不同分級指數(shù)苜蓿干草–小麥秸稈組合對牦牛瘤胃體外發(fā)酵的影響

夏洪澤，郝文君，崔占鴻，劉書杰

（青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院 / 青海省牦牛工程技術(shù)研究中心 / 青海省高原放牧家畜動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點實驗室，青海 西寧 810016）

牦牛作為青藏高原地區(qū)的特有畜種，以放牧養(yǎng)殖為主，但由于青藏高原地區(qū)的冷季時間較長，高寒草地牧草產(chǎn)量較低，營養(yǎng)價值變化較大，不能滿足該地區(qū)冷季反芻家畜自身的營養(yǎng)需要量，致使家畜體重明顯降低甚至死亡。近年，牦牛養(yǎng)殖已由全年放牧飼養(yǎng)調(diào)整到適度規(guī)模舍飼飼養(yǎng)，科學(xué)合理地進(jìn)行牦牛的營養(yǎng)平衡補飼已勢在必行[1-5]。

在家畜舍飼養(yǎng)殖過程中，農(nóng)作物秸稈作為粗飼料已被廣泛應(yīng)用于牦牛的生產(chǎn)，在青海地區(qū)小麥秸稈產(chǎn)量巨大，年產(chǎn)量達(dá)到46 萬t[6]，為充分發(fā)揮并利用當(dāng)?shù)氐娘暡萘腺Y源優(yōu)勢，將小麥(Triticum aestivum)秸稈與苜蓿(Medicago)干草組合，發(fā)揮粗飼料間的正組合效應(yīng)，從而將小麥秸稈與苜蓿干草更好地應(yīng)用于生產(chǎn)[7-9]。

在粗飼料品質(zhì)評定上，已有很多體系，如營養(yǎng)值指數(shù)體系(NVI)、可消化能進(jìn)食量體系(DEI)、飼料的相對值體系(RFV)等。2001 年盧德勛根據(jù)我國的飼草產(chǎn)量以及供給現(xiàn)狀，首先提出飼草分級指數(shù)(GI) 的概念[10]。之后經(jīng)過 GI 理論驗證、GI 模型化研究以及補充，逐步趨于理論完善和技術(shù)成熟，并在篩選和優(yōu)化飼草組合等方面得到了廣泛的應(yīng)用[11-14]。

國內(nèi)外大量研究表明，多種粗飼料進(jìn)行搭配具有協(xié)同作用，可以有效改善瘤胃的內(nèi)環(huán)境，提高飼料的消化利用率[10]。因此本研究以西北地區(qū)常用飼草苜蓿干草、小麥秸稈為研究對象，采用體外產(chǎn)氣法探究兩種粗飼料組合降解率、瘤胃發(fā)酵的變化趨勢，篩選出最佳分級指數(shù)的苜蓿干草–小麥秸稈組合，為發(fā)揮青藏高原地區(qū)飼草資源優(yōu)勢和提高該地區(qū)舍飼牦牛的生產(chǎn)性能奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗樣品的采集與處理

1.1.1 牧草采集與處理

苜蓿干草、小麥秸稈經(jīng)65 ℃干燥制成風(fēng)干樣，粉碎后過孔徑為0.85 mm 的篩子，自封袋密封保存待測，苜蓿干草、小麥秸稈原樣營養(yǎng)水平如表1 所列。

1.1.2 試驗動物及其日糧營養(yǎng)水平

本試驗的瘤胃液供體為3 頭裝有瘤胃瘺管、體重為(280.5 ± 15.0) kg 的大通牦牛，飼喂方式為自由采食、飲水，每日飼喂2 次。飼喂日糧的成分和營養(yǎng)組成如表2。

1.2 試驗設(shè)計

5 種苜蓿干草–小麥秸稈組合的GI 分別為7.03、6.21、5.38、4.55 和3.72，即苜蓿干草與小麥秸稈比例分別為70 ? 30、60 ? 40、50 ? 50、40 ? 60 和30 ? 70，每個組合設(shè)定3 個重復(fù)，利用體外產(chǎn)氣法進(jìn)行試驗，累積發(fā)酵48 h。

