川芎嗪對(duì)糖尿病患者體內(nèi)及體外單核細(xì)胞腫瘤壞死因子-α-誘導(dǎo)蛋白-8-2、腫瘤壞死因子-α、組織因子表達(dá)水平影響

張 莉， 孫 倩， 張 銘， 何志偉， 高國(guó)領(lǐng)， 姬婷婷

石家莊平安醫(yī)院(河北醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院)1.藥械科；2.心血管科，河北 石家莊 050000；3.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院 藥械科，河北 石家莊 050000

近年來(lái)，2型糖尿病的發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì)。2型糖尿病以糖代謝紊亂為主要特征，隨著病情進(jìn)展，可出現(xiàn)多個(gè)組織、器官損傷，進(jìn)而合并多種并發(fā)癥，造成患者生活質(zhì)量降低，其發(fā)病與免疫、炎癥、高凝狀態(tài)等均有關(guān)[1-3]。目前，糖尿病以西藥治療為主，通過(guò)改善胰島素分泌功能和降低血糖代謝水平達(dá)到治療目的。隨著中醫(yī)的不斷發(fā)展，中醫(yī)辯證療法在糖尿病治療中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。糖尿病屬于中醫(yī)消渴癥范疇，病因以陰虛燥熱為主。有研究指出，川芎嗪可顯著改善2型糖尿病患者的局部微循環(huán)能力，增強(qiáng)胰島素功能，提高免疫力[4]。腫瘤壞死因子-α-誘導(dǎo)蛋白-8-2(tumor necrosis factor-α-induced protein-8-like 2，TIPE2)是重要的免疫負(fù)性調(diào)節(jié)因子，對(duì)維持免疫穩(wěn)態(tài)具有重要意義[5]。腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis factor-α，TNF-α)是一種炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)。組織因子(tissue factor，TF)可在一定程度上反映患者的血管高凝狀態(tài)。本研究旨在探討川芎嗪對(duì)糖尿病患者體內(nèi)及體外單核細(xì)胞TPIE2、TNF-α、TF表達(dá)水平的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象、材料及方法

1.1 研究對(duì)象 將石家莊平安醫(yī)院自2017年1月至2019年12月收治的120例糖尿病患者納入研究，并將患者隨機(jī)分入A組和B組，每組各60例；另將同期60例健康體檢者納入健康組。排除標(biāo)準(zhǔn)：病情不穩(wěn)定，合并嚴(yán)重肝腎功能異?；蛐姆喂δ懿蝗?；3個(gè)月內(nèi)服用過(guò)激素類(lèi)藥物或受體拮抗劑類(lèi)可影響血糖代謝的藥物者；不配合檢查和治療、自行停止治療或轉(zhuǎn)院者；對(duì)本研究藥物過(guò)敏者。A組中，男性35例，女性25例，平均年齡(66.71±3.27)歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(24.20±2.21)kg/m2，平均病程(9.77±2.24)年；B組中，男性36例，女性24例，平均年齡(67.34±3.34)歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(24.30±2.33)kg/m2，平均病程(9.55±2.37)年；健康組中，男性30例，女性30例，平均年齡(67.03±3.20)歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(24.40±2.30)kg/m2。3組研究對(duì)象性別比例、年齡、體質(zhì)量指數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 治療方法 A組患者采用胰島素治療：甘精胰島素(來(lái)得時(shí)，Aventis Pharma Deutschland GmbH，國(guó)藥準(zhǔn)字J20140052)起始劑量0.1～0.2 U/kg，每日睡前或晨起固定時(shí)間皮下注射。B組患者在A組基礎(chǔ)上聯(lián)合川芎嗪治療：川芎嗪注射液(吉林四長(zhǎng)制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H22026448)10 ml+250 ml 5%葡萄糖溶液，靜脈滴注，每日1次。健康組不采取任何措施。A組和B組患者均治療4周。

1.3 細(xì)胞來(lái)源 THP-1單核細(xì)胞由中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所提供。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 10%小牛血清培養(yǎng)THP-1細(xì)胞，條件設(shè)定為37℃、5% CO2，孵育THP-1細(xì)胞48 h，促進(jìn)其向巨噬細(xì)胞分化。細(xì)胞由懸浮狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橘N壁狀態(tài)后，將細(xì)胞分入A(細(xì)胞)組、B(細(xì)胞)組、C(細(xì)胞)組。A(細(xì)胞)組加入25 mmol/L葡萄糖溶液，B(細(xì)胞)組加入川芎嗪注射液，C(細(xì)胞)組加入25 mmol/L葡萄糖溶液+川芎嗪注射液，3組均孵育24 h。

