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    火力楠種胚組培快繁研究

    2021-02-26 07:50:02
    植物研究 2021年1期
    關(guān)鍵詞:褐化芽苗火力

    劉 英

    (中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所,廣州 510520)

    火力楠(Michelia macclurei Dandy)又名醉香含笑,為木蘭科(Dagnoliaceae)含笑屬(Magnolia)常綠喬木,分布于我國(guó)廣東、海南和廣西北部以及越南北部,在我國(guó)福建、云南等地亦有引種。其生長(zhǎng)速度快,適應(yīng)性強(qiáng),已成為我國(guó)南方主要造林樹種之一。其樹干通直,木材紋理美觀,有香氣,硬度較高且耐腐,易干燥,少開裂而不反翹,是優(yōu)良的家具和建筑用材。其樹型美觀、花朵艷麗,是優(yōu)良的木本花卉、園林樹種;因其燃燒性差,也是我國(guó)南方一個(gè)主要的防火林帶樹種[1]。

    近年來(lái),林業(yè)科技工作者從火力楠種質(zhì)資源收集與評(píng)價(jià)[2]、苗木培育及栽培技術(shù)[3]、木材與林副產(chǎn)加工[4]等方面開展系列研究,拓展了火力楠開發(fā)應(yīng)用前景,造林規(guī)模日益增大。目前生產(chǎn)上主要應(yīng)用種子繁育造林苗,由于種苗差異大,林木分化嚴(yán)重,林分生產(chǎn)力難以提高。應(yīng)用前期優(yōu)良種質(zhì)材料開展組培快繁研究,將有利于良種壯苗的規(guī)模化生產(chǎn),推動(dòng)火力楠種植業(yè)的快速發(fā)展。

    木蘭科植物含有較多的酚類物質(zhì),容易褐化造成組織壞死而引發(fā)組培失?。?],增大組培難度。褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生因物種、品種及個(gè)體而異[6],亦與無(wú)機(jī)鹽濃度[6~7]、培養(yǎng)基的NH4+、NO3-濃度[8]有關(guān),選擇合適的基本培養(yǎng)基以及探究適宜的抗褐化措施是木蘭科植物組培快繁成功的關(guān)鍵所在。對(duì)于火力楠而言,僅柳曼瓊等[9]和李雪等[10]開展過增殖和生根培養(yǎng)的初步研究,由于二者增殖苗生長(zhǎng)矮小,在生根培養(yǎng)之前均需要經(jīng)過壯苗環(huán)節(jié)才能達(dá)到生根瓶苗標(biāo)準(zhǔn),從而導(dǎo)致培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng),生產(chǎn)成本升高,污染概率亦增大,不利于組培苗高效生產(chǎn);二者均以個(gè)別材料為對(duì)象,其生根培養(yǎng)基及生根效果差異大,說(shuō)明個(gè)體間存在組培難易程度差異。因此,改善火力楠繼代培養(yǎng)基配方,促進(jìn)增殖培養(yǎng)中芽苗的抽高生長(zhǎng),提高生根芽苗的出苗率,可提升組培苗生產(chǎn)效率;而且研究諸多個(gè)體間組培配方差異,對(duì)于火力楠組培苗規(guī)模化高效生產(chǎn)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

    本研究以火力楠2個(gè)優(yōu)良家系10個(gè)胚系為試驗(yàn)材料,從基本培養(yǎng)基、抗褐化、生根誘導(dǎo)等方面開展組培研究,旨在探索出適應(yīng)大多數(shù)胚系生長(zhǎng)的組培配方,實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)苗木的規(guī)?;a(chǎn),亦為優(yōu)良火力楠無(wú)性系的組培快繁研究奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    消毒試驗(yàn)選用家系A(chǔ) 和B 的種子與種胚,其種子采自廣東省云浮市廣東省仙菊林場(chǎng)火力楠采種母樹林。基本培養(yǎng)基篩選及聚乙烯比洛烷酮(簡(jiǎn)稱PVP)抗褐化濃度篩選試驗(yàn)應(yīng)用A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、B1 和B2 無(wú)性胚系。生根促進(jìn)劑類型及濃度試驗(yàn)選擇能抽高生長(zhǎng)的A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、B1和B2無(wú)性胚系。