表 1 小麥秸稈、苜蓿干草的營養(yǎng)水平Table 1 Nutrient levels of wheat straw and alfalfa hay

表 2 日糧成分和營養(yǎng)組成Table 2 Diet composition and nutritional composition

1.3 樣品處理方法

1.3.1 苜蓿干草、小麥秸稈及其組合分級指數(shù)的計算

分級指數(shù)、代謝能(ME)及采食量(VDM I)預(yù)測模型參考胡紅蓮和盧媛[15]的計算公式：

苜蓿干草–小麥秸稈組合GI = 苜蓿干草GI × 相應(yīng)比例 + 小麥秸稈GI × 相應(yīng)比例。式中：CP 為粗蛋白，VDM I 為單日干物質(zhì)采食量，ME 為代謝能，NDF 為中性洗滌纖維，ADF 為酸性洗滌纖維含量，BW 為試驗動物體重。

1.3.2 樣本制備及瘤胃液的配置

稱取組合樣品(400 ± 5) mg 裝入自制的尼龍袋，待用。將裝好樣品的尼龍袋放入100 m L 的發(fā)酵管內(nèi)，為保證發(fā)酵管氣密性，在其內(nèi)塞上均勻涂抹適量工業(yè)凡士林，每個樣本設(shè)定3 個重復(fù)，每次試驗做3 個空白對照。

采用Menke 的方法準(zhǔn)備人工瘤胃營養(yǎng)液[16]，晨飼前，通過瘤胃瘺管，每頭牦牛各抽取1 000 m L 瘤胃液，充分混勻后，在通入CO2的前提下，將人工瘤胃液與瘤胃營養(yǎng)液以2 ? 1 的體積比混合；每個培養(yǎng)管加入(40.0 ± 0.5) m L 混合營養(yǎng)液。排空培養(yǎng)管內(nèi)全部氣體，并記錄起始刻度值，立即轉(zhuǎn)入人工培養(yǎng)箱(39 ℃)。

1.3.3 發(fā)酵底物、發(fā)酵液的收集

分別在發(fā)酵3、6、12、24 和48 h 時，將培養(yǎng)管取出，取出裝有發(fā)酵底物的尼龍袋，投入冰水中以終止反應(yīng)，并用蒸餾水沖洗尼龍袋，直至無色，終止其發(fā)酵，65 ℃烘干，備用；將發(fā)酵液收集在15 m L 離心管中，放?20 ℃冰箱中保存，備用。

1.4 體外發(fā)酵指標(biāo)測定

1.4.1 累積產(chǎn)氣量測定及產(chǎn)氣參數(shù)測定

參照夏洪澤等的累積產(chǎn)氣量(GP)測定方法[17]，分別在發(fā)酵0、3、6、12、24 和48 h 取出培養(yǎng)管并記錄刻度值；利用SAS 9.0 軟件，根據(jù)?rskov 和M cdonald[18]的產(chǎn)氣模型GP = b (l ? e?ct)，計算出各體外產(chǎn)氣參數(shù)。產(chǎn)氣模型中，b 代表潛在產(chǎn)氣量(m L)；t 代表發(fā)酵開始后某一時間(h)；c 代表b 的產(chǎn)氣速率常數(shù)(%·h?1)。

累積產(chǎn)氣量(m L) = 培養(yǎng)管產(chǎn)氣量?空白管產(chǎn)氣量。

1.4.2 消化能、干物質(zhì)消失率、中性洗滌纖維消失率及pH 的測定

消化能(DE)可由產(chǎn)氣量與常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)估算得出[19]：DE = 0.138 4 × GP + 0.142% × CP + 0.111% ×EE + 2.86；式中：GP 為產(chǎn)氣總量，CP 為培養(yǎng)底物的粗蛋白含量，EE 為培養(yǎng)底物的粗脂肪含量。將發(fā)酵底物于65 ℃烘箱中烘6 h，烘3 次至恒重根據(jù)如下公式計算干物質(zhì)消失率(IVDMD)、中性洗滌纖維消失率(IVNDFD)。

IVDMD = [(底物重量?殘留底物重量)/底物重量] × 100%；

IVNDFD = [(底物NDF 含量?殘留底物NDF 含量)/底物NDF 含量] × 100%。

通過臺式酸度計(HANNA HI221 型)測定發(fā)酵液pH。

1.4.3 氨態(tài)氮(NH3-N)濃度和微生物蛋白(MCP)測定

通過比色法[20]利用紫外可見分光光度計(波長625 nm)測定吸光值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得出發(fā)酵液的氨態(tài)氮濃度。微生物蛋白的測定依據(jù)Wang 等[21]差速離心法，對菌體蛋白進(jìn)行分離，將分離出的菌體蛋白轉(zhuǎn)移至消化管中，用考馬斯亮藍(lán)法進(jìn)行測定。

