表觀遺傳修飾在支氣管肺發(fā)育不良發(fā)病機(jī)制中作用的研究進(jìn)展

霍夢(mèng)月, 梅 花

（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院新生兒科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050）

支氣管肺發(fā)育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）多見于小早產(chǎn)兒或極低出生體質(zhì)量兒，是目前新生兒科最常見且最棘手的呼吸系統(tǒng)危重疾病之一。隨著近年來產(chǎn)前生育管理工作的完善和產(chǎn)后新生兒救治水平的不斷提高，早產(chǎn)兒的生存率逐年升高，但BPD 的發(fā)病率并未降低卻呈逐年上升的趨勢(shì)［1-2］。BPD 不僅發(fā)病率高，其嚴(yán)重的遠(yuǎn)期后遺癥也是臨床醫(yī)生必須面對(duì)的問題［3］。當(dāng)前BPD 的治療方式主要為對(duì)癥支持治療，尚無一項(xiàng)特異性治療能改善BPD 患兒的癥狀和遠(yuǎn)期預(yù)后［4］，因此，深入研究BPD 的發(fā)病機(jī)制，明確如何早期預(yù)測(cè)BPD，尋找有效的防治手段對(duì)提高早產(chǎn)兒存活率、減少兒童致殘率和提升兒童生活質(zhì)量具有重要意義。目前國內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為BPD 是多種因素共同作用的結(jié)果，各因素之間既相互獨(dú)立又相互滲透，共同參與BPD 的發(fā)生發(fā)展。PARKER 等［5］對(duì)雙胞胎的研究顯示：BPD 發(fā)生率在雙胞胎中存在高度的一致性，首次發(fā)現(xiàn)了遺傳學(xué)在BPD 中的作用。研究［6］顯示：BPD 的發(fā)病機(jī)制涉及遺傳因素和環(huán)境因素之間復(fù)雜的相互作用，是在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，因多種內(nèi)源性和外源性刺激導(dǎo)致炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)而對(duì)未成熟肺組織造成的損傷以及損傷后肺血管發(fā)育的失控和肺組織的異常進(jìn)行修復(fù)。但目前國內(nèi)外關(guān)于表觀遺傳修飾在BPD 發(fā)病機(jī)制中作用的研究仍較為有限，因此，本研究以遺傳易感性為切入點(diǎn)，探討表觀遺傳修飾在BPD 發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制，為BPD 的防治提供新方向。

1 表觀遺傳學(xué)概述

表觀遺傳學(xué)是與遺傳學(xué)相對(duì)的概念，其研究的主要目的是探討非遺傳因素如何在DNA 核苷酸序列不發(fā)生改變的前提下調(diào)控基因的表達(dá)，并發(fā)揮其在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用，因此表觀遺傳學(xué)在整合遺傳因素與環(huán)境因素中起關(guān)鍵作用［7］。常見的表觀遺傳修飾包括DNA 甲基化、組蛋白修飾和非編碼RNA（non-coding RNA，ncRNA），除此之外，染色體失活和構(gòu)型重塑亦屬于表觀遺傳修飾范疇［8］。目前已有研究［9］證實(shí)：表觀遺傳修飾可參與自身免疫性疾病、糖尿病、風(fēng)濕性疾病和惡性腫瘤等多種疾病的基因調(diào)控過程。研究［10］顯示：表觀遺傳學(xué)是肺發(fā)育過程中重要的調(diào)控機(jī)制之一，且BPD的發(fā)病機(jī)制多有表觀遺傳效應(yīng)。因此，深入研究表觀遺傳學(xué)在BPD 發(fā)生發(fā)展中的作用可能對(duì)闡明BPD 的病理生理機(jī)制和提供新的治療靶點(diǎn)具有重要意義。

