血清omentin-1和vaspin在非酒精性脂肪性肝病患者中的表達及意義

蘇秀麗 王同生 張英劍

關(guān)于網(wǎng)膜蛋白-1(omentin-1)、內(nèi)臟脂肪組織來源的絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，vaspin)這些脂肪因子在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)中的發(fā)病機制和炎癥影響情況尚不清楚[1-3]。本研究通過檢測NAFLD患者omentin-1、vaspin、白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)和C反應(yīng)蛋白(creactive protein，CRP)血清水平，評估這些脂肪因子與NAFLD患者IL-6和CRP的關(guān)系。

資料與方法

一、研究對象

2014年3月至2019年3月在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化科門診和病房診斷的NAFLD患者，均符合NAFLD的診斷標(biāo)準(zhǔn)。入選標(biāo)準(zhǔn)：NAFLD診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2010年中華醫(yī)學(xué)會肝臟病學(xué)分會《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[4]。入選患者由3名固定的、有經(jīng)驗的高年資醫(yī)生討論通過。

138名NAFLD患者(NAFLD組)：53名男性，85名女性，年齡35～50歲，平均年齡(43.8±6.1)歲；選擇同期健康體檢者，肝功能正常、經(jīng)B型超聲檢查無脂肪肝癥狀，且無飲酒史或飲酒折合乙醇量符合納入或排除標(biāo)準(zhǔn)的人群作為對照組。129名健康無NAFLD者為對照組：50名男性，79名女性，年齡35～51歲，平均年齡(42.7±7.5)歲。兩組年齡、性別無統(tǒng)計學(xué)差異。本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會審批通過(批號：20140208)，所有研究對象均簽署知情同意書。

二、研究方法

所有入選的對象均記錄性別、年齡、身高、體質(zhì)量、腰圍，腰圍有固定人員應(yīng)用非彈性軟尺測量，測量位置在髂前上嵴與最低肋骨連線中點處，檢測空腹(空腹12 h)血脂、血糖,抽血待查CRP、IL-6及omentin-1、vaspin的水平。

(一)肝臟B超檢查 由固定的、有經(jīng)驗的超聲醫(yī)師應(yīng)用Elegra-Siemens公司(德國)的B超儀扇形探頭(3.5～5.0 MHz)進行檢查。參照《非酒精性脂肪性肝病診療指南》中NAFLD的B超診斷標(biāo)準(zhǔn)進行診斷[4]。

(二)血生化參數(shù)的檢測 于上午8時空腹采取靜脈血查血糖(FBG)、總膽固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)，均在本院臨床檢驗中心采用全自動生化分析儀(美國,型號：BHBMD1600)檢測。

(三)測定CRP、IL-6 抽取肘靜脈血4 mL，注入干燥試管，4 ℃，3 000 r/min離心15 min，分離血漿-80 ℃保存待測CRP、IL-6,高靈敏度濁度法測定，單位mg/L。

(四)omentin-1、vaspin的測量 抽肘靜脈血8 mL，注入加有10%乙二胺乙酸二鈉30 μL及抑肽酶40 μL抗凝劑的試管中，混均，4 ℃，3 000 r/min離心15 min，分離血漿-80 ℃保存，待測omentin-1、vaspin。通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測量(上海晶天生物科技有限公司)，單位均為ng/mL，嚴格按照操作說明書進行。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

結(jié) 果

一、臨床特征

NAFLD組和對照組比較，腰圍(WC)、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、空腹血糖、膽固醇、LDL-C、TG差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。年齡、性別、HDL-C、ALT、AST差異沒有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 NAFLD組和對照組臨床特征比較

二、兩組IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比較

NAFLD組IL-6(117±8.2)高于對照組(103±9.1)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.01)，NAFLD組CRP中位數(shù)(四分位間距)為3.1(1.0～9.3)mg/L，顯著高于對照組1.1(1.0～6.9)mg/L；omentin-1中位數(shù)(四分位間距)1.6(0.5～7.5)ng/mL低于對照組2.8(0.4～7.5)ng/mL；vaspin水平中位數(shù)(四分位間距)2.1(0.7～6.3)ng/dL高于1.0(0.2～7.3)ng/dL，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Z值-2.935～-1.605，P值0.003～0.03)。詳見表2。

表2 兩組IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比較[中位數(shù)(四分位間距)]

三、相關(guān)分析

Vaspin水平分別與腰圍、LDL-C、CRP、IL-6成正比(r值分別為0.335，0.231，0.341，0.285，均P<0.05)；與HDL-C、omentin-1呈負相關(guān)(r值分別為-0.221，-0.246，均P<0.05)。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負相關(guān)(r值為別-0.250，-0.238，-0.319，均P<0.05)，與HDL-C呈正相關(guān)(r=0.326，P<0.05)。

