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    高脆金針菇“蓉金567”的選育

    2021-03-06 02:42:48曾先富李昕竺熊維全
    食用菌 2021年1期
    關(guān)鍵詞:脆度蓋玻片單核

    曾先富 李昕竺 熊維全

    (成都市農(nóng)林科學(xué)院園藝所,四川成都610030)

    金針菇(Flammulina velutipes)又稱冬菇、樸菇、毛柄金錢菌等,其菌蓋滑潤、菌柄細(xì)長脆嫩,形美味鮮,營養(yǎng)價值和保健功效顯著,具益智作用和觀賞價值,開發(fā)利用前景廣闊[1]。近年來,即食金針菇食品、休閑產(chǎn)品等加工產(chǎn)品不斷涌現(xiàn),既拓展了金針菇產(chǎn)品市場,也滿足了人們更高層次的營養(yǎng)保健需求。

    加工的金針菇除了對外觀品質(zhì)有一定要求外,更重要的是營養(yǎng)、口感。目前金針菇加工企業(yè)原料均為鮮金針菇,品質(zhì)參差不齊,且加工產(chǎn)品普遍存在塞牙、咀嚼不爽的現(xiàn)象,嚴(yán)重制約了金針菇加工產(chǎn)品的銷售及深度開發(fā)[2]。

    研究立足于解決企業(yè)對加工金針菇品質(zhì)要求,以咀嚼口感為主要指標(biāo),兼顧營養(yǎng)和產(chǎn)量指標(biāo),通過單孢雜交和系統(tǒng)篩選,獲得品質(zhì)優(yōu)良的黃色金針菇加工專用新品種“蓉金567”。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    (1)金針菇菌株:收集性狀優(yōu)良的9個金針菇菌株作為親本篩選材料,其編號分別為①(B3,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院)、②(G1,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院)、③(F3-1,成都市農(nóng)林科學(xué)院)、④(川金7號,四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院)、⑤(金絲,成都市農(nóng)林科學(xué)院)、⑥(FA12-24,成都市農(nóng)林科學(xué)院)、⑦(川金3號,四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院)、⑧(金雜19,福建三明真菌研究所)、⑨(金絲2號,成都市農(nóng)林科學(xué)院)。

    (2)培養(yǎng)基:PDA 加富培養(yǎng)基為馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂16 g,蛋白胨2 g,磷酸二氫鉀1 g,硫酸鎂0.5 g。原種培養(yǎng)基為棉籽殼78%,米糠15%,玉米粉5%,白糖1%,石膏1%。培養(yǎng)料為配方①棉籽殼53%,胡豆殼9%,棉渣24%,玉米粉7%,麩皮2%,稻草1%,磷肥1%,尿素0.1%,硫酸鎂0.1%,石灰2%,石膏0.8%;配方②玉米芯42%,細(xì)木屑30%,麩皮20%,玉米粉5%,白糖1%,石膏1%,石灰1%。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 技術(shù)路線

    親本材料篩選——單孢分離與單核菌絲鑒定——單核菌絲配對雜交——雜合子初篩——優(yōu)良菌株復(fù)篩

    1.2.2 親本材料篩選

    成都市農(nóng)林科學(xué)院從四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、福建三明真菌研究所等地引進(jìn)金針菇(菌株)5 個,自主分離保藏菌株4 個,共9 個菌株進(jìn)行比較試驗(yàn)。以配方①配制培養(yǎng)料,用22 cm×45 cm 袋裝料,每袋裝料800 g,高壓滅菌,接種;18~20 ℃培養(yǎng) 45 d,移入菇房,開口,搔菌,保濕出菇(兩頭出菇)。連續(xù)試驗(yàn)3 批次。每個菌株選擇30 袋,采收第一潮菇,考察商品外觀、產(chǎn)量、營養(yǎng)成分和脆度,從中篩選出產(chǎn)量較高、商品外觀較好、營養(yǎng)品質(zhì)高且脆度值高的2 個菌株作為雜交親本材料。

    金針菇菌株的脆度由成都大學(xué)采用質(zhì)構(gòu)儀測定,營養(yǎng)成分由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測試中心檢測。

    1.2.3 雜交選育

    1.2.3.1 孢子的分離和單核菌絲的鑒定

    分別制作親本孢子印,以梯度稀釋法將孢子液稀釋至約103個/mL,兩個親本各取0.1 mL 孢子液均勻涂布于PDA平板培養(yǎng)皿中,倒置于24 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~5 d。待培養(yǎng)基上出現(xiàn)肉眼可見微小菌落時,挑取單個菌落轉(zhuǎn)接于PDA 平板上,在菌落邊緣斜插一滅菌的蓋玻片,24 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3 d,待菌絲爬上蓋玻片后取出蓋玻片,用乳酸酚棉藍(lán)試劑染色,在普通光學(xué)顯微鏡下觀察有無鎖狀聯(lián)合。試驗(yàn)共獲得36 個③號(F3-1)菌株的單核體、24 個④號(川金-7)菌株的單核體。

