苦參提取液替代抗生素對肉羊生長性能和血液代謝的影響

娜日蘇 董雨萌

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)草原與資源環(huán)境學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010011；2.植物學(xué)國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，內(nèi)蒙古呼和浩特010011）

21世紀(jì)初歐盟禁止飼用抗生素利用以來，國內(nèi)在豬、雞、羊的養(yǎng)殖中以中藥代替抗生素的研究增多[1-4]，但中草藥生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用還存在問題[5]。2020年我國開始全面禁止飼用抗生素的應(yīng)用，因此，天然植物性飼料添加劑的需求也來越多大，傳統(tǒng)民族藥物代替飼用抗生素的研究成為熱點(diǎn)，肉羊飼喂中的中草藥飼料添加劑利用研究也不少[6-7]。同時(shí)，蒙古族的傳統(tǒng)蒙藥作為飼用添加劑利用研究也有報(bào)道，如恩克奧恩等[8]研究發(fā)現(xiàn)蒙藥材飼料添加劑對羔羊有顯著的增重效果；蒙藥植物的抑菌效果及提高家畜免疫活性等作用方面也有很多報(bào)道，根據(jù)戰(zhàn)永波[9]報(bào)道，大部分蒙藥植物具有良好的抑菌作用，還可以提高機(jī)體非特異性免疫功能；烏日娜等[10]研究表明，蒙藥復(fù)方對大腸桿菌具有良好的體內(nèi)外抑菌效果；胡海等[11]研究發(fā)現(xiàn)，蒙藥復(fù)方丹參制劑可以提高小鼠免疫功能。

苦參（Sophora flavescens Ait.）是一種豆科槐屬植物。其根入中藥，用于清熱除濕、祛風(fēng)殺蟲、抑制皮膚真菌等?？鄥槊舍t(yī)最常用的藥用植物之一，其根用于抗炎、抗病毒、保肝、調(diào)血脂等，主要化學(xué)成分有苦參堿、槐定堿等多種生物堿[12]。在民間，蒙古族牧民利用苦參單劑治療家畜感冒和瘟疫。前人研究表明，苦參做飼料添加劑對育肥豬有增重效果[13]，也能防止雞的疾病[14]，可見，苦參有抑菌效果并能提高飼養(yǎng)動物的生長性能。但是，前期研究中，還未發(fā)現(xiàn)苦參代替飼用抗生素在肉羊生長中的研究報(bào)道。因此，本研究以肉羊?yàn)轱曫B(yǎng)動物，分別飼喂苦參提取液和飼用抗生素，從生長性能、免疫功能、抗菌能力三個(gè)方面對飼養(yǎng)效果進(jìn)行比較，明確苦參替代飼用抗生素用于肉羊飼養(yǎng)中的應(yīng)用效果，為提高飼料安全、民眾健康服務(wù)。傳統(tǒng)資源利用方式用于現(xiàn)代化養(yǎng)殖業(yè)，把文化資源變成經(jīng)濟(jì)資源，也有利于地區(qū)發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)地點(diǎn)位于寧夏回族自治區(qū)吳忠市鹽池縣。選取3 月齡、體重18 kg 左右、生長發(fā)育正常、健康的灘羊20 只，隨機(jī)分為4 組，每組5 只。試驗(yàn)前驅(qū)蟲并注射疫苗。

苦參購于自內(nèi)蒙古呼和浩特市賽罕區(qū)國大藥房。100 g 苦參用200 mL 純化水浸泡24 h，煎熬30 min，過濾，再加100 mL 純化水煎熬30 min，再過濾，兩次取得的液體混合后煎熬至100 mL，制成100%苦參提取液。

試驗(yàn)用抗生素為30%金霉素預(yù)混劑，內(nèi)蒙古正大飼料公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將20 只肉羊分為4 組，即對照組（CK）、抗生素組、苦參1組、苦參2組。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧（TMR），飼喂量見表1?？股亟M在基礎(chǔ)日糧（TMR）里添加175 mg/kg 金霉素預(yù)混劑；苦參1 組、苦參2組分別添加基礎(chǔ)日糧鮮重1%的苦參提取液和2%的苦參提取液。對照組、苦參1 組加相應(yīng)量的純凈水使各組添加液體量相等。預(yù)試期為7 d，正試期為14 d?；A(chǔ)日糧的組成及營養(yǎng)成分參照國家肉羊飼喂標(biāo)準(zhǔn)《NY T 816—2004》配置，見表2。

表1 供試肉羊的基礎(chǔ)日糧飼喂量

表2 供試肉羊的基礎(chǔ)日糧（TMR）組成

1.3 飼養(yǎng)管理

供試肉羊采取小組舍飼管理，每5 只一欄，每次飼喂前打掃飼槽，每天8：00 和16：00 進(jìn)行飼喂，自由飲水。

1.4 測定指標(biāo)

1.4.1 生長性能

分別在正試期第0 d和第14 d，于清晨6：00進(jìn)行空腹稱重，計(jì)算供試肉羊的平均日增重和總增重。

平均日增重=（試驗(yàn)結(jié)束體重-試驗(yàn)開始體重）/試驗(yàn)天數(shù)

1.4.2 免疫功能參數(shù)

在正試期最后1 d，于清晨6：00進(jìn)行空腹頸靜脈采血5 mL，后置于離心機(jī)中離心（3 000 r/min，12 min），分離血清至1.5 mL 離心管中冷凍，帶回內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的免疫球蛋白測試試劑盒檢測血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A等指標(biāo)。

