卵孢小奧德蘑的研究進(jìn)展*

杜 娜，胡惠萍，謝意珍，3，雍天喬，莫偉鵬，梁曉薇，卓麗君

（1.廣東省微生物研究所廣東省科學(xué)院 華南應(yīng)用微生物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣東省微生物安全與健康重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣東省微生物應(yīng)用新技術(shù)公共實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510070；2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院資源與環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510225；3.廣東粵微食用菌技術(shù)有限公司，廣東 廣州 510663）

卵孢小奧德蘑（Oudemansiella raphanipes） 商品名為黑皮雞菌，又名二孢擬奧德蘑、長根菇、水雞、長根金錢菌和露水雞等。卵孢小奧德蘑分布于我國的大部分地區(qū)及國外，如澳大利亞、印度、日本、泰國和韓國等地，夏秋季主要生長在無患子科（Sapindaceae） 等闊葉林地下[1]。卵孢小奧德蘑鮮嫩醇香、肉質(zhì)細(xì)嫩、口感獨(dú)特，生熟皆可食，營養(yǎng)豐富，且具有良好的藥用價(jià)值，如抗氧化、抗腫瘤和抑制病原菌等功效[2-4]。通過對卵孢小奧德蘑的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為進(jìn)一步深入研究和產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供參考。

1 卵孢小奧德蘑的分類地位

卵孢小奧德蘑Oudemansiella raphanipes(Berk.)Pegler&T.W.K.Young[5]，隸屬于傘菌綱 （Agaricomycetes） 傘菌目 （Agaricales） 膨瑚菌科 （Physalacriceae） 小奧德蘑屬 （Oudemansiella）[1，6]。

1850年，卵孢小奧德蘑發(fā)現(xiàn)于印度錫金的大吉嶺，并被Berkeley首次報(bào)道后命名為Agaricus raphanipes[7]，將其置于傘菌屬 （Agaricus）。1880年，Spegazzini提出傘菌屬可置于Oudemansia中，由于這個(gè)名稱被不同源梧桐科（Sterculiaceae） 的同名詞所占據(jù)，所以認(rèn)為有必要將其改名為小奧德蘑屬（Oudemansiella）[8]。1986年P(guān)egler等在小奧德蘑屬[5]分類研究中，通過觀察孢子外觀形態(tài)，將卵孢小奧德蘑命名為O.raphanipes。1993年楊祝良等[9]首次報(bào)道了采集自云南西雙版納州勐臘縣的中國卵孢小奧德蘑。隨著系統(tǒng)分類學(xué)的完善，2010年P(guān)etersen等[10-11]收集了我國西南地區(qū)（滇、黔、川、藏）小奧德蘑屬及全球傘菌目標(biāo)本，通過詳細(xì)的類型樣本信息，宏觀和微觀描述，形態(tài)分類學(xué)，分子應(yīng)用和系統(tǒng)發(fā)育學(xué)等研究，認(rèn)為小奧德蘑屬僅生長于熱帶地區(qū)，且不是多年生品種；通過分類大部分來自干蘑屬（Xerula）和小奧德蘑屬下物種，被提議作為新組合Hymenopellis，我國卵孢小奧德蘑O.raphanipes也被命名為Oudemansiella raphanipes。由于中國首次報(bào)道卵孢小奧德蘑學(xué)名為O.raphanipes，為避免造成學(xué)名混亂，國內(nèi)學(xué)術(shù)研究報(bào)道均一直使用該學(xué)名。

2 卵孢小奧德蘑的栽培歷史

我國進(jìn)行卵孢小奧德蘑人工栽培時(shí)間較晚。2007年，孫思國等[22]在山東省濟(jì)寧市金鄉(xiāng)縣首次成功栽培卵孢小奧德蘑；并于2013年實(shí)現(xiàn)了卵孢小奧德蘑的周年生產(chǎn)[23]；2012年，胡惠萍等[24]首次提出了卵孢小奧德蘑菌袋直接出菇的栽培方法；2019年，顏振蘭等[25]研究了卵孢小奧德蘑的工廠化設(shè)施栽培技術(shù)，栽培均取得成功，每袋鮮菇產(chǎn)量約0.3 kg，且供不應(yīng)求。目前，卵孢小奧德蘑在山東、四川、廣東、湖南、江蘇和山西等地形成了一定規(guī)模的人工栽培，但產(chǎn)量小、質(zhì)量不穩(wěn)定，且人工成本高。

