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    油茶多酚提取物對SD大鼠降血脂和抗氧化作用的影響

    2021-02-26 03:13:08石浩何小娥丁仁惠王文龍黃謙游靜
    食品研究與開發(fā) 2021年4期
    關(guān)鍵詞:茶多酚高脂阿托

    石浩,何小娥,丁仁惠,王文龍,黃謙,游靜*

    (1.湖南應(yīng)用技術(shù)學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院,湖南 常德 415100;2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,湖南 長沙 410128;3.岳陽市食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心,湖南 岳陽 414000)

    油茶(Camellia oleifera Abel.),別名:茶子樹、茶油樹,為多年生木本糧油作物[1]。油茶適合生長在山區(qū)丘陵地帶,尤其適合在有機質(zhì)含量豐富的土壤中,是我國山區(qū)丘陵地區(qū)分布及栽培的主要經(jīng)濟林樹種之一[2]。茶油營養(yǎng)豐富,含有多種不飽和脂肪酸、天然維生素及多種人體所需的微量元素,且茶油產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟效益十分可觀[3]。最近幾年我國的油茶產(chǎn)業(yè)得到快速的發(fā)展,在產(chǎn)量和種植面積方面領(lǐng)先世界,尤其是在湖南、浙江、廣西、江西和貴州等地,產(chǎn)量和面積居全國前列。隨著油茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,其副產(chǎn)物油茶粕也隨之增加,我國每年有超過70萬噸油茶粕的產(chǎn)出[4]。油茶粕中含有大量的糖類、皂苷類、蛋白質(zhì)、多酚類和黃酮類物質(zhì)[5-6]。對油茶粕中功效物質(zhì)的開發(fā)與利用,可有效地提高油茶果的附加值,提高種植戶的經(jīng)濟效益。近些年來隨著人民生活水平的提高,現(xiàn)代飲食方式和飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大的變化,同時因工作、生活壓力的增加,導(dǎo)致體內(nèi)氧自由基(freeradical,F(xiàn)R)的快速增加[7],易引起高血壓、高血脂、動脈血管硬化、癌癥、早衰等,且相關(guān)疾病也越來越“年輕化”,因此如何通過食療來預(yù)防上述疾病已成為近年來的研究熱點[8-9]。據(jù)相關(guān)研究表明多酚具有改善血液循環(huán)、軟化血管、降血脂[10]、清除氧自由基、預(yù)防肥胖、保肝護(hù)肝、抗菌、抗輻射和預(yù)防誘變的作用[11-12]。本研究以大鼠、油茶多酚提取物為材料,采用多指標(biāo)深入分析油茶多酚對高脂日糧大鼠降血脂及抗氧化能力的效果,并探索其相關(guān)作用機理,為今后油茶多酚類物質(zhì)降血脂、保肝護(hù)肝、抗氧化等保健食品、藥品的開發(fā)與利用提供一定理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 材料與試劑

    油茶餅粕:油茶基地油茶果經(jīng)壓榨所得產(chǎn)物;基礎(chǔ)飼料、高脂飼料、SPF級雄性 SD大鼠[體質(zhì)量(125±5)g]:湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司;血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminatransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase,AST)測定試劑盒:深圳邁瑞醫(yī)療電子有限公司;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)測試盒:南京建成生物工程研究所;阿托伐他?。罕本┍贝缶S信生物科技有限公司;焦碳酸二乙酯(diethy pyrocarbonate,DEPC)、Trizol試劑、核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)反轉(zhuǎn)錄試劑盒:全式金生物技術(shù)有限公司;引物:上海生物工程技術(shù)有限公司合成;AB-8大孔吸附樹脂、木瓜蛋白酶(120萬U/g):上海索萊寶生物科技有限公司;乙醇、鎢酸鈉、鉬酸鈉、氫氧化鈉(均為分析純):國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    1.2 設(shè)備與儀器

