不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及腸道菌群數(shù)量的影響

姜 丹，王麗娟，丁 毅，黃 竹，唐日益，解桂香，徐 淼，張淑枝

（1.沈陽豐美生物技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽 110179；2.沈陽禾豐反芻動(dòng)物飼料有限公司，遼寧 沈陽 110164）

隨著飼料科學(xué)和飼料工藝的發(fā)展， 尤其是在飼料禁抗、養(yǎng)殖減抗的行業(yè)大背景下，作為飼料添加劑的酶制劑，不僅受到業(yè)界的高度關(guān)注，而且應(yīng)用越來越廣泛［1］。 飼料原料是非常復(fù)雜的有機(jī)混合物， 各種不同的養(yǎng)分以復(fù)雜的化學(xué)方式結(jié)合在一起，不同酶譜的復(fù)合酶，作用效果如何，需要更多動(dòng)物試驗(yàn)的驗(yàn)證［2］。 目前添加到飼料日糧中的復(fù)合酶制劑是由幾種單一的酶制劑為主的復(fù)合酶，可以利用各種單一酶制劑的協(xié)同作用，用于補(bǔ)充動(dòng)物內(nèi)源酶的不足，提高養(yǎng)分消化率，消除飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子，改變腸壁結(jié)構(gòu)，降低腸道食糜的黏度，從而提高養(yǎng)分的吸收能力，同時(shí)可以提高動(dòng)物的機(jī)體代謝，增強(qiáng)動(dòng)物的免疫力［3］。 而不同酶譜組成復(fù)合酶作用效果有所差異。 該試驗(yàn)選用幾種不同酶譜的復(fù)合酶，進(jìn)行肉雞的飼養(yǎng)試驗(yàn)，測(cè)定生長(zhǎng)性能指標(biāo)、血液生化指標(biāo)及腸道菌群數(shù)量，對(duì)復(fù)合酶在肉雞上的作用進(jìn)行評(píng)估， 為選擇最佳酶譜復(fù)合酶應(yīng)用到肉雞的生產(chǎn)實(shí)踐提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)肉雞與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將480 只28 日齡白羽肉雞隨機(jī)分為4 組（對(duì)照組和試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每組12 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只（公、母各占1/2）。 對(duì)照組飼喂玉米—豆粕型日糧，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ試驗(yàn)組在相同營(yíng)養(yǎng)水平的日糧中添加不同酶譜組合的復(fù)合酶，添加量均為200 g/t 配合飼料。試驗(yàn)肉雞的飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期15 d，試驗(yàn)地點(diǎn)為遼寧某肉雞籠養(yǎng)小區(qū)， 采用多層籠飼養(yǎng)于同一雞舍內(nèi)，自由采食和飲水， 免疫程序和欄舍消毒按常規(guī)進(jìn)行。

1.1.2 復(fù)合酶制劑的組成 試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ所用復(fù)合酶1、2、3 酶譜的組成如表2 所示，3 種不同酶譜的復(fù)合酶均由沈陽豐美生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.2.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)的測(cè)定 平均日采食量（ADFI，g/d）=耗 料 重/試 驗(yàn) 天 數(shù)； 平 均 日 增 重（ADG，g/d）=（結(jié)測(cè)體重-始測(cè)體重）/試驗(yàn)天數(shù)；料肉比（F/G）=平均日采食量/平均日增重；歐洲指數(shù)=成活率×體重 （kg）/（料肉比×出欄天數(shù)）×10 000。

1.2.2 肉雞血清生化指標(biāo)的測(cè)定 42 日齡時(shí)從每組隨機(jī)選取15 只試驗(yàn)雞，共60 只，采血，3 000r/min，離心10 min，吸取上清液分裝于離心管中，置于液氮中保存待測(cè)。采集的血清，用于測(cè)定血清中總蛋白、白蛋白、總膽固醇和尿素氮的含量。

表1 肉雞飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平 單位：%

表2 試驗(yàn)組復(fù)合酶1、2、3 酶譜組成 單位：U/g

1.2.3 肉雞腸道菌群測(cè)定 取42 日齡對(duì)照組和試驗(yàn)組肉雞的糞便， 進(jìn)行大腸桿菌和乳酸桿菌含量的測(cè)定。

2 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 9.1（2003）軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，多重比較選擇的方法是LSD，以P<0.01（差異極顯著）、P<0.05（差異顯著）作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果