3 卵孢小奧德蘑的生物學(xué)特性

3.1 形態(tài)特征

自然環(huán)境下，卵孢小奧德蘑的子實(shí)體在夏秋季混交林或闊葉林中單生或群生，菌蓋直徑1 cm～12 cm，半球形至逐漸平展，中部扁平狀或似臍狀并有深色輻射狀皺褶，濕潤時(shí)粘稠，在成熟或未平展時(shí)呈灰色、棕色、黃褐色、淺褐色至黑褐色，表面光滑；菌肉薄，白色；菌褶白色至乳白色，彎生、厚、稍密，不等長[1]。菌柄 （2.0～30.0） cm× （0.2～2.1）cm，近圓柱形，表皮淺灰色至深灰色，密被褐色氈狀鱗片，但先端近白色，表面脆骨質(zhì)，內(nèi)部纖維質(zhì)且松軟，基部稍膨大且延生成假根[1]。孢子印白色至乳白色；孢子 （13～21） μm× （9～16） μm，薄壁、無色透明，表面光滑，呈橢圓形近卵圓形；側(cè)囊狀體 （70～200） μm × （17～52） μm，有梗，頭狀先端梭形突出，褐色至金色，薄壁或略厚，無色透明；褶緣囊狀體 （25～240） μm× （5～41） μm，有梗、梭形、頂端稍鈍，近圓柱形、薄壁、無色透明[1]。

胡惠萍等[26]從野外采集到白色卵孢小奧德蘑，子實(shí)體菌蓋中部凸起并有輻射狀皺褶，幼時(shí)至成熟均為白色，濕潤時(shí)更粘稠。菌柄近圓柱形、白色、有縱紋脫落。孢子印白色、孢子無色、光滑，卵圓形至寬圓形，大小為（14～18） μm×（10～13） μm[26]。

3.2 生活史

Petersen等[10]研究認(rèn)為卵孢小奧德蘑有2個(gè)擔(dān)孢子；郝艷佳等[1]研究發(fā)現(xiàn)卵孢小奧德蘑有2個(gè)擔(dān)孢子的無性生殖個(gè)體和有4個(gè)擔(dān)孢子的有性繁殖個(gè)體，兩者是同一種。由此可見，卵孢小奧德蘑生活史有較明顯的2種生活模式，分別為四孢卵孢小奧德蘑生活循環(huán)模式和雙孢卵孢小奧德蘑生活循環(huán)模式，但這2種類型的生活史又不是完全獨(dú)立存在的，均要經(jīng)歷擔(dān)孢子萌發(fā)形成初生菌絲階段。不同生活模式孢子萌發(fā)情況見圖1[27]。

由圖1A所示，若初生菌絲未發(fā)生交配，可產(chǎn)生雙孢子實(shí)體，雙孢子實(shí)體擔(dān)子內(nèi)進(jìn)行有絲分裂，產(chǎn)生2個(gè)擔(dān)孢子，則為雙孢卵孢小奧德蘑的生活史。雙孢卵孢小奧德蘑的菌絲為單核的初生菌絲，無鎖狀聯(lián)合。

由圖1B所示，在菌絲交配階段，當(dāng)不同極性的菌絲發(fā)生交配，形成的次生菌絲不斷生長和成熟，產(chǎn)生四孢子實(shí)體，減數(shù)分裂后產(chǎn)生4個(gè)擔(dān)孢子，即為四孢卵孢小奧德蘑的生活史。四孢卵孢小奧德蘑菌絲為雙核菌絲，兩核保持一定的距離，在菌絲橫隔處普遍可見鎖狀聯(lián)合[27-28]。

