(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510640)
【研究意義】貢柑Citrus reticulata blancovar.Gonggan(Deqing tribute orange)又稱“皇帝柑”或“貴妃橙”,有“中國柑王”之稱,它集中了橙類外形美和柑桔肉質(zhì)細(xì)嫩、易剝皮的雙重優(yōu)點(diǎn),是南方優(yōu)系柑橘地方品種,口感極佳,特別適合鮮食[1-2]。廣東省韶關(guān)市仁化縣位于南嶺山脈南麓,廣東省北部,粵、湘、贛三省交界地,屬于中亞熱帶南區(qū),氣候溫和,雨量充沛,環(huán)境優(yōu)良,適合種植貢柑。同時(shí)仁化縣貢柑主產(chǎn)區(qū)的土壤為丹霞地貌沖積形成的紅砂巖壤土,有機(jī)質(zhì)含量較豐富,非常有利于發(fā)展貢柑產(chǎn)業(yè)[3]。目前,仁化縣已成為廣東省最大的貢柑產(chǎn)業(yè)基地[4]。據(jù)《廣東統(tǒng)計(jì)年鑒》報(bào)道,2003 年仁化縣柑橘類種植面積僅12942 hm2,年產(chǎn)量10.27 萬t;以后逐年增加,2018 年僅貢柑種植面積就達(dá)到約13333 hm2,總產(chǎn)量達(dá)35 萬t,總產(chǎn)值14.5 億元,占全縣農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值的48.2%,已經(jīng)成為農(nóng)民增收致富的重要支柱產(chǎn)業(yè)?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】柑橘黃龍病是世界性難防難治病害之一,目前還沒有抗性柑橘品種被發(fā)現(xiàn)和報(bào)道[5]。我國柑橘黃龍病菌主要由柑橘韌皮部細(xì)菌屬亞洲種(Candidatus Liberibacter asiaticus)引起,目前還不能被人工培養(yǎng)[6-7]。柑橘病毒病為柑橘生產(chǎn)上普遍發(fā)生的病害,能夠極大地減弱樹勢(shì)、減少產(chǎn)量和減低果品品質(zhì)。據(jù)報(bào)道,我國目前主要有4 種常見的柑橘病毒病,分別為柑橘衰退病、柑橘裂皮病、柑橘碎葉病和柑橘黃脈病[8-10]。柑橘炭疽病和柑橘褐斑病是柑橘生產(chǎn)上重要的真菌病害,在我國,柑橘褐斑病報(bào)道于2007 年的重慶萬州紅橘上,主要為害柑橘葉片、果實(shí)和新梢;幼葉受害先出現(xiàn)褐色針頭狀大小的病斑,周圍有黃色暈圈;新梢發(fā)病時(shí)形成褐色不定形凹陷的褐色或黑色小點(diǎn),而后繼續(xù)擴(kuò)大,最后病斑以上新梢會(huì)變褐枯死;發(fā)病嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成落葉落果,甚至枝梢枯死[11];柑橘炭疽病可在柑橘葉片、枝梢、花、果上發(fā)生,同樣可引起落葉、枯梢、落果及儲(chǔ)藏期果實(shí)病害,對(duì)柑橘樹勢(shì)和產(chǎn)量、效益影響都很大[12]。但是關(guān)于仁化縣貢柑主要病害的調(diào)查和分析還未見詳細(xì)報(bào)道?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】為全面了解仁化縣貢柑果園病害發(fā)生情況,于2019 年4-10 月前往仁化縣3 個(gè)鎮(zhèn)(街道)4 個(gè)有代表性的貢柑果園進(jìn)行柑橘病害的普查和分析?!緮M解決的關(guān)鍵問題】通過調(diào)查研究,弄清楚仁化縣貢柑上的主要病害,以期為該地區(qū)柑橘病害的有效防治和柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提供理論依據(jù)和指導(dǎo)價(jià)值。