    BS-200全自動生化分析儀:深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;JB-P5組織包埋、JJ-12J自動脫水機:俊杰電子有限公司;Wonbio-48R全自動樣品快速研磨儀:上海凈信實業(yè)發(fā)展有限公司;SUNRISE全自動酶標(biāo)儀:TECAN公司;GDS8000凝膠成像系統(tǒng):Syngene Gene Genius;Qiagen Rotor-Gene 7500 熒光定量PCR儀:北京北嘉美儀生物科技有限公司;Bio-Rad Power Pac 2000電泳儀:美國伯樂公司;SW-CJ-2D雙人單面超凈工作臺:上海書培實驗設(shè)備有限公司;ZW1105051705紫外可見分光光度計:上海光譜儀器有限公司;Thermo Savznt冷凍干燥儀:上海智巖科學(xué)儀器有限公司;DR-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:鄭州長城科工貿(mào)有限公司;SB-3200D超聲儀:寧波新芝生物科技股份有限公司。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 油茶多酚供試材料的制備

    參照李嘉偉等[13]的方法,略有修改。取100 g油茶粕粉末于2.5 L的大燒杯中,并加入2 L 40%的乙醇和2 mL 1%的木瓜蛋白酶浸泡1 h,然后在90℃的溫度下水浴超聲1.5 h,將提取液進(jìn)行抽濾后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀去除溶劑,直至無明顯醇味。將濃縮液調(diào)pH值至4,以3 BV/h的流速上柱(3.0 cm×70 cm、AB-8大孔吸附樹脂),先用蒸餾水洗脫至無色,再采用5 BV體積、60%乙醇、3 BV/h的流速進(jìn)行洗脫,每30 mL為一流分收集洗脫液。洗脫液經(jīng)顯色后合并,濃縮去除洗脫液。將濃縮液冷凍干燥至粉末。通過標(biāo)樣采用鎢酸鈉-鉬酸鈉顯色法測定其純度達(dá)74.53%。

    1.3.2 動物實驗及分組

    健康雄性大鼠60只,體重(125±5)g,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,按照體重隨機分為6組,分別為基礎(chǔ)飼料組:基礎(chǔ)飼料+10 mL/kg BW生理鹽水;高脂飼料組:高脂飼料+10 mL/kg BW生理鹽水;阿托伐他汀處理組:高脂飼料+10 mL/kg BW阿托伐他汀;油茶多酚處理組:高脂飼料+2.5、7.5、15 mL/kg BW油茶多酚。其中阿托伐他汀和油茶多酚濃度均為1 mg/mL。每天上午9∶00左右處理組灌胃藥劑一次,其余時間均自由飲水進(jìn)食,連續(xù)灌胃6周,最后一次給藥后禁食12 h(不禁水)。飼養(yǎng)結(jié)束后,取血液和組織測定相應(yīng)酶活指標(biāo)和基因表達(dá)水平。動物飼料:分籠喂養(yǎng),采用基礎(chǔ)飼料及高脂飼料飼喂小鼠。高脂飼料配方為:74.8%基礎(chǔ)飼料、4%膽固醇、6%蛋黃粉、5%白糖、10%豬油、0.2%膽鹽。放于4℃冰箱冷藏保存。飼養(yǎng)條件:室溫(22℃~25℃,濕度40%~70%),12 h周期明暗交替,自由采食飲水,保持良好通風(fēng),墊料隔天一換,每2周對籠具清洗并消毒1次。

    1.3.3 大鼠體況變化的測定

    每天觀察SD大鼠的毛色、活動、飲食狀態(tài)、精神狀況等,每周稱體重一次,記錄。肝體比計算:肝體比(肝系數(shù))/%=肝重(g)/體重(g)×100。

    1.3.4 血清生化指標(biāo)的測定

    谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇水平,按照試劑盒說明書用BS-200全自動生化分析儀進(jìn)行測定。

    1.3.5 肝臟勻漿中抗氧化指標(biāo)的測定

    將制備好的10%勻漿液用高速冷凍離心機4 000 r/min,離心10 min,取上清液,測定肝臟超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性及丙二醛含量。SOD、GSH-Px、MDA分別采用WST-1法、比色法、硫代巴比妥酸(thibabituric acid,TBA)法測定。嚴(yán)格按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進(jìn)行測定。

