǎn)工貿(mào)有限公司，高效多功能粉碎機(jī)800Y：武義海納電器有限公司，化學(xué)試劑乙醇、甲醇等均購(gòu)自成西藏寶信生物技術(shù)有限公司。藏藥七味螃蟹甲丸(批號(hào)：20213)購(gòu)自西藏自治區(qū)藏醫(yī)院，配制陰性樣品的七種藥材均購(gòu)自西藏亞郎藏藥材銷(xiāo)售有限公司。

2 薄層色譜法鑒別

2.1 螃蟹甲的薄層色譜

2.1.1 供試品溶液的制備

取本品3g，研碎，加乙醇10mL，加熱回流30 分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)砸掖?mL 溶解后作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照藥品溶液的制備

取批號(hào)為121407-200401 螃蟹甲對(duì)照藥材1g，加乙醇10mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺螃蟹甲的陰性藥材3g，采用相同的方法制成缺螃蟹甲的陰性樣品溶液。

2.1.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2015 年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取供試品、對(duì)照品溶液、缺螃蟹甲陰性樣品溶液各5-10μL 點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(12 ∶8)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的一藍(lán)色主斑點(diǎn)并且無(wú)陰性干擾。結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.2 叢菔的薄層色譜

2.2.1 供試品溶液的制備

取本品粉末0.5g，加入20mL 稀乙醇，超聲處理30 min，過(guò)濾，蒸干濾液，殘?jiān)孟∫掖既芙獠⒍ㄈ葜?mL，即得供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照藥品溶液的制備

另取批號(hào)為140685-201707 精氨酸對(duì)照品，加稀乙醇制成0.04mg·mL 對(duì)照品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺叢菔的陰性藥材0.5g，采用相同的方法制成缺叢菔的陰性樣品溶液。

2.2.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2015 年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，分別吸取供試品、對(duì)照品溶液、缺叢菔陰性樣品溶液各5-10μL點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8 ∶8 ∶6)為展開(kāi)劑，展開(kāi)、晾干，噴以茚三酮試液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位上，顯相同櫻紅色的斑點(diǎn)，缺叢菔的陰性樣品無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖1 螃蟹甲TLC 鑒別

圖2 叢菔TLC 鑒別

2.3 訶子的薄層色譜

2.3.1 供試品溶液的制備

取本品粉末2g,加甲醇10mL,超聲處理30 分鐘，濾過(guò)處理后，水浴上蒸干，殘?jiān)砸掖?mL 溶解后作為供試品溶液。

2.3.2 對(duì)照藥品溶液的制備

另取批號(hào)為110831-201906 沒(méi)食子酸對(duì)照品，加乙醇制成0.5mg/mL 對(duì)照品溶液。

2.3.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺訶子的陰性藥材2g，采用相同的方法制成缺訶子的陰性樣品溶液。

2.3.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2015 年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，分別吸取供試品、對(duì)照品缺訶子陰性樣品各5μL，點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(12 ∶8 ∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)、晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇試液。置于紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而訶子的陰性樣品無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 訶子TLC 鑒別

3 結(jié)論

本文研究主要采用薄層色譜方法對(duì)藏藥七味螃蟹甲丸的處方中螃蟹甲、叢菔、訶子藥材進(jìn)行定性薄層色譜鑒別。所建立的方法重現(xiàn)性好、可操作性強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)表明，在薄層層析之前薄層板應(yīng)進(jìn)行預(yù)飽和，以防止斑點(diǎn)的擴(kuò)散及產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，從而達(dá)到更好的分離效果。通過(guò)TLC 實(shí)驗(yàn)，制定了螃蟹甲、叢菔、訶子藥材的薄層色譜鑒別方法，特征斑點(diǎn)明顯，色譜分離清晰，可用作制劑中的螃蟹甲、叢菔、訶子專(zhuān)屬定性鑒別。本研究結(jié)果表明，該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與制劑相關(guān)規(guī)定相符[10]，為藏藥七味螃蟹甲丸提供了既簡(jiǎn)便又有效的質(zhì)量控制方法。