2 表觀遺傳學(xué)在BPD 中的作用

2.1 DNA 甲基化與BPDDNA 甲基化是S-腺苷甲硫氨酸中的甲基在DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyl transferases，DNMT）的作用下，與DNA上CG 二核苷酸序列胞嘧啶中的第5 位碳原子通過共價(jià)鍵的形式結(jié)合，進(jìn)而生成5-甲基胞嘧啶的化學(xué)修飾過程，是迄今為止研究最深入的表觀遺傳調(diào)控方 式［11］。常見的DNMT包括DNMT1 和DNMT3 a/b，在DNA 復(fù)制過程中，DNMT1 可將雙親DNA鏈中原有的甲基化模式完整地復(fù)制到新合成的子鏈上，而DNMT3a/b 主要負(fù)責(zé)在尚未經(jīng)過修飾 的DNA模板上建立新的DNA甲基化模式［12］。研究［13］顯示：DNA 甲基化可通過干擾轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、印記基因中單等位基因的表達(dá)、DNA上啟動(dòng)子對(duì)轉(zhuǎn)錄因子的選擇性暴露、細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育等一系列關(guān)鍵過程，在表觀遺傳水平調(diào)控基因表達(dá)。近些年，隨著表觀遺傳學(xué)研究的不斷深入發(fā)現(xiàn)：DNA 甲基化不僅與腫瘤性疾病密切相關(guān)，而且其在BPD 等呼吸系統(tǒng)疾病中亦扮演重要角色。

矮小相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3（Runt-related transcription factor 3，RUNX3）是一類肺發(fā)育相關(guān)基因，與肺上皮細(xì)胞分化和肺血管發(fā)育密切相關(guān)，可通過DNMT1 和DNMT3b 介導(dǎo)的DNA 甲基化在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)其表達(dá)，而組蛋白H3 第27 賴氨酸三甲基化（trimethylation of lysine 27 on histone H3，H3K27me3）是表觀遺傳學(xué)中最常見的一種修飾方式，因此，美國一項(xiàng)研究［14］首先于動(dòng)物水平發(fā)現(xiàn)：在高氧誘導(dǎo)新生鼠BPD 模型的RUNX3 基因啟動(dòng)子區(qū)域存在DNA 甲基化和H3K27me3 這2種表觀遺傳修飾方式，該團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步于細(xì)胞水平驗(yàn)證了上述結(jié)果，提示表觀遺傳修飾可能在BPD 的形成過程中具有重要作用。CUNA 等［15］通過微陣列技術(shù)與DNA 甲基化測(cè)定相結(jié)合的方式分析人類基因表達(dá)與DNA 甲基化關(guān)系研究，結(jié)果顯示：在BPD 患兒中，包括谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶M3（glutathione Stransferase M3，GSTM3）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白7（bone morphogenetic protein-7，BMP-7）在內(nèi)的23個(gè)基因的表達(dá)水平與甲基化水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示這些基因可能參與了BPD 的表觀遺傳修飾。國外學(xué)者通過對(duì)BPD 患兒進(jìn)行尸檢證實(shí)：與死于非呼吸道疾病的患兒比較，BPD 患兒肺組織中miR-17～92 基因簇的所有成員表達(dá)水平均明顯降低，且其降低程度與各miRNA 基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系［16］，上述結(jié)論也在隨后的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，提示miR-17～92 基因簇可能通過增強(qiáng)基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化水平進(jìn)而參與BPD 的發(fā)生發(fā)展［17］。