    1.3.6 RNA提取與實時熒光定量PCR分析

    實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative realtime polymerase chain reaction,qPCR)分析,采用 Trizol試劑盒說明方法提取RNA,RNA逆轉(zhuǎn)錄成互補脫氧核糖核酸(complementary deoxyribo nucleic acid,cDNA),然后以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴增,引物序列見表1。反轉(zhuǎn)錄 PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)反應(yīng)體系:10 μL SYBR Green qPCR SuperMix,1 μL 模板,1 μL 上游引物(10 nmol/L),1 μL 下游引物(10 nmol/L),滅菌后的雙重蒸餾水補充至20 μL。反應(yīng)條件:94℃條件下預(yù)變性30 s,94℃條件下變性5 s,60℃條件下退火15 s,熒光檢測15 s,循環(huán)40次。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作為內(nèi)參,參照Schmittgen[14]的方法,相對定量2-ΔΔCt分析法計算樣品中各基因的相對表達(dá)量。

    表1 熒光定量PCR引物序列信息Table 1 Primer sequences used in qPCR analysis

    1.3.7 數(shù)據(jù)處理

    采用WPS 2018軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理及制圖,采用Statistix 8.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,所有指標(biāo)數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示,并用最小顯著極差法(least significant difference,LSD)對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異檢驗。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 對高脂日糧大鼠體重影響測定結(jié)果

    油茶多酚或阿托伐他汀處理對高脂日糧大鼠體重影響的測定結(jié)果見表2。

    表2 對高脂日糧大鼠體重影響效果Table 2 Effects on body weight of high-fat diet rats

    由表2可知,各組大鼠初始體重基本保持在150 g~160 g之間。各組大鼠經(jīng)過6周不同飼料喂養(yǎng),以及阿托伐他汀或油茶多酚處理后,各組大鼠間的體重具有較大的差異,其中高脂飼料組大鼠體重及肝體比均最大,分別達(dá)到了398.74 g、4.31%,除與2.5 mL/kg BW油茶多酚組大鼠肝體比不具有極顯著性差異外,高脂飼料組與其它處理組均有極顯著性差異(P<0.01),說明各處理均有一定的效果。經(jīng)過阿托伐他汀、油茶多酚處理后高脂日糧大鼠的體重有了一定量的減少,且油茶多酚處理組效果略好于阿托伐他汀處理組,15mL/kgBW油茶多酚處理的效果最好。

    2.2 對高脂日糧大鼠血脂及相關(guān)酶活性的影響

    油茶多酚或阿托伐他汀處理對高脂日糧大鼠血脂及相關(guān)酶活性影響的測定結(jié)果見表3。

    表3 對大鼠血脂及相關(guān)酶活性的影響Table 3 Effects on serum lipid levels and related enzyme activities of rats

    由表3可知,總膽固醇含量除了2.5 mL/kg BW油茶多酚處理組與高脂飼料組(3.02 mmol/L)不具有極顯著性差異外,其余處理組均有較大程度的降低(P<0.01),且阿托伐他汀處理組和15 mL/kg BW油茶多酚處理組效果較好,與基礎(chǔ)飼料組不具有極顯著性差異(P>0.01)。各組大鼠經(jīng)阿托伐他汀或油茶多酚處理后甘油三酯的含量均遠(yuǎn)低于高脂飼料組,但都高于基礎(chǔ)飼料組(P<0.01),說明有一定降低甘油三酯的效果,但相對基礎(chǔ)飼料組不能完全清除。除15 mL/kg BW劑量油茶多酚處理組高密度脂蛋白(1.62 mmol/L)相對于高脂飼料組具有極顯著性升高外,其余處理組均不具有極顯著性。阿托伐他汀和油茶多酚處理組低密度脂蛋白均低于高脂飼料組,且均具有極顯著性差異。高脂飼料組大鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性最高,分別達(dá)到了77.42 U/L、121.36 U/L,說明高脂飼料組大鼠肝臟受損最為嚴(yán)重。各處理組大鼠經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后,2種酶的活性均有較大程度的降低,較高脂飼料組均具有極顯著性差異(P<0.01)。但除了15 mL/kg BW劑量處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與基礎(chǔ)飼料組不具有極顯著性差異外,其余處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活均遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)飼料組,且各處理組大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)飼料組。說明阿托伐他汀或油茶多酚處理可緩解及修復(fù)高脂日糧對大鼠肝臟的損傷,但不能完全阻止其損傷。

