戴璐怡,林勝利,葉建勇,徐仰麗,葉 劍,郭安托,馬建忠,儲(chǔ)張杰
(1.溫州科技職業(yè)學(xué)院,浙江溫州 325006;2.溫州市特色食品資源工程技術(shù)研究中心, 浙江溫州 325006;3.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,宿遷農(nóng)科所,江蘇宿遷 223800; 4.溫州市漁業(yè)技術(shù)推廣站,浙江溫州 325000;5.浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所洞頭基地, 浙江溫州 325000;6.浙江海洋大學(xué),浙江舟山 316000)
脂肪作為魚(yú)類生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一,不僅能夠提供大量的能量,而且也能為魚(yú)體提供必需脂肪酸。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中選擇合適的脂肪源,既能保證營(yíng)養(yǎng)的平衡,促進(jìn)魚(yú)體生長(zhǎng),又能降低飼料成本,減少環(huán)境污染[1]。魚(yú)油作為傳統(tǒng)水產(chǎn)飼料常用的脂肪源,二十二碳六烯酸(EPA)和二十碳五烯酸(DHA)等必需脂肪酸含量豐富,適口性良好,易于吸收。但受資源的限制,魚(yú)油產(chǎn)量低,價(jià)格高,為了維持水產(chǎn)養(yǎng)殖的持續(xù)發(fā)展,降低飼料的生產(chǎn)成本,急需尋找合適的替代脂肪源[2]。大量研究證明,在不影響魚(yú)類生長(zhǎng)的基礎(chǔ)上,用植物油替代魚(yú)油是可行的,如大豆油、棕櫚油、玉米油等[3-5],但不同脂肪源脂肪酸組成存在差異性,對(duì)魚(yú)體脂肪酸組成具有較大的影響[6-7]。
臺(tái)灣泥鰍(Paramisgumusdabryanusssp)是中國(guó)臺(tái)灣地區(qū)改良的泥鰍品種,因其生長(zhǎng)迅速、個(gè)體大、養(yǎng)殖密度高、抗病力強(qiáng)、養(yǎng)殖周期短、易捕撈等特點(diǎn),備受養(yǎng)殖戶的歡迎和消費(fèi)者青睞[8]。目前,我國(guó)針對(duì)臺(tái)灣泥鰍的研究主要集中在繁育[9-11]、營(yíng)養(yǎng)特性[12-15]、生長(zhǎng)特性[16,17]等方面,針對(duì)泥鰍人工配合飼料的研究還較少。李新蕊等[8]研究不同餌料密度對(duì)臺(tái)灣泥鰍仔魚(yú)攝食存活生長(zhǎng)的影響;周朝偉等[18]評(píng)價(jià)了飼料蛋白水平對(duì)臺(tái)灣泥鰍幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、飼料利用率及免疫酶活性的影響。但關(guān)于不同脂肪源對(duì)臺(tái)灣泥鰍生長(zhǎng)性能和肌肉脂肪酸組成及質(zhì)構(gòu)的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。
本研究以臺(tái)灣泥鰍為研究對(duì)象,在其基礎(chǔ)日糧中分別添加魚(yú)油(FO)、大豆油(SO)、花生油(PO)、玉米油(CO)或棕櫚油(PaO),探討不同脂肪源飼養(yǎng)對(duì)其生長(zhǎng)性能、肌肉脂肪酸組成、肌肉質(zhì)構(gòu)的影響,綜合評(píng)價(jià)臺(tái)灣泥鰍對(duì)不同脂肪源的利用效果,以期為臺(tái)灣泥鰍飼料油脂選用及基礎(chǔ)配方開(kāi)發(fā)提供參考資料。
