刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿維生素和化學(xué)成分的影響

孫 林 ，薛艷林，張福金，吳曉光，肖燕子，張欣昕，劉廣華，劉思博

（1. 西華師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 南充 637002；2. 內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010031；3. 內(nèi)蒙古自治區(qū)土地調(diào)查規(guī)劃院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010055；4. 呼倫貝爾學(xué)院農(nóng)林學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼倫貝爾 021000）

紫花苜蓿(Medicago sativa)作為世界上栽培面積最大的牧草之一，因其高產(chǎn)量、消化率和適口性，各種營(yíng)養(yǎng)成分齊全，尤其是粗蛋白質(zhì)、維生素含量豐富，是我國(guó)北方主要豆科當(dāng)家草種，也是反芻動(dòng)物良好的蛋白質(zhì)和天然維生素來(lái)源[1]，在改善生態(tài)環(huán)境、解決優(yōu)質(zhì)飼草短缺等方面起著重要作用[2]。在生長(zhǎng)、加工過(guò)程中苜蓿品質(zhì)除易受氣候土壤條件、品種、澆水和施肥等環(huán)境因素影響外，刈割對(duì)其影響尤為顯著[3]。有研究表明，苜蓿干物質(zhì)(dry matter, DM)產(chǎn)量和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值指標(biāo)受刈割茬次影響顯著[4]。田雨佳[5]研究結(jié)果表明，在年刈割苜蓿3茬的地區(qū)，第3 茬苜蓿的中性洗滌纖維(neutral detergent fiber, NDF)和酸性洗滌纖維(acid detergent fiber, ADF)含量較低，粗蛋白質(zhì)(crude protein, CP)含量較高，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最高；第2 茬則相反，第1 茬居中。趙海明等[6]研究表明，海河平原區(qū)種植的紫花苜蓿粗蛋白質(zhì)含量第2、3 茬顯著高于第1、4 茬。第2、3 茬苜蓿生長(zhǎng)時(shí)間較短，植株中葉片含量較高，枝條和葉片較為幼嫩，使得其具有較高的粗蛋白含量。陳水紅等[7]對(duì)22 個(gè)紫花苜蓿品種的研究結(jié)果與之相似，隨著刈割茬次的增加，粗蛋白質(zhì)含量表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)。萬(wàn)素梅等[8]研究表明，第1 茬、第2 茬紫花苜蓿的粗蛋白質(zhì)、灰分含量明顯高于第3 茬，而纖維的含量則相反。Guo 等[9]研究表明，從營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、發(fā)酵品質(zhì)和體外模擬瘤胃發(fā)酵參數(shù)指標(biāo)來(lái)看，紫花苜蓿在同一個(gè)生育期收獲調(diào)制青貯飼料，第1 茬苜蓿青貯優(yōu)于第2 茬苜蓿。尉志霞等[10]研究表明，相比于日間刈割時(shí)間，刈割茬次對(duì)苜蓿青貯品質(zhì)的影響更大。這些研究主要集中于不用刈割茬次對(duì)苜蓿干草和青貯品質(zhì)影響方面，不同研究者針對(duì)不同地區(qū)種植的不同品種苜蓿的化學(xué)成分研究結(jié)果差異較大。因此，了解其不同茬次化學(xué)成分變化對(duì)于獲得優(yōu)質(zhì)苜蓿草產(chǎn)品至關(guān)重要。

