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    VITEK MS鑒定惰性凝聚桿菌2例報(bào)道

    2021-02-05 07:48:46郭映輝張文超翟玉磊周珊珊李貴霞
    檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 2021年1期
    關(guān)鍵詞:氨芐西林惰性桿菌屬

    李 梅,郭映輝,張文超,翟玉磊,周珊珊,李貴霞

    (河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科,河北 石家莊 050031)

    惰性凝聚桿菌原名惰性嗜血桿菌,最初被歸屬于嗜血桿菌屬,2006年被劃分到放線桿菌屬,目前被劃歸到凝聚桿菌屬。與其親緣性相近的有嗜沫凝聚桿菌、副嗜沫凝聚桿菌和伴放線凝聚桿菌均為凝聚桿菌屬。我們分別在2018年3月和8月從2例眼分泌物樣本中分離到2株惰性凝聚桿菌,現(xiàn)對其形態(tài)學(xué)、質(zhì)譜分析結(jié)果以及抗菌藥物譜進(jìn)行報(bào)道。

    1 病例資料

    1.1 菌株編號18023016

    患兒,男,出生3個月。2018年2月12日發(fā)現(xiàn)右眼角膜上出現(xiàn)“白點(diǎn)”,于2018年2月30日于河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省兒童醫(yī)院眼科就診。入院查體:體溫37.0 ℃,脈率140次/min,呼吸頻率36次/min,發(fā)育正常,營養(yǎng)中等,神志清楚,心、肺、腹、脊柱及四肢檢查未見異常。眼部專科檢查:右眼角膜刺激征(+),瞼結(jié)膜充血,球結(jié)膜混合充血,角膜中央偏鼻側(cè)可見1處圓片狀灰白色潰瘍灶,角膜熒光素染色(+),周圍角膜水腫。左眼瞼結(jié)膜充血,球結(jié)膜輕度充血,角膜染色示鼻側(cè)可見點(diǎn)狀著色。雙側(cè)前房深淺可,未見明顯浮游物。瞳孔雙側(cè)正大等圓,對光反應(yīng)存在。診斷為右眼角膜潰瘍,雙眼角膜炎。入院后按照檢查結(jié)果給予局部抗感染治療,給予左氧氟沙星眼水點(diǎn)雙眼4次/d,妥布霉素眼膏點(diǎn)雙眼2次/d,復(fù)方托吡卡眼水點(diǎn)右眼1次/d,小牛血去蛋白提取物眼膠點(diǎn)雙眼4次/d,1周后右眼角膜潰瘍較之前好轉(zhuǎn),患兒出院。

    1.2 菌株編號18073021

    患兒,女,出生3 d,雙眼內(nèi)眥部隆起3 d,左眼紅腫1 d,于2018年7月30日10:07收入院,查體:體溫36.6 ℃,脈率130次/min,呼吸頻率42次/min,發(fā)育正常,營養(yǎng)中等,神志清楚,心、肺、腹、脊柱四肢檢查未見異常,臍部微隆起;眼部??茩z查:雙眼淚囊區(qū)隆起,局部可觸及硬結(jié),右眼淚囊區(qū)色青紫,左眼淚囊區(qū)紅腫,按壓可見黃色分泌物溢出,雙眼瞼結(jié)膜稍充血,球結(jié)膜未見明顯充血,無水腫,角膜清。入院診斷:(1)雙眼淚囊突出;(2)左眼淚囊炎。入院后積極完善各項(xiàng)常規(guī)檢查,于2018年8月2日全麻行內(nèi)窺鏡下雙側(cè)鼻腔淚囊造影術(shù),手術(shù)進(jìn)行順利,術(shù)后沖洗雙眼淚道,沖洗通暢,吞咽明顯,無嗆咳,出院。出院后繼續(xù)給予妥布霉素眼水點(diǎn)雙眼4次/d,妥布霉素眼藥膏涂雙眼1次/晚,注意眼部衛(wèi)生,5 d后復(fù)查,癥狀好轉(zhuǎn)。

