美藤果殼多酚物質(zhì)的提純及其抗氧化性

林錦銘，蔡尤林，李俊健，鐘淳菲，杜冰，2*，黎攀，2*

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東廣州510642；2.云南省杜冰專家工作站，云南普洱665008）

美藤果（Plukenetia volubilis Linneo）又稱為印加果、南美油藤、印奇果、星油藤等，為大戟科藤本植物、多年生油料作物。美藤果原產(chǎn)于南美洲秘魯亞馬遜河流域雨林，2006 年，由中國(guó)科學(xué)院西雙版納熱帶植物園從秘魯引種成功。2011 年7 月，由普洱聯(lián)眾生物資源開發(fā)有限公司申請(qǐng)，中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所標(biāo)本館組織專家鑒定，確認(rèn)將其正式定名為“美藤果”[1]。2013年1 月4 日，衛(wèi)生部2013 年第1 號(hào)公告批準(zhǔn)美藤果油作為新資源食品[2]，開啟了開發(fā)美藤果新一輪熱潮。美藤果種子富含油脂（35%～60%）和蛋白質(zhì)（27%）及帶有熱不穩(wěn)定苦味成分[3]，其中不飽和脂肪酸含量達(dá)92%以上，對(duì)人體具有良好營(yíng)養(yǎng)作用，具有預(yù)防心血管疾病、保養(yǎng)肌膚等作用[4]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)美藤果油的研究較多[5-6]，而美藤果殼作為美藤果提煉油后的廢棄物，對(duì)其利用卻少有報(bào)道。美藤果殼中多酚含量豐富，是良好的多酚來(lái)源，而植物多酚在食品、醫(yī)藥中應(yīng)用廣泛[7]。在食品中，植物多酚可作為一種天然的抗氧化添加劑，相對(duì)于人工合成的抗氧化添加劑更安全[8]。近代醫(yī)學(xué)研究顯示，氧化損傷是導(dǎo)致許多慢性病，如心血管病、癌癥和衰老性疾病的重要原因，如何阻止氧化損傷、清除體內(nèi)自由基是醫(yī)學(xué)上預(yù)防和治療這些慢性病的突破口，而多酚的抗氧化功能可以對(duì)這些慢性病起到預(yù)防作用[9-14]。本文開展了美藤果殼多酚的提取純化工藝條件研究，并與商品化的抗氧化添加劑丁基羥基甲苯（butylated hydroxytoluene，BHT）、特丁基對(duì)苯二酚（tert-butylhydroquinone，TBHQ）、維生素C 的體外抗氧化性進(jìn)行對(duì)比，確定美藤果殼多酚的主要成分，為美藤果殼多酚的深入開發(fā)及其作為抗氧化劑在食品加工業(yè)、臨床醫(yī)藥中的應(yīng)用提供一些科學(xué)數(shù)據(jù)支持，美藤果殼綜合開發(fā)利用具有較好的發(fā)展前景。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

美藤果殼：普洱聯(lián)眾生物資源開發(fā)有限公司；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（2，2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH）、三羥甲基氨基甲烷[tris（hydroxymethyl）aminomethane，Tris]：美國(guó)Sigma 公司；無(wú)水乙醇、碳酸鈉、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品、福林酚試劑、2，6-二叔丁基對(duì)甲酚（BHT）、叔丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）、維生素C、雙氧水、三氯化鐵等（均為分析純）：天津市大茂化學(xué)試劑廠。

HH-6 數(shù)顯恒溫水浴鍋：常州奧華儀器有限公司；80 目國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩：浙江上虞市道墟五四儀器紗篩廠；PL203 電子精密天平：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；SHZ-III 型循環(huán)水真空泵：上海亞榮生化儀器廠；UV-5100 紫外分光光度計(jì)：上海元析儀器有限公司；LC1260 反相高效液色譜儀：Agilent 公司。

1.2 方法

1.2.1 原料的預(yù)處理

將美藤果殼用多功能粉碎機(jī)粉碎處理，過(guò)80 目篩得美藤果殼干粉，按GB 5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》，測(cè)得其含水量為2.95%。剩余粉末裝入密封袋中并置于-18 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 乙醇回流法提取美藤果殼多酚