    1.2 方法

    1.2.1外植體消毒及初代培養(yǎng)

    采用0.1%的升汞溶液分別對(duì)洗凈后種子浸泡處理15、20、30 和40 min,對(duì)洗凈后剝殼的胚浸泡處理3、6、9 和12 min,然后用無(wú)菌水浸泡清洗,5 min一次,處理4~5次,接種于初代培養(yǎng)基上,每瓶1粒種子,每個(gè)處理30瓶,重復(fù)3次。

    采用MS+0.5 mg·L-16BA+0.2 mg·L-1IBA 為初代培養(yǎng)基,pH6.0~6.2,35 g·L-1蔗糖。在光照強(qiáng)度為2 000~3 500 lx,室溫25±1℃,光照時(shí)間8 h·d-1的條件下培養(yǎng)30、60 和90 d 后調(diào)查消毒效果,統(tǒng)計(jì)染菌數(shù)、胚死數(shù)、無(wú)菌活胚數(shù),匯總統(tǒng)計(jì)分析染菌率、胚死率、無(wú)菌胚成活率和胚萌發(fā)率。

    1.2.2增殖培養(yǎng)

    基本培養(yǎng)基篩選試驗(yàn):剪取1.0 cm 左右的頂芽或側(cè)芽,設(shè)置MS、3/4MS、2/4MS、1/4MS和LY等5個(gè)基本培養(yǎng)基。LY培養(yǎng)基是由MS改良而來(lái),其大量元素含量為:250 mg·L-1NH4NO3、340 mg·L-1KH2PO4、555 mg·L-1MgSO4、1 900 mg·L-1KNO3、332 mg·L-1CaCl2、85 mg·L-1Ca(NO3)2。各培養(yǎng)基均添加0.2 mg·L-16BA、0.2 mg·L-1IBA、35 g·L-1蔗糖,微量元素和有機(jī)質(zhì)含量均為MS。

    聚乙烯比洛烷酮(簡(jiǎn)稱PVP)抗褐化濃度篩選試驗(yàn):采用LY 基本培養(yǎng)基,設(shè)置0、2、4、6和8 g·L-15個(gè)PVP濃度梯度開展抗褐化試驗(yàn)。

    培養(yǎng)35 d,調(diào)查統(tǒng)計(jì)以下指標(biāo):

    同時(shí),調(diào)查培養(yǎng)基褐化情況。培養(yǎng)基褐化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為:1 級(jí),培養(yǎng)基無(wú)褐化;2 級(jí),25%培養(yǎng)基淺色褐化;3級(jí),50%培養(yǎng)基淺色褐化;4級(jí),75%培養(yǎng)基淺色褐化;5 級(jí),100%培養(yǎng)基淺色褐化;6 級(jí),100%培養(yǎng)基深色褐化。

    以上試驗(yàn)每個(gè)胚系均設(shè)置5 個(gè)處理,每個(gè)處理重復(fù)15瓶。

    1.2.3生根培養(yǎng)

    選取苗高≥3.0 cm且具3片以上充分展開葉子的芽苗,應(yīng)用IBA 及ABT 2 號(hào)生根粉兩種生根促進(jìn)劑設(shè)置5 個(gè)濃度梯度開展雙因素試驗(yàn)。兩種生根促進(jìn)劑的濃度處理均為0(對(duì)照)、2.5、5.5、8.5、和11.5 mg·L-1?;诹偟龋?4]和李雪等[15]的生根誘導(dǎo)基本培養(yǎng)基,調(diào)整生根基本培養(yǎng)基為0.4MS,添加380 mg·L-1Ca(NO3)2、25 g·L-1蔗糖,微量元素和有機(jī)質(zhì)含量均為MS。每個(gè)胚系10 個(gè)處理,每個(gè)處理重復(fù)20 瓶,培養(yǎng)40 d 時(shí)調(diào)查生根條數(shù)和生根率。

