黃 平,王 健,許瑋琦
(四川省阿壩州林業(yè)中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科,四川 成都 611830)
幽門螺桿菌(Helicobacterpylori,Hp)是消化性潰瘍(petic ulcer,PU)的主要致病菌,可致胃腸黏膜組織損傷,進而導(dǎo)致潰瘍的發(fā)生。Hp產(chǎn)生的細胞毒素相關(guān)蛋白(cytotoxinassociated protein,CagA)、空泡毒素A蛋白(vacuolar protein toxin A,VacA)、尿素酶A(urease A,UreA)和尿素酶B(urease B,UreB)等多種毒力因子是決定其感染臨床后果的重要因素,不同的毒力因子可產(chǎn)生不同程度的致病力[1]。臨床將Hp分為Ⅰ型和Ⅱ型,Ⅰ型Hp能產(chǎn)生CagA和/或VacA,Ⅱ型Hp僅產(chǎn)生UreA和UreB,不產(chǎn)生CagA和VacA,2種類型Hp的致病力存在著較大的差異[2]。本研究對214例PU患者進行回顧性分析,并與慢性淺表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)患者和健康體檢者進行對比,旨在探討Hp抗體血清分型檢測對PU的診斷價值,以期為臨床診治提供參考依據(jù)。
選取2018年2月—2019年4月阿壩州林業(yè)中心醫(yī)院收治的PU患者214例(PU組),其中男125例、女89例,年齡(44.72±3.85)歲。納入標(biāo)準:(1)經(jīng)臨床癥狀、胃鏡檢查等確診為PU,診斷參照《消化性潰瘍診斷與治療規(guī)范(2016年,西安)》[3]中關(guān)于PU的診斷標(biāo)準;(2)近1個月內(nèi)未接受非甾體類抗炎藥、抗菌藥物、抑酸劑、質(zhì)子泵抑制劑、鉍劑及激素等治療;(3)年齡18~70歲,性別不限;(4)無胃腸道手術(shù)史。排除標(biāo)準:(1)復(fù)合性潰瘍;(2)合并其他消化道疾病,如胃食管反流、胃炎、惡性潰瘍等;(3)合并免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、心腦血管系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤及肝、腎、肺等重要臟器功能不全;(4)有酗酒、暴飲暴食等不良生活習(xí)慣;(5)妊娠期、哺乳期婦女。另選取同期同院接受治療的146例CSG患者,其中男82例、女64例,年齡(45.02±4.02)歲,排除合并其他消化道疾病、臟器功能不全及有不良生活習(xí)慣者,作為CSG組。以同期同院118名健康體檢者[男67名、女51名,年齡(44.49±3.76)歲]作為對照組。本研究經(jīng)阿壩州林業(yè)中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過,并向所有研究對象告知本研究相關(guān)事項后獲得其知情同意。
1.2.114C尿素酶呼氣試驗 所有研究對象均于空腹或禁食4 h后接受14C尿素酶呼氣試驗。
1.2.2 Hp抗體血清分型檢測 抽取所有研究對象清晨空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血3 mL,離心后取血清置于2~8 ℃冰箱中保存待測。采用免疫印跡法檢測CagA抗體、VacA抗體、UreA抗體和UreB抗體,試劑購自深圳帕勞特生物制品有限公司,嚴格按照試劑盒說明書要求進行操作。CagA抗體和/或VacA抗體陽性為Ⅰ型Hp;僅UreA抗體和/或UreB抗體陽性,CagA抗體和VacA抗體陰性為Ⅱ型Hp。比較3組Hp陽性檢出率、Hp抗體血清分型、Ⅰ型Hp感染者CagA抗體及VacA抗體的表達情況。
(1)制定明確的納入標(biāo)準、排除標(biāo)準,并嚴格按照標(biāo)準納入研究對象,確保組間基線資料的可比性;(2)由經(jīng)驗豐富的同一組檢驗醫(yī)師進行Hp抗體血清分型檢測;(3)認真核對所有研究數(shù)據(jù),錄入員采用雙軌錄入法錄入數(shù)據(jù)資料后進行核對、補漏、校正,以確保所有數(shù)據(jù)的可靠性和真實性。
采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析,正態(tài)分布的計量資料采用±s表示,組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料以例或率表示,組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3組研究對象年齡等一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
