森林腦炎致雙相情感障礙患者的血清細(xì)胞因子水平研究

孫偉

(呼倫貝爾市精神衛(wèi)生中心，內(nèi)蒙古 牙克石 022150)

0 引言

森林腦炎，即蜱傳腦炎(Tick-borne encephalitis, TBE)，因TBE 病毒攻擊機(jī)體中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起，通常表現(xiàn)出發(fā)熱、眩暈、頭痛和精神紊亂等癥狀。TBE 病毒屬于黃病毒屬，黃病毒科，共包括三個亞型，即歐洲亞型(TBEV-Eu)、西伯利亞亞型(TBEV-Sib)和遠(yuǎn)東亞型(TBEV-FE)，其中TBEV-FE 亞型主要經(jīng)全溝硬蜱進(jìn)行傳播，流行于我國北部地區(qū)。雖然森林腦炎可以通過接種疫苗進(jìn)行預(yù)防，但過去十幾年，各地該病的發(fā)病率始終保持增長，相關(guān)研究一直是國內(nèi)外的重要課題。其中雙相情感障礙為森林腦炎常見臨床并發(fā)疾病。雙相情感障礙患者以反復(fù)發(fā)作的情緒惡化為特點(diǎn)，從重度抑郁癥發(fā)作到躁狂發(fā)作，或是相反發(fā)作。在許多患者中，該病的特征是病程逐漸加重、發(fā)作頻繁、恢復(fù)不完全、情感癥狀低于閾值且對治療不敏感。雙相患者的預(yù)期壽命縮短10-15 年，這不僅是因?yàn)樽詺⒙试黾樱€因?yàn)榇嬖谥T如血管疾病、糖尿病和其他代謝疾病等醫(yī)學(xué)合并癥[1]。近幾年，關(guān)于雙相情感障礙的神經(jīng)生物學(xué)研究正在不斷深入，越來越多的證據(jù)表明炎癥過程在雙相情感障礙的病理生理學(xué)中起主要作用[2]。

目前，森林腦炎致雙相情感障礙的病理學(xué)機(jī)制尚未明確，臨床上也缺乏統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)和治療方法，但諸多研究表明TBE 感染一般伴有細(xì)胞因子的產(chǎn)生[3,4]。本文利用流式細(xì)胞儀微球捕獲芯片(cytometric bead array，CBA)技術(shù)分析了森林腦炎致雙相情感障礙患者躁狂發(fā)作、混合發(fā)作及抑郁發(fā)作3 種狀態(tài)下血清白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、干擾素-γ(IFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平變化，從炎癥反應(yīng)角度探討森林腦炎致雙相情感障礙的可能機(jī)制。

1 對象與方法

1.1 研究對象

躁狂組：收集我院2016 年8 月至2018 年8 月期間精神科蜱咬傷住院患者，根據(jù)中國精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第3版(CCMD-3)雙相情感障礙躁狂發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)，共收集該類型患者21 例(男性13 例，女性8 例)，年齡35-62 歲，平均年齡46 歲。

混合組：收集我院同期精神科蜱咬傷住院患者，根據(jù)CCMD-3 雙相情感障礙混合發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)，共收集該類型患者18 例(男性11 例，女性7 例)，年齡25-65 歲，平均年齡39 歲。

抑郁組：收集我院同期精神科蜱咬傷住院患者，根據(jù)CCMD-3 雙相情感障礙抑郁發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)，共收集該類型患者23 例(男性11 例，女性12 例)，年齡28-55 歲，平均年齡42 歲。

對照組：為同期入院體檢健康人群，且無精神疾病家族史，共收集對照組20 例(男性10 例，女性10 例)，年齡22-63歲，平均年齡35 歲。

以上四組間性別、年齡均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。對上述各組對象實(shí)施靜脈穿刺采集血樣，離心(3500 rpm, 5 min)后收集血清，存于-20℃冰箱備用。

1.2 方法

使用楊氏躁狂評定量表(YMRS) 和漢密爾頓抑郁量表(HDRS) 分別評估躁狂和抑郁癥狀。急性躁狂或抑郁發(fā)作由DSM-IV-TR 標(biāo)準(zhǔn)定義。根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)將森林腦炎致雙相情感障礙患者分為三組：(1)混合組不應(yīng)滿足情緒發(fā)作的DSM-IV 標(biāo)準(zhǔn)，且YMRS 和HDRS 評分應(yīng)小于8；(2) 躁狂組 滿 足YMRS＞7 且HDRS＜7；(3) 抑 郁 癥 滿 足HDRS ＞7 且YMRS＜7。

圖1 森林腦炎致雙相情感障礙患者血清細(xì)胞因子水平的變化情況(＊＊：P＜0.05)

