102例新生兒交叉配血不合原因分析及輸血策略*

周 蓉，屈柯暄，呂孟興

云南省昆明市兒童醫(yī)院輸血科，云南昆明 650228

輸血是臨床搶救新生兒生命不可替代的治療方法，輸血前交叉配血試驗(yàn)相合是保證臨床輸血安全、有效的重要環(huán)節(jié)，但新生兒交叉配血不合是常遇到的問(wèn)題。進(jìn)行新生兒輸血前血清學(xué)檢測(cè)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇合適的血液進(jìn)行交叉配血，可降低交叉配血不合發(fā)生率。美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)(AABB)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)4個(gè)月以下的嬰幼兒進(jìn)行限定的輸血前血清學(xué)檢測(cè)，要求首次檢測(cè)必須對(duì)患兒紅細(xì)胞進(jìn)行ABO血型和RhD血型測(cè)定，以及篩查患兒或母親血漿(血清)中的不規(guī)則紅細(xì)胞抗體，如存在抗體，必須輸注ABO血型相容的紅細(xì)胞，直到檢測(cè)不到該獲得性抗體為止[1]。本文對(duì)本院新生兒交叉配血不合的原因及輸血策略進(jìn)行回顧性分析，收集接受輸血治療的新生兒血液標(biāo)本，運(yùn)用微柱凝膠卡式法進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩選及抗體鑒定試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月至2019年8月本院申請(qǐng)輸血的新生兒1 903例為研究對(duì)象，年齡0～28 d。收集患兒交叉配血試驗(yàn)結(jié)果，以及電子病歷記錄，包括病程、疾病、治療等情況。供血者血液標(biāo)本均為不規(guī)則抗體篩選陰性，直接抗人球蛋白試驗(yàn)(DAT)陰性。

1.2儀器與試劑 2420離心機(jī)(日本久保田)、LC-10C低速離心機(jī)(安徽中科中佳有限公司)、TD-A型醫(yī)用離心機(jī)(長(zhǎng)春博研有限公司)、FYQ型免疫微柱孵育器(長(zhǎng)春博研有限公司)、HH.W21.600S型電熱恒溫水溫箱(上海躍進(jìn)有限公司)、CX21型生物顯微鏡(奧林巴斯公司)。標(biāo)準(zhǔn)血清抗-D、抗-M、抗-E、抗-C、抗-e、抗-c、抗人球蛋白試劑及譜細(xì)胞均為上海血液生物醫(yī)藥有限公司產(chǎn)品；篩選細(xì)胞、微柱凝膠卡均為長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司提供；凝聚胺試劑為珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.3方法 運(yùn)用微柱凝膠卡式法為主進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩選及抗體鑒定試驗(yàn)，需要時(shí)采用鹽水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法進(jìn)行復(fù)查。檢測(cè)方法均按參考文獻(xiàn)[2]進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)操作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1新生兒配血不合發(fā)生率和原因分類(lèi) 1 903例新生兒交叉配血試驗(yàn)中，交叉配血不合102例，新生兒交叉配血不合發(fā)生率5.36%；102例交叉配血不合新生兒中男60例(3.15%)，女42例(2.21%)，男性交叉配血不合發(fā)生率高于女性(P<0.05)；102例交叉配血不合新生兒中，紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致交叉配血不合40例(39.2%)，DAT陽(yáng)性導(dǎo)致交叉配血不合62例(60.8%)。

2.2紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致交叉配血不合 紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致交叉配血不合的40例患兒其抗體鑒定結(jié)果顯示，Rh血型系統(tǒng)抗體占52.5%(21/40)，抗-D占15.0%(6/40)、抗-Ec占15.0%(6/40)、抗-E占12.5%(5/40)、抗-c占2.5%(1/40)、抗-(D+E)占2.5%(1/40)、抗-(D+C)占2.5%(1/40)、抗-RH17占2.5%(1/40)；ABO血型系統(tǒng)抗體占32.5%(13/40)，13例新生兒母親血型均為O型Rh陽(yáng)性，其中6例新生兒血型為A型Rh陽(yáng)性，血液中檢出IgG抗-A；7例新生兒血型為B型Rh陽(yáng)性，血液中檢出IgG抗-B；MNS血型系統(tǒng)占7.5%(3/40)；抗體無(wú)特異性占7.5%(3/40)。紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致新生兒交叉配血不合中Rh血型系統(tǒng)抗體占52.5%，ABO血型系統(tǒng)抗體占32.5%，均高于其他血型系統(tǒng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 紅細(xì)胞抗體鑒定結(jié)果(n=1 903)

