sTREM-1、WBC/LYM、IL-10在肺部細菌、支原體感染鑒別與病情評估中的價值

李 芳，馬生華，郝雙喜，王亞楠

(呼和浩特市第一醫(yī)院老年內(nèi)二科，呼和浩特 010031)

流行病學(xué)調(diào)查[1-2]顯示，肺部感染的發(fā)生率正逐年升高，我國每年因肺部感染死亡人數(shù)達12.5萬，居因疾病死亡原因的第5位。其中，支原體、細菌為肺部感染的主要致病菌。臨床上不同病原體引起的肺部感染，其患者的臨床表現(xiàn)、治療及預(yù)后均有差異。盡早明確肺部感染的病原菌類型，對臨床合理選擇抗菌藥物，及時控制患者病情具有重大意義[3-4]。然而，病原學(xué)檢測結(jié)果的獲得具有時間遷延性，故探究快速、有效的實驗室檢測指標(biāo)對早期鑒別病原菌類型非常重要。既往研究[5]指出，可溶性髓細胞表達觸發(fā)受體1(sTREM-1)的變化與機體感染的同步性較強，是反映細菌感染特異度較高的指標(biāo)，且不受其它臨床、生物學(xué)特征的影響。白介素-10(IL-10)為近年來發(fā)現(xiàn)的具有廣泛免疫學(xué)效應(yīng)的細胞因子。有資料[6]顯示，IL-10影響宿主對不同疾病的易感性和疾病發(fā)生過程。白細胞計數(shù)與淋巴細胞絕對值比值(WBC/LYM)為新型炎癥標(biāo)志物。有研究[7-8]表明，WBC、LYM在鑒別肺部感染病原菌類型方面具有一定可行性。鑒于此，本研究探討sTREM-1、WBC/LYM、IL-10在肺部細菌、支原體感染鑒別與病情評估中的價值，為臨床肺部感染的早期診斷與治療提供參考。

1 臨床資料

1.1 病例選擇標(biāo)準

納入標(biāo)準：1)經(jīng)臨床表現(xiàn)、胸部X線檢查等確診為肺部感染；2)年齡≥18歲；3)臨床資料完整。排除標(biāo)準：1)合并有特殊致病菌感染者；2)合并有其它系統(tǒng)感染者；3)合并有2種及以上類型病原菌感染者；4)有血液、免疫系統(tǒng)疾??；5)由自身免疫性疾病(如干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等)引起的肺部病變；6)肺部畸形；7)先天性喉軟骨發(fā)育不全者。

1.2 一般資料

選取2018年5月至2020年5月呼和浩特市第一醫(yī)院收治的細菌性肺炎患者(細菌組)及支原體肺炎患者(支原體組)各91例，并選取同期健康體檢者91例作為對照組。3組患者年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)、吸煙、飲酒、感染時間及急性生理學(xué)及慢性健康狀況評分Ⅱ(APACHEⅡ)具有可比性(均P>0.05)。見表1。本研究經(jīng)本院倫理委員會審核批準，所有患者均知情并自愿簽署知情同意書。

表1 3組一般資料比較

2 方法

2.1 樣本采集與處理

分別采集健康體檢者體檢當(dāng)天、肺部感染患者治療前空腹靜脈血5 mL，各2份；1份用于WBC、LYM檢測，另1份肝素抗凝，于4 ℃離心(4000 r·min-1，離心10 min)后，取上層血清轉(zhuǎn)移至無菌EP管中，-60 ℃保存?zhèn)溆?，用于sTREM-1、IL-10的檢測。

2.2 sTREM-1、WBC/LYM、IL-10的檢測

采用血細胞分析儀(日本光電，8222K型)測定WBC、LYM的水平；WBC試劑盒購自北京孚博生物科技有限公司；LYM試劑盒購自北京泰澤嘉業(yè)科技發(fā)展有限公司。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清sTREM-1、IL-10水平；sTREM-1試劑盒購自北京百奧萊博科技有限公司；IL-10試劑盒購自滁州仕諾達生物科技有限公司。

