沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌資源種類1)

岑進(jìn) 高國平 王月

(沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，沈陽，110866)

天柱山位于沈陽城郊，是世界物質(zhì)文化遺產(chǎn)清福陵(俗稱東陵)的主要附屬森林區(qū)，有著重要的生態(tài)價(jià)值和文化旅游價(jià)值，對該區(qū)域內(nèi)大型真菌資源進(jìn)行系統(tǒng)全面的調(diào)查研究有著重要意義。小脆柄菇屬(Psathyrella(Fr.)Quél.)是大型真菌中的一個大屬，隸屬于擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、蘑菇綱(Agaricomycetes)、蘑菇目(Agaricales)、小脆柄菇科(Psathyrellaceae)，是小脆柄菇科的模式屬[1]。據(jù)資料記載該屬真菌物種豐富，分布廣泛，全球約有500種[2]。該屬真菌在夏秋季節(jié)常生于腐殖質(zhì)含量較高的枯枝落葉層中，在沼澤地、農(nóng)田、草原，甚至水下都能見到小脆柄菇屬真菌的生長。目前國外對該屬真菌的研究主要集中在資源調(diào)查方面，1972年Simth[2]撰寫了該屬的第1本專著，此后外國專家學(xué)者在對該屬真菌種類多樣性研究方面取得了一系列成果。我國對小脆柄菇屬真菌的研究也主要集中在資源調(diào)查和物種多樣性方面。該屬真菌在全國多數(shù)省份均有分布，其中主要報(bào)道省份有廣東、吉林、四川、河南等。2014年圖力古爾與王月對全國小脆柄菇屬名錄進(jìn)行了全面的整理，認(rèn)為我國有該屬真菌名稱51個，發(fā)現(xiàn)中國新紀(jì)錄種7個[3]，該研究成果對我國小脆柄菇屬真菌資源的后續(xù)研究有極大的幫助。此前對天柱山林區(qū)小脆柄菇屬真菌的研究未見報(bào)道。筆者對天柱山林區(qū)內(nèi)的小脆柄菇屬真菌資源進(jìn)行了2年的調(diào)查研究，并對天柱山林區(qū)的小脆柄菇屬真菌分布情況進(jìn)行了初次報(bào)道，以期為世界文化遺產(chǎn)清福陵的保護(hù)與開發(fā)提供參考，并為遼寧省小脆柄菇屬真菌的研究提供基礎(chǔ)資料。

1 研究地自然概況

天柱山地處中國沈陽市東部，占地566.67 hm2，地理坐標(biāo)為41°11′～43°2′N、122°25′～123°48′E，海拔較低，平均50.0 m。地處歐亞大陸東部，位于長白山余脈與遼河沖積平原的過渡地帶[4]，是長白山、蒙古、華北3大植物區(qū)系交匯區(qū)[5]，屬于溫帶半濕潤大陸性氣候，據(jù)長期以來的歷史氣象資料分析所知，該區(qū)域年均氣溫為8.1 ℃，年平均降水量為722 mm，無霜期為153 d，年日照總時間2 587.6 h，太陽輻射量540.93 J·cm-2·a-1。區(qū)域內(nèi)森林枯落物的常年累積使林區(qū)內(nèi)土壤腐殖質(zhì)含量較高，受區(qū)域小環(huán)境的影響，土層較厚，土壤中水分含量較高。該區(qū)為暖溫帶落葉闊葉林區(qū)，由于長期以來人類活動頻繁，原始的自然植被已消失殆盡，現(xiàn)階段該區(qū)域內(nèi)生長的次生自然植被主要為針闊混交林，其主要針葉喬木為油松(Pinustabuliformis)，闊葉喬木為蒙古櫟(Quercusmongolica)，灌木為衛(wèi)矛(Euonymusalatus)。天柱山植物群落類型豐富，主要有以油松、蒙古櫟為優(yōu)勢樹種組成的針闊混交林，糠椴(Tiliamandshurica)、蒙古櫟為優(yōu)勢樹種組成的常落闊葉混交林，長白落葉松(Larixolgensisvar.changpaiensis)純林等10種植物群落類型[6]，喬、灌、草植物500種以上。

2 研究方法

2.1 調(diào)查時間與調(diào)查路線

為了盡可能地在小脆柄菇屬真菌發(fā)生的季節(jié)對其進(jìn)行全面地調(diào)查，于2018年5月到2019年10月對天柱山區(qū)域內(nèi)不同植物群落類型下的小脆柄菇屬真菌進(jìn)行調(diào)查采集。子實(shí)體的采集采取隨機(jī)踏查的方式，以林區(qū)內(nèi)的防火道為中軸線先左側(cè)后右側(cè)呈“S”形路線前進(jìn)踏查；調(diào)查每周1次，每月至少4次，在雨水集中的6—9月份，適度增加采集次數(shù)。