    1.2.4煉苗與田間移植

    生根培養(yǎng)45 d后,在光照強(qiáng)度5 000~10 000 lx的條件下煉苗7~15 d,然后分生根與未生根瓶苗進(jìn)行移植。移植前用0.5%高錳酸鉀消毒育苗基質(zhì)(黃心土∶草炭土=7∶3,體積比),移植后一個(gè)星期內(nèi)蓋薄膜,并適當(dāng)遮蔭,按常規(guī)方法進(jìn)行組培苗管理。對(duì)于未生根瓶苗,移植前還需用500 mg·L-1的2 號(hào)生根粉浸泡10 min。移植30 和60 d 后分別調(diào)查統(tǒng)計(jì)生根和未生根瓶苗的移植成活情況。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和多重比較。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 外植體消毒

    應(yīng)用0.1%升汞溶液對(duì)火力楠種子消毒15~45 min,均未獲得無(wú)菌種子,即使是最長(zhǎng)的45 min處理,90 d 后依然從種孔內(nèi)長(zhǎng)出霉菌,污染率達(dá)100%。而應(yīng)用0.1%升汞溶液消毒胚的5 個(gè)處理中,除15 min 消毒處理胚全部殺死之外,其余4 個(gè)處理(消毒3~12 min)均能獲得無(wú)菌胚(見表1)。尤以6 和9 min 處理最好,無(wú)菌胚成活率和萌發(fā)率顯著高于其他處理(P<0.05),萌發(fā)率高達(dá)60%~65%,胚在消毒10~30 d 后萌發(fā)。3 min 處理略差,染菌率顯著增高;12 min 處理時(shí)間過長(zhǎng),胚死率顯著增高,萌發(fā)率顯著降低。

    表1 火力楠胚外植體的消毒效果Table 1 DisinfectioneffectforembryoexplantsofM.mac?clurei

    2.2 初代培養(yǎng)基對(duì)胚培養(yǎng)的影響

    各胚系在MS 培養(yǎng)基(MS+6BA 0.5mg·L-1+IBA 0.2mg·L-1)上進(jìn)行初代培養(yǎng)(見圖1),第一代(培養(yǎng)45 d)形態(tài)生長(zhǎng)正常,不同胚對(duì)6BA 的敏感程度差異明顯,出現(xiàn)直接誘導(dǎo)叢芽、單芽、未長(zhǎng)芽等現(xiàn)象。轉(zhuǎn)接3 代時(shí),胚生長(zhǎng)嚴(yán)重分化,出現(xiàn)正常生長(zhǎng)、葉片及芽黃化及培養(yǎng)基褐化、頂芽枯死、葉片變形、生根后側(cè)芽仍然死亡等情況。由此可見,大多數(shù)火力楠胚在MS培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良,而且對(duì)于部分胚系而言,6BA 濃度(0.5 mg·L-1)偏高,存在玻璃化風(fēng)險(xiǎn)。因此,增殖培養(yǎng)時(shí)需要優(yōu)化基本培養(yǎng)基,降低6BA濃度。

    2.3 大量元素對(duì)火力楠增殖培養(yǎng)的影響

    大量元素含量對(duì)各胚系增殖影響顯著(見表2~3),5 個(gè)處理間差異達(dá)到顯著水平。采用MS 基本培養(yǎng)基(大量元素含量為4 410 mg·L-1),80%的胚系出現(xiàn)嚴(yán)重玻璃化及褐化、爛芽、死芽等現(xiàn)象;1/4MS 基本培養(yǎng)基(含量為1 102.5 mg·L-1)處理的增殖芽少,葉片變形,生長(zhǎng)緩慢;3/4MS 基本培養(yǎng)基(含量為3 307.5 mg·L-1)可以緩解前二者的部分問題,但不能生產(chǎn)高3 cm 以上的芽苗;采用1/2 MS基本培養(yǎng)基(含量為2 205 mg·L-1),A6、B1、B2 等3個(gè)胚系可生產(chǎn)高3 cm 以上的芽苗,但其比例小于10%,其余70%的胚系不能產(chǎn)苗;LY 基本培養(yǎng)基(含量為3 520 mg·L-1)處理的芽苗生長(zhǎng)正常,80%胚系(A2 和A4 例外)的平均增殖芽數(shù)達(dá)到2.5 個(gè)以上,90%胚系(A8 未抽高)明顯抽高,3 cm 以上芽苗占比最高達(dá)到50.8%,各項(xiàng)指標(biāo)顯著優(yōu)于其他4個(gè)培養(yǎng)基處理。

