催產(chǎn)素在妊娠晚期及剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠體內(nèi)藥物代謝動力學(xué)研究

曲星銘， 張 紀(jì)， 徐 輝, 張 雷

北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 1.血液病科；2.婦產(chǎn)科；3.衛(wèi)勤部，遼寧 沈陽 110016;4.遼寧省婦幼保健院，遼寧 沈陽 110005

近年來，無痛分娩因其良好的鎮(zhèn)痛效果，越來越受到產(chǎn)婦和醫(yī)師的關(guān)注。盡管無痛分娩可以在一定程度上緩解產(chǎn)婦疼痛，但會引起子宮平滑肌松弛和子宮收縮抑制，從而導(dǎo)致分娩時間延長[1]。在無痛分娩過程中使用催產(chǎn)素可以有效地促進(jìn)子宮頸成熟，加速子宮頸擴張，縮短分娩時間，節(jié)省產(chǎn)婦體力和精力，改善母嬰結(jié)局[2]。催產(chǎn)素可增強子宮收縮，靜脈注射迅速生效。但催產(chǎn)素的半衰期短(4～10 min)，維持時間短，需要通過連續(xù)靜脈內(nèi)給藥維持有效的血藥濃度[3]。因此，在剖宮產(chǎn)期間連續(xù)輸注催產(chǎn)素可以使子宮在整個手術(shù)過程中和手術(shù)后2 h內(nèi)持續(xù)收縮，從而減少因子宮無力而引起的產(chǎn)后出血。目前，關(guān)于不同劑量的催產(chǎn)素對產(chǎn)婦的影響報道較少。本研究通過給予妊娠晚期和剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠尾靜脈注射不同濃度催產(chǎn)素構(gòu)建催產(chǎn)素藥物代謝動力學(xué)模型，并用高效液相色譜-二級質(zhì)譜聯(lián)用法測定血漿催產(chǎn)素濃度，探討其藥物代謝動力學(xué)變化的特點?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 選取36只妊娠晚期清潔級SD大鼠為研究對象，體質(zhì)量400～520 g，孕期18 d。實驗動物由北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院動物實驗科提供。將大鼠隨機分為妊娠晚期組(n=18)與剖宮產(chǎn)術(shù)后組(n=18)。將妊娠晚期組大鼠分為A組、B組、C組3個亞組，每組各6只。將剖宮產(chǎn)術(shù)后組大鼠分為D組、E組、F組3個亞組，每組各6只。本研究對大鼠的處置符合動物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 模型制備 術(shù)前12 h禁食。麻醉后將大鼠仰臥位固定于手術(shù)臺上，頸靜脈插管成功后用于放血。通過尾靜脈注射給藥。A組、B組、C組分別尾靜脈注射0.1、0.5、5.0 U/kg不同濃度的催產(chǎn)素。D組、E組、F組參照J(rèn)ankowski等[4]的方法構(gòu)建動物模型，下腹部正中切口打開腹腔，顯露子宮，切開大鼠子宮及孕囊。取出胎鼠后，縫合子宮，依次將各層組織逐層縫合至皮膚，維持。剖出胎鼠后，D組、E組、F組立即尾靜脈推注0.1、0.5、5.0 U/kg不同濃度的催產(chǎn)素。于給藥后1、2、4、6、8、10、15、20、45、60 min(分別記為T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10)各時間點采集頸靜脈血0.5 ml，置肝素化EP管中，3 000 r/min離心5 min，取上清，-80℃保存。

1.3 觀察指標(biāo) 取催產(chǎn)素溶液，用流動相A精密稀釋至濃度分別為0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的催產(chǎn)素標(biāo)準(zhǔn)儲備液，分別進(jìn)樣，4℃避光保存。取孕鼠空白血漿50 μl，進(jìn)樣5 μl，記錄色譜圖；將一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液加至空白血漿中，同法測定，記錄色譜圖。取催產(chǎn)素溶液，用流動相A精密稀釋至濃度分別為0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的溶液，分別進(jìn)樣。以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果