1.4.4 揮發(fā)性脂肪酸濃度、甲烷(CH4)的測定

參考文獻(xiàn)[22-23]，揮發(fā)性脂肪酸(VFA) 采用氣相色譜儀(日本島津GC–2014)進(jìn)行測定，氣相色譜條件為，載氣：N2(40 m L·m in?1)，分流比40 ? 1，進(jìn)樣量1 μL，進(jìn)樣孔溫度：250 ℃，輔助箱溫度：250 ℃，氣化室溫度：250 ℃，F(xiàn)ID 檢測器溫度：250 ℃，色譜柱型號：AT-FFAP 毛細(xì)管填充柱(30.0 m × 0.32 μm)。恒流模式，流量2.1 m L·m in?1，平均線速度38 cm ·s?1，柱壓11.3 psi (0.1 Mpa)，柱溫箱程序升溫范圍：90～150 ℃。CH4采用氣象色譜儀(日本島津GC–2014)進(jìn)行測定，氣相色譜條件為，載氣：N2(40 m L·m in?1)，進(jìn)樣量100 μL，進(jìn)樣口溫度：60 ℃，柱溫50 ℃，TCD檢測器溫度：100 ℃，熱絲溫度：150 ℃。甲烷計算公式為：甲烷產(chǎn)量(m L) = 總產(chǎn)氣量 × 甲烷所占百分比。

1.4.5 組合效應(yīng)指數(shù)的計算

單項組合效應(yīng)值( SFAEI)、綜合組合效應(yīng)指數(shù)(MFAEI)參照王旭[10]所使用的方法計算，即SFAEI =[組合后某參數(shù)實測值 ? (組分一實測值 × 其所占比例 + 組分二實測值 × 其所占比例)]/(組分一實測值 ×其所占比例 + 組分二實測值 × 其所占比例)；MFAEI =∑S FAEI。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016 進(jìn)行整理后，通過SPSS 20.0 軟件的單因素ANOVA 程序分析。以P ＜ 0.05為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)，以0.05 ≤ P ＜ 0.10 為有變化趨勢判斷標(biāo)準(zhǔn)。差異顯著時，采用Duncan 氏SSR法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 各時間段不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合在對累積產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣參數(shù)的影響

各GI 組合GP 隨著培養(yǎng)時間延長而增長(表3)，在3～48 h，GI 為6.21 組合的累積產(chǎn)氣量顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；各時間點的累積產(chǎn)氣量隨著GI減小呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，各組合潛在產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣速率常數(shù)均差異不顯著(P ＞ 0.05)。

表 3 不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合對累積產(chǎn)氣量的影響Table 3 Effects of different GI of wheat straw–alfalfa hay proportions on gas production

2.2 各時間段不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對干物質(zhì)消失率、中性洗滌纖維消失率、氨態(tài)氮、微生物蛋白的影響

發(fā)酵3 h 時，GI 為6.21 組合與GI 為7.03 和5.38的組合之間IVDMD 差異不顯著(P ＞ 0.05) (表4)，但顯著高于4.55、3.72 組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵48 h 時，GI 為6.21 的組合與GI 為7.03 組合的IVDMD 差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著高于GI 為5.38、4.55、3.72的組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵6～48 h 的IVDMD 隨著GI減小呈現(xiàn)降低趨勢，且在GI 為6.21 時達(dá)到最大值。

表 4 不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對IVDMD、IVNDFD、NH3-N 和MCP 的影響Table 4 Effects of different GI of wheat straw–alfalfa hay proportions on IVDMD、IVNDFD、NH3-N, and MCP and pH

發(fā)酵3、12、48 h 時，GI 為7.03 組合的IVNDFD與GI 為6.21 組合的差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵6 h 時，GI 為7.03 組合的IVNDFD 顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；3～12 h 的IVNDF 隨著GI 減小呈現(xiàn)降低趨勢，48 h 的IVNDF隨著GI 減小呈現(xiàn)出先升高后降低趨勢。