    各胚系對(duì)大量元素含量的需求差異顯著,A6和B1在1/4MS~MS 各種培養(yǎng)基上均能正常生長(zhǎng),其他80%胚系只能在1/4MS~1/2MS 培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)良好,但是所有胚系在LY 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好。各胚系的平均芽數(shù)、平均芽高、高3 cm以上芽苗平均占比在相同培養(yǎng)基上差異亦達(dá)到顯著水平。

    大量元素含量對(duì)增殖培養(yǎng)基的褐化影響差異顯著(見表4),各胚系在1/4MS~MS 的總鹽份含量中,隨著含量的增大褐化顯著加??;1/4MS 培養(yǎng)基的褐化程度顯著高于LY,1/2MS~MS 培養(yǎng)基的褐化程度則極顯著高于LY(P<0.01)。由此可見,LY 基本培養(yǎng)基抗褐效果最好。對(duì)于每個(gè)培養(yǎng)基處理,各胚系間褐化程度均差異顯著。

    2.4 抗氧化劑對(duì)火力楠增殖培養(yǎng)的影響

    添加PVP 能夠有效吸附酚類化合物,降低醌的合成,從而減小褐化為害。在0~4 g·L-1濃度范圍內(nèi),隨著濃度的增加各胚系褐化為害顯著降低(見表5);4~8 g·L-1濃度范圍內(nèi),隨著濃度的增加褐化為害差異不顯著(P≥0.05);因此,4 g·L-1為最佳使用濃度。在0~8 g·L-1PVP 濃度范圍內(nèi),各胚系間的褐化為害差異顯著,褐化最輕的胚系A(chǔ)6 和B1 與褐化最重的A5、A7 和A8 差異達(dá)到顯著水平(P<0.05)。

    PVP的添加對(duì)增殖芽數(shù)的影響不大(見表6)。在0~8 g·L-1濃度范圍內(nèi),各胚系平均芽數(shù)隨濃度的增加小幅升高,但差異未達(dá)顯著水平。胚系間平均芽數(shù)差異顯著。B2 平均芽數(shù)最多,與A3、A5、A6 大多差異不顯著,而顯著高于其他胚系;A2、A4平均芽數(shù)最少,顯著低于其他胚系。

    PVP 的添加有利于增殖芽苗的抽高生長(zhǎng)(見表6)。在0~8 g·L-1的濃度范圍內(nèi),各胚系隨PVP濃度的增加苗高生長(zhǎng)增大。A8在6 g·L-1濃度時(shí)才顯著抽高生長(zhǎng),且無(wú)高3 cm以上的芽苗產(chǎn)出;其他9 個(gè)胚系在4 g·L-1濃度時(shí),苗高生長(zhǎng)顯著增大,且隨PVP 濃度的增加,高3 cm 以上芽苗占比亦增大,且濃度達(dá)4 g·L-1以上時(shí)基本穩(wěn)定。

    2.5 生根促進(jìn)劑對(duì)火力楠生根培養(yǎng)的影響

    ABT 2 號(hào)生根粉生根誘導(dǎo)效果極顯著高于IBA(見表7)。2.5 mg·L-1濃度時(shí),2 號(hào)生根粉誘導(dǎo)50%以上胚系生根;8.5 mg·L-1時(shí)誘導(dǎo)近70%胚系生根,最高生根率達(dá)為93.6%。IBA 在2.5~5.5 mg·L-1濃度范圍內(nèi)僅誘導(dǎo)10%胚系生根,8.5 mg·L-1時(shí),誘導(dǎo)50%以上胚系生根,生根率均極顯著低于ABT2 號(hào)生根粉。9 個(gè)胚系間生根誘導(dǎo)差異極顯著。以ABT2 生根粉的處理效果比較,A1、A3 生根率最高,達(dá)到80%以上,A5、B1、A6 分別為55.8%、61.5%、35.6%,A4 僅5%,A2、A7、B2 不生根。

    A1 胚系在2.5~8.5 mg·L-1濃度范圍內(nèi),生根率隨濃度升高而極顯著升高,8.5 mg·L-1時(shí)達(dá)到最大值;11.5 mg·L-1時(shí),生根率又極顯著降低。生根條數(shù)隨濃度的升高而增多,8.5 和11.5 mg·L-1濃度處理顯著高于其他處理。其他胚系得生根率變化規(guī)律與A1相似。

