化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平及其臨床意義

駱小娟，陳輝，余麗梅

作者單位： 524000 廣東省湛江市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(駱小娟、余麗梅)，腫瘤科(陳輝)

非小細(xì)胞肺癌是肺癌中最常見(jiàn)類型，占原發(fā)性肺癌的80%～85%[1]。目前手術(shù)仍是早期非小細(xì)胞肺癌的標(biāo)準(zhǔn)治療方法，但術(shù)后復(fù)發(fā)率高，術(shù)后5年生存率仍低于50%[1]。大多數(shù)非小細(xì)胞肺癌患者確診時(shí)已處于晚期階段，臨床預(yù)后差[2]。非小細(xì)胞肺癌的起病隱匿，早期癥狀多不典型，斷層掃描、磁共振、蛋白質(zhì)標(biāo)志物檢測(cè)等手段在非小細(xì)胞肺癌的診斷中已較成熟，但對(duì)非小細(xì)胞肺癌的早期診斷方法仍存在敏感性和特異性不足[3]。病理學(xué)檢查是當(dāng)前臨床確診非小細(xì)胞肺癌的主要有效方法之一，但由于醫(yī)療設(shè)備限制和患者因素，取材較困難，反復(fù)獲取對(duì)患者產(chǎn)生較大的創(chuàng)傷[4]。腫瘤血清學(xué)標(biāo)記物在腫瘤的臨床診斷及預(yù)后評(píng)估的臨床價(jià)值獲得較為一致的肯定，由于其取材便捷、創(chuàng)傷小、成本低廉等，已廣泛用于非小細(xì)胞肺癌的臨床診斷[5]。腫瘤標(biāo)志物雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聯(lián)用可提高非小細(xì)胞肺癌早期診斷的敏感性，該2項(xiàng)指標(biāo)與非小細(xì)胞肺癌的臨床病理特征存在一定相關(guān)性，也是評(píng)估患者臨床預(yù)后的有效指標(biāo)之一[5]。然而腫瘤標(biāo)志物的敏感性、特異性需采取多種檢測(cè)方法反復(fù)加以驗(yàn)證[6]。本研究應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平，并分析其與非小細(xì)胞肺癌患者的床病理特征的關(guān)系及臨床預(yù)后，以期為非小細(xì)胞肺癌患者的早期診斷和臨床預(yù)后評(píng)估提供可借鑒研究資料。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 篩選2016年1月-2017年11月在廣東省湛江市第四人民醫(yī)院就診的非小細(xì)胞肺癌患者50例作為非小細(xì)胞肺癌組，男27例，女23例；年齡52～68(63.33±8.41)歲；吸煙者22例，無(wú)吸煙者28例；病理類型：腺癌33例，鱗癌17例；腫瘤直徑：<5 mm者20例，≥5 mm者30例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期31例，Ⅲ～Ⅳ期19例；分化程度：高分化17例，低中分化33例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：陽(yáng)性22例，陰性28例。另選擇同期行體檢健康者40例為對(duì)照組，男25例，女15例；年齡55～70(64.17±9.44)歲；吸煙者20例，無(wú)吸煙者20例。2組研究對(duì)象性別、年齡、吸煙比例比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究納入對(duì)象和方法均通過(guò)我院倫理委員會(huì)同意。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)原發(fā)性肺癌診療規(guī)范(2015年版)》[7]制定；肺癌的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均參照2002年國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)標(biāo)準(zhǔn)[8]。

1.3 選擇標(biāo)準(zhǔn) 入組標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理檢查確診；(2)年齡40～70歲；(3)首診患者；(4)患者或其家屬簽署《知情協(xié)議書(shū)》。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴其他類型腫瘤者；(2)存在精神異常者；(3)伴心腦血管、傳染病、肝腎等功能嚴(yán)重不全者；(4)酒精藥物濫用史者；(5)參與其他臨床試驗(yàn)者。

1.4 方法 血清采集：晨起空腹時(shí)抽取參與研究人員的靜脈血約3 ml，并進(jìn)行3 000 r/min離心(半徑為5 cm)10 min，吸取上層血清冷藏待測(cè)；全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀進(jìn)行檢測(cè)血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平，具體操作流程按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行，每份標(biāo)本均測(cè)3次，均值為最終結(jié)果。雌激素試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所有限公司提供(貨號(hào)為DS017)；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒由上海羽朵生物科技有限公司提供(貨號(hào)為YDLC-6723)；以上兩個(gè)指標(biāo)檢測(cè)均由專門(mén)的研究人員操作完成。