四、Logistic回歸分析

NAFLD為因變量，以omentin-1、vaspin、腰圍、BMI、空腹血糖、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6為自變量進行Logistic回歸分析，結(jié)果表明omentin-1、vaspin、腰圍、CRP、IL-6為患者發(fā)生NAFLD的獨立相關(guān)因素[β值分別為1.896，1.471，2.012,2.971,1.984,2.0982,OR值(1.021～3.012)，95%CI(1.431～4.979)，均P<0.05]。

討 論

本研究探索了NAFLD患者omentin-1、vaspin血清水平，并與健康組對照研究，評估了這些脂肪因子與患者的IL-6、CRP關(guān)系。

研究認為，NAFLD是代謝綜合征的組成部分，轉(zhuǎn)氨酶檢測正常的NAFLD，是NAFLD的早期階段，與胰島素抵抗合并的糖脂代謝紊亂密切相關(guān)[5]。本實驗中，NAFLD組與正常對照組比較，體質(zhì)指數(shù)、腰圍、空腹血糖、三酰甘油、總膽固醇、LDL-C的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，HDL-C、ALT、AST差異沒有明顯統(tǒng)計學(xué)意義，也支持上述觀點。

研究顯示，omentin-1與肥胖、IR等代謝紊亂呈負相關(guān)性[3.6]。Omentin-1通過抑制胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶/NF-κB通路活性，降低炎癥細胞誘導(dǎo)的內(nèi)皮黏附分子的表達。因此，omentin-1還具有抗炎，抗動脈粥樣硬化作用[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD組與對照組相比，omentin-1較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負相關(guān)，與HDL-C呈正相關(guān)，腰圍、IL-6、CRP是omentin-1水平下降的影響因素，HDL-C是omentin-1水平升高的危險因素，也符合上述觀點。國外研究[8]報道omentin-1與NAFLD的發(fā)生密切相關(guān)，是NAFLD的獨立危險因素，與本研究發(fā)現(xiàn)omentin-1是NAFLD發(fā)生的獨立危險因素相一致。本研究發(fā)現(xiàn)血清omentin-1水平與BMI無關(guān)，omentin-1與腰圍呈負相關(guān)，表明在表述身體脂肪分布方面，腰圍比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平與NAFLD患者的HDL-C水平呈正相關(guān)，提示omentin-1可能是NAFLD發(fā)生的保護因素。

對經(jīng)肝穿刺證實的NAFLD患者研究發(fā)現(xiàn)，血清vaspin水平明顯升高，是NAFLD患者肝細胞纖維化程度的獨立預(yù)測因素[9-10]。血清vaspin水平升高，且vaspin水平與超聲診斷下的肝臟脂肪變性嚴重程度及肝內(nèi)脂肪含量呈正相關(guān)[11]。本研究中，與健康對照受試者相比，NAFLD患者的vaspin濃度更高。血清vaspin與腰圍和LDL呈正相關(guān)。Vaspin是NAFLD的獨立危險因素，說明vaspin可能是NAFLD發(fā)生的預(yù)測因子。

IL-6可誘導(dǎo)肝臟合成CRP，還可刺激肝臟分泌極低密度脂蛋白，導(dǎo)致高三酰甘油血癥，TNF-α和IL-6可參與調(diào)節(jié)其他脂肪因子的分泌[6，12]。本研究發(fā)現(xiàn)vaspin分別和IL-6、CRP呈正相關(guān)，omentin-1與CRP、IL-6 呈負相關(guān)，說明了NAFLD可能與慢性炎癥有關(guān)。推測omentin-1、vaspin在NAFLD患者體內(nèi)表達可能受到IL-6、CRP炎癥因子的影響。隨著人脂肪含量(尤其是內(nèi)臟脂肪含量)增多，游離脂肪酸脂解增強，TNF-α、IL-6、CRP等炎癥因子表達增強，致使機體處于慢性炎癥狀態(tài)，omentin-1表達由于受到炎癥因子的抑制，其表達水平降低，抗炎作用減弱，致使機體慢性炎癥持續(xù)存在，并逐漸加重，進而促進NAFLD的發(fā)生,而vaspin則因為炎癥因子的作用，表達增加，促進了NAFLD的發(fā)生[13]。

NAFLD患者omentin-1、vaspin、IL-6、CRP和健康組不同。Vaspin可能是NAFLD發(fā)生的預(yù)測因子，而omentin-1可能是預(yù)防NAFLD發(fā)生的保護性因子。其機制可能與炎癥因子有關(guān)，具體機制需進一步研究。