研究發(fā)現(xiàn)[27]，這2種生活史相互輔助，可讓卵孢小奧德蘑更好的適應(yīng)環(huán)境。2種類型的卵孢小奧德蘑子實(shí)體均廣泛分布，且經(jīng)常在同一區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)。不同生活史的子實(shí)體與農(nóng)藝性狀，產(chǎn)量等無關(guān)，目前還未發(fā)現(xiàn)其中的優(yōu)勢子實(shí)體類型。

3.3 生長發(fā)育條件

卵孢小奧德蘑菌絲生長溫度15℃～38℃，最適溫度20℃～25℃；子實(shí)體原基分化最適溫度15℃～30℃；原基形成和子實(shí)體生長最適溫度23℃～26℃[29-30]。

濕度是食用菌生產(chǎn)中影響其產(chǎn)量及品質(zhì)的重要條件之一。在栽培卵孢小奧德蘑時(shí)，栽培料含水量應(yīng)控制在60%～65%；原基分化及子實(shí)體生長階段，空氣相對濕度應(yīng)控制在85%～95%，空氣濕度過低，不利于原基形成和分化；空氣濕度過高，易造成子實(shí)體腐爛和污染[29]。

卵孢小奧德蘑屬好氣性食用菌，菌絲生長階段和子實(shí)體生長階段，均要求新鮮的空氣環(huán)境，二氧化碳濃度應(yīng)控制在 0.000 1 mol·L-1～0.000 6 mol·L-1[31]。菌絲生長階段可完全避光培養(yǎng)；子實(shí)體分化階段需要一定的光照刺激子實(shí)體原基形成（光照時(shí)長12 h，光照強(qiáng)度為 300 lx～1 000 lx）[24]。

卵孢小奧德蘑適宜在中性或微酸性環(huán)境中生長，菌絲生長最適 pH 為 6.0～7.5[25，32]。歐勝平等[33]報(bào)道，卵孢小奧德蘑在pH為6.5時(shí)菌絲干重最大且生長速度最快。

4 卵孢小奧德蘑的栽培技術(shù)

4.1 栽培原料、季節(jié)及場地

現(xiàn)有報(bào)道中，雜木屑、棉籽殼、玉米芯等均可作為卵孢小奧德蘑主要栽培原料，并以麩皮、木糠、玉米粉、磷肥、石膏作為氮源補(bǔ)充。另外，可根據(jù)不同地區(qū)實(shí)際情況就地取材，如使用秸稈類、廢棄桑樹枝等為原料[29-30，34]。

卵孢小奧德蘑屬于中高溫型食用菌，在南方地區(qū)栽培更具優(yōu)勢；其適宜在秋季制作栽培袋，春秋季栽培出菇；不同的地區(qū)，栽培季節(jié)不同。廣東、福建、湖南等可分為春栽和秋栽。春栽于2月～3月制作栽培袋，4月～5月地溫穩(wěn)定在20℃以上時(shí)栽培下田，進(jìn)行出菇管理；秋栽于7月～8月制作栽培袋，9月～10月地溫降至28℃以下，之后進(jìn)行出菇管理[25]。四川、云南、廣西、河南和安徽等地于11月～次年1月制作栽培袋，7月～8月地溫在22℃～27℃時(shí)進(jìn)行出菇管理[35]。

卵孢小奧德蘑栽培環(huán)境需要充足的氧氣，且對濕度要求較高。工廠化或設(shè)施大棚都應(yīng)選擇周邊環(huán)境干凈、通風(fēng)良好、交通便利、給排水方便、土地堅(jiān)實(shí)的場所；菇房設(shè)計(jì)布局應(yīng)根據(jù)栽培工藝和生產(chǎn)流程，且結(jié)合地形（坐北朝南原則）、自然環(huán)境和交通條件等進(jìn)行總體設(shè)計(jì)安排；房間的栽培架不宜過高或過寬，方便栽培操作[25]。