制粒是將粉狀原料(牧草等)經(jīng)擠壓作用而成型的粒狀飼料過(guò)程。有研究表明，牧草制粒后不僅保持了新鮮牧草的營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)兼具有消化率高、適口性好、耐貯存等優(yōu)點(diǎn)，能很好地避免干草貯藏運(yùn)輸過(guò)程中帶來(lái)的弊端[11]。同時(shí)，牧草經(jīng)制粒時(shí)，因溫度、水分和壓力等綜合作用，可以改善其中淀粉、蛋白質(zhì)等成分分布情況，增強(qiáng)牧草中酶的活性，有效降低牧草中寄生蟲卵和有害病原微生物的活性，牧草的消化率可提高10%～12%[12-13]，從而提高牧草的利用率。紫花苜蓿中富含多種維生素[14]。維生素是機(jī)體內(nèi)少量需要的有機(jī)化合物，對(duì)代謝功能至關(guān)重要[15]。它們參與維持動(dòng)物健康所需的許多代謝反應(yīng)，有充當(dāng)免疫刺激劑的作用。有研究表明，在動(dòng)物的日糧中添加維生素B3、B5和Vc 均可以取得良好的飼喂效果[16-20]。然而，由于維生素微量和易破壞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，多數(shù)維生素不能穩(wěn)定存在，遇到光、熱、酸、堿時(shí)容易發(fā)生降解，制粒工藝中壓力、溫度和水分等外界因素可造成牧草20%～75%的維生素?fù)p失，具體損失程度取決于不同牧草對(duì)加工條件的敏感度[21]?？v觀國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，針對(duì)刈割茬次與制粒對(duì)苜蓿草顆粒維生素含量的研究資料鮮有報(bào)道。因此，本研究擬分析3 個(gè)茬次收獲的紫花苜蓿草粉和草顆粒所含維生素和化學(xué)成分的變化規(guī)律，以進(jìn)一步研究具有穩(wěn)定保存草顆粒維生素作用的添加劑，減少畜禽外源維生素的添加，從而節(jié)約生產(chǎn)成本，為畜禽生產(chǎn)添磚加瓦；同時(shí)篩選出紫花苜蓿品質(zhì)最佳的收獲茬次，以期獲得優(yōu)質(zhì)的苜蓿草顆粒。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試 驗(yàn) 于2016 年4 月1 日 ? 2018 年12 月31 日，在內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)基地進(jìn)行。該基地位于內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市清水河縣，111°43′33″ E，39°45′15″ N，屬于典型的半干旱大陸性氣候。年均溫7.4 ℃。年均降水量410 mm，年均日照時(shí)數(shù)2 900 h，無(wú)霜期136 d。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與材料

試驗(yàn)采用刈割茬次、制粒3 × 2 [茬次(C) × 制粒(Pel)]裂區(qū)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)以種植第3 年的準(zhǔn)格爾苜蓿為試驗(yàn)材料，刈割茬次為第1 茬、第2 茬和第3 茬，收獲時(shí)間為現(xiàn)蕾期，留茬高度為5～6 cm。刈割后采取自然干燥方式調(diào)制干草。適時(shí)監(jiān)測(cè)紫花苜蓿水分含量動(dòng)態(tài)變化，當(dāng)含水量降至12%～14%時(shí)，用電動(dòng)粉碎機(jī)(FW 80 型，常州市國(guó)旺儀器制造有限公司)加工成長(zhǎng)度為5 mm 苜蓿干草粉。此時(shí)取樣待測(cè)草粉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、維生素含量、大腸桿菌數(shù)量。然后，調(diào)節(jié)紫花苜蓿草粉含水量為22%～24%，將其混勻，直接經(jīng)SKJ 250 型顆粒機(jī)(曲阜市啟航機(jī)械有限公司生產(chǎn)，顆粒直徑6 mm)制粒，冷卻后取樣，待測(cè)草顆粒的化學(xué)成分、維生素含量、大腸桿菌數(shù)量。每個(gè)處理設(shè)置3 個(gè)重復(fù)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 維生素含量的測(cè)定方法