    表2 大量元素濃度對(duì)火力楠繼代苗生長(zhǎng)的影響Table 2 Effects of macro-element concentration on growth of subculture plantlets for M.macclurei

    表3 大量元素濃度對(duì)火力楠增殖苗生長(zhǎng)的影響Table 3 Effects of macro-element concentration on growth of proliferating plantlets for M.macclurei

    表4 大量元素濃度對(duì)培養(yǎng)基褐化的影響Table 4 Effect of macro-element concentration on medium browning

    表5 PVP濃度對(duì)培養(yǎng)基褐化的影響Table 5 Effect of PVP concentration on medium browning

    表6 PVP濃度對(duì)增殖苗抽高生長(zhǎng)的影響Table 6 Effect of PVP concentration on height growth of plantlets

    2.6 瓶苗移植效果

    煉苗后,將瓶苗分類移植。30 d 后生根芽苗移植成活率高達(dá)90%以上,60 d 后未生根芽苗移植成活率達(dá)80%以上。

    3 討論

    利用種胚開展組培研究,能否獲得無(wú)菌外植體,主要與種子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、消毒方法有關(guān)。對(duì)于種孔緊密、外菌不易侵入的種子而言,確定好藥劑和消毒時(shí)間即可直接消毒種子獲得無(wú)菌外植體[11~12];帶胚蓋的棕櫚科種子,種子消毒后還需要去除胚蓋[13];火力楠種孔不緊密、無(wú)胚蓋,胚表面存有雜菌,消毒難度大,只有去除種殼取出胚進(jìn)行消毒才能成功。應(yīng)用0.1%升汞溶液消毒胚6~9 min,能獲得60%~65%無(wú)菌且可萌發(fā)的外植體。

    基本培養(yǎng)基是影響組培苗正常增殖的重要因素,也是引起褐化發(fā)生的主要因素之一[14]。大量研究表明,低濃度無(wú)機(jī)鹽有利于降低褐化[6~7],降低NH4+、提高NO3-濃度能減輕組織褐化[8]。有人采用1/2MS[9]和1/3MS[10]大量元素開展火力楠增殖培養(yǎng),盡管繁殖系數(shù)高,但其芽苗矮小,需經(jīng)30~35 d 壯苗培養(yǎng)方可進(jìn)行生根培養(yǎng)。本研究發(fā)現(xiàn),2個(gè)胚系在1/4~1MS 各種培養(yǎng)基上均能正常生長(zhǎng);其他8 個(gè)胚系在1/4~1/2MS 上才能正常生長(zhǎng),若大量元素濃度再增加,則導(dǎo)致增殖苗玻璃化及褐化加劇,與以往研究結(jié)果基本一致。所有胚系均在LY 培養(yǎng)基上增殖效果最佳,究其原因,與大量元素配比有關(guān)。LY 培養(yǎng)基調(diào)整了NH4NO3、KH2PO4和MgSO4的含量,并添加Ca(NO3)2,各元素配比發(fā)生變化,其鹽分含量為3 520 mg·L-1,比MS含量低,比其他1/4~3/4MS含量高,增殖芽苗生長(zhǎng)正常,極顯著降低褐化程度、提高增殖倍數(shù)和生根有效苗率。由此可見,調(diào)整大量元素配比相較鹽分濃度,對(duì)火力楠組培增殖效果影響更大。采用LY 培養(yǎng)基,僅A8 胚系難抽高,其余9 個(gè)胚系抽高生長(zhǎng)明顯,6 個(gè)胚系3 cm 以上高度芽苗占比在30%以上,2個(gè)胚系在50%。在最優(yōu)培養(yǎng)基LY 上,各胚系間褐化差異并沒有1/4MS~MS系列培養(yǎng)基明顯,說(shuō)明LY培養(yǎng)基具有其普適性。