準(zhǔn)確稱取1.000 g 美藤果殼干粉，按適當(dāng)?shù)牧弦罕?、合適比例的乙醇溶液為提取劑，于普通加熱回流裝置，80 ℃回流提取1 h，然后用布氏漏斗抽濾，上清液減壓濃縮過(guò)濾后，用蒸餾水定容至250 mL。其中美藤果殼多酚得率計(jì)算公式如下：

多酚得率/%=（提取液濃度×體積）/樣品質(zhì)量×100

1.2.3 美藤果殼總多酚含量的測(cè)定

采用福林酚法[15-16]測(cè)定美藤果殼總多酚含量，以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 最佳提取工藝條件優(yōu)化

以美藤果殼多酚得率作為考察指標(biāo)，分別固定A乙醇濃度、B 料液比、C 提取溫度和D 提取時(shí)間進(jìn)行單因素試驗(yàn)。試驗(yàn)重復(fù)3 次，試驗(yàn)結(jié)果取平均值。然后根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果各取3 個(gè)水平。按L9（34）正交設(shè)計(jì)表進(jìn)行正交試驗(yàn)，因素水平見表1。

表1 正交試驗(yàn)因素水平Table 1 Factors and levels of orthogonal experiment

1.2.5 大孔吸附樹脂法純化美藤果殼多酚

1.2.5.1 樣品濃度影響

稱取20.0 g AB-8 樹脂，分別加入濃度0.5 mg/mL～3.0 mg/mL 樣品液。25 ℃條件下振蕩吸附一定時(shí)間，取樣品液測(cè)多酚含量。

1.2.5.2 洗脫劑濃度對(duì)解吸的影響

吸附后分別加入10%、30%、50%、70%、90%乙醇50 mL，置于恒溫恒速振蕩器中，在25 ℃條件下振蕩解吸一定時(shí)間，取等量解吸液測(cè)定多酚含量。

1.2.5.3 上樣液流速的選擇

大孔樹脂濕法裝柱，分別以1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 BV/h 的流速進(jìn)行樣品上柱，測(cè)定漏出液中多酚含量，研究上樣液流速對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響。

1.2.5.4 洗脫流速對(duì)洗脫的影響

吸附后用3 倍柱體積蒸餾水沖洗樹脂柱。相同體積洗脫液分別按照1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 BV/h 的流速進(jìn)行洗脫，測(cè)定其中多酚的含量，計(jì)算解吸率。

1.2.5.5 洗脫體積的影響

洗脫樹脂上吸附的美藤果殼多酚，分部收集洗脫液并測(cè)定各管洗脫液中的美藤果殼多酚含量，以洗脫液體積為橫坐標(biāo)，洗脫液中多酚濃度為縱坐標(biāo)，繪制洗脫曲線。

1.2.6 美藤果殼提取物成分分析

采用安捷倫1260 型高效液相色譜（high-performance liquid chromatography -diode array detection，HPLC-DAD）測(cè)定多酚成分。儀器條件為Zorbox SBC18 色譜柱；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：20 μL；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器（diode array detection，DAD），280 nm 處進(jìn)行檢測(cè)。流動(dòng)相組成：0.4%冰乙酸超純水（A）和乙腈（B）；以標(biāo)準(zhǔn)品在色譜柱上的保留時(shí)間為對(duì)照，判斷各多酚成分。

1.2.7 美藤果殼提取物抗氧化特性

將提取液真空冷凍干燥后，制得美藤果殼提取物粉末，通過(guò)福林酚法測(cè)定提取物粉末中總多酚含量為26%。以該美藤果殼提取物粉末作為受試物并配制成一系列濃度，通過(guò)其對(duì)羥自由基、DPPH 自由基的清除作用研究美藤果殼提取物的抗氧化性。