    1.2.3.2 單核菌絲配對雜交

    將1.2.3.1 的單核體兩兩配對培養(yǎng)。在無菌條件下用滅菌的吸管切取直徑約0.8 cm的菌塊于PDA平板上培養(yǎng),兩個菌塊間距1 cm,24 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)3~5 d。當(dāng)兩個能融合的單菌落中間形成突起的融合線時,在無菌環(huán)境中挑取融合處菌絲到另一PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),將滅菌的蓋玻片斜插入菌落邊緣培養(yǎng)基中,24 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3 d。待菌絲爬上蓋玻片后取出蓋玻片,用單核菌絲檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)融合是否成功,將有鎖狀聯(lián)合或雙核的菌絲轉(zhuǎn)接到PDA斜面培養(yǎng)基中擴(kuò)培。

    1.2.3.3 雜合子初篩

    以配方②配制培養(yǎng)料,用17 cm×33 cm 的袋裝料(每袋裝料折干250 g),121 ℃滅菌2 h。每個雜交種直接用母種接種5 袋,培養(yǎng)室25 ℃恒溫暗培養(yǎng)。待菌絲長滿袋后,移入出菇房出菇。采收第一潮菇,記錄產(chǎn)量等數(shù)據(jù)。篩選農(nóng)藝性狀優(yōu)良的菌株進(jìn)入復(fù)篩。

    1.2.3.4 優(yōu)良雜交菌株復(fù)篩

    培養(yǎng)料同初篩,用22 cm×45 cm 袋裝料,每袋裝料800 g,高壓滅菌,接種,18~20 ℃培養(yǎng)45 d,移入菇房,開口,搔菌,保濕出菇(一頭出菇)。每個菌株選擇30袋,采收第一潮菇,記錄其產(chǎn)量等數(shù)據(jù),同時送樣至成都大學(xué)檢測脆度。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 親本材料篩選結(jié)果

    綜合色澤、基部褐變長度等商品外觀,編號②、④、⑤、⑥、⑨菌株較優(yōu),而從袋產(chǎn)量考慮,編號③(F3-1)的產(chǎn)量最高,比大面積栽培的⑦號(川金3號)高2%左右。

    表1 9個金針菇菌株產(chǎn)量和商品外觀等性狀比較

    表2 每100 g鮮品金針菇營養(yǎng)成分及脆度值

    由表2 可知,金針菇③、④、⑤、⑦號品質(zhì)較優(yōu),③號(F3-1)的脆度值極高,口感極佳,非常滿足深加工要求。

    2.2 雜交選育結(jié)果

    孢子分離和單核菌絲的鑒定,獲得36個③號菌株的單核體、24 個④號菌株的單核體。單核菌絲兩兩配對雜交,獲得具有鎖狀聯(lián)合的雜合子452 個。袋栽出菇試驗(yàn)初篩,獲得黃色、菌柄較細(xì)且白、菌蓋包裹緊實(shí)、基部褐變少的菌株19個。

    2.2.1 優(yōu)勢雜交菌株復(fù)篩結(jié)果

    由表3 可以看出,雜交親本③、④號菌株在培養(yǎng)料(配方②)上的菌絲生長速度分別為(2.28±0.14)mm/d、(2.16±0.06)mm/d,菌絲長勢較好。雜交子代菌絲生長速度較兩個親本快的有325、371、389、503、567、607號菌株,其中371、503、567號菌株的菌絲生長極為濃密。

    圖1 親本子實(shí)體形態(tài)

    表3 優(yōu)勢雜交菌株及其親本在培養(yǎng)料(配方②)上菌絲生長情況

    表4 優(yōu)勢雜交菌株及其親本子實(shí)體性狀及產(chǎn)量比較

    由表4可以看出,與親本菌株相比,雜交子代基部褐變長度變短,編號187、300、389 菌株基部褐變相對較長。雜交子代第一潮菇袋產(chǎn)量差異較大,介于220~410 g,其中產(chǎn)量高于兩個親本菌株的雜交菌株有54、187、299、300、375、429、504、567 號,產(chǎn)量最高的為567號菌株。

    2.2.2 親本及優(yōu)良雜交菌株的營養(yǎng)成分及脆度

    表5 優(yōu)勢雜交菌株及其親本子實(shí)體主要營養(yǎng)成分及脆度

    由表5 可以看出,雜交子代菌株子實(shí)體脆度值高于兩個親本子實(shí)體脆度值的有299、371、389、429、567、607號菌株,其中567號菌株子實(shí)體脆度值明顯高于親本。子實(shí)體蛋白質(zhì)含量介于親本③和④菌株之間的有 19、325、336、371、389、429、450、567 號菌株。子實(shí)體氨基酸總量介于親本③和④菌株之間,或者是高于兩個親本的有19、54、299、300、325、371、429、503、567、607、714、743號菌株。

    綜合表4、表5結(jié)果,子實(shí)體脆度值高,營養(yǎng)價值高的雜交子代菌株為567號。該菌株經(jīng)四川省農(nóng)作物品種認(rèn)定委員會定名為“蓉金567”。

    圖2 高脆度黃色金針菇“蓉金567”子實(shí)體形態(tài)

    3 小結(jié)

    蓉金567 營養(yǎng)成分與親本接近,但脆度值約是親本③(F3-1)菌株的1 倍,是親本④(川金7 號)菌株2 倍多。相對于親本F3-1,該菌株具有菌蓋不易開傘,菌柄色澤光亮,基部褐變部位短等商品外觀優(yōu)勢,且脆度值高(咀嚼不塞牙),非常適合加工為即食食品。

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