100 g 樣品用真空冷凍干燥機(jī)(Free Zone 4.5 L，美國(guó)密蘇里州堪薩斯城LABCONCO 公司)冷凍干燥2 d，冷凍干燥的樣品粉碎后過(guò)1.0 mm 的篩，每份樣品設(shè)置兩個(gè)平行，采用高效液相色譜法測(cè)定維生素含量。維生素K1(VK1)、維生素C (Vc)、維生素B1(VB1)、維生素B2(VB2)、維生素B3(VB3)、維生素B5(VB5)和維生素B6(VB6)含量分別參照GB 5009.158–2016[22]、 GB 7303 –2018[23]、 GB/T 14700 –2018[24]、GB/T 14701–2019[25]、GB/T 17813–2018[26]、GB/T 18397–2014[27]和GB/T 14702–2018[28]方法測(cè)定。

1.3.2 營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定方法

試驗(yàn)樣品于65 ℃鼓風(fēng)干燥箱烘干，用微型植物粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過(guò)1 mm 篩，保存于密封袋中備用。將粉碎樣品置于105 ℃烘箱中烘3 h，測(cè)定干物質(zhì)(dry matter, DM)含量；粗灰分(crude ash，Ash)采用電爐碳化后，經(jīng)馬弗爐550 ℃灼燒3 h 后測(cè)定；有機(jī)物質(zhì)計(jì)算公式:有機(jī)質(zhì)(organic matter, OM) = 干物質(zhì) ? 粗灰分；粗蛋白(crude protein, CP)采用半微量凱氏定氮法測(cè)定；粗脂肪(ether extract, EE)采用索氏抽提法測(cè)定；酸性洗滌纖維(acid detergent fiber,ADF)、中性洗滌纖維(neutral detergent fiber, NDF)采用Van Soets 法測(cè)定。以上指標(biāo)均參照張麗英[29]的方法測(cè)定。

1.3.3 大腸桿菌數(shù)量的測(cè)定方法

取各處理樣品10 g，裝入盛有0.85%滅菌生理鹽水90 m L 的三角瓶?jī)?nèi)，置于勻質(zhì)機(jī)上拍打2 min，采用伊紅美蘭培養(yǎng)基[30]，分別接種10?1、10?2、10?33 個(gè)稀釋梯度的懸浮液，將接種好的培養(yǎng)皿置于30 ℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24 h 后選取邊緣整齊、圓形、表面有光澤呈灰白色的菌落進(jìn)行大腸桿菌計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用Excel 2007 進(jìn)行初步處理。采用SAS 9.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，利用Duncan 多重檢驗(yàn)比較均值的差異顯著性。因子數(shù)學(xué)模型：

式中：Yijk為觀察值，μ 為均值，αi為茬次的影響(i =第1 茬、第2 茬、第3 茬)，βj為制粒的影響(j = 草粉、草顆粒)；αβij為茬次(C)和制粒(Pel)交互效應(yīng)，即茬次(C) × 制粒(Pel)，εijk為誤差。

2 結(jié)果與分析

2.1 刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿維生素含量的影響

刈割茬次對(duì)紫花苜蓿VK1含量無(wú)顯著影響 (P =0.615 8) (表1)。制粒顯著影響紫花苜蓿VK1含量(P ＜0.000 1)。草顆粒的VK1含量顯著低于草粉。刈割茬次和制粒的互作效應(yīng)對(duì)紫花苜蓿VK1含量無(wú)顯著影響(P = 0.714 1)。

表 1 茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿維生素K 1 和維生素C 含量的影響Table 1 Effect of cutting number and pelletizing on VK 1 and Vc content of alfalfa

刈割茬次(P = 0.000 2)和制粒(P = 0.013 8)對(duì)紫花苜蓿Vc 含量影響顯著。第1 茬和第2 茬紫花苜蓿Vc 含量顯著高于第3 茬，而草粉的Vc 含量(14.32 mg·kg?1)顯著高于草顆粒(12.66 mg·kg?1)，高出13.11%。刈割茬次和制粒的互作效應(yīng)對(duì)紫花苜蓿Vc 含量無(wú)顯著影響(P = 0.531 4)。