1.2.7.1 清除羥自由基作用

通過(guò)Fenton 體系（甲基紫—Fe2+—H2O2）產(chǎn)生羥自由基，采用分光光度法測(cè)定上述提取物對(duì)羥自由基的清除作用[17]。在10 mL 具塞比色皿中依次加入1.0 mL（2.0×10-4mol/L）甲基紫溶液、1.0 mL（1.0×10-3mol/L）Fe2+溶液、1.0 mL（0.12%）H2O2溶液，并用Tris-HCl 緩沖液（pH 8.25）調(diào)節(jié)pH 4.5 后用水稀釋到10 mL，搖勻放置30 min 后以水為空白參比在578 nm 處測(cè)定吸光值A(chǔ)0；測(cè)定樣品時(shí)在上述體系中預(yù)加入1.0 mL 樣品溶液，同上測(cè)定吸光值A(chǔ)S，同體積樣品溶液、Tris-HCl 及水溶液作空白參比；甲基紫及Tris-HCl 緩沖液測(cè)定吸光值A(chǔ)，以水為空白參比。則清除率為：S/%＝[（AS－A0）/（A－A0）]×100。

回歸擬合樣品濃度與清除率的量效關(guān)系曲線，算出提取物的的半數(shù)抑制濃度（IC50）值并與其他抗氧化劑進(jìn)行對(duì)比。

1.2.7.2 DPPH 自由基清除作用

在3.0 mL 6 μmol/L DPPH-無(wú)水乙醇溶液中加入500 μL 樣品溶液，搖勻放置30 min，測(cè)定其在517 nm下的吸光值（AS）；以500 μL 無(wú)水乙醇代替樣品為空白對(duì)照（A0）；以500 μL 樣品與3.0 mL 無(wú)水乙醇混合液為樣品對(duì)照（AX）以消除樣品本身顏色的影響，測(cè)定DPPH 自由基清除率[18]。清除率計(jì)算公式：S/%＝（A0－A）/A0×100。

回歸擬合樣品濃度與清除率的量效關(guān)系曲線，計(jì)算出提取物的半數(shù)抑制濃度（IC50）數(shù)值并與其他抗氧化劑進(jìn)行對(duì)比。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2016 進(jìn)行處理，采用SPSS 19.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

試驗(yàn)得沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1 所示，回歸方程為Y=100.4X+0.020 8，R2=0.997 2，線性較好。其中Y 為吸光值，X 為沒食子酸濃度，mg/mL。

圖1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Gallic acid standard curve

2.2 單因素試驗(yàn)

2.2.1 乙醇濃度對(duì)美藤果殼多酚得率的影響

乙醇濃度對(duì)多酚得率的影響見圖2。

圖2 乙醇濃度對(duì)多酚得率的影響Fig.2 Effect of ethanol concentration on polyphenol yield

由圖2 可知，美藤果殼多酚得率隨乙醇濃度提高而提高。乙醇濃度小于70%時(shí)，隨乙醇濃度提高，多酚得率的提高速度較快，乙醇濃度大于70%后，多酚得率提高速度較緩慢?？赡苁且?yàn)殡S著乙醇濃度的增大，其他脂溶性物質(zhì)和多酚競(jìng)爭(zhēng)溶解致使多酚得率上升緩慢[19]。綜合考慮選擇70%乙醇提取多酚為宜。

2.2.2 料液比對(duì)美藤果殼多酚得率的影響

料液比對(duì)多酚得率的影響見圖3。

圖3 料液比對(duì)多酚得率的影響Fig.3 Effect of material liquid ratio on polyphenol yield

由圖3 可知，料液比為1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50（g/mL）時(shí)，多酚得率相對(duì)較低，料液比為1 ∶60（g/mL）時(shí)，多酚得率有明顯上升，料液比達(dá)1 ∶70（g/mL）時(shí)，多酚得率又隨之下降。當(dāng)溶劑比例較低時(shí)，溶劑不能將多酚完全提取，增加溶劑用量，未溶解的多酚向提取劑中轉(zhuǎn)移，溶劑與原料的比值越大，濃度梯度越大，有效成分的擴(kuò)散速率也越大[20]。當(dāng)料液比1 ∶60（g/mL）時(shí)，多酚得率最高，再繼續(xù)增大溶劑比例不利于多酚提取，所以應(yīng)選擇料液比為1 ∶60（g/mL）。