4.2 栽培方式

卵孢小奧德蘑的出菇栽培分為3種方式：脫袋覆土出菇、不脫袋覆土出菇和菌袋直接出菇。工廠化栽培以大棚脫袋覆土生產(chǎn)為主。目前，我國工廠化栽培較成熟的主要品種有金針菇Flammulina velutipes、杏鮑菇Pleurotus eryngii、雙孢蘑菇Agaricus bisporus、斑玉蕈 Hypsizygus marmoreus 等[36]。金針菇是典型的低溫型食用菌品種，和卵孢小奧德蘑相比，出菇栽培需要低溫刺激和搔菌2個(gè)重要環(huán)節(jié)以保證金針菇出菇整齊[37]；目前卵孢小奧德蘑尚未形成成熟的工廠化生產(chǎn)模式，主要是由于其出菇周期長，出菇整齊度差等特性。但卵孢小奧德蘑具有耐高溫且口感鮮美等特點(diǎn)，已成為市場接受度較高的品種類型。隨著其生物學(xué)特性和栽培技術(shù)研究的不斷深入，可使卵孢小奧德蘑的產(chǎn)量得以大幅度提升。

卵孢小奧德蘑屬土生木腐菌，覆土栽培既可以提高土壤微生物活力又可以保持良好的濕度，且子實(shí)體數(shù)量較易控制，單菇重量大，外觀形態(tài)較好[25]。但缺點(diǎn)有：1）栽培管理不善易感染霉菌，尤其是木霉，污染嚴(yán)重；2） 用土量和工程量大；3） 子實(shí)體假根容易攜帶大量泥土。不進(jìn)行覆土栽培雖然管理難度大，較難保濕，子實(shí)體出菇不整齊、單菇重量小，但可節(jié)省用工，子實(shí)體干凈，且更容易實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)[24，35]，并可通過篩選優(yōu)良菌株或優(yōu)化工廠化條件進(jìn)行改善。

4.3 栽培管理

4.3.1 發(fā)菌期管理

卵孢小奧德蘑菌袋在避光條件下先培養(yǎng)30 d～45 d，菌絲長滿菌袋后還需后熟培養(yǎng)30 d～45 d，當(dāng)菌袋袋口基質(zhì)表面出現(xiàn)黑褐色菌皮時(shí)，即可完成培養(yǎng)并進(jìn)入出菇階段。發(fā)菌期間室內(nèi)溫度保持在22℃～25℃，濕度控制在70%以下，保持微量通風(fēng)，并即時(shí)挑出污染菌袋[38]。

4.3.2 出菇期管理

卵孢小奧德蘑從菌絲生長階段進(jìn)入子實(shí)體發(fā)育階段。覆土后7 d～10 d，覆土表面轉(zhuǎn)成紅褐色的菌膜時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)調(diào)節(jié)好棚內(nèi)溫度、濕度，及時(shí)通風(fēng)換氣，保持覆土層的濕潤狀態(tài)[25]。轉(zhuǎn)色10 d～15 d后菇蕾萌發(fā)，此時(shí)空間相對濕度需控制在85%～95%，溫度約20℃～26℃，培養(yǎng)7 d～10 d即可采收。采收標(biāo)準(zhǔn)可依據(jù)市場鮮銷要求，手握菌柄基部連假根一同拔起，削去假根泥土并分成不同等級排放，放入冷庫0℃～4℃環(huán)境下冷藏4 h～6 h，裝袋后泡沫箱密封發(fā)貨[25,30]。

5 卵孢小奧德蘑的食（藥）用價(jià)值

卵孢小奧德蘑香味馥郁，肉質(zhì)鮮嫩，含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖、膳食纖維及礦物質(zhì)元素等營養(yǎng)成分，并具有抗氧化、保護(hù)肝臟、調(diào)整腸道菌群、抗腫瘤、抑制病原菌等生物活性，具有極高的食用價(jià)值及保健價(jià)值[3]。