刈割茬次(P ＜ 0.000 1)、制粒(P ＜ 0.000 1)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.007 6)對(duì)紫花苜蓿VB1含量影響顯著(表2)。第1 茬紫花苜蓿VB1含量為4.04 mg·kg?1，顯著高于第2 茬(3.63 mg·kg?1)和第3 茬(1.51 mg·kg?1)，分別高出11.29%和167.55%。草顆粒的VB1含量為3.63 mg·kg?1，顯著高于草粉(2.49 mg·kg?1)，高出45.78%。刈割茬次(P ＜ 0.000 1)、制粒(P = 0.027 3)對(duì)紫花苜蓿VB2含量影響顯著，第2 茬紫花苜蓿VB2含量為21.86 mg·kg?1，顯著高于第1茬(16.50 mg·kg?1)和第3 茬(12.33 mg·kg?1)，分別高出32.48%和77.29%。草粉的VB2含量為18.08 mg·kg?1，顯著高于草顆粒(15.72 mg·kg?1)，高出15.01%。兩因素互作效應(yīng)(P =0.302 0)對(duì)紫花苜蓿VB2含量無(wú)顯著影響。刈割茬次對(duì)紫花苜蓿VB3含量影響顯著(P ＜ 0.000 1)。第2 茬紫花苜蓿VB3含量為1.96 mg·kg?1，顯著高于第1 茬(1.62 mg·kg?1)和第3 茬(0.33 mg·kg?1)，分別高出20.99%和493.94%。制粒(P = 0.097 3)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.813 1)對(duì)紫花苜蓿VB3含量無(wú)顯著影響。刈割茬次對(duì)紫花苜蓿VB5含量影響顯著(P =0.000 5)。第2 茬紫花苜蓿VB5含量為7.69 mg·kg?1，顯著高于第1 茬(5.58 mg·kg?1)和第3 茬(6.83 mg·kg?1)，分別高出37.81%和12.59%。制粒(P = 0.079 0)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.187 5)對(duì)紫花苜蓿VB5含量無(wú)顯著影響。刈割茬次(P = 0.000 7)、制粒(P = 0.000 2)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.002 0)對(duì)紫花苜蓿VB6含量影響顯著。第3 茬紫花苜蓿VB6含量為0.64 mg·kg?1，顯著低于第1 茬(0.88 mg·kg?1)和第2 茬(0.92 mg·kg?1)，分別低27.27%和30.43%。草粉的VB6含量為0.94 mg·kg?1，顯著高于草粉(0.69 mg·kg?1)，高出36.23%。

表 2 茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿B 族維生素含量的影響Table 2 Effect of cutting number and pelletizing on B group vitam in content of alfalfa

2.2 刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)影響

茬次對(duì)紫花苜蓿DM 含量影響顯著(P = 0.018 2)，第2 茬和第3 茬紫花苜蓿的DM 含量顯著高于第1 茬(表3)。制粒顯著降低了紫花苜蓿DM 含量(P ＜0.000 1)；兩因素的互作效應(yīng)(P = 0.026 1)對(duì)紫花苜蓿DM 含量有顯著影響。刈割茬次(P = 0.000 5)、制粒(P = 0.000 6)和兩因素互作效應(yīng)對(duì)紫花苜蓿OM含量影響顯著(P = 0.000 4)。第1 茬紫花苜蓿的OM 含量為92.35%，顯著高于第2 茬和第3 茬；草顆粒的OM 含量為91.75%，顯著高于草粉(89.98%)。刈割茬次對(duì)紫花苜蓿CP 含量影響顯著(P ＜ 0.000 1)，第2 茬紫花苜蓿CP 含量為17.40%，顯著高于第1 茬和第3 茬；制粒(P = 0.238 5)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.132 2)對(duì)紫花苜蓿CP 含量無(wú)顯著影響。刈割茬次對(duì)紫花苜蓿NDF 含量影響顯著(P ＜ 0.014 1)，第2 茬紫花苜蓿NDF 含量為39.55%，顯著低于第1 茬，但和第3 茬無(wú)顯著差異；制粒(P = 0.062 5)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.069 5)對(duì)紫花苜蓿NDF 含量無(wú)顯著影響。刈割茬次(P ＜ 0.000 1)和制粒(P =0.000 4)對(duì)紫花苜蓿ADF 含量影響顯著，第2 茬紫花苜蓿ADF 含量為29.73%，顯著低于第1 茬和第3 茬；草顆粒的ADF 含量為30.56%，顯著低于草粉。兩因素互作效應(yīng)(P = 0.837 0)對(duì)紫花苜蓿ADF含量無(wú)顯著影響。刈割茬次、制粒、和兩因素的互作效應(yīng)對(duì)紫花苜蓿EE 含量無(wú)顯著影響。