2.2.3 提取溫度對(duì)美藤果殼多酚得率的影響

提取溫度對(duì)多酚得率的影響見圖4。

圖4 提取溫度對(duì)多酚得率的影響Fig.4 Effect of extraction temperature on polyphenol yield

由圖4 看出，溫度對(duì)美藤果殼多酚得率的影響比較明顯。溫度較低時(shí)，美藤果殼多酚得率較低，在一定范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，多酚得率也隨之升高。一方面可能是由于多酚在熱水中的溶解度較大；另一方面可能溫度的升高加速了分子的運(yùn)動(dòng)，氫鍵更容易斷裂，多酚的滲透、溶解、擴(kuò)散速度也加快，因而酚類物質(zhì)更易于從原料中溶出，提高乙醇提取多酚的速度。但溫度過(guò)高時(shí)一些熱敏性多酚成分會(huì)發(fā)生氧化分解，故提取溫度定在90 ℃為宜。

2.2.4 提取時(shí)間對(duì)美藤果殼多酚得率的影響

提取時(shí)間對(duì)多酚得率的影響見圖5。

圖5 提取時(shí)間對(duì)多酚得率的影響Fig.5 Effect of extraction time on polyphenol yield

由圖5 看出，在一定范圍內(nèi)，隨著提取時(shí)間的增加，美藤果殼多酚得率也隨之增大，當(dāng)提取時(shí)間大于2.0 h 后，多酚得率的增大趨于平緩?？梢娞崛r(shí)間越長(zhǎng)，美藤果殼多酚的提取量越高，這是因?yàn)殡S著回流時(shí)間的加長(zhǎng)可以使得多酚更加充分地溶解于溶劑中[21]。當(dāng)提取時(shí)間≥2.0 h，多酚得率增加趨勢(shì)趨于平緩，提取時(shí)間的進(jìn)一步延長(zhǎng)對(duì)多酚得率沒有顯著影響，考慮到實(shí)際生產(chǎn)的提取效率，故提取時(shí)間定為2.0 h 為宜。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，按正交設(shè)計(jì)表L9（34）安排試驗(yàn)，用福林酚法測(cè)定多酚得率，結(jié)果如表2。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果及極差分析Table 2 Orthogonal experiment results and range analysis

表2 極差分析結(jié)果表明，各因素對(duì)多酚得率影響大小次序?yàn)镃>A>B>D，即提取溫度＞乙醇濃度＞料液比＞提取時(shí)間，最優(yōu)條件組合為C3A2B2D3，即提取溫度90 ℃，乙醇濃度70%，料液比為1 ∶55（g/mL），提取時(shí)間2.0 h 為最優(yōu)方案。對(duì)方案進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。準(zhǔn)確稱1.000 g 美藤果殼粉，按最佳工藝條件C3A2B2D3，進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，分別測(cè)定多酚得率，計(jì)算得多酚的平均得率為4.79%，高于正交試驗(yàn)中各試驗(yàn)的得率，說(shuō)明最佳工藝合理。

2.4 大孔吸附樹脂法純化美藤果殼多酚試驗(yàn)結(jié)果

樣品濃度對(duì)大孔樹脂吸附效果的影響見圖6，解吸劑濃度對(duì)美藤果殼多酚解吸的影響見圖7，上柱液流速對(duì)大孔樹脂吸附的影響見圖8，洗脫流速對(duì)洗脫效果的影響見圖9，AB-8 大孔樹脂洗脫曲線見圖10。

圖6 樣品濃度對(duì)大孔樹脂吸附效果的影響Fig.6 Effect of sample concentration on adsorption of macroporous resin

圖7 解吸劑濃度對(duì)美藤果殼多酚解吸的影響Fig.7 Effect of concentration of desorption agent on the desorption of polyphenols from sacha inchi shell

圖8 上柱液流速對(duì)大孔樹脂吸附的影響Fig.8 Effect of flow rate on adsorption of macroporous resin

