人工授精技術(shù)在家兔繁殖中的應(yīng)用

符世雄，孫新明

(安順職業(yè)技術(shù)學(xué)院，貴州 安順 561000)

兔屬于節(jié)糧型草食家畜，能有效利用植物蛋白和部分粗纖維。近年來(lái)，我國(guó)加快了兔肉生產(chǎn)的開(kāi)發(fā)與利用，人均兔肉消費(fèi)的數(shù)量逐年增加。兔生產(chǎn)是畜牧業(yè)的重要組成部分，全世界養(yǎng)兔的國(guó)家達(dá)100多個(gè)。許多國(guó)家把發(fā)展肉兔業(yè)作為滿足人們對(duì)蛋白質(zhì)需要、解決糧食短缺的重要途徑之一。我國(guó)是養(yǎng)兔大國(guó)，家兔飼養(yǎng)量居世界首位，兔肉在中國(guó)飲食文中享有盛譽(yù)。在當(dāng)前的經(jīng)濟(jì)技術(shù)條件下，依靠本交繁殖的模式制約了養(yǎng)兔經(jīng)濟(jì)效益的提高。我國(guó)養(yǎng)兔業(yè)人工授精技術(shù)起步晚，隨著畜牧業(yè)規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化、專業(yè)化水平的不斷提升，人工授精技術(shù)在養(yǎng)兔生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用顯得越來(lái)越重要。

1 兔人工授精的操作步驟

兔人工授精是指借助特殊器械，采集種公兔精液，經(jīng)過(guò)精液品質(zhì)檢查和鑒定，再將公兔精液輸入發(fā)情母兔生殖道的過(guò)程，使其受胎的一種繁殖技術(shù)。關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)包括：種公兔精液采集，品質(zhì)檢查，稀釋與保存，母兔誘導(dǎo)排卵及輸精等。

1.1 前期準(zhǔn)備

1.1.1 假陰道制作及安裝 假陰道的外殼可用PVC管、試管等制作。一般可選用直徑5 cm，長(zhǎng)度8 cm的塑料管，內(nèi)裝與塑料管內(nèi)徑相近的海綿并將海綿沿直軸方向打一小孔。內(nèi)胎選用120 mm長(zhǎng)的避孕套，洗凈消毒后裝入假陰道內(nèi)胎，開(kāi)口的一端用膠圈固定，注入50～60 ℃的溫水，使海綿吸收至內(nèi)胎外口呈三角形并略有縫隙。用溫度計(jì)蘸取生理鹽水或石蠟插入假陰道內(nèi)測(cè)溫，母兔的正常體溫為39～40.5 ℃，故假陰道溫度以40～42 ℃為宜。為確保潤(rùn)滑效果，臨用前可適當(dāng)涂抹潤(rùn)滑劑。

1.1.2 顯微鏡及玻片 顯微鏡使用時(shí)接通電源，先把載物臺(tái)貼近物鏡，向下微調(diào)載物臺(tái)，調(diào)清視野觀察。載玻片用完后，先后使用清水和蒸餾水沖洗干凈，放入恒溫箱烘干備用，保持載玻片干凈整潔。

1.1.3 集精杯 集精杯一般選用帶有刻度的棕色保護(hù)瓶，要對(duì)集精杯進(jìn)行編號(hào)，便于檢測(cè)精液。用完后的集精杯先用清水沖洗，再用試管刷清洗，并用蒸餾水再?zèng)_洗兩遍，插入試管架，在紫外線燈下消毒，放恒溫箱烘干備用。

1.1.4 水浴鍋及藥品 在采精前先打開(kāi)水浴鍋，水溫升到35 ℃時(shí)待用，溫度以實(shí)測(cè)為準(zhǔn)。藥品必須現(xiàn)配現(xiàn)用，注意觀察藥品的時(shí)效性。常用藥品如精液稀釋劑粉劑和孕馬血清等。

1.1.5 輸精器械 輸精前可用6 %的30 ℃葡萄糖沖洗輸精器2～3次，使用前調(diào)整好刻度，輸精槍用完后用清水沖洗干凈，可用酒精浸泡數(shù)小時(shí)，再用蒸餾水沖洗兩遍，消毒備用。取用時(shí)手禁止觸摸小頭，防止污染。

1.1.6 健康母兔 應(yīng)選擇健康無(wú)病，體質(zhì)健壯，達(dá)到配種日齡，無(wú)疾病處于發(fā)情期的母兔進(jìn)行授精。經(jīng)產(chǎn)母兔輸精前50～52 h注射30 U孕馬血清。

1.2 采精

常用母兔誘情或假陰道采精法。左手抓住母兔的雙耳及頸皮，右手握假陰道，用小指和無(wú)名指護(hù)住集精杯，伸入發(fā)情母兔腹下，至后軀外陰下，方向與公兔陰莖挺出的方向一致。公兔爬跨時(shí)，用假陰道迎接陰莖。當(dāng)公兔后軀蜷縮，發(fā)出“咕咕”叫聲，表示射精完畢。豎起假陰道，以防精液流失。

