冠心病患者血清補(bǔ)體C1q、IMA及MCP-1 的表達(dá)及與冠狀動(dòng)脈狹窄的相關(guān)性分析

謝明斌，徐正明，李倩曉，吳源鴻，黃琪

冠心病（CHD）是臨床常見心血管疾病，致死率極高，不僅嚴(yán)重影響人們生活健康，也給社會(huì)醫(yī)療資源造成了巨大消耗[1]。其主要病理基礎(chǔ)為冠狀動(dòng)脈器質(zhì)性狹窄，阻塞血液流動(dòng)，最終導(dǎo)致心肌缺血缺氧而壞死[2]。因此，早期發(fā)現(xiàn)冠狀動(dòng)脈狹窄對(duì)挽救CHD 患者生命具有重要意義。冠脈造影為CHD 診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”；但有放射性，且為有創(chuàng)，費(fèi)用高，難以在基礎(chǔ)醫(yī)院開展。補(bǔ)體1q（C1q）為補(bǔ)體系統(tǒng)C1 重要組成部分，是特異性免疫與固有免疫間橋梁，可通過(guò)調(diào)節(jié)種免疫細(xì)胞調(diào)控炎性反應(yīng)和維持自身免疫耐受[3]。缺血修飾性白蛋白（IMA）為一種N-末端修飾白蛋白（Alb），當(dāng)心肌缺血出現(xiàn)后可迅速升高，相比心肌肌鈣蛋白具備出現(xiàn)更早、敏感性更高等優(yōu)勢(shì)[4]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）為一種單核細(xì)胞趨化蛋白，可在急性炎癥緩解下觸發(fā)更多炎癥因子，形成級(jí)聯(lián)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）發(fā)生和發(fā)展[5]。本研究分析血清C1q、IMA、MCP-1 水平與CHD患者冠狀動(dòng)脈狹窄的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月至2019 年1 月浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院收治的187 例CHD 患者（CHD 組），納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合CHD 診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，且經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診；（2）臨床資料完整；（3）無(wú)其他心臟疾病及精神類疾??；（4）患者及家屬均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）免疫系統(tǒng)疾病者；（2）血液系統(tǒng)疾病者；（3）其他重要器官嚴(yán)重疾病者；（4）近3 個(gè)月有外傷、燒傷、手術(shù)史者。另選58 名體檢健康者為對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 收集基礎(chǔ)資料 包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、吸煙、飲酒、既往病史、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）及超敏C 反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平。

1.2.2 血清C1q、IMA、MCP-1 水平測(cè)定抽取研究對(duì)象清晨空腹靜脈血3 ml，3000 r/min 離心10 min，取上層血清，免疫透射比濁法（上海北加生化試劑有限公司）測(cè)定血清C1q水平，游離鈷比色法（南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司）測(cè)定血清IMA 水平，酶聯(lián)吸附法（上?；鄯f生物科技有限公司）測(cè)定血清MCP-1 水平，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.2.3 冠狀動(dòng)脈造影 CHD 組患者行冠狀動(dòng)脈造影。由兩名專業(yè)介入醫(yī)師操作，選擇西門子Artis zee III biplane 血管造影機(jī)，Seldinger 法常規(guī)穿刺股動(dòng)脈或橈動(dòng)脈，多體位、多角度照射冠脈血管，根據(jù)患者具體情況選擇合適體位，確保冠狀動(dòng)脈各段能充分顯影，左冠狀動(dòng)脈至少投照5 個(gè)體位，右冠狀動(dòng)脈至少投照2 個(gè)體位。由兩名介入專家判斷造影結(jié)果，取平均值。冠狀動(dòng)脈狹窄程度根據(jù)Gensini 積分[7]評(píng)價(jià)，冠脈病變?cè)u(píng)分=冠脈狹窄程度計(jì)分×病變部位計(jì)分，總積分為所有病變積分之和。根據(jù)Gensini積分將CHD 組分為輕度狹窄組（0 ～＜18 分，n=57）、中度狹窄組（18 ～＜41分，n=43）、重度狹窄組（≥41 分，n=87）。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 選用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料比較采用2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間單因素方差分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本 檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性分析；影響因素分析采用多元線性回歸分析。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基礎(chǔ)資料及血清C1q、IMA、MCP-1 水平比較 CHD組TC、LDL-C、hs-CRP、C1q、IMA、MCP-1 水平均高于對(duì)照組，HDL-C 水平低于對(duì)照組（均P＜0.05）。兩組性別構(gòu)成，年齡，BMI，血壓，TG 及吸煙、飲酒、糖尿病史、高血壓史例數(shù)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＞0.05）。見表1。

2.2 不同冠脈狹窄程度CHD 患者血清C1q、IMA、MCP-1 水平比較 血清C1q、IMA、MCP-1 水平隨著CHD 患者冠脈狹窄程度增加而提升（均P ＜0.05）。見表2。