PU組、CSG組14C尿素酶呼氣試驗陽性率分別為85.51%(183/214)、76.03%(111/146),明顯高于對照組的42.37%(50/118),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);PU組14C尿素酶呼氣試驗陽性率明顯高于CSG組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3組Hp抗體血清分型比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。PU組、CSG組Ⅰ型Hp感染率明顯高于對照組,Ⅱ型Hp感染率低于對照組(P<0.05);PU組Ⅰ型Hp感染率明顯高于CSG組,Ⅱ型Hp感染率低于CSG組(P<0.05)。見表1。
表1 3組Hp抗體血清分型比較 例(%)
3組Ⅰ型Hp感染者CagA+VacA抗體和單一CagA/VacA抗體陽性率比較,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。PU組、CSG組CagA+VacA抗體陽性率均明顯高于對照組,而PU組CagA+VacA抗體陽性率明顯高于CSG組(P<0.05)。PU組、CSG組CagA+VacA抗體陽性率均顯著高于單一CagA/VacA抗體陽性率(P<0.05)。見表2。
表2 3組Ⅰ型Hp CagA抗體、VacA抗體表達情況比較例(%)
我國Hp感染率為40%~65%,其中大部分Hp感染者發(fā)生慢性活動性胃炎,部分Hp感染者由胃黏膜炎癥進一步發(fā)展為潰瘍,甚至出現(xiàn)癌變[4]。Hp定植于胃黏膜上皮表面,可通過產(chǎn)生CagA、VacA和UreA、UreB等毒力因子,誘導(dǎo)胃黏膜發(fā)生免疫應(yīng)答,釋放各種炎性介質(zhì),導(dǎo)致胃黏膜細胞損傷[5]。在病變處黏膜受損時,Hp產(chǎn)生的黏液酶可降解黏液,促進H+反彌散,尿素酶水解黏膜上皮表面的尿素產(chǎn)生的氨使局部黏膜pH值升高,增加胃泌素釋放,刺激胃酸分泌增加,過高的胃酸可加劇胃黏膜損傷,引起胃黏膜上皮炎性改變,最終形成潰瘍[6]。本研究結(jié)果顯示,PU組14C尿素酶呼氣試驗陽性率高達85.51%,CSG組14C尿素酶呼氣試驗陽性率也高達76.03%,均明顯高于對照組的42.37%(P<0.05),進一步證明了Hp感染在胃黏膜病變和消化性潰瘍發(fā)生中的作用。
臨床實踐發(fā)現(xiàn),Hp感染后產(chǎn)生的病理變化、臨床后果并不一樣,這與Hp菌株的基因多態(tài)性有關(guān)[7]。Hp的毒力因子較多,其中以CagA、VacA為主,是決定Hp致病力高低的重要毒力因子。CagA進入胃黏膜上皮細胞后,可誘導(dǎo)白細胞介素-8產(chǎn)生,引起中性粒細胞浸潤,造成胃黏膜炎癥損傷,同時可引起細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路改變,促進胃上皮細胞有絲分裂,誘導(dǎo)細胞骨架結(jié)構(gòu)重排而致癌變[8]。VacA進入胃黏膜上皮細胞后可引起空泡樣變性,并誘導(dǎo)細胞凋亡,使細胞間的緊密連接蛋白表達減少,削弱胃黏膜的屏障功能和修復(fù)功能,易形成潰瘍,誘發(fā)癌變[9]。Ⅰ型Hp菌株分泌CagA和/或VacA,這類菌株毒性較大,可引起較嚴重的胃黏膜病變,長期Hp感染可使胃黏膜病變發(fā)生進展,甚至誘發(fā)癌變[10]。而Ⅱ型Hp菌株不表達CagA、VacA,為低毒力菌株,不會對胃黏膜造成實質(zhì)性損害,大多只會導(dǎo)致胃黏膜淺表的炎癥,長期Hp感染也可無明顯臨床癥狀。本研究結(jié)果顯示,PU、CSG患者均以Ⅰ型Hp感染為主,且PU患者Ⅰ型Hp感染率明顯高于CSG患者,提示Ⅰ型Hp菌株毒性更強,可導(dǎo)致較嚴重的胃黏膜損傷,與相關(guān)研究結(jié)果基本一致[11]。此外,本研究結(jié)果顯示,PU、CSGⅠ型Hp感染者均以CagA抗體、VacA抗體同時表達為主,CagA+VacA抗體陽性率均顯著高于單一CagA/VacA抗體陽性率,提示同時分泌CagA、VacA的I型Hp菌株為高毒力菌株,是消化性潰瘍的主要致病菌。
綜上所述,PU患者以CagA抗體、VacA抗體均陽性表達為主,Hp抗體血清分型檢測增加了PU診斷結(jié)果的準確性。此外,對于PU Hp感染者應(yīng)進行抗體血清分型檢測,建議對于表達CagA抗體、VacA抗體的I型Hp感染者應(yīng)及時、嚴格地行Hp根除治療,其他患者可先行臨床觀察,以提高醫(yī)療資源有效利用率,同時可避免耐藥菌株的產(chǎn)生。