PCR檢驗法和細(xì)菌培養(yǎng)法對陰道細(xì)菌檢驗效果的對比研究

（遼寧省健康產(chǎn)業(yè)集團鐵煤總醫(yī)院檢驗科，遼寧 調(diào)兵山 112700）

陰道炎是一種常見的婦科疾病，因為此病的出現(xiàn)與進展十分緩慢，大部分陰道炎患者早期沒有顯著表現(xiàn)，如果患者出現(xiàn)顯著癥狀表現(xiàn)，通常已經(jīng)引發(fā)腹部與盆腔疾病出現(xiàn)[1]。相關(guān)研究顯示：如果患者陰道炎長時間不愈，會引發(fā)不孕。所以，早期診斷陰道炎成為現(xiàn)階段研究的重點[2-3]。細(xì)菌培養(yǎng)法是臨床對陰道炎診斷的常用方法，伴隨研究的不斷加深，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌培養(yǎng)法的時間較長，陽性率不高，患者通常需要進行多次細(xì)菌培養(yǎng)才可以確診。PCR檢驗法是一種新型的檢測方法，其對陰道炎的診斷價值顯著[4-5]。為了探究陰道細(xì)菌檢驗中應(yīng)用PCR檢驗法與細(xì)菌培養(yǎng)法的檢驗效果對比，選取本院2017年5月至2018年8月進行陰道細(xì)菌檢驗的97例患者，全部患者分別接受PCR檢驗法與細(xì)菌培養(yǎng)法檢驗，并對不同檢驗方法對陰道細(xì)菌檢驗準(zhǔn)確率進行對比，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2017年5月至2018年8月隨機選取本院進行陰道細(xì)菌檢驗的97例患者，全部患者都為育齡期女性，入院時都存在一定的白帶分泌增多與陰道瘙癢等癥狀，都滿足陰道炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，所有患者都自愿參與此次研究；并將處在妊娠期患者、月經(jīng)期患者、48 h內(nèi)有過性生活患者以及近期應(yīng)用過陰道局部用藥患者等充分排除。97例患者最小年齡31歲，最大年齡46歲，平均年齡（39.25±8.37）歲；最短病程4個月，最長病程20個月，平均病程（12.26±8.54）個月；通過臨床及檢驗確診顯示：棒狀桿菌、加特納菌、腸球菌分別有30例、32例、35例，所占比例分別為30.93%、32.99%、36.08%。

1.2 方法 ①采集陰道分泌物的方法：于陰道后穹隆處，用無菌棉簽蘸取陰道分泌物，并把陰道分泌物放在無菌鹽水內(nèi)貯存，留置進行陰道細(xì)菌檢驗。②PCR檢驗法：選擇1000 μL陰道分泌物和生理鹽水混合液進行離心處理，離心時間15 min，每分鐘離心12 000轉(zhuǎn)，將上層清液充分棄掉，把剩余組織裂解液在60 ℃水中放置10 min，取出后再進行15 min的離心處理，每分鐘12 000轉(zhuǎn)，并把獲得的上清液應(yīng)用在DNA模板的制作中。檢驗人員需選擇陰性作為參考，其中不加模板DNA，于DNA模板擴增過程中，需在其中添加引物或緩沖對等，把標(biāo)本有效置入PCR儀并進行循環(huán)處理。③細(xì)菌培養(yǎng)法：選取陰道分泌物和生理鹽水混合液在培養(yǎng)基內(nèi)放置，并于二氧化碳孵箱內(nèi)持續(xù)培養(yǎng)3 d。培養(yǎng)基內(nèi)長成菌落后，選擇灰色、光滑并且露滴狀細(xì)菌進行細(xì)菌生化鑒定。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察與記錄不同檢驗方法對陰道細(xì)菌檢驗陽性率與陰道細(xì)菌分布檢驗準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 選擇統(tǒng)計軟件SPSS21.0對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料（如陰道細(xì)菌檢驗陽性率等）以百分率（%）表示，行χ2檢驗，P＜0.05表示組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢驗方法對陰道細(xì)菌檢驗陽性率的對比 PCR檢驗組患者陰道細(xì)菌檢驗陽性率87.63%，與細(xì)菌培養(yǎng)組患者的75.26%相比較存在統(tǒng)計學(xué)方面的意義（P＜0.05）；PCR檢驗組患者陰道細(xì)菌檢驗陰性率12.37%，與細(xì)菌培養(yǎng)組患者的24.74%相比較存在統(tǒng)計學(xué)方面的意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同檢驗方法對陰道細(xì)菌檢驗陽性率的對比[n（%）]