動(dòng)物水平的研究［18-21］顯示DNA 甲基化修飾可能參與了BPD的形成。CHEN等［18］首先證實(shí)了高氧性肺損傷模型的肺表型與BPD極為相似，隨后采用DNA 甲基化免疫共沉淀法對(duì)大鼠肺組織進(jìn)行全基因組DNA 甲基化分析，結(jié)果顯示：DNA 甲基化可能參與了高氧誘導(dǎo)新生鼠的肺泡化阻滯過程。BIK-MULTANOWSKI等［19］采用微陣列技術(shù)分析高氧誘導(dǎo)新生大鼠BPD 模型肺組織中甲基化水平，結(jié)果顯示： 高氧組大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β 受體1（transforming growth factor beta receptor 1，TGFBR1）和環(huán)腺苷酸反應(yīng)成分結(jié)合蛋1（cyclic adenylate response component binding protein 1，CREB1）等基因啟動(dòng)子區(qū)域DNA 甲基化水平高于空氣組，為BPD 可能存在DNA 甲基化的表觀遺傳效應(yīng)提供了理論依據(jù)。研究［20］顯示：對(duì)BPD 小鼠肺組織進(jìn)行甲基化分析發(fā)現(xiàn)高氧使磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）- 蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）信號(hào)通路的表達(dá)出現(xiàn)明顯變化，該途徑的關(guān)鍵元件如AKT、PI3K 和10 號(hào)染色體上缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物（PTEN）等均被高度甲基化，提示BPD 的基因調(diào)控可能涉及表觀遺傳因素，與CHENG 等［21］研究結(jié)果一致。

綜上所述，在BPD 的發(fā)病過程中可能存在異常的DNA 甲基化過程，DNA 甲基化有望成為BPD潛在的治療靶標(biāo)。

2.2 組蛋白修飾與BPD組蛋白是核小體的重要組成部分之一，一個(gè)核小體由長度約為146 bp 的雙鏈DNA 包裹著8個(gè)核心組蛋白（H2A、H2B、H3和H4 各2個(gè)）組成［22］。組蛋白修飾作為表觀遺傳學(xué)重要組成之一，可通過多種翻譯后修飾過程參與調(diào)節(jié)染色質(zhì)狀態(tài)和轉(zhuǎn)錄活性，進(jìn)而調(diào)控基因表達(dá)［23］。組蛋白不僅能影響基因表達(dá)，還可招募蛋白復(fù)合體，通過影響下游蛋白表達(dá)而參與細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋 亡等多種生物過程［24］。研究［25］證 實(shí)：組蛋白修飾在肺癌、肺動(dòng)脈高壓和BPD 等多種呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。這使得表觀遺傳修飾機(jī)制成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)之一。

在BPD 的發(fā)病機(jī)制中，組蛋白修飾通常以乙?；腿ヒ阴；癁橹?。多數(shù)情況下，組蛋白乙?；饕獏⑴c基因轉(zhuǎn)錄過程，而組蛋白去乙?；瘎t多與基因沉默有關(guān)，兩者動(dòng)態(tài)配合共同調(diào)控組蛋白的乙?；揎?。組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（histone acetyltransferases，HATs）是組蛋白乙?；^程中的關(guān)鍵酶，可催化組蛋白賴氨酸殘基上的氨基發(fā)生乙?；尤氲囊阴；ㄟ^中和帶正電的組蛋白復(fù)合物減弱組蛋白與DNA 之間的相互作用，使染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變得疏松，從而激活基因轉(zhuǎn)錄過程［26］。為探討B(tài)PD 中可能存在的表觀遺傳機(jī)制，CHAO 等［27］將小鼠置于高氧環(huán)境構(gòu)建BPD模型，結(jié)果顯示：高氧組小鼠肺內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶3（nitric oxide synthase 3，NOS3）和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducers and activators of transcription 3，STAT3）mRNA 表達(dá)水平明顯升高，且NOS3 和STAT3基因位點(diǎn)均發(fā)生H2aZ和H3K9組蛋白乙?；揎?，研究者進(jìn)一步采用體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了上述結(jié)論，提示NOS3 和STAT3 基因位點(diǎn)組蛋白乙?；揎椏赡苁窃绠a(chǎn)兒發(fā)生BPD 的主要原因之一。美國一項(xiàng)針對(duì)54例胎齡小于28周的早產(chǎn)兒進(jìn)行橫斷面研究［28］結(jié)果顯示：出生后逐漸發(fā)展成BPD 的患兒存在組蛋白乙?；腿旧|(zhì)重塑這2種表觀遺傳途徑，提示組蛋白乙?；腿旧|(zhì)重塑可能是BPD 潛在且可行的表觀遺傳治療手段。