5.1 食用價(jià)值

歐勝平等[33]研究發(fā)現(xiàn)卵孢小奧德蘑粗蛋白含量和可溶性總糖含量分別為32.12%和24.25%，比大部分食用菌的蛋白質(zhì)含量高；其中17種氨基酸總含量為18.14%，4種鮮味氨基酸總量較高為6.20%，占總氨基酸含量的43.33%；氨基酸評分、化學(xué)評分、必須氨基酸指數(shù)和營養(yǎng)指數(shù)分別為90、85、92和29。通過對本研究團(tuán)隊(duì)采集的野生卵孢小奧德蘑進(jìn)行營養(yǎng)成分測定，發(fā)現(xiàn)野生卵孢小奧德蘑粗蛋白含量和18種氨基酸總含量分別為22.4%和15.91%，其中谷氨酸的含量最高為2.89%，占總氨基酸含量的18.20%，總膳食纖維含量為41.00%，有利于改善人體的腸道功能；還含有豐富的礦物質(zhì)元素磷（679.00 mg·100-1g-1）、鉀（3 230.00 mg·100-1g-1）、鈣（9.92 mg·100-1g-1）、鎂（103.00 mg·100-1g-1）、鐵（23.20 mg·100-1g-1）、鋅（5.99 mg·100-1g-1），表明卵孢小奧德蘑是一種高蛋白且營養(yǎng)成分豐富的食用菌，其鮮味氨基酸的含量較高，可開發(fā)成為天然健康調(diào)味品的原料。

5.2 藥用價(jià)值

卵孢小奧德蘑也是傳統(tǒng)的藥用真菌之一，有治療或改善人體多種疾病的功效。盧彩會等[4]報(bào)道卵孢小奧德蘑中含有多種抗氧化生物活性物質(zhì)如多糖、黃銅和多酚等，通過測定卵孢小奧德蘑水提物和醇提物的抗氧化活性，證實(shí)2種提取物對DPPH自由基、羥基自由基和ABTS自由基均有較好的清除能力，對鐵離子的還原能力隨著添加量的增加逐漸提高，且水提物比醇提物抗氧化能力更強(qiáng)。陳地靈等[39]研究發(fā)現(xiàn)卵孢小奧德蘑膳食纖維提取物不僅能明顯促進(jìn)高脂飲食所致肝損傷的修復(fù)，而且還對與肝損傷相關(guān)的疾病表現(xiàn)出明顯的治療或預(yù)防效果，可用于藥物、保健品等領(lǐng)域的開發(fā)，具有極大的經(jīng)濟(jì)效益和社會價(jià)值。郭艷芳等[2]研究發(fā)現(xiàn)，卵孢小奧德蘑石油醚萃取物比乙醇提取物對植物病原菌人參立枯病菌的抑制活性更強(qiáng)，對人參立枯病的防治具有較好的應(yīng)用前景；卵孢小奧德蘑石油醚萃取物比乙酸乙酯萃取物的抗腫瘤活性更強(qiáng)，且石油醚萃取物對人體肺癌（NCI-H460）、肝癌（HepG-2）、乳腺癌（MCF-7）細(xì)胞的抑制率均高于50%；可見，其提取物中可能含有大量的抗腫瘤活性成分，具有巨大的研究潛力[3]。

6 總結(jié)與展望

卵孢小奧德蘑是近年來成功商品化的珍稀食用菌品種，從21世紀(jì)初首次成功栽培到目前栽培技術(shù)日漸成熟。由于其鮮味濃郁、口感脆嫩，營養(yǎng)豐富等優(yōu)點(diǎn)，逐漸受到廣大消費(fèi)者的認(rèn)可，且市場需求不斷擴(kuò)大。菌種的研究方向更應(yīng)該注重對野生種質(zhì)資源的收集，對具有自主知識產(chǎn)權(quán)且有利于工廠化生產(chǎn)的高品質(zhì)菌種的選育和推廣，及人工栽培技術(shù)研究；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步深入研究卵孢小奧德蘑的活性成分、挖掘功能基因和功效機(jī)理價(jià)值探討，開發(fā)卵孢小奧德蘑保健品和藥品等精深加工產(chǎn)品。