2.2 野外調(diào)查與標(biāo)本采集

在野外沿著調(diào)查路線仔細(xì)搜尋林地內(nèi)地表、枯死立木、倒伏枯朽木上的真菌子實(shí)體，發(fā)現(xiàn)后首先記錄編號、采集時間、采集地信息(具體地點(diǎn)、海拔高度、坡向、坡位、林地類型等)。再觀察描述其子實(shí)體大小(Bas方案[7])、顏色、形狀、氣味、著生方式等。記錄描述后，借助數(shù)碼相機(jī)(尼康D90或尼康D810等)拍攝其生態(tài)照、正面照、側(cè)面照及被面(菌褶)照。拍照完畢后進(jìn)行標(biāo)本采集，選取發(fā)育成熟的小脆柄菇屬真菌子實(shí)體2～5株，用移植鏟輕輕挖掘撥開周圍腐質(zhì)層，確保大型真菌完整；將采集到的標(biāo)本放入大小合適、透氣性較好的收集帶中(信封等)，接著將收集袋封口后放入保鮮箱作野外暫時保存處理；采集完成后，在實(shí)驗(yàn)室用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(LDO-9246A，上海)進(jìn)行集中干燥處理保存；初次在80 ℃下干燥30 min，進(jìn)行子實(shí)體內(nèi)部殺蟲，第2次將溫度調(diào)整為40 ℃干燥4 h；最后將標(biāo)本取出平攤在試驗(yàn)臺上一周進(jìn)行自然通風(fēng)干燥處理，待標(biāo)本完全干燥后放入標(biāo)本柜統(tǒng)一保存?zhèn)溆?，?biāo)本按編號現(xiàn)存放于沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院真菌標(biāo)本室(HMFCSAU)。

2.3 微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)特征觀察

對于野外采集到的子實(shí)體，回到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)立刻做微觀鏡檢，主要觀察擔(dān)子、孢子、囊狀體和菌絲等微觀形態(tài)特征。具體步驟：首先選取小脆柄菇屬真菌子實(shí)體不同部位材料，采用徒手切片法，以蒸餾水為浮載劑制作臨時玻片標(biāo)本，在光學(xué)顯微鏡Motic(BA210)下40～1 000倍范圍內(nèi)調(diào)整觀察孢子等其他結(jié)構(gòu)微觀特征，并隨機(jī)選取20個成熟的孢子測量大小，同時繪出孢子、擔(dān)子、菌絲等顯微結(jié)構(gòu)線條圖。

2.4 菌種鑒定

采用傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分類方法，依據(jù)采集到的小脆柄菇屬真菌標(biāo)本信息，將其形態(tài)特征與國內(nèi)外工具書[8-28]和相關(guān)文獻(xiàn)資料[29-37]進(jìn)行比對，并在Index fungorum、Mcobank等專業(yè)網(wǎng)站查詢小脆柄菇屬真菌物種記錄資料，鑒定小脆柄菇屬真菌物種，最后查閱國內(nèi)資料以確認(rèn)小脆柄菇屬真菌中國新紀(jì)錄種以及遼寧省新紀(jì)錄種。

3 結(jié)果與分析

3.1 沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌資源名錄

通過2年調(diào)查研究，在天柱山區(qū)域內(nèi)共計(jì)采集到小脆柄菇屬真菌標(biāo)本25份，形態(tài)鑒定結(jié)果顯示：共有小脆柄菇屬真菌13種，含中國新紀(jì)錄種2種，遼寧新紀(jì)錄種6種；其中5種可食用，2種不可食用，食藥用不明6種；生于闊葉林8種，針葉林1種，針闊混交林5種，林緣裸地2種，草地1種，腐朽木上1種。各種生境具體分布情況見表1。

表1 沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌名錄

3.2 中國新紀(jì)錄種描述

3.2.1畢夫朗小脆柄菇(Psathyrellabifrons(Berk.) A. H. Sm.)

形態(tài)特征：子實(shí)體很小，菌蓋直徑為2.0～3.0 cm，赭棕色或淺赭色，濕時菌蓋赭褐色，菌蓋中央顏色稍深，干時奶油色，圓錐形或鐘形；隨著子實(shí)體的生長，菌蓋增大，變?yōu)槠交?；生長初期具放射狀條紋，菌蓋邊緣具絲狀殘余物，略向上反卷；菌肉白色，?。痪拶N生；由幼齡時的奶油色逐漸變?yōu)楹稚?，成熟后變?yōu)樽虾稚痪野咨咨?；菌柄長4.0～6.0 cm，直徑為0.1～0.3 cm，菌柄基部具白色纖毛，無菌環(huán)，菌柄脆，菌肉白色，纖維細(xì)長，實(shí)心逐漸變?yōu)榭招?圖1)。無特殊氣味；無特殊化學(xué)反應(yīng)(憑證標(biāo)本：HMFCSAU98；采集人：高國平，岑進(jìn)；采集時間：2018年7月11日)。