發(fā)酵3、6、48 h 時，GI 為6.21 組合的NH3-N 濃度與GI 為7.03、5.38 組合之間差異不顯著(P ＞ 0.05)，但GI 為7.03、6.21、5.38 組合顯著高于GI 為4.55、3.72的組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵12～24 h 時，GI 為6.21 組合的NH3-N 濃度與GI 為7.03 組合之間差異不顯著，但顯著高于其他GI 的組合(P ＜ 0.05)；各時間段的NH3-N 濃度整體隨著GI 減小呈現(xiàn)先增加后降低趨勢。

發(fā)酵3～24 h 時，各組合的MCP 差異不顯著(P ＞0.05)，發(fā)酵48 h 時，GI 為6.21 的組合與GI 為7.03、5.38 的組合MCP 差異不顯著(P ＞ 0.05)，但GI 為6.21 的組合MCP 顯著高于GI 為4.55 和3.72 的組合(P ＜ 0.05)；且MCP 隨著GI 減小呈現(xiàn)出先小幅度增加再減小的趨勢。

發(fā)酵12～24 h 時，GI 為6.21 組合的pH 與GI為7.03 組合間差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著低于其他組合(P ＜ 0.05)，發(fā)酵48 h 時，GI 為6.21 組合的pH 與GI 為7.03 和5.38 的組合間差異不顯著(P ＞0.05)，但顯著低于其他GI 的組合(P ＜ 0.05)。

2.3 各時間段不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合在對發(fā)酵液VFAs 的影響

發(fā)酵3 h 時，GI 為6.21 的組合乙酸濃度顯著高于其他組合(P ＜ 0.05) (表5)；發(fā)酵48 h 時，GI 為7.03、6.21、5.38 組合的乙酸濃度差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著高于GI 為4.55 和3.72 的組合(P ＜ 0.05)。發(fā)酵48 h 的乙酸濃度隨著GI 減小呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢。

表 5 不同苜蓿干草–小麥秸稈組合對乙酸、丙酸和總揮發(fā)性脂肪酸的影響Table 5 Effects of different combinations of alfalfa hay–wheat straw on acetic acid, propionic acid, and total volatile fatty acids

發(fā)酵3 h 時，GI 為6.21 的組合丙酸濃度顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵6～12 h 時，各組合的丙酸濃度差異不顯著(P ＞ 0.05)；發(fā)酵24 h 時，GI 為6.21 的組合與GI 為5.38 組合的丙酸濃度差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著高于GI 為7.03、4.55、3.72 的組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵48 h 時，GI 為7.03 和6.21 組合的丙酸濃度差異不顯著(P ＞ 0.05)，但GI 為6.21 的組合顯著高于GI 為5.38、4.55、3.72 的組合(P ＞ 0.05)；發(fā)酵24 和48 h 時，丙酸隨著GI 減小呈現(xiàn)出先增加后降低趨勢。

發(fā)酵3 h 時，GI 為6.21 組合的總揮發(fā)性脂肪酸濃度顯著高于GI 為7.03、5.38、4.55、3.72 的(P ＜ 0.01)；發(fā)酵48 h 時，GI 為6.21 組合的總揮發(fā)性脂肪酸濃度與7.03 組合差異不顯著(P ＞ 0.05)，但顯著高于5.38、4.55、3.72 的組合(P ＜ 0.05)；發(fā)酵3 和48 h 時，TVFA 隨著GI 減小呈現(xiàn)出先升高后降低趨勢。

2.4 各時間段不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合在對甲烷和消化能的影響

發(fā)酵3～24 h 時，GI 為6.21 組合的CH4含量顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；各時間段的CH4含量隨著GI 減小呈現(xiàn)出先升高后降低趨勢，發(fā)酵48 h 時各組合無顯著差異(P ＞ 0.05)。發(fā)酵3～48 h 時，GI為6.21 的組合DE 顯著高于其他組合(P ＜ 0.05)；各時間段的DE 隨著GI 減小呈現(xiàn)出先升高后降低趨勢 (表6)。

2.5 不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對綜合組合效應(yīng)值的影響

GI 為7.03、6.21、5.38 的組合在各時間段均產(chǎn)生了正組合效應(yīng)，GI 為4.55 和3.72 的組合在48 h 產(chǎn)生了正組合效應(yīng)，但在3～24 h 產(chǎn)生了組合的負(fù)效應(yīng)。各時間段GI 為6.21 組合的MFAEI 均高于其他GI 組合 (表7)。

