VCC-1在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義

宋劍鋒　白明輝

【摘要】 目的：探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子相關(guān)性趨化因子-1（VCC-1）在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定VCC-1在52例胰腺癌及52例對(duì)應(yīng)癌旁正常胰腺組織中的表達(dá)情況，并分析VCC-1和胰腺癌臨床相關(guān)指標(biāo)之間的關(guān)系。結(jié)果：VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率為91.67%（22/24）高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的64.29%（18/28），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%（17/28），低于腫瘤直徑>2 cm的95.83%（23/24），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在低分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為87.88%（29/33），在高分化中的陽(yáng)性表達(dá)率為14.29%（1/7），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位無(wú)關(guān)（P>0.05）。VCC-1陰性表達(dá)組PC患者的中位生存期為26.9個(gè)月長(zhǎng)于陽(yáng)性表達(dá)組的16.3個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：VCC-1在胰腺癌組織中呈高表達(dá)，VCC-1的表達(dá)可能在胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

【關(guān)鍵詞】 胰腺腫瘤 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子相關(guān)性趨化因子-1 腫瘤標(biāo)記

Expression and Significance of VCC-1 in Pancreatic Cancer Tissue/SONG Jianfeng， BAI Minghui. //Medical Innovation of China， 2021， 18（23）： -163

[Abstract] Objective： To investigate the expression and significance of VCC-1 in pancreatic cancer tissue. Method： The VCC-1 expressions in 52 specimens of pancreatic cancer tissues and 52 specimens of their adjacent normal pancreatic tissues were determined by immunohistochemical staining， and the relationship between VCC-1 and clinical indicators of pancreatic cancer were analyzed. Result： The positive expression rate of VCC-1

protein in pancreatic cancer tissues was 76.92%， higher than 28.85% in paracancer tissues， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in stage Ⅰ， Ⅱ pancreatic cancer tissues was 69.23% （27/39）， which was lower than 100% （13/13） in stage Ⅲ， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 with lymph node metastasis was 91.67% （22/24）， which was higher than 64.29% （18/28） without lymph node metastasis， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in tumor diameter ≤2 cm was 60.71% （17/28）， which was lower than 95.83% （23/24） in tumor diameter >2 cm， the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of VCC-1 in low differentiation carcinoma was 83.33% （10/12）， the positive expression rate of VCC-1 in medium differentiation carcinoma was 87.88% （29/33）， and the positive expression rate of VCC-1 in high differentiation carcinoma was 14.29% （1/7）， the difference was statistically significant （P<0.05）. VCC-1 was not associated with age， gender or tumor site （P>0.05）. The median survival time of PC patients in VCC-1 negative expression group was 26.9 months， which was longer than 16.3 months in positive expression group， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The VCC-1 expression is increased in pancreatic cancer and its expression may be closely connected to the occurrence and development of pancreatic cancer.

[Key words] Pancreatic neoplasms VEGF correlated chemokine-1 Tumor markers

First-author’s address： Foresea Life Insurance Guangzhou General Hospital， Guangzhou 511300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.23.039

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）早期癥狀不明顯，且發(fā)展快，預(yù)后差，其5年生存率為8%，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者5年生存率為3%[1-8]。目前PC被診斷時(shí)多為中晚期，手術(shù)切除是最有效的治療方法，但復(fù)發(fā)率比較高[9-13]。而導(dǎo)致PC發(fā)生和進(jìn)展是多種基因及因素共同作用的結(jié)果[14]。已經(jīng)有研究表明血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子相關(guān)性趨化因子-1（vsacular endothelial growth factor correlated chemokine 1，VCC-1）與乳腺癌、直腸癌及肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[15]。筆者通過(guò)試驗(yàn)研究VCC-1在PC中的表達(dá)及意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 選取本院2019年10月-2020年

2月及鄭州大學(xué)附屬洛陽(yáng)中心醫(yī)院2011年2月-2019年12月存檔的PC組織蠟塊52例及與其相對(duì)應(yīng)的癌旁正常胰腺組織52例。其中男38例，女14例;年齡32～77歲，平均（56.40±2.02）歲;TNM分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期28例，Ⅲ期13例。病理分級(jí)：高分化癌7例，中分化癌33例，低分化癌12例。所有入選的PC患者術(shù)前均沒(méi)有接受放療、化療及生物治療等，均可以找到完整的臨床病例資料。鼠抗人VCC-1單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)R&D Systems公司，兔抗人VEGF單克隆抗體試劑盒和通用型二抗PV-6000購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。PBS緩沖液，DAB顯色試劑盒及抗原修復(fù)液均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。其他試劑及設(shè)備均由鄭州大學(xué)附屬洛陽(yáng)中心醫(yī)院提供。