圖9 洗脫流速對(duì)洗脫效果的影響Fig.9 Effect of elution velocity on elution efficiency

圖10 AB-8 大孔樹脂洗脫曲線Fig.10 AB-8 macroporous resin

圖6 表明，吸附率隨樣品濃度增加呈先升高后降低趨勢(shì)，當(dāng)樣品濃度在1.5 mg/mL 時(shí)吸附率最大；圖7表明，隨著乙醇濃度的升高解吸率逐漸增加，乙醇濃度超過(guò)30%時(shí)，繼續(xù)增加乙醇濃度，對(duì)洗脫效果的提升作用不大；圖8 顯示過(guò)高的上樣流速不利于多酚的吸附，上柱流速為2.0 BV/h 左右多酚吸附率最高，因此選擇上柱流速為2.0 BV/h；圖9 顯示洗脫流速1.5 BV/h左右洗脫效果較好，因此洗脫流速定為1.5 BV/h；圖10顯示當(dāng)洗脫體積達(dá)到1.6 BV 左右時(shí)，洗脫液中的多酚含量達(dá)到最大值，洗脫效果最好，因此洗脫液體積為1.6 BV 比較適宜。

綜上所述，AB-8 大孔樹脂對(duì)美藤果殼多酚分離純化的最佳工藝：以乙醇粗提物為原料，乙醇作為洗脫劑，上樣速度為2.0 BV/h，采用30%乙醇溶液以1.5 BV/h 的洗脫速度洗脫4.0 BV，最終純化液多酚純度可達(dá)到68.3%

2.5 美藤果殼多酚純化前后成分分析

大孔樹脂AB-8 純化前美藤果殼多酚提取物高效液相色譜（highperformanceliquidchromatography，HPLC）見圖11，大孔樹脂AB-8 純化后美藤果殼多酚提取物HPLC 見圖12。

如圖11、圖12 所示，對(duì)比發(fā)現(xiàn)美藤果殼多酚提取物經(jīng)過(guò)大孔樹脂AB-8 純化后不會(huì)造成峰的丟失，即單體酚組成未減少，并且峰面積的下降程度較低，即單體酚經(jīng)純化后損失量較少（約5%左右）。美藤果殼多酚提取物純化前保留時(shí)間3 min～4 min 之間有許多雜峰，可見這類雜質(zhì)水溶性較好，可能是粗提后通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)無(wú)法除去的殘留乙醇；而經(jīng)大孔樹脂AB-8 純化后雜峰去除效果較好，且純化前保留時(shí)間大于4 min的峰均被很好地保留，由此可見利用大孔樹脂AB-8純化美藤果殼多酚提取物是可行的。

結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC 分析圖譜及混合標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC 分析圖譜對(duì)純化后多酚提取物HPLC 譜分析結(jié)果見表3。

圖11 大孔樹脂AB-8 純化前美藤果殼多酚提取物HPLCFig.11 HPLC of polyphenol extract from the shell of sacha inchi before purification with macroporous resin AB-8

圖12 大孔樹脂AB-8 純化后美藤果殼多酚提取物HPLCFig.12 HPLC of polyphenol extract from the shell of sacha inchi after purification with macroporous resin AB-8

表3 純化后美藤果殼多酚提取物HPLC 分析結(jié)果Table 3 HPLC analysis results of polyphenol extract from the shell of sacha inchi after purification

由表3 可知，美藤果殼多酚經(jīng)純化主要成分為沒食子酸、蘆丁、兒茶素、單寧和異槲皮苷，含量分別為9.28、7.29、5.54、4.31、2.93 μg/mL。

2.6 抗氧化性測(cè)定結(jié)果

2.6.1 美藤果殼多酚對(duì)羥自由基的清除作用

BHT、TBHQ、維生素C、美藤果殼多酚等物質(zhì)的濃度與羥自由基清除率的量效關(guān)系曲線如圖13 所示。

圖13 各樣品質(zhì)量濃度與羥自由基清除率量效關(guān)系Fig.13 Relationship between the mass concentration of each sample and the scavenging rate of hydroxyl radical