3.1.1 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響各組試驗(yàn)肉雞的體重、采食量、料肉比和歐洲指數(shù)如表3 所示。與對(duì)照組的結(jié)果比較，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日增重分別提高了1.29%、2.19%和1.09%，與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）；試驗(yàn)組Ⅱ的日增重與試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅲ差異顯著（P<0.05）。 各組試驗(yàn)肉雞的日采食量差異不顯著 （P>0.05）。 試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ的料肉比與對(duì)照組相比， 分別降低了1.01%、2.20%和0.83%，與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）；試驗(yàn)組Ⅱ的料肉比與試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅲ差異極顯著（P<0.01）。 與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的歐洲指數(shù)分別提高了3.65%、6.32%和4.69%，與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）。

3.1.2 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響 各組42 日齡試驗(yàn)肉雞的血清生化指標(biāo)如表4 所示。 與對(duì)照組的試驗(yàn)結(jié)果比較，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ肉雞的總蛋白、 白蛋白的含量分別提高了10.08%～11.41%和12.00%～12.93%，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01），試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ差異不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的總膽固醇的含量分別提高了16.67% 、20.19% 和14.42%，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）；試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的尿素氮含量分別降低了3.41%、4.55%和6.82%，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），試驗(yàn)組Ⅲ與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。

3.1.3 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞腸道微生物菌群的影響 各組試驗(yàn)肉雞的腸道微生物菌群的指標(biāo)見表5。 統(tǒng)計(jì)42 日齡肉雞的試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果，與對(duì)照組的試驗(yàn)結(jié)果比較，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的大腸桿菌的數(shù)量含量分別降低了17.87%、26.43%、21.67%，與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）；試驗(yàn)組Ⅰ與試驗(yàn)組Ⅱ差異極顯著（P<0.01），試驗(yàn)組Ⅲ與試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ差異顯著（P<0.05）。 試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的乳酸桿菌的數(shù)量分別提高了13.99%、26.10%和24.06%，與對(duì)照組差異極顯著（P<0.01），試驗(yàn)組Ⅱ、Ⅲ差異不顯著（P>0.05），試驗(yàn)組Ⅰ與試驗(yàn)組Ⅱ、Ⅲ相比差異極顯著（P<0.01）。

表3 不同酶譜對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的測(cè)定

表4 不同酶譜對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的測(cè)定

3.2 討論

3.2.1 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響酶制劑可以降解飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料的利用率，同時(shí)可以補(bǔ)充內(nèi)源酶的不足，提高動(dòng)物對(duì)飼料的消化利用率，進(jìn)而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能［4］。 杜德偉等［5］研究證明，在飼料中直接添加飼用復(fù)合酶能改善肉雞的生產(chǎn)性能，總體增重提高6%，平均日增重提高0.65%， 料肉比降低0.13， 采食量降低。Dymkov 等［6］研究表明，肉雞飼喂了添加復(fù)合酶的日糧之后， 存活率提高了3.7%， 活體重增加了112.7 g，平均日增重提高了2.7 g，日采食量減少了0.41 g，料肉比減少了0.12。 該試驗(yàn)結(jié)果與前述的研究結(jié)果一致，在試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日糧中分別添加了不同酶譜的復(fù)合酶，日增重、日采食量均有不同程度的提高； 料肉比呈下降的趨勢(shì)。 試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日增重最高提高2.19%，采食量有所提高，但無顯著差異；料肉比最多降低2.20%，歐洲指數(shù)顯著提高，與對(duì)照組都有極顯著的差異（P<0.01）。 該試驗(yàn)證明復(fù)合酶制劑可以顯著提高肉雞的體重以及降低料肉比，提高歐洲指數(shù)；從生產(chǎn)性能的相關(guān)指標(biāo)來看， 復(fù)合酶2 比其余2 種復(fù)合酶的效果更佳。