2.3 肺炎嚴重程度的評估標(biāo)準

參照肺炎嚴重指數(shù)(PSI)[9]進行評估。PSI評分系統(tǒng)預(yù)測指標(biāo)及計算方法：1)居住在養(yǎng)老院(+10分)。2)伴有基礎(chǔ)疾病。腎病(+10分)、腦血管疾病(+10分)、肝病(+20分)、充血性心力衰竭(+10分)、腫瘤(+30分)。3)實驗室檢查。血糖>14 mmol·L-1(+10分)、血氧分壓(PaO2)<60 mmHg(7.98 kPa，+10分)、血鈉<130 mmol·L-1(+20分)、動脈血pH<7.35(+30分)、紅細胞壓積(HCT)<30%(+10分)、血尿素氮(BUN)>30 mg·dL-1(+20分)。4)體征。心率>125次·min-1(+20分)、精神狀態(tài)改變(+20分)、收縮壓<90 mmHg(11.97 kPa，+15分，呼吸頻率>30 次·min-1(+20分)、體溫<35 ℃或>40 ℃(+10分)。5)胸部影像。胸腔積液(+10分)。肺炎嚴重程度評估。輕度：PSI評分≤90分；中度，PSI評分91～130分；重度，PSI評分>130分。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以例數(shù)表示；計量資料以均數(shù)±標(biāo)準差表示；采用Bartlett 方差齊性檢驗與Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗確認方差齊且近似服從正態(tài)分布，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩組間比較采用SNK-q檢驗；2組間比較采用獨立樣本t檢驗；采用Spearman、偏相關(guān)性分析相關(guān)性；預(yù)測效能分析采用受試者工作特征(ROC)曲線，獲取曲線下面積、置信區(qū)間、敏感度、特異度及cut-off值，不同預(yù)測方案間曲線下面積比較采用DeLong 檢驗，聯(lián)合診斷實施Logistic二元回歸擬合，返回預(yù)測概率logit(p)，將其作為獨立檢驗變量。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 各組sTREM-1、WBC/LYM、IL-10比較

與對照組比較，細菌組sTREM-1、WBC/LYM均高于對照組(均P<0.05)，2組IL-10差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與對照組比較，支原體組WBC/LYM高于對照組(P<0.05)，IL-10低于對照組(P<0.05)，2組sTREM-1差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與支原體組比較，細菌組sTREM-1、WBC/LYM、IL-10均更高(均P<0.05)。見表2。

表2 各組sTREM-1、WBC/LYM、IL-10比較

3.2 sTREM-1、WBC/LYM、IL-10的預(yù)測效果分析

ROC結(jié)果顯示，sTREM-1鑒別的AUC為0.792，WBC/LYM鑒別的AUC為0.730，IL-10鑒別的AUC為0.758。其中，IL-10鑒別敏感度最高(91.21%)、sTREM-1鑒別特異度最高(92.31%)。見表3。

表3 ROC分析結(jié)果

3.3 不同病情嚴重程度肺炎患者的sTREM-1、WBC/LYM、IL-10比較

細菌組中，sTREM-1、WBC/LYM隨著病情程度加重而升高(均P<0.05)，IL-10在不同病情嚴重程度患者中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。支原體組中，WBC/LYM隨著病情程度加重而升高(P<0.05)，IL-10隨著病情程度加重而降低(P<0.05)，sTREM-1在不同病情嚴重程度患者中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。見表4。

表4 不同病情嚴重程度肺炎患者的sTREM-1、WBC/LYM、IL-10比較

3.4 sTREM-1、WBC/LYM、IL-10與病情程度的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示：sTREM-1(r=0.771，P<0.001)、WBC/LYM(r=0.790，P<0.001)均與細菌性肺炎患者的病情程度呈正相關(guān)；WBC/LYM與支原體肺炎患者的病情程度呈正相關(guān)(r=0.814，P<0.001)，IL-10與支原體肺炎患者病情程度呈負相關(guān)(r=-0.922，P<0.001)。

3.5 偏相關(guān)性分析

偏相關(guān)性分析顯示，將年齡、性別等因素控制后，sTREM-1、WBC/LYM仍與細菌性肺炎患者PSI評分相關(guān)，WBC/LYM、IL-10仍與支原體肺炎患者PSI評分相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 偏相關(guān)性分析

4 討論

肺部感染為呼吸系統(tǒng)常見疾病[10]。早期診斷、識別肺部感染患者的病原菌類型，對提高該病的治療效果，改善預(yù)后至關(guān)重要。常規(guī)臨床鑒別手段主要依靠采樣培養(yǎng)，但受微生物自身生長周期限制、標(biāo)本留取方法不當(dāng)?shù)扔绊?，可造成樣本培養(yǎng)結(jié)果假陽性，致使抗菌藥物錯誤使用，增加多重耐藥機會[11-12]。因此，尋找可提示病原菌類型的特異性生物指標(biāo)輔助臨床病原判斷在肺部感染診治中具有重要意義。

