TCT 聯(lián)合HR-HPV DNA 檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用

張冬燕

（河南科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院 體檢科， 河南 洛陽471000）

宮頸癌是臨床常見婦科惡性腫瘤之一， 發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位， 但其是唯一可以防治的癌癥。 因此， 早篩查、早診治對(duì)于宮頸癌及癌前病變患者具有重要的臨床意義［1］。 當(dāng)前， 宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué) （TCT） 檢查是針對(duì)宮頸病變的主要篩查手段， 但仍然存在漏診以及誤診的風(fēng)險(xiǎn)［2］。 相關(guān)研究［3－4］表明， 宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)被人乳頭瘤病毒 （HPV） 感染是造成宮頸癌的最主要原因， 輔助進(jìn)行高危型人乳頭瘤病毒基因 （HR－HPV DNA） 檢測(cè)， 可進(jìn)一步提高診斷準(zhǔn)確率。 基于此， 本研究旨在探討TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值， 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016 年2 月至2017 年2 月在我院行宮頸病變篩查的受檢者70 例， 其中未婚者30 例， 已婚者40 例；年齡20 ～64 歲， 平均 （45.31 ± 4.33） 歲。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)： 有性生活史； 子宮完整； 無放療以及化療史。 排除標(biāo)準(zhǔn)： 近期接受宮頸病變藥物治療者； 合并非宮頸組織的其他惡性腫瘤者； 6 個(gè)月內(nèi)給予免疫調(diào)節(jié)劑或免疫抑制劑者； 7 d 內(nèi)有陰道給藥史者； 免疫功能缺陷者； 嚴(yán)重傳染性疾病者。

1.3 方法①所有受檢者均先行TCT 檢查： 使用專門制作的一次性宮頸刷采集受檢者宮頸外口、 宮頸管處的脫落細(xì)胞， 然后將其放于甲醛保存液中并多次進(jìn)行充分漂洗， 將漂洗后的脫落細(xì)胞放在全自動(dòng)制片機(jī)進(jìn)行人工制片處理， 處理后進(jìn)行人工巴氏染色， 并放于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察分析， 最后參考中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院制定的Bethesda 法進(jìn)行分類： 無上皮內(nèi)病變或惡性病變、 意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞、 傾向高度病變的不典型鱗狀上皮細(xì)胞、 低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變、 高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變和宮頸癌。 將意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞及其以上病變判斷為篩檢陽性。 ②對(duì)不同類型的宮頸病變進(jìn)行HRHPV DNA 檢測(cè)， 具體操作如下： 使用廣州安必平醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)的檢測(cè)試劑盒以及珠海黑馬醫(yī)學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的基因擴(kuò)增PCR 儀、 佛山達(dá)安醫(yī)療設(shè)備有限公司的全自動(dòng)核酸分子雜交儀， 嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。 對(duì)16 種高危HPV 進(jìn) 行 檢 測(cè)： HPV16、 HPV18、 HPV31、 HPV33、 HPV35、HPV45、 HPV51、 HPV52、 HPV53、 HPV56、 HPV58、 HPV59、HPV66、 HPV68、 HPV73、 HPV82。 判斷標(biāo)準(zhǔn)： 1 種HPV DNA≥1.0 ng／L 即為檢測(cè)陽性。 在完成TCT 及HR－HPV DNA 篩查當(dāng)天通過陰道鏡對(duì)患者進(jìn)行宮頸病變組織多點(diǎn)病理活檢， 必要時(shí)采取宮頸錐切， 在常規(guī)病理制片、 蘇木精－伊紅染色法染色、盲法閱片后做出診斷， 并以此為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)以病理活檢結(jié)果作為 “金標(biāo)準(zhǔn)”， 分析TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)篩查宮頸病變的準(zhǔn)確度、 靈敏度、 特異度及與病理活檢結(jié)果的一致性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。 計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)和例數(shù)表示； 進(jìn)行Kappa 一致性檢驗(yàn)， Kappa＜0.4，一致性較差； 0.4≤Kappa＜0.75， 一致性一般； Kappa≥0.75，一致性較好。 P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理活檢結(jié)果70 例受檢者中， 經(jīng)病理活檢確診宮頸低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變35 例， 宮頸高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變20 例，宮頸癌15 例。