供試樣品采集于2019年4月貢柑謝花掛果期和10月果實(shí)成熟期。主要調(diào)查仁化縣3個(gè)鎮(zhèn)(街道)4個(gè)貢柑果園,其基本情況見表1。調(diào)研時(shí)所采集的樣品(株)為果園的不同方位隨機(jī)采集,每個(gè)樣品為同一株樹不同方向上的若干枝條各采1~3個(gè)葉片或果實(shí),優(yōu)先采集枝條上具有黃化癥狀的葉片或果實(shí)。
表1 調(diào)查的4 個(gè)果園基本情況Table 1 Basic information of the four investigated orchards
1.2.1 植物DNA和RNA的提取、檢測(cè)及RNA的反轉(zhuǎn)錄 植物DNA和RNA的提?。好糠軩NA和RNA樣品均采集3~7個(gè)柑橘葉片的中脈或柑橘果實(shí)的果皮,用刀片切碎,而后用液氮快速將樣品磨碎,依次類推。每個(gè)樣品單獨(dú)用一副手套、一個(gè)研缽和研磨棒(使用前需對(duì)研缽和研磨棒進(jìn)行高溫滅菌處理)。DNA的提取嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行,試劑盒為(AXYGEN)愛思進(jìn)動(dòng)植物基因組DNA制備試劑盒,具體提取方法見試劑盒說明書(Axygen Scientific Inc,美國);RNA的提取主要采用天根生化科技有限公司的RNA提取試劑盒(貨號(hào)DP441,RNAprep Pure Plant Plus Kit),具體操作見試劑盒說明書(北京天根生化科技有限公司)。
DNA 和RNA 的檢測(cè):取2 μL 樣品在超微量紫外/可見分光光度計(jì)(Nano-100)儀器上進(jìn)行檢測(cè),讀取并記錄DNA 和RNA 的含量和質(zhì)量數(shù)值。
RNA的反轉(zhuǎn)錄:具體操作見天根生化科技有限公司反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書〔貨號(hào)KR116 -02,F(xiàn)astKing RT Kit(with gDNAase)〕。
1.2.2 柑橘黃龍病的檢測(cè) 本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative PCR)的方法對(duì)貢柑葉片及果實(shí)中的黃龍病菌進(jìn)行檢測(cè)。所有的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)均在ABI PRISM 7500(Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)上進(jìn)行。同時(shí)以柑橘黃龍病亞洲種的部分16S rDNA 序列為模板設(shè)計(jì)引物,引物的設(shè)計(jì)主要參照Li 等的方法:HLBas:5-TCGAGCGCGTATGCAA TACG-3,HLBr:5-GCGTTATCCC GTAGAAAAAGGTAG-3,利用探 針HLBp:5-6-carboxy -fluorescein(FAM)-AGACGGGTGA GTA ACGCG -Black Hole Quencher(BHQ)-1-3 對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)[13]。所用試劑為購自TAKARA 公司的Premix Ex Taq(Probe qPCR),所用引物和探針均合成于上海生工生物工程股份有限公司。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 操作的具體體系(25 μL)為:12 μL Premix Ex Taq(Probe qPCR),0.5 μL HLBas/HLBr,1 μL HLBp,1μL DNA(50 ng/μL),10 μL ddw。具體程序?yàn)椋?5 ℃/30 s,40 個(gè)循環(huán)95 ℃/5 s~60 ℃/30 s。程序運(yùn)行結(jié)束后,讀取Ct value 數(shù)值,以備后續(xù)分析。本團(tuán)隊(duì)利用標(biāo)準(zhǔn)品做出來的Ct value 與菌含量的關(guān)系為:Y=-0.286X+11.924,其中X為Ct value 值,Y為拷貝數(shù),每克植物組織中含有的病原菌拷貝數(shù)為10Y[14-15]。