實(shí)驗(yàn)用臺(tái)灣泥鰍來(lái)源于浙江平陽(yáng)美飛淡水泥鰍養(yǎng)殖專業(yè)合作社,運(yùn)回后暫養(yǎng)在水箱(38 cm×26 cm×40 cm)中,養(yǎng)殖2周投喂通威魚(yú)用膨化配合飼料以適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。正式實(shí)驗(yàn)前,將泥鰍饑餓24 h。挑選體重為(2.30±0.05) g的健康泥鰍750尾,隨機(jī)分為5組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)水箱(規(guī)格同上)50尾。整個(gè)實(shí)驗(yàn)持續(xù)7周,每天按照泥鰍體重的3%~5%進(jìn)行投喂,投喂3次,分別為早(07:00-08:00)、中(11:00-12:00)和晚(17:00-18:00)。日換水一次,保證水質(zhì)潔凈,每周進(jìn)行稱重,并定期調(diào)整投喂量;如有泥鰍死亡,及時(shí)修改飼料投喂量。
實(shí)驗(yàn)飼料分為5組,配方及基本成分見(jiàn)表1。5組實(shí)驗(yàn)飼料中分別使用不同的脂肪源: FO、SO、PO、CO、PaO。按照表1精準(zhǔn)稱取原料,粉末飼料原料在混合前粉碎通過(guò)60目篩,按照添加量從小到大的順序逐級(jí)攪拌混勻。用小型飼料顆粒機(jī)制作出直徑為2 mm的飼料,置熱風(fēng)干燥箱內(nèi)55 ℃烘干8 h后儲(chǔ)存于-18 ℃冰箱備用。
表1 實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)飼料配方及基本組成(干物質(zhì))Tab.1 Formula and basic composition of experimental basic feed(dry matter) %
實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),將臺(tái)灣泥鰍饑餓24 h,分別撈取各水箱臺(tái)灣泥鰍濾水后稱重(精確至0.01 g),并記錄尾數(shù),用于生長(zhǎng)性能計(jì)算。從各缸中隨機(jī)挑取12尾全魚(yú)體攪碎后轉(zhuǎn)入-20 ℃冰箱中,用于體成分的測(cè)定;取10尾臺(tái)灣泥鰍背部肌肉,用于質(zhì)構(gòu)的測(cè)定;取4尾臺(tái)灣泥鰍背部肌肉組織,經(jīng)液氮速凍后轉(zhuǎn)入-20 ℃冰箱中,用于脂肪酸組分和相對(duì)含量的測(cè)定。
采用高溫灼燒法(GB5009.4-2016)測(cè)定灰分;采用凱氏定氮法(GB5009.5-2016)測(cè)定臺(tái)灣泥鰍和飼料的粗蛋白;采用索氏抽提法(GB 5009.6-2016)測(cè)定臺(tái)灣泥鰍和飼料的粗脂肪;采用質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定泥鰍背部肌肉的硬度、黏著性、彈性、凝聚性、咀嚼性等質(zhì)構(gòu)指標(biāo),參數(shù)為:探頭P/36R,觸發(fā)力為0.2 N,測(cè)試速率60 mm/min,測(cè)試間隔時(shí)間為5 s,壓縮比為40%,重復(fù)10次測(cè)定;采用氣相色譜儀(Gilent 6890,美國(guó))按照GB/T17377-2008測(cè)定臺(tái)灣泥鰍背部肌肉脂肪酸組成,結(jié)果采用面積歸一法計(jì)算不同脂肪酸含量。
每個(gè)實(shí)驗(yàn)組的魚(yú)計(jì)數(shù)、稱重,計(jì)算臺(tái)灣泥鰍的成活率(Survival rate,SR)、特定生長(zhǎng)率(Specific growth rate,SGR)和飼料系數(shù)(Feed conversion rate,F(xiàn)CR)。各項(xiàng)指標(biāo)按下式計(jì)算:
SGR=100%×(lnmt-lnm0)/t;
FCR=mf/(mt-m0);
SR=(n0-nt)/n0×100%。
式中mt、m0分別為實(shí)驗(yàn)?zāi)~(yú)體均重、實(shí)驗(yàn)初魚(yú)體均重,t為實(shí)驗(yàn)天數(shù);mf為每個(gè)水箱投喂飼料總量;nt、n0分別為終末尾數(shù)、初始尾數(shù)。