表 3 茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響Table 3 Effect of cutting number and pelletizing on the nutritional content of alfalfa

2.3 刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量影響

刈割茬次(P ＜ 0.000 1)、制粒(P ＜ 0.000 1)和兩因素互作效應(yīng)(P = 0.001 0)對(duì)紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量影響顯著，第1 茬紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量顯著低于第2 茬和第3 茬，而第2 茬紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量顯著高于其他茬次(表4)。草顆粒附著的大腸桿菌數(shù)量顯著低于草粉。第1 茬次紫花苜蓿草顆粒大腸桿菌數(shù)量最低為2.86 lg cfu·g?1。

表 4 茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量的影響Table 4 Effect of cutting num ber and pelletizing on Escherichia coli population of alfalfa sam p les

3 討論

3.1 刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿維生素含量的影響

維生素的主要作用是作為酶的輔酶參與機(jī)體功能、調(diào)節(jié)機(jī)體代謝。紫花苜蓿制粒工藝的粉碎、混合、制粒、冷卻等環(huán)節(jié)產(chǎn)生的溫度、摩擦、壓力等都會(huì)影響維生素的穩(wěn)定性。VK 包括葉醌(VK1)、甲喹酮(VK2)和甲萘醌(VK3)等形式。VK 化合物都具有2-甲基-1,4-萘醌的生物活性[31]。本研究中刈割茬次對(duì)VK1含量無(wú)顯著影響，但制粒后，苜蓿VK1含量顯著降低，說(shuō)明VK1受制粒工藝的影響顯著。Vc 的化學(xué)性質(zhì)極不穩(wěn)定，遇堿或遇堿加熱、遇光都能促進(jìn)其氧化分解，失去生物活性[32]。Vc 作為植物營(yíng)養(yǎng)成分的重要指標(biāo)，易受氣候、采收時(shí)期、加工方式、貯藏方式、時(shí)間等因素的影響[33-36]。有研究報(bào)道，蒸汽制?？墒谷占Z維生素C 損失20%～30%，擠壓處理則有55%～70%被破壞[37]。嚴(yán)芳芳[38]研究發(fā)現(xiàn)制粒工藝中膨化浮性飼料中維生素C 晶體損失率達(dá)71%。沈祥[39]研究表明，飼料加工工藝中，制粒后Vc 純品添加劑的保留率明顯降低。本研究中第1 茬和第2 茬紫花苜蓿Vc 含量無(wú)顯著差異，但顯著高于第3 茬。紫花苜蓿草顆粒Vc 含量(12.66 mg·kg?1)顯著低于草粉(14.32 mg·kg?1)，損失率達(dá)11.59%。因此，制粒工藝顯著降低了紫花苜蓿VC 含量。B 族維生素作為一類低分子有機(jī)化合物(輔酶)。除了濕度和氧化還原反應(yīng)單一條件能破壞維生素穩(wěn)定性外，其他單一條件必須與其他因素結(jié)合才可能破壞維生素的穩(wěn)定性[40]。Lew is 等[41]和 Le?ková等[42]研究發(fā)現(xiàn)溫度低于88 ℃時(shí)，制粒過(guò)程對(duì)B 族維生素含量無(wú)顯著影響，進(jìn)一步說(shuō)明B 族維生素相對(duì)穩(wěn)定，不易分解。Gadient 和Fenster[43]研究報(bào)道，無(wú)論在高溫、室溫還是低溫環(huán)境下VB2穩(wěn)定性都很好。高溫35 ℃時(shí)，VB1和VB6的損失率略高，而VB5(泛酸)損失率明顯升高。Zhuge 等[44]研究表明，隨著溫度的增高，VB2的損失程度明顯比VB3的損失程度大。VB6在光照和堿性條件下不穩(wěn)定，而VB3(煙酰胺)基本是穩(wěn)定的，沒(méi)有單一的條件能破壞它[45]。Hunt 和Bethke[46]研究表明苜蓿刈割后，在強(qiáng)光照射48 h 后，維生素B2含量減少了約25%。有研究表明制粒過(guò)程飼料維生素B1損失10%～20%，VB2損失約為15%[47]。綜述所述，不同的研究得到的結(jié)果不同，可能是由于研究材料不同所致。本研究中，刈割茬次對(duì)B 族維生素含量影響顯著。第2 茬紫花苜蓿VB2、VB3、VB5顯著高于第1 和3 茬，第1 茬和第2 茬的VB6、Vc 含量無(wú)顯著差異，但顯著高于第3 茬，第1 茬的VB1含量顯著高于第2 和3 茬。制粒對(duì)紫花苜蓿B3、B5無(wú)顯著影響，進(jìn)一步說(shuō)明VB3對(duì)高溫的穩(wěn)定性。制粒工藝顯著降低了VB2、VB6含量，說(shuō)明VB2、VB6遇高溫分解。而制粒后顯著提高了VB1含量，該結(jié)果有待進(jìn)一步研究。