2.3疾病與交叉配血不合的關(guān)系 分析102例交叉配血不合新生兒所患疾病，結(jié)果顯示，紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致交叉配血不合的患兒中高膽紅素血癥占29.4%(30/102)，黃疸占7.8%(8/102)，高于新生兒溶血性貧血[1.0%(1/102)]和消化道穿孔[1.0%(1/102)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DAT陽(yáng)性導(dǎo)致交叉配血不合的患兒中，新生兒肺炎占28.4%(29/102)，高于壞死性腸炎[7.8%(8/102)]、重癥感染[6.9%(7/102)]、新生兒貧血[6.9%(7/102)]、消化道穿孔[3.9%(4/102)]、消化道畸形[2.9%(3/102)]、化膿性腦膜炎[2.0%(2/102)]和腹部包塊[2.0%(2/102)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

交叉配血試驗(yàn)的目的是檢測(cè)受血者、獻(xiàn)血者血液之間是否存在不配合的抗原、抗體成分，防止溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生[3]。新生兒交叉配血比較特殊，新生兒期新生兒溶血病(HDN)發(fā)病率較高，受母體IgG類(lèi)抗體的影響，存在免疫性抗體，常常導(dǎo)致交叉配血不合。本研究對(duì)納入的1 903例新生兒進(jìn)行交叉配血結(jié)果分析，交叉配血不合102例，交叉配血不合發(fā)生率為5.36%。而近年來(lái)有關(guān)新生兒交叉配血不合的報(bào)道較少，且多為HDN檢出情況的分析，郭瑩瑩等[4]報(bào)道母嬰血型不合的HDN檢出率為62.0%，黃津明等[5]報(bào)道母嬰血型不合的HDN檢出率為63.4%，楊璇等[6]報(bào)道母嬰血型不合的HDN檢出率為49.9%，參考以上文獻(xiàn)并對(duì)本研究病例分析，考慮由于本院新生兒科醫(yī)生對(duì)HDN重視度較高，當(dāng)母嬰血型不合及新生兒出現(xiàn)不明原因黃疸的情況均送檢新生兒血液標(biāo)本進(jìn)行鑒別診斷。這些新生兒在交叉配血時(shí)已選用對(duì)應(yīng)抗原陰性血液配血，因此配血不合發(fā)生率較低。因此，在新生兒輸血前進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)非常必要，可降低交叉配血不合發(fā)生率，同時(shí)避免因交叉配血不合而延誤新生兒的搶救與治療。

102例交叉配血不合新生兒中，男性交叉配血不合發(fā)生率高于女性(P<0.05)。這與有關(guān)成人交叉配血不合的報(bào)道不同，成人交叉配血不合主要由免疫刺激產(chǎn)生，如輸血或妊娠，多以女性為主[7]。本研究結(jié)果還需要擴(kuò)大樣本量調(diào)查，進(jìn)一步深入研究是否與成人存在不同。HDN是指母嬰血型不合時(shí)，因胎兒體內(nèi)存在父親遺傳的血型抗原而母親體內(nèi)無(wú)此抗原，胎兒紅細(xì)胞抗原通過(guò)臍帶進(jìn)入母體后刺激產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，這些抗體再通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞抗原與抗體發(fā)生免疫性溶血。HDN是引起新生兒黃疸或新生兒高膽紅素血癥的重要原因之一[8]，尤其以Rh新生兒溶血病(Rh HDN)和ABO新生兒溶血病(ABO HDN)常見(jiàn)，這與徐超凡等[9]、韓雪芹等[10]、葉海輝等[11]的研究結(jié)果一致。成人通常以不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)檢測(cè)血清或血漿中存在的免疫抗體，新生兒與成人不同，新生兒受母體IgG抗-A和抗-B影響，由于不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)是檢測(cè)ABO以外的不規(guī)則抗體，不能檢出血液中IgG抗-A和IgG抗-B紅細(xì)胞抗體，則在新生兒不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)陰性，但新生兒交叉配血不合時(shí)ABO HDN應(yīng)為考慮的重要因素之一，需要進(jìn)一步做患兒紅細(xì)胞抗體放散試驗(yàn)來(lái)確診HDN。