炎癥標(biāo)志物表達與肺部感染具有顯著相關(guān)性，為臨床判斷肺部感染重要指標(biāo)。IL-10是具有生物活性的免疫抑制因子，主要由T淋巴細胞、單核巨噬細胞、B淋巴細胞等多種細胞產(chǎn)生，對多種細胞相關(guān)因子合成及機體免疫應(yīng)答具有抑制作用[13-14]。本研究顯示，細菌組IL-10高于支原體組，細菌組IL-10與對照組比較無顯著差異，其原因可能是：IL-10低水平表達可引起機體免疫調(diào)節(jié)失衡，對肺部組織產(chǎn)生損傷，可能參與支原體肺炎發(fā)病機制。張文波等[15]研究亦指出，支原體肺炎患者血清IL-10呈低水平，與本研究結(jié)果一致。髓系細胞表達觸發(fā)受體-1(TREM-1)為新近被闡述的受體分子，可經(jīng)多條下游途徑協(xié)同作用，致使多種促炎因子、炎性反應(yīng)遞質(zhì)釋放。多項研究[16-17]表明，TREM-1在診斷細菌、真菌感染方面具有優(yōu)越性。sTREM-1是TREM-1的可溶性形式，可能是在蛋白水解作用下由膜上脫落的缺乏跨膜域及胞內(nèi)域的一種形式，與常規(guī)感染指標(biāo)相比，是否更具有特異性值得臨床探究。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細菌組sTREM-1高于支原體組，支原體組sTREM-1與對照組比較無顯著差異，其原因可能在于，在細胞外細菌作用下能夠促進sTREM-1表達上調(diào)，而在非細菌感染炎癥疾病中sTREM-1表現(xiàn)為低表達狀態(tài)，提示sTREM-1可較好地反映肺部感染患者的病原菌類型。本研究還發(fā)現(xiàn)，細菌組WBC/LYM高于支原體組(P<0.05)，WBC為初步判斷感染性疾病重要依據(jù)，細菌性感染發(fā)生時WBC呈升高趨勢，非細菌性感染發(fā)生時WBC呈正常表達或略升高趨勢。LYM與機體免疫功能密切相關(guān)，機體發(fā)生細菌感染時，免疫功能受到抑制，LYM降低，非細菌性感染發(fā)生時LYM呈升高趨勢，故細菌組WBC/LYM較高。本研究繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，sTREM-1鑒別細菌的AUC為0.792，WBC/LYM鑒別細菌的AUC為0.730，IL-10鑒別細菌的AUC為0.758，其中IL-10鑒別敏感度最高為91.21%、sTREM-1鑒別特異度最高為92.31%。提示檢測肺部感染患者sTREM-1、WBC/LYM、IL-10水平，對指導(dǎo)臨床鑒別支原體肺炎、細菌性肺炎具有重要作用。

支原體肺炎、細菌性肺炎為肺部感染常見類型，準確評估其病情嚴重程度，對指導(dǎo)抗菌藥物合理應(yīng)用，提高疾病治療效果，改善預(yù)后具有重要臨床價值[18-19]。本研究結(jié)果顯示，隨著病情程度加重，細菌性肺炎sTREM-1逐漸升高，支原體肺炎IL-10逐漸降低(P<0.05)，sTREM-1特異性表達于單核巨噬細胞、中性粒細胞，在細菌內(nèi)毒素作用下，可促使腫瘤細胞-α、中性粒細胞脫顆粒等細胞表達，隨著sTREM-1表達上調(diào)，可擴大炎癥反應(yīng)，加重細菌性肺炎患者病情程度[20]。杜莉等[21]研究也顯示，支原體肺炎患者隨著病情加重，sTREM-1水平呈升高趨勢。IL-10為有效調(diào)節(jié)因子，隨著支原體肺炎IL-10水平下調(diào)，無法有效抑制促炎癥因子反應(yīng)介質(zhì)表達，致使支原體肺炎患者炎癥反應(yīng)加重[22]。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著病情程度加重，支原體肺炎、細菌性肺炎WBC/LYM均呈逐漸升高趨勢，已有研究[23-24]證實，WBC/LYM比值高低可有效評估全身炎癥狀態(tài)。WBC為診斷疾病進展性的原始及傳統(tǒng)指標(biāo)，隨著感染加重，大量促炎細胞因子分泌，WBC水平升高，同時細菌性感染造成機體應(yīng)激可釋放大量皮質(zhì)激素、兒茶酚胺，致使LYM凋亡增加，而非細菌性感染可選擇性引起LYM增加(幅度較WBC低)，故WBC/LYM可用于評估細菌性肺炎、支原體肺炎病情嚴重程度。本研究進一步分析上述指標(biāo)與肺部細菌、支原體感染患者病情程度，發(fā)現(xiàn)sTREM-1、WBC/LYM均與細菌性肺炎病情程度呈正相關(guān)，WBC/LYM與支原體肺炎病情程度呈正相關(guān)，IL-10與支原體肺炎病情程度呈負相關(guān)，說明sTREM-1、WBC/LYM、IL-10不但可用于鑒別肺部感染病原菌，還與病情嚴重程度密切相關(guān)。本研究不足之處在于，納入研究對象為直接選取一定時間內(nèi)連續(xù)性細菌性肺炎、支原體肺炎及健康體檢者，可能會導(dǎo)致數(shù)據(jù)的偏倚，仍需后續(xù)完善方法進行進一步的驗證。

綜上，sTREM-1、WBC/LYM、IL-10在鑒別病原菌類型與評估病情嚴重程度中具有良好價值，有助于為臨床診斷與治療提供參考依據(jù)。