3.2 刈割茬次與制粒對(duì)紫花苜蓿大腸桿菌數(shù)量和化學(xué)成分的影響

刈割是紫花苜蓿的主要利用方式，刈割茬次影響紫花苜蓿營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量是衡量牧草品質(zhì)優(yōu)劣的基本指標(biāo)，其中較為重要的是CP 含量和纖維物質(zhì)。CP 含量的多少是飼料飼用價(jià)值的主要反映。研究表明，不同的刈割茬次對(duì)苜蓿的CP 含量也有很重要的影響，刈割次數(shù)的增加會(huì)降低植株的再生能力同時(shí)降低飼草營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)[48]。ADF 和NDF的含量關(guān)系到動(dòng)物對(duì)所食牧草的采食與消化情況，ADF 和NDF 含量越低牧草營(yíng)養(yǎng)價(jià)值越高。李菲菲[3]研究表明，刈割茬次對(duì)紫花苜蓿DM、ADF、NDF、CP、Ash 含量影響顯著，但對(duì)EE 含量影響不顯著，茬次對(duì)苜蓿干草DM 含量有極顯著影響，茬次的遞增會(huì)增加DM 的積累，第3 茬DM 含量總體顯著高于第1 茬和第2 茬。本研究中，除刈割茬次除對(duì)EE無(wú)顯著影響外，對(duì)其他營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)影響顯著，該結(jié)果與李菲菲[3]研究結(jié)果一致。本研究中，第2 茬紫花苜蓿CP 含量高于第1 茬和第3 茬，這是由于紫花苜蓿的蛋白主要集聚于葉中，第2 茬紫花苜蓿生長(zhǎng)正處于雨熱同期，生長(zhǎng)旺盛，葉片數(shù)量多，保持幼嫩，且損失少，進(jìn)而增加CP 含量，降低了NDF、ADF含量。第2 和3 茬DM 含量高于第1 茬，這是由于第1 茬紫花苜蓿返青后灌水量大，水分充足，植株水分含量高，DM 含量較低，第2 茬和第3 茬紫花苜蓿試驗(yàn)地未進(jìn)行灌溉，生長(zhǎng)期間溫度升高、氣候干燥且降雨量偏低，導(dǎo)致DM 積累較多。第1 茬紫花苜蓿OM 含量高于第2 和3 茬，可能是由于第2 茬和第3 茬紫花苜蓿生長(zhǎng)過(guò)程的外界環(huán)境有助于粗灰分的富集。Sanderson 和Wedin[49]報(bào)道無(wú)論是氣溫較低的條件下還是氣溫較高的環(huán)境，紫花苜蓿中NDF 含量在第1 茬刈割前期積累最多。本研究中第1 茬紫花苜蓿NDF含量平均為41.80%，高于第2 茬和第3 茬。該結(jié)果與上述結(jié)果一致。