與組蛋白乙?；^程相反，組蛋白去乙?；峭ㄟ^促進(jìn)核小體及其周圍DNA 的緊密結(jié)合而發(fā)揮基因轉(zhuǎn)錄沉默的作用，該過程由組蛋白去乙?；福╤istone deacetytlases，HDACs）催化。HDACs 是一個(gè)大家族，其中Ⅰ類HDACs 定位于細(xì)胞核，主要包括HDAC1 和HDAC2，具有較強(qiáng)的組蛋白去乙?；富钚浴DAC1 和HDAC2 對(duì)胚胎發(fā)育至關(guān)重要，并可通過基因組和非基因組效應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化等生物學(xué)過程。LONDHE 等［29］利用動(dòng)物模型為BPD 的發(fā)病機(jī)制提供了新的證據(jù)，即高氧導(dǎo)致肺泡發(fā)育不良的部分機(jī)制可能是通過降低HDAC1 和HDAC2 的表達(dá)水平來實(shí)現(xiàn)的，與ZHU 等［16］的 研究結(jié)果一致。有研究者［30］向孕鼠羊膜腔內(nèi)注射脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）構(gòu)建絨毛膜羊膜炎模型，之后對(duì)新生小鼠肺組織進(jìn)行病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)：其病理學(xué)特點(diǎn)主要表現(xiàn)為肺發(fā)育受阻，與BPD 的肺表型十分相似，進(jìn)一步對(duì)小鼠肺組織中HDAC1 和HDAC2 的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，LPS 誘導(dǎo)組小鼠肺組織中HDAC1 和HDAC2 表達(dá)水平均降低，提示HDAC1/2 可能在阻止肺泡發(fā)育進(jìn)程中起重要作用。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator 1，Sirt1）是一種組蛋白去乙?；?，MODY 等［31］共采集了51例嬰兒的130份氣管吸出液標(biāo)本，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行相應(yīng)檢查后發(fā)現(xiàn)：BPD 患兒Sirt1 表達(dá)水平較非BPD 患兒明顯降低，提示組蛋白去乙?；赡芘cBPD 的發(fā)病密切相關(guān)。最新研究［32］顯示：全身膿毒癥可導(dǎo)致發(fā)育中的肺出現(xiàn)急性炎癥反應(yīng)，進(jìn)而表現(xiàn)出肺泡結(jié)構(gòu)簡單化等類似于早產(chǎn)兒BPD 的肺表型，而HDACs 抑制劑能進(jìn)一步增強(qiáng)膿毒癥引起的炎癥反應(yīng)，影響肺發(fā)育并加重BPD，表明HDACs 抑制劑可能在BPD 的形成中起重要作用。

上述研究均提示組蛋白乙?；腿ヒ阴；赡苁荁PD 潛在的分子調(diào)控機(jī)制，因此以組蛋白修飾為契機(jī)，探討B(tài)PD 的表觀遺傳修飾方式可能是今后研究BPD 發(fā)病機(jī)制的新思路。

2.3 ncRNA 與BPDncRNA 是指從DNA 轉(zhuǎn)錄而來，但不能翻譯成蛋白質(zhì)的功能性RNA，約占人類基因組的98%［33］。根據(jù)ncRNA 的長度可將其分為短鏈非編碼RNA（＜30 nt）和長鏈非編碼RNA（long no-coding RNA，lncRNA，＞200 nt），前者又分 為miRNA、小 干 擾RNA（short interfering RNA，siRNA）和 Piwi-interacting RNA（piRNA）［34］。作為一種新型表觀遺傳調(diào)節(jié)因子，ncRNA 在細(xì)胞和分子水平上的表觀遺傳調(diào)控功能也逐漸被揭示出來，如ncRNA 可通過調(diào)控染色質(zhì)重塑、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后過程影響基因的表達(dá)，進(jìn)而在多種生物過程中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。