3 討論

3.1 不同GI 的苜蓿干草–小麥秸稈組合對累積產(chǎn)氣量和干物質(zhì)降解率的影響

底物發(fā)酵程度可通過產(chǎn)氣量體現(xiàn)，也可呈現(xiàn)出了瘤胃微生物活躍程度和日糧的可消化性[24-26]。本研究中各組合GP 隨培養(yǎng)時間增加而增加，產(chǎn)氣速率常數(shù)無差異，說明體外發(fā)酵處于正常狀態(tài)，且GP 與IVDMD、IVNDFD 兩指標(biāo)均呈正相關(guān)關(guān)系。本研究中，各時間點的累積產(chǎn)氣量隨著GI 減小呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，發(fā)酵3 h 的 IVDMD 以及發(fā)酵3、6、12 h 的IVNDFD 均隨著GI 減小呈現(xiàn)下降趨勢，說明高蛋白質(zhì)的苜蓿干草可顯著改善小麥秸稈的發(fā)酵能力，促進(jìn)纖維物質(zhì)的消化，但在各時間段GI 為7.03 組合的IVDMD、IVNDFD 與GI 為6.21 的組合基本上差異不顯著，說明苜蓿干草雖能提高小麥秸稈的消化率但也有限度。Silva 等[27]試驗結(jié)果表明，在只提供秸稈類粗飼料時，會限制微生物的增殖，當(dāng)提供易消化的纖維飼料時，纖維分解菌首先會附著于優(yōu)質(zhì)的粗飼料中進(jìn)行分解和增殖，同時也提高了秸稈類飼料的利用率，與本研究結(jié)果一致。

表 7 不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對綜合組合效應(yīng)值的影響Table 7 Effects of different GI of alfalfa hay–wheat straw proportions on multip le factors associative effects index

3.2 不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對牦牛瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)的影響

pH 高低是牦牛瘤胃發(fā)酵功能、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、有機(jī)酸生成以及微生物活性的最直接表現(xiàn)[28]。研究顯示, 反芻動物瘤胃液pH 正常變動范圍為6.0～7.5[29-30]。本研究各GI 組合的pH 為6.80～7.32，均在正常范圍內(nèi)。本研究中，NH3-N 濃度隨著GI 的減小，呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其原因是由于苜蓿干草與小麥秸稈中的蛋白質(zhì)含量差距較大，前者為后者的3.48 倍左右，彌補了蛋白質(zhì)不足的缺陷，為瘤胃微生物提供了較充足的氮源；而后隨著GI 的減小逐漸下降，原因可能是該組合皆為粗飼料組合，其中為瘤胃微生物提供能量的可發(fā)酵碳水化合物含量較低，導(dǎo)致NH3-N 逐漸下降，這與楊麗[31]報道的隨著營養(yǎng)水平的降低，發(fā)酵效果降低的結(jié)果基本一致。

MCP 可為反芻動物瘤胃氮主要的來源，且NH3-N濃度又是影響MCP 合成的重要因素[18]；若NH3-N濃度過高會浪費營養(yǎng)源，過低會降低瘤胃微生物活性[32-33]。相關(guān)研究指出[34-36]， NH3-N 濃度為0.35～29 mg·dL?1就可為微生物提供充足氮源合成MCP，2～5 mg·dL?1就可滿足細(xì)菌對纖維降解的需求。本研究中各GI 指數(shù)組合的NH3-N 濃度均大于或等于10.87 mg·dL?1，足以滿足瘤胃微生物生長的需要。因此，粗飼料纖維的有效降解是合成MCP 的主要限制因素，GI 為6.21 的組合NH3-N 濃度、MCP 濃度均最高，原因可能是GI 為6.21 的組合提供了合適的碳、氮等營養(yǎng)素，使各元素含量達(dá)到相對平衡，給予了瘤胃微生物合適的生長環(huán)境。