1.2.3 柑橘病毒病的檢測(cè) 為了對(duì)仁化縣貢柑果園內(nèi)的主要柑橘病毒病進(jìn)行分析,本研究根據(jù)已報(bào)道的參考文獻(xiàn)中的檢測(cè)引物,重點(diǎn)對(duì)柑橘衰退病、裂皮病、碎葉病和黃脈病進(jìn)行檢測(cè)。提取樣品的RNA并以其反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板,進(jìn)行PCR反應(yīng),具體體系(20 μL)為:10 μL Premix Ex Taq,0.5 μL F/R,1μL cDNA(50 ng/μL),8 μL ddw;具體程序如下:95 ℃/5 min,35個(gè)循環(huán)94 ℃/30 s、54 ℃/30 s、72 ℃/1 min,然后72 ℃/5 min,16 ℃/forever。PCR結(jié)束后進(jìn)行電泳,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)和分析。
1.2.4 病原菌的分離、致病性測(cè)定和分子生物學(xué)鑒定 病原菌的分離:由于在田間調(diào)查的過程中發(fā)現(xiàn),每個(gè)果園都存在有不同程度的葉尖或葉緣褐變、葉枯和枝枯等現(xiàn)象。因此,我們?cè)诿總€(gè)果園中選取3~4個(gè)枝條進(jìn)行病原菌的分離,具體操作如下:選取發(fā)病的柑橘葉片和莖桿,用解剖刀在病健交界處取出0.2 mm2左右的小塊,依次在70%酒精中30 s、2%NaClO 2~3 min、無菌水沖洗3~5次,置于無菌濾紙上在超凈臺(tái)中晾干,最后放置于PDA培養(yǎng)基上25 ℃進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)3 d后,分離物上長出白色菌絲;培養(yǎng)7 d后,在顯微鏡下對(duì)分離所得菌株的菌絲和孢子進(jìn)行鏡檢。
致病性測(cè)定:采用針刺和菌絲塊相結(jié)合的接種方法,分別在健康柑橘葉片上進(jìn)行致病性測(cè)定;菌絲塊未針刺接種和空白PDA培養(yǎng)基接種作為陰性對(duì)照。
分子生物學(xué)測(cè)定:將單孢子培養(yǎng)7 d 的菌落從PDA 平板上刮下來,迅速用液氮研磨。而后依據(jù)Axygen 動(dòng)植物基因組DNA 制備試劑盒的說明書進(jìn)行DNA 的提取。選取核糖體轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)[ITS1:5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'和ITS4:5'–TCCTCCGCTTATT GATATGC-3']為檢測(cè)引物,已提取的gDNA 為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增[16]。反應(yīng)體系為:94℃ 3 min,94℃ 40 s,54℃ 40 s,72℃ 30 s,36 個(gè)循環(huán);72℃ 5 min 延伸。然后對(duì)得到的PCR 產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè),將獲得的陽性PCR 產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序后的序列在NCBI上進(jìn)行BLAST。