    2.3 對高脂日糧大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

    油茶多酚或阿托伐他汀處理對高脂日糧大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)影響的測定結(jié)果見表4。

    由表4可知,ACAT1是導(dǎo)致游離膽固醇向膽固醇酯轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵性酶。ACAT1的過量表達(dá)將導(dǎo)致肝臟酯化膽固醇和總膽固醇的含量增加。高脂飼料組大鼠ACAT1的相對表達(dá)量非常高(1.51),阿托伐他汀組含量最低,僅為高脂飼料組的64.24%,且低于油茶多酚處理組。DGAT2可催化甘油二酯合成TG并促進(jìn)脂滴(neutrallipids,LDs)的形成。高脂飼料組大鼠DGAT2的相對表達(dá)量最高(1.45),阿托伐他汀組和15 mL/kg BW多酚處理組相對表達(dá)量較低,分別為1.10、1.12。LCAT是一種固醇?;D(zhuǎn)移酶,可加強HDL對外周組織膽固醇的清除能力。高脂飼料組大鼠LCAT的相對表達(dá)量最低(0.52),阿托伐他汀或油茶多酚處理后LCAT的相對表達(dá)量均有較大程度的升高(P<0.01)。

    表4 對大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因相對表達(dá)量的影響Table 4 Effect on relative expression of the genes involved in lipid metabolism in rats livers

    解偶聯(lián)蛋白UCPs是哺乳動物特有的、存在于線粒體內(nèi)膜上的一種具有調(diào)節(jié)質(zhì)子跨膜轉(zhuǎn)運作用的轉(zhuǎn)運蛋白,可提高機體能量消耗。高脂飼料組大鼠UCP2的相對表達(dá)量最低(0.53),阿托伐他汀或油茶多酚處理后UCP2的相對表達(dá)量均有較大程度的升高(P<0.01)。MCD丙二酰輔酶A脫羧酶是調(diào)節(jié)脂肪酸氧化的重要因子,上調(diào)MCD基因的表達(dá)將有利于減少體內(nèi)游離脂肪酸(free fat acid,F(xiàn)FA)和肝臟中甘油三酯(TG)的含量。高脂飼料組大鼠MCD的相對表達(dá)量最低(0.28),阿托伐他汀或油茶多酚處理后MCD的相對表達(dá)量均有較大程度的升高(P<0.01)。CPT-1肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶在脂肪氧化的初期起到了催化作用,同時對脂肪氧化的整個過程起著調(diào)節(jié)作用。高脂飼料組大鼠CPT-1的相對表達(dá)量最低(0.56),阿托伐他汀或油茶多酚處理后CPT-1的相對表達(dá)量均有較大程度的升高(P<0.01)。FAS是脂肪酸合成的關(guān)鍵酶之一,F(xiàn)AS的基因表達(dá)的下調(diào),則能減少脂肪合成。高脂飼料組大鼠FAS的相對表達(dá)量最高(2.37),阿托伐他汀或油茶多酚處理后FAS的相對表達(dá)量均有較大程度的降低(P<0.01),其中15 mL/kg BW劑量茶多酚處理組表達(dá)量僅為高脂飼料組的56.54%。SREBP是脂質(zhì)代謝調(diào)控因子,其基因表達(dá)量的減少,可降低細(xì)胞內(nèi)總膽固醇含量。高脂飼料組大鼠SREBP的相對表達(dá)量最高(1.92),阿托伐他汀或油茶多酚處理后SREBP的相對表達(dá)量均有較大程度的降低(P<0.01)。其中15 mL/kg BW劑量茶多酚處理組表達(dá)量僅為高脂飼料組的60.41%。

    2.4 對高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)的測定結(jié)果

    油茶多酚或阿托伐他汀處理對高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)影響的測定結(jié)果見表5。

    表5 對高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effect on antioxidant index of high-fat diet rat liver homogenate