2.2 TCT 聯(lián)合HR-HPV DNA 檢測(cè)的診斷效能TCT 聯(lián)合HRHPV DNA 檢測(cè)篩查宮頸癌及癌前病變的準(zhǔn)確度為91.43% （64／70）， 靈敏度為92.73% （51／55）， 特異度為86.67% （13／15）。見表1。

表1 TCT 聯(lián)合HR-HPV DNA 檢測(cè)的結(jié)果 （例）

2.3 一致性檢驗(yàn)經(jīng)Kappa 一致性檢驗(yàn)， TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)結(jié)果和病理活檢結(jié)果的一致性較好 （Kappa ＝0.757，P ＝0.000）。

3 討論

宮頸病變的高危因素包括高危型HPV 持續(xù)感染史、 性傳播性疾病史、 長期使用免疫抑制劑類藥物或患有免疫抑制性疾病史等， 其中最為主要的原因是宮頸以及黏膜被HPV 感染［5］。宮頸癌并不是程度不同的單一病理性改變， 而是在宮頸浸潤性癌產(chǎn)生之前， 存在著很長時(shí)間的癌前病變［6］， 并且根據(jù)病情的不斷進(jìn)展出現(xiàn)明顯差異的病變反應(yīng)， 具體表現(xiàn)為低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變以及高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變。 既往， 宮頸癌在老年患者中較為常發(fā)， 但是當(dāng)前宮頸癌逐漸呈現(xiàn)低齡化發(fā)展的趨勢(shì)，嚴(yán)重?fù)p害女性患者的生理以及心理健康。 因此， 尋求準(zhǔn)確度、靈敏度、 特異度均高的檢測(cè)方法對(duì)宮頸癌以及癌前病變進(jìn)行篩查， 并根據(jù)篩查結(jié)果采取針對(duì)性治療措施臨床意義重大。

TCT 是用來判斷宮頸細(xì)胞是否有病變的一種檢查方法， 基于脫落細(xì)胞制片技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)， 只需要采集較少的樣本細(xì)胞，可減少細(xì)胞的重疊率， 呈現(xiàn)出較為清晰的結(jié)構(gòu)圖像， 通過對(duì)細(xì)胞核的異型性、 細(xì)胞質(zhì)的形態(tài)或者染色情況進(jìn)行分析， 進(jìn)而對(duì)上皮細(xì)胞的病變程度進(jìn)行評(píng)估［7］。 但是TCT 取樣過程中會(huì)存在病變部位宮頸上皮細(xì)胞的漏取， 并且觀察TCT 形態(tài)學(xué)時(shí)會(huì)受到檢查者主觀判斷的影響， 降低TCT 檢查的準(zhǔn)確性［8－9］。 而針對(duì)TCT 檢查提示有低級(jí)別鱗狀上皮細(xì)胞內(nèi)病變或者高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變的人群， 需要進(jìn)一步做HR－HPV DNA 篩查。 HRHPV DNA 檢測(cè)是對(duì)宮頸上皮細(xì)胞HPV DNA 的擴(kuò)增情況進(jìn)行評(píng)估， 進(jìn)而判斷HPV 感染程度， 通過HR－HPV DNA 檢測(cè)柱狀上皮細(xì)胞的高危病毒基因， 可以有效避免檢測(cè)環(huán)境以及溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響， 有較高的可靠性； 另外， 在進(jìn)行HR－HPV DNA 檢測(cè)時(shí)， 在較低的基礎(chǔ)性細(xì)胞濃度要求下就能實(shí)現(xiàn)對(duì)HPV 病毒的擴(kuò)增， 對(duì)病毒載量進(jìn)行有效評(píng)估， 上皮細(xì)胞感染程度的評(píng)估準(zhǔn)確性較高［10－11］。 本研究結(jié)果顯示， TCT 聯(lián)合HRHPV DNA 檢測(cè)篩查宮頸癌及癌前病變的準(zhǔn)確度、 靈敏度、 特異度均較高； 且經(jīng)Kappa 一致性檢驗(yàn)， TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)結(jié)果和病理活檢結(jié)果的一致性較好， 表明TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)篩查宮頸癌及癌前病變的價(jià)值較高。

綜上所述， TCT 聯(lián)合HR－HPV DNA 檢測(cè)能有效篩查宮頸癌及癌前病變， 臨床應(yīng)用價(jià)值較高。