本研究中有3例不規(guī)則抗體陽(yáng)性患兒，與譜細(xì)胞有廣譜反應(yīng)，無(wú)法鑒定抗體特異性。結(jié)合病例總結(jié)原因可能為：(1)存在多種特異性抗體；(2)存在自身抗體合并同種抗體；(3)譜細(xì)胞抗原多樣性較少，從而檢測(cè)不出稀有抗體?？贵w鑒定困難時(shí)進(jìn)一步對(duì)患兒血液進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)，需選用抗原種類(lèi)較多的多組譜細(xì)胞鑒定抗體特異性。新生兒在出生3個(gè)月內(nèi)，自身幾乎無(wú)血型抗體，攜帶的抗體來(lái)自母體，母親抗體篩查結(jié)果可輔助分析新生兒抗體。因此檢測(cè)新生兒母親血液和新生兒紅細(xì)胞放散液的抗體特異性尤為重要。

紅細(xì)胞抗體導(dǎo)致配血不合的對(duì)策：鑒定其紅細(xì)胞抗體特異性，除ABO HDN選擇O型洗滌紅細(xì)胞交叉配血配合進(jìn)行輸注，其余選擇檢出紅細(xì)胞抗體對(duì)應(yīng)紅細(xì)胞抗原陰性的血液交叉配血配合進(jìn)行輸注；抗體鑒定無(wú)特異性應(yīng)選擇與新生兒母親Rh(D/C/c/E/e)分型、MNS等高頻抗原同型的血液交叉配血配合進(jìn)行輸注，本研究納入的病例按照以上原則進(jìn)行交叉配血配合輸注，均達(dá)到預(yù)期效果，無(wú)輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

102例新生兒交叉配血不合中，62例交叉配血不合均為紅細(xì)胞DAT陽(yáng)性。DAT的目的是檢測(cè)紅細(xì)胞表面是否存在不完全抗體。不完全抗體致敏紅細(xì)胞，在鹽水介質(zhì)中致敏紅細(xì)胞不發(fā)生凝集，加入抗人球蛋白試劑后則出現(xiàn)凝集，即為DAT陽(yáng)性，表示紅細(xì)胞上有相應(yīng)抗體存在。導(dǎo)致DAT陽(yáng)性原因如下：(1)紅細(xì)胞固有抗原自身抗體；(2)HDN；(3)藥物誘導(dǎo)的抗體；(4)細(xì)菌感染、自身抗體或同種抗體引起的補(bǔ)體激活；(5)溶血性輸血反應(yīng)。常云等[12]、陳麗娟等[13]報(bào)道成人DAT陽(yáng)性結(jié)果多見(jiàn)于血液病、腫瘤等疾病和藥物影響。本研究顯示，DAT陽(yáng)性的新生兒中，臨床診斷疾病主要為新生兒肺炎，與成人不同。新生兒肺炎是新生兒期常見(jiàn)疾病，有研究報(bào)道，新生兒肺炎支原體感染檢出率為10%，嬰兒及兒童肺炎支原體感染檢出率為大于20%[14-15]。本研究中新生兒肺炎主要為細(xì)菌或肺炎支原體感染，肺炎支原體可產(chǎn)生高效價(jià)冷凝聚素，致敏自身紅細(xì)胞，可致DAT陽(yáng)性；對(duì)于重癥感染患兒，不同程度長(zhǎng)期應(yīng)用抗菌藥物，可發(fā)生藥物抗體致敏紅細(xì)胞，也可導(dǎo)致DAT陽(yáng)性；新生兒DAT陽(yáng)性與新生兒肺炎的相關(guān)性還需進(jìn)一步研究明確。

DAT陽(yáng)性導(dǎo)致交叉配血不合對(duì)策：懷疑可能存在同種抗體的情況，需進(jìn)行新生兒紅細(xì)胞放散試驗(yàn)或抗體鑒定來(lái)明確同種抗體是否存在；ABO HDN選擇O型洗滌紅細(xì)胞交叉配血配合進(jìn)行輸注；其余選擇檢出紅細(xì)胞抗體對(duì)應(yīng)紅細(xì)胞抗原陰性的血液交叉配血配合進(jìn)行輸注；重癥感染或疾病引起DAT陽(yáng)性，選擇同型洗滌紅細(xì)胞交叉配血配合進(jìn)行輸注；鑒定為藥物抗體導(dǎo)致DAT陽(yáng)性，停用該藥物并更換其他藥物進(jìn)行治療，選擇同型洗滌紅細(xì)胞交叉配血配合進(jìn)行輸注。

總之，新生兒交叉配血不合因素很多，根據(jù)交叉配血不合的原因、患兒病史、疾病治療等情況，結(jié)合輸血前血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果，制訂最宜的個(gè)體化輸血方案，確保新生兒輸血安全。