2.1 妊娠晚期大鼠催產(chǎn)素血藥濃度比較 A組、B組、C組藥物達(dá)峰時間均為給藥后1 min。C組T1～T10各時間點血藥濃度均明顯高于B組與A組，且B組高于A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 妊娠晚期給予大鼠不同濃度催產(chǎn)素血藥濃度比較

2.2 剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠催產(chǎn)素血藥濃度比較 D組、E組、F組藥物達(dá)峰時間均為給藥后1 min。F組T1～T10各時間點血藥濃度均明顯高于D組與E組，且E組高于D組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 剖宮產(chǎn)術(shù)后給予大鼠不同濃度催產(chǎn)素血藥濃度比較

2.3 妊娠晚期大鼠藥物代謝動力學(xué)參數(shù)比較 C組峰值藥物濃度、曲線下面積(area under the curve，AUC)、血漿清除率、表觀分布容積均高于A組與B組，且B組高于A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。C組半衰期短于A組與B組，且B組短于A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。C組藥物體內(nèi)平均駐留時間(mean retention time，MRT)短于A組與B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 妊娠晚期大鼠藥物代謝動力學(xué)參數(shù)比較

2.4 剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠藥物代謝動力學(xué)參數(shù)比較 F組峰值藥物濃度濃、AUC、血漿清除率、表觀分布容積均高于D組及E組，且E組高于D組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。F組半衰期短于D組及E組，且E組短于D組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠藥物代謝動力學(xué)參數(shù)比較

3 討論

目前，臨床上測定催產(chǎn)素血藥濃度的方法有酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)物質(zhì)放射免疫檢驗、高效液相色譜-二級質(zhì)譜聯(lián)用法等[5]。高效液相色譜具有高壓、高效、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣，以及分析速度快等優(yōu)點。二級質(zhì)譜對一級質(zhì)譜中有疑問的峰進(jìn)行再次解離分析以確定一級質(zhì)譜中不確定的峰的結(jié)構(gòu)。本研究首次采用高效液相色譜-二級質(zhì)譜聯(lián)用法檢測妊娠晚期及剖宮產(chǎn)術(shù)后催產(chǎn)素的濃度，該方法提取回收率較高，樣品預(yù)處理簡單，運行時間較短，能夠滿足實際生物樣品的測定。

腎小球濾過、催產(chǎn)素酶等因素影響催產(chǎn)素的代謝與清除[6-7]。在催產(chǎn)素酶水解前，催產(chǎn)素必須與內(nèi)皮細(xì)胞表面的催產(chǎn)素受體結(jié)合，隨后通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的信號通路，最終回收到細(xì)胞表面[8]。有研究報道，催產(chǎn)素在人體內(nèi)的半衰期為1～3 min[9]。本研究采用高效液相色譜-二級質(zhì)譜聯(lián)用法測定妊娠晚期和剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠體內(nèi)不同濃度催產(chǎn)素的半衰期為7～10 min，且隨著催產(chǎn)素給藥濃度增加，孕鼠體內(nèi)半衰期均變短，提示高濃度催產(chǎn)素代謝快，半衰期短。本研究催產(chǎn)素半衰期較相關(guān)文獻(xiàn)報道[9]的半衰期長，其原因可能是高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的方法高效、快速、準(zhǔn)確、靈敏，避免了血漿催產(chǎn)素在體外的降解。因為催產(chǎn)素半衰期短，因此，催產(chǎn)素的最佳給藥方式非肌肉注射和靜脈推注，而是靜脈滴注持續(xù)給藥。

綜上所述，催產(chǎn)素半衰期短，給予妊娠晚期和剖宮產(chǎn)術(shù)后大鼠不同濃度催產(chǎn)素后，達(dá)峰時間均為1 min。在剖宮產(chǎn)術(shù)中當(dāng)胎頭或胎肩娩出后，及時經(jīng)靜脈給予催產(chǎn)素將會快速產(chǎn)生宮縮的效應(yīng)。