為了詳細(xì)了解仁化縣貢柑上柑橘黃龍病的發(fā)病情況,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)方法對(duì)采集自仁化縣不同果園共計(jì)150 個(gè)樣品進(jìn)行貢柑黃龍病的檢測(cè)。結(jié)果(表2)發(fā)現(xiàn),2019 年4 月4 個(gè)貢柑果園黃龍病檢出率為13.2%(6.7%~18.2%),2019 年10 月檢出率為31%(14.3%~87.5%)。而2019 年4 月份QRCR 檢測(cè)的Ct 值范圍為279.3~0,10 月份為6.09~0。具體表現(xiàn)為:采自丹霞街葛布村的陽性檢出率最低,黃坑鎮(zhèn)黃坑村的陽性檢出率最高。除來自黃坑鎮(zhèn)下營村的樣品黃龍病陽性抽檢率從4 月份的16.7%下降到10月份的14.3%外,其他果園4 月份的陽性抽檢率均低于10 月份的陽性抽檢率。值得注意的是,來自黃坑鎮(zhèn)黃坑村的失管果園,柑橘黃龍病的陽性檢出率就從2019 年4 月的18.2%上升到10 月的87.5%;丹霞街葛布村果園的陽性檢出率則從6.7%上升到14.3%。
柑橘病毒病是柑橘生產(chǎn)上重要的病害之一,為了分析仁化縣貢柑上柑橘病毒病的為害情況,選用已報(bào)道的4種主要柑橘病毒病的相關(guān)檢測(cè)引物為引物,采集的150個(gè)樣品的cDNA為模板進(jìn)行分析。結(jié)果(表3)表明,2019年4月在仁化縣4個(gè)貢柑果園均能夠檢測(cè)到衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV),檢出率為41.18%(33.33%~54.55%);而裂皮病毒(Citrus exocortis viroid,CEVd)僅在丹霞街葛布村1個(gè)樣品中檢測(cè)到,檢出率為6.67%,其他果園均未檢測(cè)到;碎葉病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)和黃脈病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)在4個(gè)貢柑果園中均沒有被檢測(cè)到。而在2019年10月的檢測(cè)中,4個(gè)果園均能夠檢測(cè)到柑橘衰退病毒病,檢出率為100%,其他3種病毒病在4個(gè)果園中均沒有檢測(cè)到。結(jié)果說明仁化縣的柑橘衰退病有一定程度的為害,而其他被檢病毒病則發(fā)生較低或沒有發(fā)生。
表2 仁化縣貢柑黃龍病檢測(cè)結(jié)果Table 2 Detection results of citrus Huanglongbing in Renhua County
表3 仁化縣貢柑病毒病檢測(cè)結(jié)果Table 3 Detection results of citrus virus diseases in Renhua County
圖1 柑橘褐斑病和炭疽病復(fù)合侵染的田間癥狀和病原菌生物性狀Fig.1 Field symptoms and pathogenic biological characters under compound infection of citrus brown spot disease and citrus anthracnose
2019年4月和10月田間病害調(diào)查發(fā)現(xiàn),4個(gè)果園中的柑橘植株均存在不同程度的葉尖或葉緣褐變,有的葉片上有褐色斑點(diǎn),病斑不規(guī)則形;腋芽處發(fā)現(xiàn)淡褐色病斑,引起枯葉和枯枝的情況,病梢枯死,花穗變褐,引起落花,見圖1A。經(jīng)病原菌分離,共分離到2種不同的真菌,見圖1B、D;2種真菌在PDA上最開始都長出白色菌絲,3~5 d后,真菌B的菌落呈現(xiàn)出灰色,并伴有大小不一的橙色孢子堆出現(xiàn)在上面;真菌D的菌落則完全變?yōu)榛液谏?。在電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),真菌B的菌絲有分割和分叉,分生孢子卵圓形,且有明顯的油珠;真菌D的菌絲有分隔和分叉;分生孢子有喙和多個(gè)縱、橫隔膜。