    由表5可知,高脂飼料組中SOD、GSH-Px酶活性均最低,分別僅為281.35、509.41 U/mg,大鼠經(jīng)阿托伐他汀或油茶多酚處理后,相應(yīng)的酶活性均有較大程度的提高,相對于高脂飼料組均具有極顯著性差異(P<0.01),且15 mL/kg BW茶多酚處理組SOD酶活性增加最多,阿托伐他汀處理組GSH-Px酶活性增加最多。但是阿托伐他汀或油茶多酚處理組SOD、GSH-Px兩指標(biāo)均低于基礎(chǔ)飼料組。高脂飼料組中MDA的含量最高,達(dá)到了3.14 nmol/mg,大鼠經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后MDA的含量有了較大程度的降低,且阿托伐他汀藥物處理組和15 mL/kg BW茶多酚處理組效果較好,其MDA含量接近了基礎(chǔ)飼料組(P>0.01),可較大程度地減輕膜脂的過氧化損傷。

    2.5 對高脂日糧大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)量的影響

    油茶多酚或阿托伐他汀處理對高脂日糧大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)量影響的測定結(jié)果見表6。

    表6 對大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)水平的影響Table 6 Effects on the expression of antioxidant genes in rat livers

    由表6可知,高脂飼料組SOD1基因的相對表達(dá)量最低,僅為0.56,經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后,大鼠肝臟組織中SOD1基因的表達(dá)有極顯著性增加(P<0.01),且15 mL/kg BW茶多酚處理組效果最好,相對于高脂飼料組增加了1.93倍。高脂飼料組CAT基因同樣非常低,僅為0.41,此時阿托伐他汀處理組效果最好,相對于高脂飼料組增加了3.07倍。GPX-1調(diào)控著GSH-Px酶的活性,可阻斷活性氧對機體造成的進(jìn)一步損傷,高脂飼料組GPX1基因相對表達(dá)量也非常低,僅為0.68,此時15 mL/kg BW油茶多酚處理組效果最好,相對于高脂飼料組增加了1.36倍。谷氨酰半胱氨酸連接酶(glutamatecysteine ligase,GCL)是 GSH-Px生物合成的限速酶,各處理組GCLM基因的相對表達(dá)量都非常高,均遠(yuǎn)超高脂飼料組和基礎(chǔ)飼料組,其中阿托伐他汀處理組效果最好(1.76),相對于基礎(chǔ)飼料組提高了0.76倍。

    3 結(jié)論與討論

    實驗以油茶多酚和大鼠作為研究對象。大鼠經(jīng)過高脂日糧喂食6周后,相對于基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠體重有了較大程度的提高,同時肝體比也相對于基礎(chǔ)飼料組增加了許多,說明經(jīng)過高脂飼料飼養(yǎng)能讓大鼠在短期時間內(nèi)快速增重,高脂飼料處理效果較好。當(dāng)采用油茶多酚對高脂日糧大鼠進(jìn)行按時灌胃后,相對于高脂飼料組大鼠體重和肝體比有所下降。大鼠經(jīng)過高脂日糧喂食后肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性均具有較大程度的提高,此時大鼠肝臟受到了一定程度的損傷,且含量越高,損傷越嚴(yán)重,大鼠經(jīng)過油茶多酚處理后,相對于高脂飼料組兩種酶活性均有較大程度的降低(P<0.01),說明油茶多酚具有一定保護(hù)肝臟的作用。同時經(jīng)過油茶多酚喂養(yǎng)高脂飼料處理后的大鼠,大鼠體內(nèi)總膽固醇TC、甘油三酯TG、低密度脂蛋白LDL-C的含量較高脂飼料組具有極顯著水平的降低(P<0.01),而高密度脂蛋白HDL-C的含量具有一定程度的提高。