1.3 精液品質(zhì)檢查

1.3.1 外觀檢查 正常公兔的精液呈淡乳白色，略帶腥味。兔子的射精量一般在0.2～2 mL之間，平均為0.8 mL。pH一般為6.8～7.5。正常情況下，每毫升含精子0.7～2.0×107個(gè)。新鮮精液精子活力應(yīng)達(dá)0.7以上。

1.3.2 顯微鏡檢查 顯微鏡檢查主要是對(duì)精子密度和活力進(jìn)行評(píng)定。常用目測(cè)法對(duì)精子密度進(jìn)行估算，將精子的密度評(píng)定為“稀”、“中”和“密”三個(gè)等級(jí)。正常情況下，精子活力應(yīng)在0.5級(jí)以上方可用于輸精，在0.5級(jí)以下會(huì)導(dǎo)致受精率偏低。家兔的精子密度隨季節(jié)變化較為明顯。不同季節(jié)的精子活力差異十分明顯，3～5月平均活力0.61級(jí)，9～10月平均活力為0.15級(jí)，12月～次年2月平均活力0.51級(jí)。

1.4 精液的稀釋

精液稀釋的目的是為了擴(kuò)大精液量，延長(zhǎng)精子存活時(shí)間。在稀釋液配制時(shí)要做到“三等一緩”，即等溫(35～37 ℃)、等滲(0.85 %)、等值(pH=6.4～7.8)，緩慢沿管壁注入稀釋液，稍加搖晃即可。成熟的精子不能通過(guò)同化作用將外界物質(zhì)變成本身的成分。為使精子的能量不被快速消化，可加入簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，例如：山梨醇、果糖、甘油磷酸膽堿(GPC)和磷脂。為了維持精液正常的pH值，常加入檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉等保護(hù)成分和緩沖物質(zhì)。為防止冷凍，可加入專門(mén)防冷保護(hù)劑，常用的有卵磷脂、卵黃等。同時(shí)，還可加入抑菌物質(zhì)，常用的有鏈霉素(每mL稀釋液加人500～1 000 μg)、青霉素(每mL稀釋液加入500～1 000單位)。家兔精液稀釋液常用5 %的C6H12O6溶液或0.9 %的NaCl稀釋9倍。稀釋后的精液應(yīng)作一次顯微鏡檢查，發(fā)現(xiàn)精子活力不強(qiáng)或死亡過(guò)多則不能用作輸精。取一滴稀釋后的精液鏡檢，活力無(wú)變化即可輸精。

1.5 刺激排卵

家兔是誘發(fā)排卵動(dòng)物，母兔發(fā)情后，如無(wú)交配或其他蘊(yùn)含物刺激則不會(huì)排卵。常用的刺激母兔排卵的方法有：生殖激素刺激排卵法，試情公兔刺激排卵法。未發(fā)情的母兔，可先用孕馬血清促性腺激素(PMSG)每天肌肉注射60～80 U，連用2 d，第3 d觀察母兔發(fā)情情況。一般情況下，對(duì)每只母兔注射促排卵素3號(hào)0.5 μg有較好的促排卵效果。

1.6 輸精方法

發(fā)情母兔應(yīng)輸精1～2次，每次0.5 mL。開(kāi)始輸精時(shí)，抓住母兔的背部，使母兔臀部略朝上。家兔是雙子宮動(dòng)物，陰道長(zhǎng)8～10 cm，輸精部位應(yīng)在陰道深部子宮勁深處為好。取經(jīng)過(guò)稀釋的精液0.5 mL(約含精子1～3×107個(gè))慢慢插入母兔陰道內(nèi)約6～8 cm處即可輸精。輸精器及精液必須與兔子體溫接近，輸精前可放在35 ℃的溫水保溫。插入時(shí)應(yīng)輕輕向前上方旋動(dòng)，邊旋邊進(jìn)，切不可損傷生殖道。插入后可來(lái)回輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)幾次，有助于刺激子宮頸。抽出輸精器時(shí)應(yīng)邊轉(zhuǎn)動(dòng)邊抽出，以防精液隨輸精器溢出。抽出輸精器后，可輕拍打一下兔子的臀部，防止精液倒流，整個(gè)過(guò)程要求在無(wú)菌條件下完成。

2 兔人工授精的優(yōu)點(diǎn)

2.1 提高種兔利用率

人工授精極大提高了優(yōu)良種公兔的利用率。自然交配公母比例一般為1∶4～6，人工授精技術(shù)可擴(kuò)大到1∶80～120，可節(jié)約種公兔的購(gòu)置和飼養(yǎng)管理費(fèi)用。采用優(yōu)質(zhì)種兔精液，還可提高母兔的情期受胎率及窩產(chǎn)仔數(shù)。同時(shí)，人工授精技術(shù)可以隨時(shí)對(duì)精液質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，避免因精液質(zhì)量問(wèn)題造成的不良影響。