作為強(qiáng)大的基因表達(dá)調(diào)控因子之一的miRNA，可通過阻礙mRNA 翻譯或指導(dǎo)mRNA 降解，從而在轉(zhuǎn)錄后水平沉默基因表達(dá)［35］。miRNA是個(gè)龐大的家庭，其廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中，并在多種生物過程中具有重要功能，因此成為當(dāng)今的研究熱 點(diǎn)［36］。人類超過60%的mRNA是由miRNA 直接調(diào)控的，miRNA雖然僅占人類基因組的2%，但將近30%的基因均受其調(diào)控［37］。表觀遺傳現(xiàn)象可以導(dǎo)致miRNA 的調(diào)控失調(diào)，而一些miRNA又可以控制表觀遺傳調(diào)節(jié)因子，因此，miRNA是理解疾病機(jī)制、生物標(biāo)志物和治療干預(yù)的潛在靶點(diǎn)［38］。

迄今為止，在BPD 的肺泡間隔階段共發(fā)現(xiàn)19個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào)，26個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào)，提示miRNA 在BPD的發(fā)生發(fā)展中可能起重要作用［39］。LAL 等［40］前期研究已證實(shí)：患兒出生時(shí)miR-876-3p 表達(dá)降低對(duì)預(yù)測(cè)極低出生體質(zhì)量兒發(fā)生嚴(yán)重BPD 有很大潛力。研究［40］顯示：BPD 模型中異常的肺泡結(jié)構(gòu)可通過miR-876-3p 功能的增加而得到改善，提示miR-876-3p 可預(yù)測(cè)并阻止早產(chǎn)兒BPD 的發(fā)生，為miRNA 成為BPD 預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物提供了有力證據(jù)。臨床研究［37］顯示：診斷為BPD的早產(chǎn)兒血清中miR-29b 表達(dá)水平下調(diào)。進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)［37］證實(shí)給予嚴(yán)重BPD小鼠外源性注射miR-29b 可改善其肺表型，因此miR-29b 可能是治療或預(yù)防早產(chǎn)兒嚴(yán)重BPD 的一種新策略。SUN 等［41］采 集20例BPD 患兒和20例對(duì)照組患兒的外周血，采用微陣列技術(shù)篩選2組患兒差異表達(dá)的miRNA 并進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果顯示：BPD組患兒血清miR-495-5p 的表達(dá)水平較對(duì)照組明顯增加，進(jìn)一步采用靶基因數(shù)據(jù)庫預(yù)測(cè)miR-495-5p 靶基因，結(jié)果共預(yù)測(cè)了117個(gè)miR-495-5p 的靶基因，這些靶基因多與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞自噬、轉(zhuǎn)錄調(diào)控和血管生成等多種生物過程有關(guān)，提示miRNA-495-5p 可能通過參與上述生物調(diào)控過程進(jìn)而參與早產(chǎn)兒BPD的發(fā)生。