杜書增等[50]為評(píng)價(jià)刈割茬次對(duì)紫花苜蓿產(chǎn)量及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響，在陜西省旬邑縣種植了3 個(gè)品種紫花苜蓿，結(jié)果表明：第1 茬的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值優(yōu)于第2 茬和第3 茬。宋書紅等[51]研究表明，不同刈割茬次紫花苜蓿營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的高低順序?yàn)榈? 茬 ＞ 第2 茬 ＞ 第3 茬。本研究表明，第2茬紫花苜蓿品質(zhì)優(yōu)于第1 茬和第3 茬，第3 茬刈割的紫花苜蓿干草品質(zhì)較低，這是由于潮濕的天氣推遲了收獲時(shí)間，該結(jié)果與上述結(jié)果不一致，可能是由于不同品種、氣候、施肥、刈割時(shí)間、收獲期、管理等客觀因素造成的，有待于進(jìn)一步研究。

孫林[52]研究報(bào)道針茅草原牧草經(jīng)加工成草顆粒后，針茅(Stipa)草顆粒干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)與針茅干草草粉無(wú)顯著差異。本研究中，制粒對(duì)CP、NDF、EE 無(wú)顯著影響，但草粉的DM 含量高于草顆粒，這主要是由于制粒時(shí)為了達(dá)到適宜的含水量添加了一定比例的水所致。草顆粒的OM 含量顯著高于草粉，這可能是由于制粒時(shí)使部分礦物質(zhì)元素受損而降低；而ADF 含量顯著低于草粉，主要是由于制粒使紫花苜蓿纖維素結(jié)構(gòu)形式改變[47]。

朝魯孟其其格等[53]報(bào)道草顆粒形成過(guò)程經(jīng)蒸汽高溫能殺滅寄生蟲卵和其他病原微生物。調(diào)制過(guò)程中的高溫、高濕和壓力的處理可使飼料中有害微生物失活。Ekperigin 等[54]報(bào)道經(jīng)制粒處理，大腸桿菌、非乳酸發(fā)酵菌全部滅活，好氧生物和真菌分別滅活99.7%和93.6%。本研究中，紫花苜蓿制粒后大腸桿菌數(shù)量顯著降低，進(jìn)一步驗(yàn)證了制粒工藝是影響大腸桿菌數(shù)量的主要因子；3 個(gè)茬次紫花苜蓿大腸桿菌由低到高的順序?yàn)榈? 茬 ＜ 第3 茬 ＜ 第2 茬。茬次與制粒兩因素的互作效應(yīng)顯著，第1 茬草顆粒大腸桿菌數(shù)量最低。

4 結(jié)論

綜合分析，第1 茬和第2 茬紫花苜蓿具有較高維生素含量，且第2 茬紫花苜蓿營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)于第1 茬和第3 茬。制粒顯著降低了紫花苜蓿VB2、VB6、Vc、VK1含量，且抑制了其表面附著大腸桿菌的活性。