利用擬合曲線計(jì)算出美藤果殼多酚的IC50值，即清除率為50%時(shí)樣品的濃度為IC50＝0.586 mg/mL。

羥自由基是活性氧的一種，在體內(nèi)的形成主要是由過(guò)氧化物負(fù)離子和過(guò)氧化氫反應(yīng)生成，羥自由基能殺死紅細(xì)胞，降解DNA、細(xì)胞膜和多糖化合物，對(duì)人體的健康產(chǎn)生巨大的危害[22-24]。研究美藤果殼多酚對(duì)羥自由基的清除效果既能評(píng)定其抗氧化能力，還能夠評(píng)定其對(duì)人體健康的保護(hù)作用。

由圖13 可知羥自由基的清除率隨樣品的質(zhì)量濃度的升高而升高，并且在同等濃度下美藤果殼多酚的羥自由基清除率>TBHQ 的羥自由基清除率>VC的羥自由基清除率>BHT 的羥自由基清除率。在較低濃度下，美藤果殼多酚相對(duì)于TBHQ、VC、BHT，其對(duì)羥自由基清除效果的優(yōu)勢(shì)就比較明顯，隨著濃度的升高，清除率也不斷升高。當(dāng)質(zhì)量濃度均為700 mg/L 時(shí)，其清除羥自由基的作用分別是TBHQ、VC、BHT 的3.19 倍、6.61 倍和41.30 倍，可見美藤果殼多酚對(duì)羥自由基的清除作用均要優(yōu)于TBHQ、VC、BHT。

2.6.2 美藤果多酚對(duì)DPPH 自由基的清除作用

BHT、TBHQ、維生素C、美藤果殼多酚提取物的濃度與DPPH 自由基清除率的量效關(guān)系曲線如圖14所示。

利用擬合曲線計(jì)算出提取物的IC50值，即清除率為50%時(shí)樣品的濃度為IC50＝7.51×10-3mg/mL。

圖14 各樣品質(zhì)量濃度與DPPH 清除率量效關(guān)系Fig.14 relationship between mass concentration of each sample and DPPH clearance

由圖14 可知，美藤果殼多酚的DPPH 自由基清除率>TBHQ 的DPPH 自由基清除率>VC的DPPH 自由基清除率>BHT 的DPPH 自由基清除率，美藤果殼多酚在較低濃度下就顯示出其對(duì)DPPH 自由基良好的清除率，且清除效率隨著質(zhì)量濃度的升高而提升。當(dāng)質(zhì)量濃度均為20 mg/L 時(shí)，其清除DPPH 自由基的作用分別是TBHQ、VC、BHT 的1.24 倍、1.76 倍和7.02 倍，可見美藤果殼多酚對(duì)DPPH 自由基的清除作用均要優(yōu)于TBHQ、VC、BHT。

3 結(jié)論

影響美藤果殼多酚得率的4 個(gè)因素中，影響程度為：提取溫度>乙醇濃度>料液比>提取時(shí)間。最佳工藝為提取溫度90 ℃，乙醇濃度為70%，料液比為1∶55（g/mL），反應(yīng)時(shí)間為2.0 h 的條件下提取美藤果殼多酚。經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)多酚得率為4.79%。AB-8 大孔樹脂對(duì)美藤果殼多酚分離純化的最佳工藝為以乙醇為洗脫劑，上樣速度為2.0 BV/h，采用30%乙醇溶液以1.5 BV/h 的洗脫速度洗脫4.0 BV。

美藤果殼多酚主要為：沒食子酸、蘆丁、兒茶素、單寧和異槲皮苷，濃度分別為9.28、7.29、5.54、4.31、2.93 μg/mL。美藤果殼多酚對(duì)羥自由基、DPPH 自由基的半數(shù)清除濃度IC50分別0.586、7.51×10-3mg/mL，且清除效果均顯著優(yōu)于TBHQ、VC、BHT。因此美藤果殼多酚是一種優(yōu)質(zhì)有效的抗氧化劑。