2.2 降低飼養(yǎng)成本

人工授精技術(shù)是提高養(yǎng)兔生產(chǎn)性能的重要措施。人工授精和自然交配相比，節(jié)省財(cái)力、人力和物力?？蓽p少種公兔飼養(yǎng)量，提高公兔配種效率，節(jié)省飼料和設(shè)備費(fèi)用，提高養(yǎng)兔效益。精液便于運(yùn)輸，使母兔配種不受地域限制。人工授精技術(shù)適用于肉兔集約化、工廠化生產(chǎn)，人工授精的時(shí)間通常比本交所花的時(shí)間少。

2.3 克服配種難題

采用人工授精技術(shù)，可解決體型較大或肥胖的肉兔自然交配難題。人工授精可不受公兔年齡、時(shí)間、地域及國(guó)界的限制，可充分發(fā)揮優(yōu)秀種公兔的利用價(jià)值，做到適時(shí)配種，提高受精率。精液冷凍技術(shù)能使受精率達(dá)到80 %以上，該技術(shù)可長(zhǎng)期將優(yōu)秀品系保存，穩(wěn)定遺傳給后代。人工授精技術(shù)操作簡(jiǎn)單，技術(shù)容易掌握，有利于優(yōu)秀種公兔遺傳潛力的發(fā)揮，加快兔的改良速度。

2.4 減少疾病傳播

人工授精可以避免公母兔直接接觸，減少疾病的傳播。本交時(shí)無(wú)法對(duì)公兔生殖器官進(jìn)行徹底消毒，容易造成疾病的感染和傳播。在公兔交配器官有病時(shí)，自然交配后可能導(dǎo)致母兔繁殖疾病。

3 兔人工授精缺點(diǎn)

如兔場(chǎng)生產(chǎn)水平不高，技術(shù)欠缺，設(shè)備簡(jiǎn)陋，消毒滅菌不嚴(yán)格，可能會(huì)造成受胎率低和產(chǎn)仔數(shù)少。建議先采取自然交配與人工授精相結(jié)合的繁育方式，待條件成熟以后再進(jìn)行推廣。

4 提高種兔繁殖力的措施

4.1 使用激素或藥物配合催情

初秋季節(jié)，母兔體況恢復(fù)欠佳，公兔性欲不足，受精前兩天待配種母兔統(tǒng)一肌肉注射兔用催情素1 mL，注射兔用排卵素1 mL。

4.2 合理安排種公兔采精

為發(fā)揮優(yōu)良種公兔作用，提高母兔受胎率和產(chǎn)仔數(shù)，在采精前對(duì)公兔進(jìn)行訓(xùn)練，對(duì)假陰道進(jìn)行科學(xué)處理，對(duì)公兔每周安排1 d集中采精，當(dāng)天采精2次。要合理控制好環(huán)境溫度，公兔陰莖在低于40 ℃環(huán)境中不易射精，如果環(huán)境溫度過(guò)高會(huì)對(duì)精液品質(zhì)造成影響。

4.3 掌握輸精的程序及要領(lǐng)

人工授精技術(shù)操作不當(dāng)是造成不孕的重要原因。輸精人員操作的熟練程度是影響人工授精效果的主要因素。一是精液的檢查和稀釋濃度。因輸入母兔體內(nèi)的精子需12 h才能與卵子結(jié)合，在此過(guò)程中會(huì)有大量的死亡，所以精液稀釋后要保證一定的數(shù)量、密度和活力，不能隨意配比。二是輸精的操作方法。正常輸精時(shí)，輸精管需越過(guò)尿道口進(jìn)入陰道內(nèi)，而輸精時(shí)母兔容易緊張，其尿道口與陰道連接處緊縮，輸精管難以插入，強(qiáng)制操作時(shí)，容易損傷母兔陰道。完成輸精后，沒(méi)有倒提母兔輕拍臀部或輸精時(shí)操作不當(dāng)造成母兔過(guò)于緊張而小便，都將會(huì)使輸入的精液倒流，影響輸精效果。

5 小結(jié)

兔生產(chǎn)效益好，成本低，產(chǎn)品附加值大，符合國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的需求。推廣兔的人工授精技術(shù)是加快兔種改良步伐，促進(jìn)養(yǎng)兔業(yè)健康發(fā)展的重要措施。家兔人工授精效果的好壞，既受公兔精液質(zhì)量和母兔自身狀況的影響，同時(shí)也受人為操作的因素影響。生產(chǎn)實(shí)際中要從人工授精配套技術(shù)需求入手，綜合開(kāi)展種兔繁殖控制技術(shù)研究，進(jìn)一步優(yōu)化種兔繁殖周期，科學(xué)制定兔人工授精配套技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化、專業(yè)化培訓(xùn)與示范推廣，逐步破解兔產(chǎn)業(yè)發(fā)展技術(shù)瓶頸，為推動(dòng)兔健康養(yǎng)殖提供技術(shù)參考，助推養(yǎng)兔產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效。