在高氧誘導(dǎo)的BPD 小鼠模型中，同樣發(fā)現(xiàn)多個(gè)與BPD 密切相 關(guān)的miRNA。有學(xué)者［42］采用高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)高氧誘導(dǎo)的BPD 小鼠模型中miRNA 表達(dá)譜的研究顯示：共有201個(gè)miRNA 在2組小鼠中存在差異表達(dá)，其中miR-342、miR-335、miR-150、miR-126 和miR-151 表達(dá)下調(diào)，而miR-21 和miR-34a表達(dá)上調(diào)。有 研究［43］證 實(shí)：長期持續(xù)吸入高氧的新生小鼠肺組織中miR-30a 呈高表達(dá)，在高氧暴露21d時(shí)雌性小鼠肺組織中miR-30a 表達(dá)水平明顯高于雄性小鼠，提示miR-30a 表達(dá)上調(diào)可能與BPD 有關(guān)并存在性別差異。SYED 等［44］發(fā)現(xiàn)：暴露于高氧環(huán)境的新生小鼠肺組織中miR-34a 表達(dá)水平明顯升高，抑制miR-34a表達(dá)可改善BPD 小鼠模型中BPD 及相關(guān)的肺動(dòng)脈高壓癥狀，相反，miR-34a 過表達(dá)使癥狀加重，提示miR-34a 抑制劑可能是預(yù)防或改善BPD 的治療方式之一。既往研究［45］已證實(shí)：成纖維細(xì)胞生長因子10（fibroblast growth factor 10，F(xiàn)GF10）是miR-421的靶基因。研究 者［45］通過高氧誘導(dǎo)構(gòu)建小鼠BPD 模型，進(jìn)一步探討miR-421 在小鼠BPD模型中作用機(jī)制的結(jié)果顯示：高氧組小鼠肺組織中miR-421 表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，且FGF10 表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組，提示miR-421 表達(dá)水平上調(diào)和FGF10 沉默不僅會(huì)加劇BPD 肺組織的炎癥反應(yīng)，還可加重細(xì)胞凋亡情況，同時(shí)上述改變可以通過下調(diào)miR-421 表達(dá)來逆轉(zhuǎn)，為BPD 的治療提供了可能的藥物靶點(diǎn)。

上述基于臨床和動(dòng)物水平的研究均證實(shí)：miRNA 在研究BPD 發(fā)病機(jī)制和基因靶向治療方面具有重要意義。

lncRNA 是指轉(zhuǎn)錄本長度超過200個(gè)堿基的ncRNA，約 占ncRNA總數(shù)的80%［46］。與miRNA一 樣，研究［47］顯示： lncRNA在轉(zhuǎn)錄、翻 譯、RNA代謝、染色質(zhì)修飾、干細(xì)胞維持和分化、細(xì)胞自噬和凋亡及胚胎發(fā)育等方面均發(fā)揮重要作用。lncRNA 不僅可通過作為染色質(zhì)修飾復(fù)合物的支架發(fā)揮表觀遺傳功能，還能作為轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子直接對(duì)轉(zhuǎn)錄過程進(jìn)行調(diào)節(jié)。除了在細(xì)胞核中的作用外，一些反義lncRNA還可與mRNA 的3′非翻譯區(qū)（3′UTR）結(jié)合，調(diào)節(jié)其在細(xì)胞質(zhì)中的穩(wěn)定性及其與miRNA 的相互作用［48］。由于lncRNA 與多種疾病的發(fā)生均有密切的聯(lián)系，其已成為近年來疾病機(jī)制研究的重點(diǎn)領(lǐng)域，有望為疾病的治療和預(yù)防提供新思路。

轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄本1（metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）是長度約為8 778 bp的lncRNA。研究者［49］通過分析基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫（gene expression omnibus，GEO）中 的GSE25286數(shù)據(jù)集以明確MALAT1 在BPD 小鼠肺組織中表達(dá)的結(jié)果顯示：BPD組小鼠肺組織中MALAT1 的表達(dá)明顯上調(diào)。早產(chǎn)兒外周血標(biāo)本驗(yàn)證［49］結(jié)果也表明BPD 早產(chǎn)兒血液樣本中MALAT1 表達(dá)水平明顯升高，提示lnRNA MALATl的差異性表達(dá)與BPD 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，為BPD 的臨床診斷及治療提供新的理論依據(jù)。國內(nèi)一項(xiàng)研究［50］收集早產(chǎn)兒2～5 mL臍帶血和BPD患兒2 mL 外周靜脈血，采用熒光定量PCR 技術(shù)檢測(cè)臍帶血及外周血中l(wèi)ncRNA_AK096792 相對(duì)表達(dá)水平的結(jié)果顯示：BPD組患兒臍帶血中l(wèi)ncRNA_AK096792 表達(dá)水平明顯高于非BPD組，且BPD 患兒外周血中l(wèi)ncRNA_AK096792表達(dá)水平明顯高于臍帶血，提示lncRNA_AK096792的表達(dá)水平可作為BPD潛在的生物標(biāo)志物之一。