3.2.2 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響 血清中總蛋白的水平提高證明在肉雞飼料中添加復(fù)合酶可以提高蛋白質(zhì)的利用率。 在肉雞生長(zhǎng)的后期， 復(fù)合酶制劑能夠顯著降低血清中總膽固醇的含量［7］。龔俊勇等［8］研究證明酶制劑能夠降低肉雞血清中總膽固醇的含量。 尿酸是禽類蛋白質(zhì)分解代謝的主要終產(chǎn)物， 其含量的高低能夠反映禽類蛋白質(zhì)分解代謝的情況。 該次研究的結(jié)果與上述研究結(jié)果一致， 復(fù)合酶制劑可以使肉雞血液中總蛋白和白蛋白的含量極顯著（P<0.01）提高，說明添加復(fù)合酶制劑之后，可以提高肉雞飼料中的蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率， 增加了肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積［4］。

3.2.3 不同酶譜的復(fù)合酶對(duì)肉雞腸道微生物菌群的影響 動(dòng)物腸道內(nèi)存在龐大的微生物體系，有助于腸道消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和提高消化率。 微生物發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物在動(dòng)物的腸道內(nèi)被吸收利用， 同時(shí)微生物可以利用腸道內(nèi)源性氮合成自身的菌體蛋白，為動(dòng)物提供微生物蛋白質(zhì)，所以動(dòng)物腸道正常的微生物菌群對(duì)動(dòng)物的健康成長(zhǎng)也起著很重要的作用［9］。 湯海鷗等［10］研究表明，復(fù)合酶制劑提高了肉雞空腸乳酸桿菌的數(shù)量， 提高了17.5%，能夠降低大腸桿菌的數(shù)量。 周小娟等［11］研究表明， 日糧中添加了復(fù)合酶可顯著降低盲腸的大腸桿菌濃度，顯著提高了乳桿菌濃度，并且降低了盲腸pH 值。 該試驗(yàn)的結(jié)果與上述研究結(jié)果一致， 試驗(yàn)組可顯著降低肉雞腸道內(nèi)大腸桿菌的數(shù)量，增加乳酸桿菌的活菌數(shù)量。因?yàn)閯?dòng)物腸道中的有益菌和病原菌存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，在動(dòng)物腸道內(nèi)，乳酸菌可以與一些病原菌競(jìng)爭(zhēng)地利用動(dòng)物腸道內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)， 并且競(jìng)爭(zhēng)腸道上皮黏膜內(nèi)共同的黏附位點(diǎn)，同時(shí)乳酸菌還可以通過本身分泌的產(chǎn)物（例如有機(jī)酸類）降低腸道pH 值，這樣也可以抑制一些病原菌的生長(zhǎng)［7］。 未被充分消化的飼料在進(jìn)入小腸后段時(shí)， 也會(huì)成為厭氧有害微生物增殖發(fā)酵的培養(yǎng)基，發(fā)酵產(chǎn)生的毒素可能會(huì)抑制畜禽生長(zhǎng)，在這種情況下， 添加以非淀粉多糖酶為主的復(fù)合酶，一些小分子多糖片段的黏度就會(huì)降低，食糜黏度也會(huì)降低，進(jìn)而提高飼料養(yǎng)分的消化利用率［12］。

4 結(jié)論

在肉雞飼料中添加復(fù)合酶制劑可以顯著提高肉雞后期的生產(chǎn)性能、 優(yōu)化血清生化指標(biāo)以及維持腸道健康， 同時(shí)復(fù)合酶中的酶譜組成不同也顯著影響這些指標(biāo)。 影響動(dòng)物對(duì)飼料原料的消化和吸收能力的因素是多方面的，既與動(dòng)物的品種、生長(zhǎng)階段等有關(guān)系，還與飼料的成分、生產(chǎn)工藝等有關(guān)， 可以根據(jù)不同畜禽的消化生理特點(diǎn)和飼料的成分，配制出不同的畜禽專用復(fù)合酶制劑［13］，也可根據(jù)不同的飼料類型配制出不同的專用復(fù)合酶。使用專用的復(fù)合酶制劑可以同時(shí)降解多種飼料底物 （例如飼料中有很多種抗?fàn)I養(yǎng)因子和多種養(yǎng)分），不同種類的酶還具有協(xié)同作用，可以最大限度地提高飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

表5 不同酶譜對(duì)肉雞腸道微生物菌群的測(cè)定 單位：lg CFU/g