1.3 細(xì)胞因子的測定

儀器與試劑：測定所用的流式細(xì)胞儀(FACS Canto Ⅱ)和人Th1 /Th2 /Th17 CBA 試劑盒均購自美國BD 公司。

標(biāo)準(zhǔn)品的制備：將細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品置于分析稀釋液中，均勻混合溶解后靜置15 min，按照1:2、1:4，1:8、1:16、1:32、1:64、1:128 和1:256 的濃度梯度連續(xù)等比例稀釋。

待測樣品的前處理：將6 種(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α)捕獲微球各10μL 加入樣品管中，混勻后離心(1500 rpm, 5 min)，棄上清，加入PBS 洗液使微球重懸，制備得到捕獲微球混合液；在各進(jìn)樣管中依次加入50μL 待測樣品溶液、50μL 捕獲微球混合液及50μLPE 信號抗體，室溫避光孵育3h 后，于各管中加入1 mLPBS 洗液洗滌，離心(1500 rpm, 5 min)棄上清后，加入200μLPBS 洗液使微球重懸，充分混勻后上機(jī)檢測。

數(shù)據(jù)的測定：對所用流式細(xì)胞儀調(diào)試參數(shù)、設(shè)置程序后，分別對上述標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)行檢測，利用CellQuest 軟件導(dǎo)出數(shù)據(jù)文件后，用FACP 軟件進(jìn)行分析并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回算得到所測樣品各細(xì)胞因子水平。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 21.0 對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。使用ANOVA檢驗(yàn)分析各組的臨床特征；使用Mann-Whitney U 秩和檢驗(yàn)分析細(xì)胞因子水平(α=0.05)。

2 結(jié)果

2.1 雙相情感障礙患者的臨床特征分析

森林腦炎致雙相情感障礙躁狂組、混合組、抑郁組患者的YMRS 和HDRS 得分如表1 所示。

表1 雙相情感障礙患者的臨床特征分析

2.2 森林腦炎致雙相情感障礙患者的血清細(xì)胞因子水平分析

與對照組相比，森林腦炎致雙相情感障礙患者在各狀態(tài)下 的 血 清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α 水 平均升高( 圖1)，使用Mann-Whitney U 秩和檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中躁狂組患者的血清IL-6 水平升高幅度最大。

3 討論

森林腦炎為林業(yè)地區(qū)高發(fā)疾病，近幾年其發(fā)病率不斷增長，已成為影響林區(qū)居民健康的公共衛(wèi)生問題[5]。此外，已有諸多文獻(xiàn)表明森林腦炎患者通常會伴有嚴(yán)重的精神障礙，嚴(yán)重影響了此類患者的臨床治療[6]。值得一提的是，已有研究表明不論是森林腦炎還是雙相情感障礙患者均會表現(xiàn)出一定的炎癥反應(yīng)[7,8]，因此本文以森林腦炎致雙相情感障礙患者為研究對象，從炎癥反應(yīng)角度入手，探討此類疾病發(fā)生發(fā)展的可能病理生理基礎(chǔ)。

雙相情感障礙與其他精神疾病不同，在臨床上會突發(fā)出現(xiàn)兩種截然不同的形式，即躁狂癥和抑郁癥。本文的細(xì)胞因子水平分析結(jié)果表明，與對照組相比，森林腦炎致雙相情感障礙患者在躁狂發(fā)作、混合發(fā)作及抑郁發(fā)作3 種狀態(tài)下血 清 中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α 水 平 均顯著升高(P＜0.05)，與已有關(guān)于雙相情感障礙患者的細(xì)胞因子水平分析結(jié)果一致[9]；另外，躁狂組患者的血清IL-6 水平升高幅度最大，且與混合組和抑郁組水平相比呈現(xiàn)顯著差異(P＜0.05)，這一結(jié)果提示血清IL-6 水平的變化或與森林腦炎致雙相情感障礙的發(fā)作狀態(tài)有關(guān)。IL-6 是一種由T 細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌的多效細(xì)胞因子，其作用是刺激B 和T 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生急性炎癥蛋白，如高敏C 反應(yīng)蛋白等，此外，有人提出IL-6 可與TNF-α 以協(xié)同作用的方式增強(qiáng)機(jī)體免疫反應(yīng)[10]。本文中森林腦炎致雙相情感障礙患者不同發(fā)作狀態(tài)下的IL-6水平提示免疫失衡或是此類疾病發(fā)生發(fā)展的影響因素之一。另有研究表明高水平的細(xì)胞因子可使5-羥色胺和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)增加并破壞單胺信號傳導(dǎo)，從而引發(fā)情感障礙[11]。

關(guān)于雙相情感障礙的神經(jīng)生物學(xué)研究正在逐步深入，炎癥反應(yīng)作為影響疾病發(fā)生發(fā)展的因素之一，通過各細(xì)胞因子的共同作用，影響中樞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的功能及神經(jīng)遞質(zhì)的分泌。本文通過分析森林腦炎致雙相情感障礙患者在3 種發(fā)作狀態(tài)下的血清細(xì)胞因子水平，探討了炎癥反應(yīng)對疾病發(fā)生發(fā)展的影響，以期提供新的治療靶點(diǎn)。