BAO等［51］的研究首次揭示了高氧組與對(duì)照組小鼠肺組織中l(wèi)ncRNA 表達(dá)的差異，即BPD組小鼠肺組織中882個(gè)lncRNA 表達(dá)上調(diào)，887個(gè)lncRNA表達(dá)下調(diào)，提示這些lncRNA可能參與了BPD的發(fā)生發(fā)展，為進(jìn)一步了解BPD發(fā)生的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。包天平等［52］采用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)檢測(cè)BPD小鼠中l(wèi)ncRNA 1010001N08Rik 和Gata 6mRNA 變化的情況，結(jié)果顯示： lncRNA 1010001N08Rik 的表達(dá)水平與氧暴露時(shí)間呈正相關(guān)關(guān)系，而Gata 6 mRNA 表達(dá)水平與氧暴露時(shí)間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示lncRNA 1010001N08Rik 可能通過下調(diào)Gata 6 的表達(dá)而在BPD 形成過程中起促進(jìn)作用。CHENG 等［21］首先通過高氧誘導(dǎo)構(gòu)建了新生鼠BPD 模型，進(jìn)一步采用Illumina 測(cè)序技術(shù)分析2組中l(wèi)ncRNA 的差異表達(dá)，并進(jìn)行GO 和KEGG富集分析結(jié)果顯示：高氧組有30 225個(gè)與lncRNA相關(guān)的基因表達(dá)，對(duì)照組有30361個(gè)與lncRNA相關(guān)的基因表達(dá)，提示2組lncRNA 的表達(dá)存在差異。該研究者同時(shí)發(fā)現(xiàn)：高氧組和對(duì)照組共檢測(cè)到1 175 條不同的lncRNA，其中544條表達(dá)上調(diào)，631條表達(dá)下調(diào)；GO富集分析結(jié)果顯示：共發(fā)現(xiàn)673個(gè)GO功能富集差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且主要與細(xì)胞定位等生物學(xué)過程有關(guān)；KEGG 富集分析結(jié)果顯示：lncRNA參與了257條KEGG途徑，該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其中的9個(gè)lncRNA，高氧組與對(duì)照組驗(yàn)證的lncRNA 數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此該研究者認(rèn)為lncRNA 可能參與BPD 的發(fā)生，為探索BPD的生物學(xué)過程提供了新的認(rèn)識(shí)角度。

綜上所述，lncRNA 有望成為BPD 診斷和治療的新型分子靶標(biāo)之一，其具有重要的臨床應(yīng)用前景。

3 展 望

盡管國內(nèi)外醫(yī)務(wù)人員在防治BPD 方面做出了不懈的努力，但在降低BPD 發(fā)生率方面取得的進(jìn)展仍非常有限，因此，深入研究BPD 的發(fā)病機(jī)制迫在眉睫。表觀遺傳學(xué)憑借其可遺傳性和可逆性的特點(diǎn)已為多種疾病的預(yù)防和治療提供了新思路，然而目前國內(nèi)外關(guān)于BPD 表觀遺傳學(xué)分子機(jī)制研究的文章仍較有限，大樣本多中心的臨床研究也較少，因此進(jìn)一步闡明BPD分子遺傳學(xué)機(jī)制不僅能加深人們對(duì)BPD 具體發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)和理解，還能為BPD 的分子靶向治療帶來新的突破和進(jìn)展。