    酚類物質(zhì)經(jīng)氧化形成醌類化合物,在氨酸酶的作用下,與繁殖材料的蛋白質(zhì)聚合,造成其他酶系統(tǒng)的失活而致代謝混亂,影響植物生長(zhǎng)。因此,對(duì)于酚類物質(zhì)含量高的木蘭科植物而言,解決褐化毒害問題是實(shí)現(xiàn)其組培成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。選擇適宜外植體[6]、基本培養(yǎng)基[6~7]、生根促進(jìn)劑類型及濃度[15~16]、添加抗氧化劑[15~18]是抗褐化的主要方法。PVP 是一種酚類物質(zhì)吸附劑,通過吸附酚類物質(zhì)阻止醌類物質(zhì)形成,達(dá)到抗褐化之目的[19]。如,天女木蘭在PVP 1 g·L-1濃度時(shí),能有效降低褐化傷害[17];景寧木蘭在PVP 0.5~2.0 g·L-1濃度內(nèi),褐化率隨濃度增加而顯著降低[18]。本研究中,在0~8 g·L-1PVP 濃度范圍內(nèi),各火力楠胚系褐化為害均先隨PVP 濃度增加而降低,到4 g·L-1時(shí)抗褐化效果顯著最佳,此后抗褐化效果趨于穩(wěn)定,說(shuō)明4 mg·L-1PVP 能有效地消除火力楠的褐化為害,PVP 用量較天女木蘭和景寧木蘭大得多。比較表3 和表6 可以看出,對(duì)于最佳抗褐化培養(yǎng)基LY 而言,添加PVP對(duì)于增殖芽數(shù)量效果不明顯,但能夠明顯提高增殖苗的抽高生長(zhǎng),表現(xiàn)在高3 cm 以上芽苗占比明顯增大,由15.2%~50.8%增至34.4%~75.8%。

    生根是植物的一個(gè)復(fù)雜生理生化過程,多數(shù)木蘭科植物組培生根難[20],其難易程度因樹種而異。李艷等添加NAA 1.0 mg·L-1在1/2MS 基本培養(yǎng)基上誘導(dǎo)白玉蘭、二喬玉蘭、紫玉蘭生根,生根率分別為68%、81%、43%[21];利用1/2MS 基本培養(yǎng)基開展火力楠生根培養(yǎng),柳曼瓊等添加細(xì)胞分裂素(ZT 0.5~0.6 mg·L-1)、生長(zhǎng)素(NAA 1.5~2.0 mg·L-1、IAA 2~2.5 mg·L-1)以及椰乳(15%~20%)誘導(dǎo)生根,獲得約29.4%的生根率[9],李雪等僅添加生長(zhǎng)素(IBA 2.0 mg·L-1及NAA 3.0 mg·L-1)即獲得93.25%的生根率[10],其生根難易程度差異可能與個(gè)體有關(guān)。這種現(xiàn)象在本研究中亦得到證實(shí),在最佳處理(8.5 mg·L-1ABT 2 號(hào)生根粉)下,生根率為0%~93.6%,胚系間差異極顯著,可能與個(gè)體的遺傳基因有關(guān)。ABT 2 號(hào)生根粉的生根效果極顯著優(yōu)于IBA,無(wú)論是ABT 2 號(hào)生根粉還是IBA,火力楠生根率隨著生根促進(jìn)劑濃度的升高呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì),在濃度為8.5 mg·L-1時(shí)生根效果最佳。究其原因,適宜濃度的IBA 有利于植株內(nèi)源IAA 的合成,促進(jìn)植物生根,過高濃度反而降低[22~23];ABT 2 號(hào)生根粉為廣譜性生根劑[24],其生根誘導(dǎo)效應(yīng)亦是如此。

    4 結(jié)論

    應(yīng)用0.1%升汞溶液消毒火力楠胚6~9 min,能成功獲得無(wú)菌胚系,其萌發(fā)率為60%~65%。采用LY 基本培養(yǎng)基,添加4 g·L-1PVP 進(jìn)行增殖培養(yǎng),能有效降低LY 培養(yǎng)基的褐化程度,促進(jìn)瓶苗抽高生長(zhǎng),顯著提高生根瓶苗出苗率。采用8.5 mg·L-1ABT2 號(hào)生根粉進(jìn)行生根培養(yǎng),生根率可達(dá)93.6%。瓶苗移植成活率在80%以上。總而言之,本研究獲得以火力楠種胚為外植體的組培方案,為后續(xù)火力楠無(wú)性系組培研究和優(yōu)質(zhì)苗木生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。

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