1.4.3 抗菌能力

正飼期第0 d 和第14 d，分別采集供試肉羊的糞便進(jìn)行冷凍，帶回實(shí)驗(yàn)室，樣品稀釋到最佳濃度后接種到LB培養(yǎng)基上，厭氧培養(yǎng)48 h后計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

用SPSS軟件的單因素方差分析程序?qū)υ囼?yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和多重比較，并檢驗(yàn)其顯著性，數(shù)據(jù)結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。

2 結(jié)果

2.1 苦參提取物代替抗生素對肉羊生長性能的影響（見表3）

表3 不同處理對肉羊生長性能的影響(kg)

由表3 可知，經(jīng)過14 d 的飼喂對照組、抗生素組、苦參1 組、苦參2 組的平均總增重(末重減去始重的平均值)各組之間無顯著性差異（P＞0.05）；日增重各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 苦參提取物代替抗生素對肉羊免疫功能參數(shù)的影響（見表4）

表4 不同處理對肉羊免疫功能的影響

由表4 可知，血清中IgG、IgA 含量各組間無顯著性差異（P＞0.05）；與對照組相比，苦參1組的IgM顯著性增加（P＜0.05）。

可見，添加1%含量苦參顯著提高了IgM 含量；且具有提高IgG 的趨勢，效果均優(yōu)于抗生素組和苦參2組。

2.3 苦參提取物代替抗生素對肉羊抗菌能力的影響（見表5）

表5 正試前后肉羊糞便中大腸桿菌的數(shù)量對比（菌落數(shù)單位：×105 CFU/g）

由表5 可知，正試前，試驗(yàn)組的糞便中大腸桿菌數(shù)量與對照沒有顯著差異；正試結(jié)束后，試驗(yàn)組的糞便中大腸桿菌數(shù)量均減少，且有顯著差異（P＜0.05）；正試前后大腸桿菌減少的幅度苦參1 組最大，苦參1 組和苦參2組減少的幅度大于抗生素組。

可知，添加1%和2%苦參添加劑能夠提高肉羊的腸道抑菌能力，而且效果優(yōu)于抗生素。

3 討論

在試驗(yàn)期間，通過對肉羊的采食量、外觀表象及糞便的狀態(tài)等反映健康狀況的指標(biāo)進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)供試肉羊行為均無異常，也無腹瀉、嘔吐等癥狀的產(chǎn)生。結(jié)合前人研究及民間利用等判斷，苦參沒有明顯的毒害作用，為安全的飼料添加劑。

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，抗生素組、兩種濃度苦參組均顯示了增重的趨勢, 但無顯著差異。分析原因，抗生素可以有效抑制有害菌的生長，利于動物生長；添加苦參提取液可以抑制有害菌的繁殖，其苦味可以健胃，促進(jìn)食欲，有助于營養(yǎng)成分的吸收，從而產(chǎn)生了增重的效果[13-14]。但本試驗(yàn)可能由于試驗(yàn)周期較短，添加劑的飼喂效果尚未出現(xiàn)顯著變化。

免疫球蛋白是機(jī)體免疫系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分，具有抗菌、抗病毒和中和毒素的功能，其濃度升高會增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能[15]。IgG在血液中的含量最高，是動物機(jī)體感染免疫的主力軍；IgM 是最早產(chǎn)生的抗體，在機(jī)體的早期防御中起著重要作用；IgA是外分泌液中主要的免疫球蛋白。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，抗生素組肉羊血清中IgG、IgA 含量具有降低趨勢，而IgM含量具有增加趨勢，原因是抗生素還具有一定的免疫作用[16]；苦參1組顯著增加IgM含量，具有增加肉羊血清中IgG 含量、降低IgA 含量的趨勢，但效果不顯著；苦參2組肉羊血清中IgG含量無顯著變化，IgM含量有增加趨勢，IgA含量有降低趨勢。綜上所述，苦參對肉羊血清中IgG、IgM含量的生成具有促進(jìn)作用，表明苦參能夠提高肉羊的免疫力，這可能是苦參中的活性成分促進(jìn)了免疫因子的產(chǎn)生，進(jìn)而提高機(jī)體的免疫力。前人研究指出苦參素通過體液免疫、細(xì)胞免疫及與免疫相關(guān)的信號通路改善免疫性[17]。添加2%苦參提取物能夠降低糞便中大腸桿菌數(shù)量，這與苦參的傳統(tǒng)藥用利用知識和前人研究相符[12-14]。糞便中大腸桿菌數(shù)量，苦參2組的效果優(yōu)于抗生素組，分析原因，苦參本身具有抑菌能力的同時(shí)，如上所述能夠提高機(jī)體的免疫力，從而達(dá)到抑菌效果，為雙重影響的結(jié)果，這正是天然植物添加劑的優(yōu)點(diǎn)。

近年來苦參的人工種植面積不斷增加。市場價(jià)格為7～10 元/kg，按日糧的1%計(jì)算，飼喂60 d 需增加7～10 元/只的苦參原料費(fèi)?？鄥⒌乃幱貌课皇歉?，地上部位是非藥用部位，但是也含有苦參堿等有效成分，具有良好的普及推廣前景。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究苦參提取物替代抗生素對肉羊的生長性能、血清免疫球蛋白、糞便中大腸桿菌數(shù)量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加1%苦參顯著提高了IgM含量，苦參添加組肉羊的抗菌能力均顯著提高，并且苦參組優(yōu)于抗生素組，1%苦參組優(yōu)于2%苦參組?？傊?，1%苦參提取物替代飼用抗生素的效果良好，可提高肉羊免疫功能和抗菌能力。