Wnt1與WT1在卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義

裴 越，劉盈盈，孫森森，付 莉，呂榮榮，張鳳舜

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，吉林 長(zhǎng)春130041)

Wnt的激活已經(jīng)在乳腺、肺、結(jié)直腸和造血系統(tǒng)惡性腫瘤中被觀察到，并與腫瘤的復(fù)發(fā)相關(guān)[1]。其中，Wnt1蛋白是一種分泌信號(hào)蛋白，結(jié)合卷曲體受體(FZD)和協(xié)同受體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP5),啟動(dòng)Wnt信號(hào)通路[2]。Wilms’tumour(WT1)在成人腫瘤中廣泛表達(dá)，包括來(lái)自上皮、間充質(zhì)、造血和神經(jīng)元組織。哺乳動(dòng)物WT1基因長(zhǎng)度為50 kb，編碼多達(dá)10個(gè)外顯子的蛋白質(zhì)。至少有36種潛在的哺乳動(dòng)物WT1亞型，其多樣性是通過替代轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、翻譯起始位點(diǎn)、剪接和RNA編輯的組合而產(chǎn)生的[3]。Carter.等[4]對(duì)196例卵巢腫瘤進(jìn)行研究，結(jié)果表示W(wǎng)T1與卵巢腫瘤類型、分級(jí)、FIGO分期及患者生存相關(guān)。本研究探討卵巢癌、正常卵巢組織中Wnt1蛋白及WT1陽(yáng)性表達(dá)及臨床意義。為今后臨床檢測(cè)卵巢癌提供新思路。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

收集 2019年6月至2020年6月于吉林大學(xué)第二醫(yī)院就診的34例卵巢癌患者作為研究對(duì)象，同時(shí)取因子宮肌瘤行全子宮、雙附件切除術(shù)患者的正常卵巢組織10例，作為對(duì)照組，年齡為 43-73歲。所有患者均接受手術(shù)治療并經(jīng)病理確診，其中漿液性癌 24 例，黏液性癌 2例，透明細(xì)胞癌 4例，子宮內(nèi)膜樣癌3 例，未分化癌1例，且均未接受放療、化療及其他抗腫瘤治療;所有患者均未合并其他原發(fā)性腫瘤?；颊甙?FIGO，2014) 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行手術(shù)-病理分期，其中Ⅰ期4例，Ⅱ期12例，Ⅲ期17例，Ⅳ期1 例;按是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行分組，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組8例，無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移組17例。本研究已通過我院倫理委員會(huì)審批。

1.2 方法

1.2.1免疫組化檢測(cè)Wnt1、WT1表達(dá)情況 按照說明書，采用免疫組化(SP) 法觀察Wnt1 、WT1陽(yáng)性反應(yīng)情況。試劑由Immunoway公司提供。比較不同年齡、手術(shù)-病理分期、病理學(xué)分組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況時(shí)Wnt1、WT1表達(dá)陽(yáng)性率(計(jì)算公式為Wnt1表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)÷總例數(shù)×100%) 。

1.2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、計(jì)算P值，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Wnt1和WT1在正常卵巢及卵巢癌組織中表達(dá)和比較卵巢癌組織中 Wnt1 和WT1的陽(yáng)性率均顯著高于正常卵巢組織(表1) 。Wnt1卵巢癌組與正常卵巢組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，WT1表達(dá)卵巢癌組與正常卵巢組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 不同卵巢組織中Wnt1、WT1表達(dá)情況

2.2 卵巢癌組織 Wnt1與卵巢癌臨床病理特征間的關(guān)系免疫組化染色后，鏡下可見Wnt1 陽(yáng)性細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核呈棕黃色染色，不同年齡的卵巢癌患者Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。不同手術(shù)-病理分期卵巢癌的Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量不同(P<0.05)，從Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量逐漸增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。不同病理學(xué)分組卵巢癌的 Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。卵巢癌伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)，Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05) (表2)。

表2 卵巢癌組織中Wnt1的表達(dá)情況

2.3 卵巢癌組織中WT1的表達(dá)免疫組化染色后，鏡下可見WT1 陽(yáng)性細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色染色，不同年齡的卵巢癌患者WT1蛋白相對(duì)表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。不同手術(shù) -病理分期卵巢癌的WT1蛋白相對(duì)表達(dá)量不同(P<0.05) ，從Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相對(duì)表達(dá)量逐漸增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05) 。不同病理學(xué)分組卵巢癌的 WT1蛋白相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05) 。卵巢癌有、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)，WT1蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) (表3)。

表3 卵巢癌組織中WT1的表達(dá)情況

3 討論

Wnt1蛋白作為Wnt/β-catenin通路的配體之一，由于其基因突變與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，近年來(lái)，已成為研究的熱點(diǎn)。既往有研究發(fā)現(xiàn)，上皮性卵巢漿液性癌組織中WNT1蛋白高表達(dá)[5]，但其在上皮性卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及機(jī)制尚未完全明確。我們通過對(duì)已確診的卵巢癌患者的組織進(jìn)行免疫組化分析，Wnt1蛋白不僅在卵巢癌中表達(dá)，也在正常卵巢組織中表達(dá)，在卵巢癌中表達(dá)的陽(yáng)性率高于正常卵巢組織中表達(dá)的陽(yáng)性率，但由于正常卵巢組織樣本數(shù)量相對(duì)較少，不除外存在偏差，未來(lái)仍需要大樣本數(shù)據(jù)進(jìn)一步研究。另外，Wnt1蛋白與卵巢的分期、有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)，分期越晚，表達(dá)程度越高，Ⅲ期明顯高于Ⅰ-Ⅱ期，由于Ⅳ期患者術(shù)前大多采用新輔助化療，樣本量較少，此次數(shù)據(jù)中的Ⅳ期患者標(biāo)本W(wǎng)nt1表達(dá)陽(yáng)性，不除外個(gè)體差異。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。Wnt1的表達(dá)與年齡、腫瘤病理學(xué)類型無(wú)明顯相關(guān)性。

WT1在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用,小鼠模型中WT1缺失顯著抑制細(xì)胞遷移和侵襲，逆轉(zhuǎn)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，并阻止卵巢癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[6]。在本研究中表明，WT1表達(dá)與卵巢癌病理學(xué)類型有明顯的相關(guān)性，幾乎大部分漿液性卵巢癌中均表達(dá)WT1，其他病理學(xué)類型如：子宮內(nèi)膜樣、透明細(xì)胞樣、粘液性卵巢癌中，WT1表達(dá)較弱，或不表達(dá)。這也與崔麗燕等[7]的研究結(jié)果一致。WT1的表達(dá)與手術(shù)-病理分期有關(guān)，病理分期越晚，其表達(dá)率越高，與年齡、淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性。