1.2 方法 免疫組化采用Elivision二步法，將蠟塊制成3 μm厚度的切片，常規(guī)脫蠟、脫水;室溫放置10 min以滅活內(nèi)源性酶;加pH=6.0的檸檬酸鹽緩沖液中檔微波處理10 min;加1滴3%的H2O2阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶10 min;加一抗（1︰100稀釋）室溫孵育2 h;PBS沖洗;加親和素1滴，室溫孵育2 h;PBS沖洗;加羊抗兔IgG二抗，室溫孵育2 h;DAB顯色5 min;蘇木素復(fù)染2 min;脫水、透明，封片，閱片。

1.3 結(jié)果判定 每張切片隨機(jī)取5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)左右細(xì)胞，在相同放大倍數(shù)（×400）及光強(qiáng)度等的條件下由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)師閱片判定。將細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒定義為陽(yáng)性。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及染色強(qiáng)度進(jìn)行綜合判定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ檢驗(yàn);采用log-rank的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)比較VCC-1陰性組和陽(yáng)性的中位生存期;采用GraphPad Prism繪制生存曲線。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VCC-1在PC組織及癌旁組織中的表達(dá) 陽(yáng)性顆粒為棕黃色，位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中，VCC-1在胰腺癌組織中的表達(dá)比在癌旁組織中強(qiáng)，見(jiàn)圖1、2。VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ=24.12，P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2 VCC-1表達(dá)與PC臨床相關(guān)指標(biāo)的關(guān)

系 VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率為91.67%（22/24）高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的64.29%（18/28），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%（17/28），低于在腫瘤直徑>2 cm中的95.83%（23/24），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在低分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為87.88%（29/33），在高分化中的陽(yáng)性表達(dá)率為14.29%（1/7），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位均無(wú)關(guān)（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 VCC-1表達(dá)與PC患者的遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系 在40例VCC-1陽(yáng)性表達(dá)的PC患者隨訪中失訪2例，在12例VCC-1陰性表達(dá)的PC患者隨訪中失訪1例。VCC-1陰性表達(dá)組PC患者的中位生存期為26.9個(gè)月，長(zhǎng)于陽(yáng)性表達(dá)組的16.3個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ=7.62，P<0.05）。見(jiàn)圖3。

3 討論

VCC-1基因編碼119個(gè)氨基酸，有6個(gè)半胱氨酸殘基，其中有4個(gè)分別位于2個(gè)CXC結(jié)構(gòu)域，其包括4個(gè)外顯子，15 kb大小，位于人19q11染色體上[16-17]。研究表明，VCC-1通過(guò)上調(diào)VEGF-A表達(dá)，來(lái)參與新生血管的形成，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移及進(jìn)展[17]。

本研究結(jié)果顯示，VCC-1蛋白在胰腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為76.92%高于癌旁組織的28.85%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明VCC-1可能作為一種促癌基因?qū)е铝薖C的發(fā)生。VCC-1在低分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為83.33%（10/12），在中分化癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為87.88%（29/33），在高分化中的陽(yáng)性表達(dá)率為14.29%（1/7），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明VCC-1參與了PC的增殖及分化。VCC-1在VCC-1在Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率為69.23%（27/39）低于Ⅲ期的100%（13/13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率為91.67%（22/24）高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的64.29%（18/28），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1在腫瘤直徑≤2 cm中的陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%（17/28），低于在腫瘤直徑>2 cm中的95.83%（23/24），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VCC-1與患者的年齡、性別及腫瘤部位無(wú)關(guān)（P>0.05）。提示VCC-1促進(jìn)了PC的發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移。研究已經(jīng)證實(shí)，VEGF與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲有關(guān)[18-20]。筆者推測(cè)VCC-1的高表達(dá)上調(diào)了VEGF的表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤新生血管的形成，來(lái)促進(jìn)腫瘤的發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移。VCC-1陰性表達(dá)的胰腺癌患者的中位生存期長(zhǎng)于陽(yáng)性表達(dá)患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明VCC-1是PC患者預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

綜上所述，VCC-1在PC的發(fā)生、發(fā)展、侵襲中發(fā)揮著重要作用。在PC患者中VCC-1的陽(yáng)性表達(dá)提示預(yù)后不良。

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（收稿日期：2020-09-15） （本文編輯：張明瀾）