圖1 畢夫朗小脆柄菇子實(shí)體

孢子深褐色，光滑，橢球形，具1個小油滴，具芽孔，擔(dān)孢子大小為(7.0～9.5)μm×(4.5～5.5)μm，擔(dān)子(19.0～22.0)μm×(4.0～6.0)μm，棒狀或網(wǎng)球拍狀，具4個小梗；擬擔(dān)子(23.0～29.0)μm×(5.0～6.5)μm，臘腸形；厚壁菌絲，具隔，菌褶菌絲直徑為2.8～3.3 μm，菌蓋菌絲直徑為3.3～5.5 μm，菌柄菌絲直徑為3.3～4.4 μm(圖2)。

a.孢子；b.擔(dān)子；c.擬擔(dān)子；d.菌褶菌絲；e.菌蓋菌絲；f.菌柄菌絲。

3.2.2菜豆孢小脆柄菇(Psathyrelladelineate(Pk.) Smith)

形態(tài)特征：子實(shí)體很小，菌蓋直徑1.5～3.0 cm，近平展，中部稍凸起，邊緣稍具絲狀物；深銹棕色；表面具皺紋，被暗黃色顆粒狀涂層；菌褶貼生，密；灰褐色，菌柄長5～7 cm，直徑為0.5～1.5 cm，白色，無菌環(huán)，纖維較長(圖3)。無特殊氣味(憑證標(biāo)本：HMFCSAU61；采集人：高國平，岑進(jìn)；采集時間：2018年7月9日)。

孢子瘦，菜豆?fàn)?，?個小油滴，大小為(6.5～9.0)μm×(4.5～5.5)μm，深紫棕色，孢子表面具指尖狀凸起瘤；擔(dān)子(28.0～30.0)μm×(5.0～8.0)μm，長棒狀，無色，具4個小梗；擬擔(dān)子(23.0～29.0)μm×(5.0～7.0)μm，棒狀，頂端鈍圓，基部稍窄；無色；厚壁菌絲，具隔，菌褶菌絲直徑為3.0～5.0 μm，菌蓋菌絲直徑為2.0～5.0 μm，菌柄菌絲直徑為3.0～4.0 μm(圖4)。

圖3 菜豆孢小脆柄菇子實(shí)體

a.孢子；b.擔(dān)子；c.擬擔(dān)子；d.菌褶菌絲；e.菌蓋菌絲；f.菌柄菌絲。

4 結(jié)論與討論

筆者從采集到的25份沈陽天柱山小脆柄菇屬真菌標(biāo)本中共鑒定出小脆柄菇屬真菌13種，其中中國新紀(jì)錄種2種，分別為：畢夫朗小脆柄菇(Psathyrellabifrons)、菜豆孢小脆柄菇(P.delineata)；遼寧新紀(jì)錄種有6種，分別為：草地小脆柄菇(P.campestris)、綿毛小脆柄菇(P.gossypina)、丸形小脆柄菇(P.piluliformis)、微小脆柄菇(P.pygmaea)、灰褐小脆柄菇(P.spadiceogrisea)、鱗小脆柄菇(P.squamosa)；明確了每種小脆柄菇的生境，豐富了天柱山區(qū)域的小脆柄菇屬真菌資源多樣性。

小脆柄菇屬真菌因生長環(huán)境的不同，同一物種往往在宏觀形態(tài)特征上表現(xiàn)出較大的差異。本研究采自中國遼寧的畢夫朗小脆柄菇菌柄直徑為0.2～0.3 cm，而Jordan[38]記錄畢夫朗小脆柄菇菌柄直徑為0.2～3.5 cm；國外學(xué)者在北美調(diào)查發(fā)現(xiàn)菜豆孢小脆柄菇的菌蓋直徑為3～10 cm，菌柄長6～10 cm[39]，而本研究結(jié)果表明采自中國遼寧的菜豆孢小脆柄菇的菌蓋直徑為1～3 cm，菌柄長5～7 cm，且二者子實(shí)體大小差異較大，這可能和降雨量有密切關(guān)系，一般夏季雨水少時子實(shí)體生長不充分，個體大小和外部特征會出現(xiàn)明顯差異。此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，沈陽天柱山區(qū)域內(nèi)的小脆柄菇屬真菌有13種，與趙東岳等[40]在沈陽地區(qū)對大型真菌的初步調(diào)查并未發(fā)現(xiàn)小脆柄菇屬真菌相比填補(bǔ)了沈陽地區(qū)小脆柄菇屬真菌資源調(diào)查這一空白，且此次調(diào)查成果進(jìn)一步豐富了遼寧省大型真菌資源名錄。從國內(nèi)該屬真菌的報(bào)道情況看，加大對小脆柄菇屬真菌資源的調(diào)查依然是接下來的重點(diǎn)研究方向，此外，對該屬真菌產(chǎn)生的木質(zhì)素降解酶的研究也是未來造紙工業(yè)的研究熱點(diǎn)之一。