通過真菌通用引物ITS對(duì)真菌B和真菌D進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定發(fā)現(xiàn),真菌B為炭疽屬真菌(Colletotrichumsp.),真菌D為鏈格孢屬真菌(Alternariasp.)(圖1B~G)。菌絲塊在健康柑橘(貢柑)葉片上回接試驗(yàn)5 d后,分離所得的炭疽屬真菌和鏈格孢真菌能夠分別在健康柑橘上引起柑橘炭疽病和柑橘褐斑病的典型癥狀;但經(jīng)過20 d后這2種真菌分別引起的癥狀與田間癥狀相似。這與過去的相關(guān)報(bào)道相一致:炭疽屬真菌主要引起柑橘炭疽病,鏈格孢屬真菌則引起柑橘褐斑?。欢职卟『吞烤也≡诟涕偕系陌l(fā)病后期在癥狀上更多表現(xiàn)為混合感染、很難分辨。
通過2019年4月和10月對(duì)仁化縣柑橘黃龍病的調(diào)查發(fā)現(xiàn),除來自黃坑鎮(zhèn)下營村的樣品黃龍病陽性抽檢率4月份與10月份的幾乎相當(dāng)外,其他果園的柑橘黃龍病陽性抽檢率4月份均低于10月份;尤其是黃坑鎮(zhèn)黃坑村的陽性抽檢率從18.2%上升為87.5%。造成這種巨大差異的原因,首先與采樣時(shí)期、病樹清理和栽培管理相關(guān),有研究報(bào)道柑橘木虱的峰期集中在6月下旬至7月下旬、8月中旬至9月中旬、10月上旬至11月上旬,而木虱的大流行會(huì)加重柑橘黃龍病的發(fā)生[17-19];其次是采樣造成的,由于單個(gè)柑橘植株上黃龍病菌的分布并不均勻[20],尤其是黃坑鎮(zhèn)黃坑村的失管園已經(jīng)毀園2年左右,2019年4月樹上仍有綠葉,而10月份全園果樹均呈現(xiàn)出衰敗的景象,葉片大部分黃化,果實(shí)極少。同時(shí)本研究在對(duì)該地區(qū)柑橘衰退病毒病進(jìn)行檢測(cè)時(shí)也發(fā)現(xiàn)10月份其陽性檢測(cè)率達(dá)到100%,遠(yuǎn)高于4月份的現(xiàn)象,這主要是由于采樣的優(yōu)先選擇造成的,但是也從側(cè)面說明該地區(qū)的柑橘衰退病有一定程度的發(fā)生。
同時(shí),由于采樣時(shí)優(yōu)先選擇了黃化癥狀的樣品,則該地區(qū)柑橘黃龍病的實(shí)際發(fā)病率應(yīng)低于20%,且含菌量較低,因此可以采取分類防控的技術(shù)措施進(jìn)行綜合防控:加強(qiáng)以田間管理為重點(diǎn)的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的綜合防治措施,以農(nóng)業(yè)防治為基礎(chǔ),增施有機(jī)肥,實(shí)行配方平衡施肥,增施鉀肥,避免過量氮肥,改善土壤理化性狀,創(chuàng)造根系生長的良好環(huán)境。及時(shí)做好果園排灌工作,降低水田果園的水位,以增強(qiáng)樹勢(shì),提高貢柑抗病力為關(guān)鍵,同時(shí)加強(qiáng)田間病情測(cè)和評(píng)估,及時(shí)噴藥防治,減少病原基數(shù)。具體措施如下:(1)對(duì)黃坑鎮(zhèn)黃坑村等處于失管狀態(tài)或每667 m2產(chǎn)量低于750 kg 或株產(chǎn)低于10 kg 的老舊或生長衰弱的貢柑園,徹底挖除病樹并火燒處理被挖樹體,進(jìn)行徹底清園,重新進(jìn)行整體規(guī)劃,重新種植無病貢柑種苗或改種其他植物;(2)對(duì)于丹霞街葛布村貢柑園、石塘鎮(zhèn)貢柑園、黃坑鎮(zhèn)下營村等貢柑園,應(yīng)加強(qiáng)栽培管理,保持樹勢(shì)健壯,提高耐病能力,及時(shí)挖除病樹,挖樹前最好能對(duì)病樹及周圍貢柑樹噴施一次殺蟲藥劑,并火燒處理被挖樹體,并可在果園空缺的地方補(bǔ)種無病柑橘大苗;(3)需加強(qiáng)對(duì)貢柑種苗的檢測(cè)檢疫,培育種植無病苗木,保護(hù)新發(fā)展的種植區(qū);尤其是加強(qiáng)對(duì)柑橘衰退病毒病的抽檢;(4)在生長期定期統(tǒng)一噴藥,統(tǒng)防統(tǒng)治黃龍病田間傳播媒介—柑桔木虱,重點(diǎn)減少成蟲產(chǎn)卵,殺死卵塊和低齡若蟲,遏制黃龍病傳播蔓延、減少黃龍病疫情危害??