1.5 觀察指標(biāo) 比較A組和B組患者的治療有效率和血糖水平，3組研究對(duì)象體內(nèi)的TPIE2、TNF-α、TF水平，以及3組體外THP-1細(xì)胞的TPIE2、TNF-α、TF水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)TF，采用放射免疫法檢測(cè)TNF-α，采用Western免疫印跡法檢測(cè)TPIE2，檢測(cè)試劑均來(lái)自上海羅氏，流程嚴(yán)格參照說(shuō)明書(shū)。治療效果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[6]：臨床癥狀及體征消失，空腹血糖、餐后2 h血糖恢復(fù)至正常范圍為顯效；臨床癥狀及體征改善，空腹血糖、餐后2 h血糖下降>20%，但未恢復(fù)至正常范圍為有效；癥狀、體征、空腹血糖、餐后2 h血糖均無(wú)變化為無(wú)效。

有效率=(顯效+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%

2 結(jié)果

2.1 A組和B組患者治療有效率比較 治療4周后，A組顯效25例，有效21例，無(wú)效14例，有效率為76.7%(46/60)，B組顯效36例，有效20例，無(wú)效4例，有效率為93.3%(56/60)。A組和B組患者治療有效率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 A組和B組患者血糖水平比較 治療前，A組和B組空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，A組和B組空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白均低于治療前，且B組低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 A組和B組患者血糖水平比較

2.3 3組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平比較 治療前，A組和B組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平均高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后，A組和B組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平均高于健康組，且A組高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 3組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平比較

2.4 3組體外THP-1細(xì)胞TPIE2、TNF-α、TF水平比較 體外THP-1細(xì)胞TPIE2、TNF-α、TF水平由高至低依次為A(細(xì)胞)組、C(細(xì)胞)組、B(細(xì)胞)組，組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 3組體外THP-1細(xì)胞TPIE2、TNF-α、TF水平比較

3 討論

糖尿病屬消渴癥范疇，氣陰兩虛是發(fā)生病變的重要機(jī)制之一，患者在長(zhǎng)期陰虛狀態(tài)下，內(nèi)熱顯著，由于氣虛證造成的血液運(yùn)行不暢引起血脈不利，阻塞經(jīng)絡(luò)，誘發(fā)系列并發(fā)癥。糖尿病是代謝紊亂性疾病，隨著病情進(jìn)展，患者血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生變化，造成微循環(huán)障礙，進(jìn)一步導(dǎo)致血液高粘性和高凝狀態(tài)，引起周?chē)窠?jīng)性病變。古籍記載：川芎，血中氣藥也，肝苦急，以辛補(bǔ)之，故血虛者宜之，辛以散之，故氣郁者宜之[7]。川芎嗪從川芎根莖中提取，具有顯著的降血糖、抗氧化、抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、提高免疫力的作用[8]。

本研究結(jié)果中：治療4周后，A組有效率為76.7%(46/60)，B組為93.3%(56/60)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后，A組和B組空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白均低于治療前，且B組低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這提示，胰島素聯(lián)合川芎嗪控制血糖效果優(yōu)于單用胰島素。TPIE2參與炎癥反應(yīng)及細(xì)胞死亡信號(hào)通路，對(duì)免疫具有顯著的負(fù)性調(diào)節(jié)作用；其表達(dá)水平還與血管硬化、腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)相關(guān)[9]。糖尿病患者的血管內(nèi)皮細(xì)胞在高糖狀態(tài)下會(huì)出現(xiàn)損傷，TPIE2的負(fù)性免疫調(diào)節(jié)導(dǎo)致病情加重，形成惡性循環(huán)[10]。TNF-α表達(dá)增強(qiáng)提示局部炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)加重；TF可反映患者的血管高凝狀態(tài)[11]。本研究結(jié)果顯示：(1)治療前，A組和B組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平均高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后，A組和B組研究對(duì)象體內(nèi)TPIE2、TNF-α、TF水平均高于健康組，且A組高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)體外THP-1細(xì)胞TPIE2、TNF-α、TF水平由高至低依次為A(細(xì)胞)組、C(細(xì)胞)組、B(細(xì)胞)組，組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。上述結(jié)果均提示，川芎嗪可通過(guò)抗凝、抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、調(diào)節(jié)免疫等調(diào)節(jié)血糖。

綜上所述，川芎嗪具有抗凝、抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、調(diào)節(jié)免疫等作用，可輔助治療糖尿病。