    相對于高脂飼料組,油茶多酚處理組大鼠基因ACAT1、DGAT2、FAS、SREBP 的相對表達(dá)量具有明顯的降低(P<0.01)。ACAT1是一種具有催化作用的多聚體變構(gòu)酶,也是形成膽固醇酯的唯一性關(guān)鍵酶,ACAT1基因的下調(diào)表達(dá)將有利于總膽固醇TC含量的降低[15]。DGAT2可以促進(jìn)腸道對脂肪的吸收作用,同時能夠催化甘油二酯合成TG并促進(jìn)LDs的形成,通過下調(diào)DGAT2基因的表達(dá)可以避免甘油三酯和膽固醇在肝臟中的大量形成與堆積[16]。SREBP是導(dǎo)致甘油三酯重新合成途徑的重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,同時也是調(diào)控脂質(zhì)代謝的重要轉(zhuǎn)錄因子,其基因表達(dá)量的減少,可有效降低細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量[17]。同時通過減少FAS基因的表達(dá),可抑制肝臟中脂肪酸的合成,減少了脂質(zhì)的聚集[18]。相對于高脂飼料組,油茶多酚處理組大鼠基因LCAT、UCP2、MCD、CPT-1 的相對表達(dá)量具有明顯的升高(P<0.01)。LCAT基因使HDL表面游離膽固醇的酯化增加,LCAT基因的上調(diào)表達(dá),可加強HDL對外周組織膽固醇的清除能力,降低膽固醇含量[19]。通過增強UCP2基因表達(dá),可提高機體能量消耗,從而避免白色脂肪過度蓄積及肥胖的發(fā)生,這也可能是其具有或可增強減肥效果的原因之一[20]。MCD是調(diào)節(jié)脂肪酸氧化的重要因子,它能催化丙二酰輔酶A轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴]o酶A和二氧化碳,上調(diào)MCD基因的表達(dá)則有利于減少體內(nèi)的游離脂肪酸(FFA)和肝臟中甘油三酯(TG)的積累[21]。CPT-1能夠介導(dǎo)調(diào)控將長鏈脂肪酸從細(xì)胞質(zhì)胞液運送至線粒體進(jìn)行β-氧化,上調(diào)CPT-1基因的表達(dá)可提高脂肪酸在肝細(xì)胞中的氧化,降低細(xì)胞中脂質(zhì)的積累[22]。

    肝臟作為食物、藥物甚至毒素的主要代謝器官,含有豐富的綜合功能抗氧化酶。相對于高脂飼料組,茶多酚處理組大鼠肝臟體內(nèi)SOD、GSH-Px酶活性極顯著升高,MDA含量極顯著降低。SOD和GSH-Px是抗氧化酶系統(tǒng),具有較強清除自由基的作用。MDA是脂質(zhì)氧化后的產(chǎn)物,可通過MDA含量的多少間接反映膜脂過氧化的程度。油茶多酚具有很好的抗氧作用,可提高體內(nèi)抗氧化酶的活性,提高機體抗氧化能力。相對于高脂飼料組,油茶多酚處理組大鼠抗氧化基因SOD1、GPX1、CAT、GCLM的相對表達(dá)量具有明顯的升高(P<0.01)。SOD 可將 O2-快速還原成 H2O2,從而達(dá)到清除超氧自由基的作用,同時H2O2再經(jīng)過GSH-Px和CAT的作用還原成H2O[23]。GPX1是GSH-Px家族中存在最為廣泛的一種酶,可有效地阻止活性氧對機體組織的損傷。谷氨酰半胱氨酸連接酶在GSH生物合成的過程中起到了限速酶的作用,同時GCL的調(diào)節(jié)亞基(GCLM)和催化亞基(GCLC)是一種重要的抗氧化蛋白酶[24],GCLM上調(diào)表達(dá)將有利于自由基的清除。

    同時15 mL/kg BW油茶多酚和10 mL/kg BW阿托伐他汀對高脂日糧大鼠均具有較強降血脂和抗氧化的作用。目前本文對茶多酚降血脂、抗氧化的實驗還處在大鼠動物實驗階段,后期可對靈長類動物代謝實驗作進(jìn)一步的研究。從而為今后相關(guān)降血脂、抗氧化功能產(chǎn)品的開發(fā)提供一定理論依據(jù),以進(jìn)一步的促進(jìn)油茶資源開發(fā)、利用,提高其經(jīng)濟價值。

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