稍诿枯喰律页榘l(fā)2~3 cm 長及將轉(zhuǎn)綠時(shí)及時(shí)噴藥防治(即1 梢2 藥,間隔7~10 d)。藥劑可選用10%吡蟲啉乳油 2000~3000 倍液、3%啶蟲脒乳油 1000~1500 倍液、40%毒死蜱乳油1000~1500 倍液、25%噻蟲嗪水分散粒劑2500~3000 倍液、2.5%溴氰菊酯乳油2000~3000 倍液、8.8%阿維·啶蟲脒乳油 2000~4000 倍液、2.5%高效氯氰菊酯乳油 1000~1500 倍液、2.5%阿維·吡蟲啉乳油 2000~3000 倍液、2.5%魚藤酮乳油300~500 倍液、25%滅幼脲懸浮劑1000~2000倍液等[21-22]。
在對(duì)該地區(qū)其他病害進(jìn)行調(diào)查和研究時(shí)發(fā)現(xiàn),部分果園的零星柑橘葉片兩面突起,組織木栓化,中央凹陷破裂呈灰褐色火山口狀,且病斑版周圍有黃色暈圈,初步鑒定為柑橘潰瘍病,這可能與2019 年該地區(qū)多雨高溫的氣候相關(guān)[23-24]。同時(shí)發(fā)現(xiàn),柑橘炭疽病和柑橘褐斑病在果園中的部分發(fā)病癥狀相似并難以分辨,后期癥狀幾乎一致;引起潰瘍病的Colletotrichumsp.和引起褐斑病的Alternariasp.,有的在病樣上被單一分離到,有的在病樣上同時(shí)被分離到。在對(duì)柑橘潰瘍病和柑橘褐斑病進(jìn)行化學(xué)防治時(shí),所選用的藥劑也不同。如防治柑橘炭疽病的二氰·吡唑酯、苯甲·錳鋅、硅唑·多菌靈、吡唑醚菌酯、苯甲·吡唑酯、咪鮮胺、氟硅唑、唑醚·代森聯(lián)、唑醚·甲硫靈、氟環(huán)唑、咪鮮胺錳鹽、唑醚·戊唑醇、嘧菌酯、氟啶胺、肟菌·戊唑醇、代森錳鋅等;目前在生產(chǎn)上還沒有防治柑橘褐斑病的登記殺菌劑,但可選用已登記防治柑橘炭疽病的殺菌劑進(jìn)行兼治[25-26];已登記防治柑橘潰瘍病的殺菌劑有王銅、氫氧化銅、喹啉銅、春雷喹啉銅、堿式硫酸銅、硫酸銅鈣、春雷王銅、枯草芽孢桿菌、中生乙酸銅、噻唑鋅、波爾多液、松酯酸銅、氧化亞銅、噻森銅、絡(luò)氨銅等[27]。因此我們建議仁化縣在進(jìn)行柑橘病害防治時(shí),選用同時(shí)防治多種病害的復(fù)合藥劑進(jìn)行防控,不僅可增加對(duì)田間病害的有效防治,同時(shí)可延緩田間病害的抗藥性。
仁化縣目前的主要柑橘品種為貢柑,且種植面積逐年擴(kuò)大。通過對(duì)該地區(qū)失管果園柑橘黃龍病抽檢陽性率從18.2%上升到87.5%可以看出,在果園種植過程中及時(shí)挖除病樹和加強(qiáng)果樹栽培管理的重要性。同時(shí)該地區(qū)其他3個(gè)果園的柑橘黃龍病發(fā)病率應(yīng)低于20%,因此,可通過加強(qiáng)以田間管理為重點(diǎn)的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的分類防控等綜合防治措施加強(qiáng)防控,盡量減輕黃龍病對(duì)柑橘產(chǎn)業(yè)的危害,延長柑橘園的豐產(chǎn)年限和生產(chǎn)壽命。同時(shí)該地區(qū)主要的柑橘病毒病衰退病毒病的發(fā)病率較高,從4月份的平均陽性抽檢率41.18%上升到10月份的100%,雖然有采樣的偏向性的原因,但也說明該地區(qū)柑橘衰退病有一定程度的發(fā)生;建議在種苗生產(chǎn)或種植前加強(qiáng)對(duì)貢柑衰退病毒病的檢測(cè),在生產(chǎn)中加強(qiáng)防治。在對(duì)柑橘炭疽病進(jìn)行防治的同時(shí),要加強(qiáng)柑橘褐斑病等真菌病害及柑橘潰瘍病等細(xì)菌病害的防治,合理用藥,減少化學(xué)農(nóng)藥用量。