數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示,實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析,采用Duncan氏檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較,P<0.05即認(rèn)為有顯著性差異。
由表2可知,7周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍成活率沒(méi)有顯著影響。FO組與PaO組的終末體重、SGR均顯著高于其他三組,F(xiàn)CR顯著低于其他三組;PO組的終末體重、SGR均顯著低于其他四組,F(xiàn)CR顯著高于其他四組。
表2 不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍生長(zhǎng)性能的影響Tab.2 The effects of different lipid diets on growth performance of P.dabryanus
如表3所示,不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍的全魚(yú)體粗脂肪、灰分和粗蛋白存在顯著影響。全魚(yú)體粗蛋白含量在16.48%~18.38%之間,其中PO組顯著高于CO組;粗脂肪含量范圍在3.23%~4.43%,PaO組粗脂肪含量顯著高于其他組,PO組和CO組粗脂肪含量顯著低于其他組;灰分含量在1.75%~3.04%,CO組顯著高于FO組和PaO組,與SO組和PO組沒(méi)有顯著差異。
表3 不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍全魚(yú)體一般成分的影響Tab.3 The effects of different lipid diets on the proximate components of P.dabryanus %
表4所示為攝食不同脂肪源飼料7周后臺(tái)灣泥鰍的背部肌肉脂肪酸組成。在臺(tái)灣泥鰍中共檢測(cè)到28種脂肪酸。四個(gè)植物油組的飽和脂肪酸(SFA)相對(duì)含量顯著低于魚(yú)油組,不飽和脂肪酸(UFA)顯著高于魚(yú)油組。其中棕櫚酸(C16 ∶0)與硬脂酸(C18 ∶0)是相對(duì)含量最高的兩種SFA,共軛亞油酸(C18 ∶2n-6c)與油酸(C18 ∶1n-9)是相對(duì)含量最高的兩種UFA。
SO組與PaO組的多不飽和脂肪酸(PUFA)相對(duì)含量顯著高于其他各組,PO組最少。從總n-3PUFA中看,F(xiàn)O組相對(duì)含量顯著高于其他各組,達(dá)到(18.16±0.15)%,從總n-6PUFA中看,各組相對(duì)含量存在顯著差異,從大到小分別為SO組>PaO組>CO組>PO組>FO組。FO組的n-3/n-6、EPA+DHA相對(duì)含量、EPA/DHA均顯著高于其他組。
表4 不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍肌肉脂肪酸相對(duì)含量的影響Tab.4 The effects of different lipid diets on fatty acid composition in muscle of P.dabryanus
續(xù)表4
表5所示不同脂肪源飼料對(duì)于臺(tái)灣泥鰍肌肉硬度、膠著性基本沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響,只有在彈性與咀嚼性上CO組和PaO組存在顯著差異。PaO組彈性為(1.46±0.08) MPa,顯著高于其他四組;PaO組咀嚼性為(3.07±0.84) mJ,遠(yuǎn)高于CO組(0.95±0.33) mJ。
表5 不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍肌肉質(zhì)構(gòu)的影響Tab.5 The effect of different lipid diets on the muscle texture of P.dabryanus (mean±SE,n=8)