    2 實(shí)驗(yàn)室檢查

    2.1 細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定

    將送檢分泌物拭子樣本接種于哥倫比亞血瓊脂平板、中國蘭瓊脂平板和巧克力瓊脂平板[貝瑞特生物技術(shù)(鄭州)有限責(zé)任公司],置于5% CO2、35 ℃恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24 h后,血瓊脂平板上長出針尖樣小菌落,巧克力瓊脂平板上長出稍大、干燥、無色菌落(圖1),中國蘭瓊脂平板未見菌落生長。菌落涂片染色為革蘭陰性小桿菌(圖2)。取巧克力瓊脂平板上的菌落涂布于VITEK MS一次性靶板(法國生物梅里埃公司),加入0.5 μL甲酸,再加入1 μL基質(zhì)液(4-羥基-2-甲基肉桂酸)(法國生物梅里埃公司),自然干燥后采用VITEK MS儀(法國生物梅里埃公司)進(jìn)行檢測,以標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC 8739)為校準(zhǔn)菌株,鑒定為惰性凝聚桿菌,鑒定百分率均為99.9%,其質(zhì)譜圖見圖3。采用法國生物梅里埃公司VITEK 2 Compact自動化鑒定藥敏儀及配套NH細(xì)菌鑒定卡,鑒定結(jié)果為灰色奈瑟球菌,鑒定百分率為88%,生化鑒定編碼為0200000040。送北京醫(yī)院檢驗(yàn)科采用MALDI Biotyper質(zhì)譜儀(德國布魯克公司)鑒定,結(jié)果也為惰性凝聚桿菌。

    2.2 體外藥物敏感性試驗(yàn)

    根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)M45文件中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行體外藥物敏感性試驗(yàn)。HTM平板和藥物敏感性試驗(yàn)紙片均購自溫州康泰生物科技有限公司,2株細(xì)菌均為β-內(nèi)酰胺酶陰性,氨芐西林、氨芐西林-舒巴坦、阿莫西林-克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢曲松、美羅培南、亞胺培南、阿奇霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、氯霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑敏感。

    圖1 細(xì)菌培養(yǎng)48 h菌落形態(tài)

    圖2 菌株革蘭染色鏡下形態(tài)(×1 000)

    圖3 細(xì)菌鑒定質(zhì)譜圖

    3 討論

    凝聚桿菌屬細(xì)菌為革蘭陰性短桿菌,有菌毛、無芽胞、無動力、兼性厭氧,常定植或共生在人、哺乳動物和鳥的消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜表面,多為動物病原菌,具有狹窄的宿主范圍,是正??谇晃⑸锶旱囊徊糠?,特別是牙菌斑的正常菌,只在創(chuàng)傷或黏膜破損時,凝聚桿菌屬才會侵入健康組織引起感染,可致心內(nèi)膜炎、軟組織感染等。有研究結(jié)果顯示,嗜沫凝聚桿菌可引起復(fù)雜性腦膿腫伴急性感染性心內(nèi)膜炎[1],也可引起化膿性關(guān)節(jié)炎[2]。有研究從乳腺感染膿液樣本和細(xì)菌性心內(nèi)膜炎血液樣本中檢出伴放線凝聚桿菌[3-4]。

    惰性凝聚桿菌屬于凝聚桿菌屬,是人類口咽部的共生菌,關(guān)于其致病性的研究報(bào)道比較少見,有研究認(rèn)為惰性凝聚桿菌與細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有黏附性,且與其他細(xì)菌共存,是引起牙菌斑的原因[5]。惰性凝聚桿菌也可能引起心內(nèi)膜炎、菌血癥、腎盂腎炎[6-8]。

    由于惰性凝聚桿菌在臨床感染中相對較為少見,且不能用普通革蘭陰性菌鑒定卡進(jìn)行鑒定,選擇特殊的苛養(yǎng)菌鑒定卡又容易與灰色奈瑟球菌混淆,因此極易被誤鑒定為其他細(xì)菌。近年來,隨著激光解析電離飛行時間質(zhì)譜和16SrRNA檢測等新的微生物鑒定技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用,越來越多的凝聚桿菌被檢出。

    凝聚桿菌屬細(xì)菌對廣譜頭孢菌素和氟喹諾酮類抗菌藥物均敏感,對青霉素和氨芐西林有較高的敏感性,1項(xiàng)針對11個嗜沫凝聚桿菌臨床分離株的研究發(fā)現(xiàn),其對青霉素的敏感性高達(dá)82%,對氨芐西林、阿莫西林-克拉維酸、頭孢曲松、美羅培南、左氧氟沙星的敏感率為100%[9],但也有產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株。本微生物實(shí)驗(yàn)室檢出的這2株惰性凝聚桿菌均為β-內(nèi)酰胺酶陰性,所以對氨芐西林、氨芐西林-舒巴坦、阿莫西林-克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢曲松、美羅培南、亞胺培南、阿奇霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、氯霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑均敏感。

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