2.3 CHD 患者冠狀動(dòng)脈狹窄影響因素的多元線性回歸分析 以TC、HDL-C、LDL-C、hs-CRP、C1q、IMA、MCP-1 為自變量，Gensini 積分為因變量分析顯示，C1q、IMA、MCP-1 為CHD 患者冠狀動(dòng)脈狹窄獨(dú)立影響因素（均P ＜0.05）。見表3。

2.4 CHD 組血清C1q、IMA、MCP-1 水平與Gensini 積分的相關(guān)性 CHD 組Gensini 積分為（61.80±13.98）分，Pearson 相關(guān)性分析顯示，血清C1q、IMA、MCP-1 水平與Gensini積分呈正相關(guān)（r=0.593、0.573、0.585，均P ＜0.05）。見封二彩圖8。

3 討論

CHD 是人類健康第一殺手，冠狀動(dòng)脈狹窄為其重要病理基礎(chǔ)，AS為冠狀動(dòng)脈狹窄主要危險(xiǎn)因素，可增加動(dòng)脈硬度，纖維化動(dòng)脈，導(dǎo)致血管腔狹窄，其發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中有多種細(xì)胞因子參與[6]。

C1q 為固有免疫補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑重要組成成分，能通過(guò)啟動(dòng)和結(jié)合免疫球蛋白G 或M 的FC 片段，激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，發(fā)揮凋亡壞死細(xì)胞清除、炎性反應(yīng)抑制、體內(nèi)抗原抗體復(fù)合物清除及免疫反應(yīng)啟動(dòng)等作用[8]。C1q 與AS 有密切關(guān)系，參與了AS 過(guò)程[7]。本研究顯示，CHD 組血清C1q 水平提升，并隨著脈狹窄程度增加進(jìn)一步增加，為冠狀動(dòng)脈狹窄獨(dú)立影響因素（P＜0.05），這說(shuō)明C1q參與了CHD 患者冠狀動(dòng)脈狹窄發(fā)生過(guò)程。分析是過(guò)度C1q 表達(dá)激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)異常，促進(jìn)嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)，破壞血管，并富集大量白細(xì)胞于血管內(nèi)皮，損害其結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致AS 形成。

IMA 由Alb 于缺血組織中形成，由肝臟內(nèi)合成，心肌缺血時(shí)，因組織局部反應(yīng)性氧產(chǎn)物大量增加，可改變過(guò)渡金屬與Alb 的結(jié)合位點(diǎn)，最終修飾為IMA[9]。目前尚不完全明確IMA 的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其詳細(xì)機(jī)制。但Mishra 等[8]通過(guò)冠狀動(dòng)脈造影發(fā)現(xiàn)，急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者動(dòng)脈狹窄程度與IMA 水平呈正相關(guān)。本研究示CHD 組血清IMA 水平提升，并隨著脈狹窄程度增加進(jìn)一步增加，為冠狀動(dòng)脈狹窄獨(dú)立影響因素（P ＜0.05）。這說(shuō)明IMA 參與了CHD 患者冠狀動(dòng)脈狹窄發(fā)生過(guò)程。分析是冠脈狹窄導(dǎo)致心肌組織缺血缺氧，可釋放Cu2+，被維生素C 等還原劑轉(zhuǎn)化為Cu+，形成羥自由基，損害Alb 并改變其N-末端序列，促進(jìn)IMA 形成，隨著冠狀動(dòng)脈狹窄程度的增加，IMA 水平越高。

MCP-1 為CC 類家族一員，可與趨化因子受體2 結(jié)合，通過(guò)細(xì)胞膜上G 蛋白偶聯(lián)磷酸肌醇等信號(hào)通路激活單核/巨噬細(xì)胞，參與一系列炎性反應(yīng)[4]。Royen等[7]研究顯示，局部給予MCP-1 后，能損傷血管，影響血流，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊形成。本研究顯示CHD 組血清MCP-1 水平提升，并隨著脈狹窄程度增加進(jìn)一步增加，為冠狀動(dòng)脈狹窄獨(dú)立影響因素（P＜0.05）。這說(shuō)明MCP-1 參與了CHD患者冠狀動(dòng)脈狹窄發(fā)生過(guò)程。分析是冠狀動(dòng)脈狹窄會(huì)形成剪切應(yīng)力，促進(jìn)多種細(xì)胞MCP-1 mRNA 表達(dá)，MCP-1 又能聚集血液中單核細(xì)胞，激活大量生長(zhǎng)因子和層粘連蛋白，促進(jìn)VEC和VSMC增殖遷移，損傷血管內(nèi)膜，攝取大量脂質(zhì)，引起AS[9]。綜上所述，監(jiān)測(cè)血清C1q、IMA、MCP-1 水平有助于判斷CHD患者冠狀動(dòng)脈狹窄。但本研究為橫斷面研究，病例和時(shí)間有限，還需前瞻性臨床試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。

表1 兩組基礎(chǔ)資料及血清C1q、IMA、MCP-1 水平比較

表2 不同冠脈狹窄程度CHD 患者血清C1q、IMA、MCP-1 水平比較

表3 CHD 患者冠狀動(dòng)脈狹窄影響因素的多元線性回歸分析