2.2 不同檢測方法對陰道細(xì)菌分布檢驗準(zhǔn)確性的對比 PCR檢驗組患者對加特納菌、棒狀桿菌檢驗準(zhǔn)確率分別為34.02%、28.87%，與細(xì)菌培養(yǎng)組患者的20.62%、16.49%相比較存在統(tǒng)計學(xué)方面的意義（P＜0.05）；PCR檢驗組患者對腸球菌檢驗準(zhǔn)確率26.80%，與細(xì)菌培養(yǎng)組患者的27.84%相比較不存在統(tǒng)計學(xué)方面的意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同檢測方法對陰道細(xì)菌分布檢驗準(zhǔn)確性的對比[n（%）]

3 討論

多數(shù)研究顯示：白帶檢驗結(jié)果反映機體健康狀態(tài)，所以女性如果有白帶分泌物增多表現(xiàn)，需馬上到醫(yī)院就診，并對疾病充分重視，為婦科病的診斷與治療提供有利條件[6-7]。最近幾年，伴隨女性工作壓力、生活壓力的增大，再加上生活節(jié)奏的轉(zhuǎn)變與飲食結(jié)構(gòu)的變化，女性陰道病的發(fā)病率越來越高，最常見的為陰道炎[8-9]。陰道炎是一種常見的女性疾病，和女性陰道中寄生菌群失衡有直接聯(lián)系。通常情況下，女性陰道中的寄生菌群平衡，細(xì)菌分泌不同物質(zhì)會使陰道中的環(huán)境維持穩(wěn)定狀態(tài)。如果陰道菌群失衡，維持菌群平衡的重要細(xì)菌會大量死亡，導(dǎo)致病菌快速增生，于繁殖期多數(shù)營養(yǎng)物質(zhì)被消耗，導(dǎo)致陰道上皮細(xì)胞應(yīng)有的代謝功能喪失，導(dǎo)致陰道內(nèi)酸堿水平異常。陰道上皮細(xì)胞失去了屏障保護功能，會導(dǎo)致炎癥出現(xiàn)，癥狀表現(xiàn)為外陰瘙癢等，對患者生活質(zhì)量造成不利影響[10-11]。所以，探究一種能夠及早判定患者有無感染的出現(xiàn)，確定致病菌種的檢查方法十分重要。臨床上細(xì)菌檢驗結(jié)果可為疾病診斷提供有利參考，對臨床治療也有重要作用，陰道檢驗精確度對陰道疾病的診斷有積極影響，所以，要求陰道檢驗準(zhǔn)確性較高。陰道分泌物檢查是對陰道炎診斷的輔助方法，可反映出陰道內(nèi)菌群與炎性感染程度。細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢驗法是對陰道細(xì)菌檢查的常見方法。細(xì)菌培養(yǎng)法對陰道菌群檢測的應(yīng)用效果較好，但此種方法存在較大的不足，如 準(zhǔn)確率低以及檢驗時間長等。PCR檢驗法是一種新型的檢驗方法，其屬于熒光定量檢測方法，其融合了DNA雜交特異性與RCP敏感性，具有多種優(yōu)勢，如精度準(zhǔn)及準(zhǔn)確率高等[12]。通過分析發(fā)現(xiàn)，PCR檢驗法操作簡便，但對設(shè)備有較高的要求，可在檢驗中達(dá)到無菌操作標(biāo)準(zhǔn)，防止細(xì)菌感染的出現(xiàn)，進而避免檢驗結(jié)果出現(xiàn)異常。并且PCR檢驗法的檢驗時間比較短，可快速獲得檢驗結(jié)果，防止患者反復(fù)進行檢驗，使其在陰道細(xì)菌檢驗中的花費時間和精力明顯減少。多數(shù)報道表明：PCR檢驗法的操作簡單、所用時間較短，且特異性與靈敏度都比較好，在陰道細(xì)菌檢驗中較為適用。與PCR檢驗法相比，細(xì)菌培養(yǎng)法的理論知識比較簡單，但所用時間較長，極易在檢驗時產(chǎn)生細(xì)菌污染的情況，對檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性造成影響[13]。

本研究結(jié)果顯示：PCR檢驗組患者陰道細(xì)菌檢驗陽性率87.63%，高于細(xì)菌培養(yǎng)組的75.26%；PCR檢驗組患者對加特納菌、棒狀桿菌檢驗準(zhǔn)確率分別為34.02%、28.87%，高于細(xì)菌培養(yǎng)組的20.62%、16.49%；PCR檢驗組患者對腸球菌檢驗準(zhǔn)確率26.80%，與細(xì)菌培養(yǎng)組的27.84%相比較不存在統(tǒng)計學(xué)方面的意義。楊青青等[14]學(xué)者探究了細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢驗法對陰道細(xì)菌檢驗的臨床價值對比，其選取81例陰道炎患者分別進行細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢驗法檢驗，結(jié)果顯示：PCR檢驗法的檢驗陽性率77.78%高于細(xì)菌培養(yǎng)法的39.51%，此研究結(jié)果與本研究一致。

總之，PCR檢驗法具有操作簡單、檢驗準(zhǔn)確率高以及所用時間短等優(yōu)勢，其對陰道細(xì)菌檢驗的準(zhǔn)確率優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)法。