本研究結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)7周不同脂肪源飼料飼喂后,各組臺(tái)灣泥鰍的成活率均在80%以上,沒(méi)有顯著差異;但其生長(zhǎng)性能卻有顯著差異,說(shuō)明臺(tái)灣泥鰍對(duì)不同脂肪源的轉(zhuǎn)化和吸收存在差異。與魚(yú)油相比,大豆油、玉米油和花生油作為脂肪源對(duì)臺(tái)灣泥鰍生長(zhǎng)有一定的負(fù)面影響,類似結(jié)果在虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[19]、鯉(Cyprinuscarpio)[20]等其他魚(yú)類中報(bào)道。Li[21]研究證實(shí)飼料中低n-3/n-6 PUFA比例油脂會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類SGR降低。魚(yú)油富含具有重要生理功能的高不飽和脂肪酸[22],這可能是魚(yú)油組臺(tái)灣泥鰍生長(zhǎng)效果較好的原因;棕櫚油組臺(tái)灣泥鰍也表現(xiàn)出較好的促生長(zhǎng)效果,粗脂肪含量顯著高于其他四組,可能是由于棕櫚油中豐富的油酸優(yōu)先被魚(yú)類β氧化供能[23],類似結(jié)果在黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)[24]、黃姑魚(yú)(Nibeacoibor)[25]等其他魚(yú)類中報(bào)道。
本研究結(jié)果表明不同脂肪源飼料對(duì)臺(tái)灣泥鰍的脂肪酸組成有顯著影響。四組植物油中油酸、共軛亞油酸和γ-亞麻酸相對(duì)含量顯著高于魚(yú)油組;魚(yú)油組總n-3 PUFA與DHA+EPA相對(duì)含量是其他各組植物油的2倍或以上,類似的結(jié)果在其他魚(yú)類中報(bào)道,包括真泥鰍(Misgurunsanguilliaudatuses)[26]、圓斑星鰈(Veraspervariegatus)[27]和黑鯛(Acanthopagrusschlegelii)[28],說(shuō)明泥鰍可以很好地吸收和利用飼料中的不飽和脂肪酸,進(jìn)而提高自身品質(zhì)?,F(xiàn)階段人類膳食中n-6 PUFA大多都是過(guò)量的,但n-3 PUFA卻嚴(yán)重不足,故認(rèn)為高n-3/n-6的魚(yú)肉對(duì)人類來(lái)說(shuō)是更健康的[29]。在本研究中,魚(yú)油組的n-3/n-6最高,可以認(rèn)為魚(yú)油組的臺(tái)灣泥鰍的肌肉更符合人類營(yíng)養(yǎng)需求。
同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)不同脂肪源飼料飼養(yǎng)下臺(tái)灣泥鰍的肌肉中MUFA與SGR具有顯著的負(fù)相關(guān)性(P=0.008),有待進(jìn)一步驗(yàn)證研究。
本研究結(jié)果表明棕櫚油組臺(tái)灣泥鰍肌肉的彈性較魚(yú)油組有顯著提升。肌肉的彈性可以反映對(duì)魚(yú)體肌肉組織的結(jié)合狀態(tài),其結(jié)合能力越好,彈性越高[30],同時(shí)反映了對(duì)臺(tái)灣泥鰍的食用口感,表明棕櫚油對(duì)臺(tái)灣泥鰍肌肉品質(zhì)有改善作用。大豆油組、花生油組和玉米油組在質(zhì)構(gòu)上沒(méi)有顯著差異,說(shuō)明大豆油、花生油和玉米油為脂肪源的飼料不會(huì)影響臺(tái)灣泥鰍的肉的口感。
本研究結(jié)果表明,不同脂肪源對(duì)臺(tái)灣泥鰍的成活率影響不顯著;從生長(zhǎng)性能角度分析,相較大豆油、花生油和玉米油,魚(yú)油和棕櫚油更加適合作為臺(tái)灣泥鰍的脂肪源;其中棕櫚油有利于魚(yú)體脂肪積累,提升肌肉的彈性;飼料中四種植物油均導(dǎo)致臺(tái)灣泥鰍肌肉總n-3 PUFA含量顯著降低,魚(yú)油可以提高魚(yú)體肌肉中n-3 PUFA含量,從而提高臺(tái)灣泥鰍的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。