3.3 不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合對能量的影響

VFA 主要通過底物中碳水化合物的發(fā)酵而來，而各GI 組合所含有的碳水化合物的相對比例不同，影響了瘤胃發(fā)酵內(nèi)環(huán)境，進(jìn)而影響瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生量。在本研究中，粗飼料在瘤胃內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)生乙酸比例可以達(dá)到總揮發(fā)性脂肪酸的59%～63%，而丙酸比例只有19%～22%，且各GI 組合的乙酸產(chǎn)量均高于丙酸產(chǎn)量，這與Petersen 的研究結(jié)果[36]較為一致。分析原因為本研究各組合皆為粗飼料組合，均含有大量的纖維素，在發(fā)酵過程中纖維素產(chǎn)生的乙酸比例要高。

當(dāng)苜蓿干草–小麥秸稈組合GI 為6.21 時乙酸、丙酸、總揮發(fā)性脂肪酸濃度最高，意味著這一組合中可消化的碳水化合物含量較高。乙酸有利于提高動物的體脂率，丙酸有利于葡萄糖的轉(zhuǎn)化和儲存[37-38]，并且丙酸含量對反芻動物的采食量具有一定的影響，因此，對于反芻動物而言，可以通過提高瘤胃發(fā)酵過程中丙酸的比例來提高飼料的轉(zhuǎn)化效率。本研究通過改變苜蓿干草–小麥秸稈組合的GI 值提高了丙酸生成量，進(jìn)而提高人工瘤胃對飼料的降解率，這一結(jié)果與孟梅娟等[39]得出隨著小麥秸稈比例降低，乙酸、丙酸和總揮發(fā)性脂肪酸均降低的結(jié)果基本一致。

本研究中GI 為6.21 時粗飼料組合的甲烷產(chǎn)量最高，馮仰廉[30]指出，瘤胃可發(fā)酵中性洗滌纖維對甲烷影響很大，而本研究中各組合 IVNDFD 與甲烷產(chǎn)量趨勢較為一致。這也充分可以說明各GI 組合中性洗滌纖維含量對產(chǎn)甲烷菌的生長繁殖有一定影響。因此，GI 為6.21 組合的甲烷產(chǎn)量最高的原因可能是這一組合為瘤胃微生物提供了較為合適的生長環(huán)境，其中的纖維在瘤胃內(nèi)降解率提高，導(dǎo)致甲烷產(chǎn)量增多，這一結(jié)果與王增林等[40]、鄭文思等[41]的隨著飼糧NDF 的提高，飼糧體外發(fā)酵的甲烷相對產(chǎn)量有所上升研究結(jié)果相似。

消化能是日糧消化后真正被機(jī)體利用吸收的能量，可以真實地衡量反芻動物對飼料的利用情況，以消化能為基礎(chǔ)配制反芻動物飼料配方更能提高飼料的利用效率[42]。發(fā)酵48 h 后DE 隨著GI 的降低呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，分析原因為隨著GI變化，各組合為瘤胃微生物提供的營養(yǎng)及環(huán)境發(fā)生變化，導(dǎo)致消化能隨之改變。

3.4 不同GI 苜蓿干草–小麥秸稈組合對MFAEI的影響

王旭[10]以分級指數(shù) GI 和MFAEI 為依據(jù)，組合配比不同種類飼草，最大程度地發(fā)揮粗飼料間的正組合效應(yīng)，提高動物的生產(chǎn)性能，從而降低精料的使用量、節(jié)約了飼養(yǎng)成本。因此，本研究也采用了MFAEI 評價各GI 組合的組合效應(yīng)。隨著時間的延長各GI 組合的組合效應(yīng)值逐漸增大；且MFAEI 隨著GI 減小呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，說明適宜的苜蓿干草與小麥秸稈的比例可以提高組合效應(yīng)值。分析原因可能是不同GI 小麥秸稈–苜蓿干草組合，其營養(yǎng)組成不一致，進(jìn)而使微生物存在的發(fā)酵環(huán)境發(fā)生改變，提高了微生物對飼料的利用率，該結(jié)果也與張吉鹍[43]得出混合日糧粗飼料 GI 較高時不用增加精料即可獲得良好的效益這一結(jié)果相近。

4 結(jié)論

根據(jù)各項瘤胃發(fā)酵指標(biāo)以及組合效應(yīng)綜合得出，GI 為6.21 的處理苜蓿干草–小麥秸稈組合體外發(fā)酵效果優(yōu)于其他GI 組合。因此，當(dāng)苜蓿干草–小麥秸稈組合的GI 為6.21 時，其更能優(yōu)化瘤胃發(fā)酵環(huán)境，增加飼料的利用率。