1.5 觀察指標(biāo) (1)比較2組血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平；(2)分析血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與非小細(xì)胞肺癌患者的性別、年齡、吸煙、病理類型、腫瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系；(3)隨訪2年，第1年每3個(gè)月隨訪1次，第2年每6個(gè)月隨訪1次，記錄死亡病例數(shù)，比較死亡患者(死亡組)與存活患者(存活組)入院時(shí)血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平。

2 結(jié) 果

2.1 血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平比較 非小細(xì)胞肺癌組患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 2組血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平比較

2.2 血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征的關(guān)系 非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與患者的性別、年齡、吸煙史、病理類型、腫瘤直徑無(wú)關(guān)(P>0.05)，與非小細(xì)胞肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同臨床病理特征非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平比較

2.3 死亡與存活患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平比較 隨訪2年，死亡14例，存活36例，死亡患者入院時(shí)血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平均顯著高于存活組(P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 死亡和存活患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平比較

3 討 論

非小細(xì)胞肺癌起病隱匿，早期癥狀不明顯，臨床診斷困難，多數(shù)肺癌患者于中晚期才被發(fā)現(xiàn)，錯(cuò)過(guò)了最佳治療期[9]。提高非小細(xì)胞肺癌的早期診斷率是降低非小細(xì)胞肺癌患者病死率及延長(zhǎng)生存期的關(guān)鍵[9]。近年來(lái)，腫瘤血清學(xué)血標(biāo)志物已成為非小細(xì)胞肺癌臨床篩查的有效手段之一[10]。國(guó)內(nèi)外臨床研究報(bào)道一些非小細(xì)胞肺癌血清標(biāo)志物，如淀粉樣蛋白A和細(xì)胞角蛋白片段[11]、胱抑素C及同型半胱氨酸[12]、癌胚抗原[13]、微小RNA-146a[14]等。上述指標(biāo)可反映非小細(xì)胞肺癌患者的部分臨床特征，非小細(xì)胞肺癌早期診斷的特異性、敏感性仍未獲得解決。

雌激素屬于甾體類固醇性激素，可誘導(dǎo)多種原癌基因活化和抑制抑癌基因表達(dá)，促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ、細(xì)胞周期有關(guān)調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)，減少腫瘤抑制性生長(zhǎng)因子的合成，誘發(fā)細(xì)胞惡變，參與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展[15]。臨床研究發(fā)現(xiàn)[16]，抗雌激素治療可抑制肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，聯(lián)合化療、分子靶向藥物治療非小細(xì)胞肺癌發(fā)揮一定的效果?？聴畹萚17]采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素發(fā)現(xiàn)，患者血清雌激素水平顯著高于正常人群，血清雌激素水平與患者臨床分期呈正相關(guān)。本研究采取化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌組患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平顯著高于健康對(duì)照組，非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與患者的年齡、性別、吸煙史、病理類型、腫瘤直徑無(wú)關(guān)，與患者的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，死亡患者入院時(shí)血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平顯著高于存活組。上述結(jié)果表明，雌激素可能參與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展，血清雌激素水平測(cè)定對(duì)非小細(xì)胞肺癌的臨床病理特征及預(yù)后評(píng)價(jià)具有一定臨床價(jià)值。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是目前已知的特異性最高、功能最強(qiáng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞刺激因子，幾乎在所有的腫瘤中均表達(dá)[18]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子通過(guò)與其特異性受體結(jié)合活化酪氨酸激酶受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及改變內(nèi)皮基因表達(dá)，形成新的毛細(xì)血管，腫瘤組織獲得豐富的血供，一定程度增加腫瘤的侵襲能力；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子也能誘導(dǎo)生存素表達(dá)，對(duì)臨床化療過(guò)程中腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞的逃避起到保護(hù)作用[19]。臨床治療中可通過(guò)降低血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，降低腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)速度，已取得一定的成效[19]。有研究[20]采取免疫組織化學(xué)法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)，并分析其與該病的臨床病理特征、患者臨床預(yù)后的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在非小細(xì)胞肺癌中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁組織，非小細(xì)胞肺癌中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的陽(yáng)性表達(dá)與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性表達(dá)患者的無(wú)病生存率低于陰性表達(dá)患者。

綜上所述，非小細(xì)胞肺癌患者血清雌激素和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平顯著升高，與肺癌臨床病理特征和預(yù)后相關(guān)。