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      龍眼多糖與燕麥多糖的結(jié)構(gòu)特征及其益生活性比較

      2021-01-15 05:53:18王軼帆鄧媛元魏振承唐小俊王佳佳張名位
      中國食品學報 2020年12期
      關(guān)鍵詞:酸乳龍眼燕麥

      王軼帆,鄧媛元,張 雁,魏振承,劉 光,唐小俊,王佳佳,廖 娜,張名位*

      (1 廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部功能食品重點實驗室廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點實驗室 廣州 510610 2 華南師范大學腦科學與康復醫(yī)學研究院 廣州510631)

      人體腸道內(nèi)存在著大量的微生物,對于人體健康有著極大的影響。定植于腸道的有益菌構(gòu)成黏膜屏障參與代謝,產(chǎn)生有益于人體的代謝產(chǎn)物,促進人體健康。通過直接食用有益菌(益生菌)或者其發(fā)酵底物(益生元),可以起到改善腸道微生態(tài),促進腸道健康的作用。大量研究發(fā)現(xiàn)大多數(shù)益生元屬于碳水化合物[1],其中植物源性多糖類來源廣泛、毒副作用小[2],對腸道菌群有著積極作用,在功能食品和臨床中顯示出廣闊的應(yīng)用前景。植物活性多糖按其單糖組成可分為同多糖和雜多糖2種類型,前者由相同的單糖殘基組成,后者由不同的單糖殘基組成。龍眼又名桂圓,是亞熱帶特色代表性水果,是國家衛(wèi)計委公布的藥食同源原料之一。從龍眼果肉中提取的龍眼多糖(Longan polysaccharide,LP)是一種由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖等多種單糖組成的典型雜多糖。燕麥(oat)是全價營養(yǎng)谷物,從燕麥麩皮中提取的燕麥多糖(Oat polysaccharide,OP)的主要成分為葡萄糖單糖組成的β-葡聚糖,具有降低血清膽固醇、降血糖和促進益生菌增殖等功能[3-4]。

      以龍眼多糖和燕麥多糖為雜多糖和同多糖的代表性材料,比較2 類多糖的益生活性,解析其結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)與多糖益生活性的構(gòu)效機制,對指導高活性益生元產(chǎn)品開發(fā)具有重要意義。目前龍眼多糖生理功能研究主要集中在抗氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等方面,而對其益生活性的研究報道較少。Chaikham 等[5-6]研究發(fā)現(xiàn)龍眼汁能顯著促進雙歧桿菌、干酪乳桿菌和嗜酸乳桿菌增殖,減少人腸道微生物生態(tài)模擬系統(tǒng)中的致病菌。研究早已證明燕麥β-葡聚糖具有調(diào)節(jié)腸道菌的作用,如:M?lkki等[7]發(fā)現(xiàn)β-葡聚糖發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸(Short chain fatty acids,SCFA)為結(jié)腸細胞提供能量,修復結(jié)腸上皮細胞的損傷,在小鼠體內(nèi)能夠促進雙歧桿菌和乳酸桿菌的增殖,并抑制大腸桿菌,且分子質(zhì)量低的β-葡聚糖對腸道益生菌增殖作用更明顯[8]。多糖大多具有促進腸道益生菌增殖的作用,不同的種類多糖的益生活性不盡相同。

      研究表明,多糖的益生活性與其單糖組成等結(jié)構(gòu)特征有著一定的相關(guān)性[9]。目前對多糖的結(jié)構(gòu)及益生活性的研究通常就某一種多糖獨立展開。龍眼多糖是一種組分復雜的雜多糖,燕麥多糖是以β-葡聚糖為主的同多糖。對比以龍眼多糖為代表的雜多糖和以燕麥多糖為代表的同多糖的益生作用差異,分析結(jié)構(gòu)與益生活性的關(guān)系還鮮見報道。本文以2 種多糖的益生效果為切入點,對比它們的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特征,分析其益生活性差異的原因,旨在為以全谷物和水果為原料開發(fā)的營養(yǎng)代餐食品或功能性健康食品提供科學依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料和試劑

      龍眼果干購于廣東省高州晟豐水果專業(yè)合作社;燕麥麥麩購于張家口莜芽食品有限公司;干酪乳桿菌(Lactobacillus casei GIM1.410)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus GIM 1.731)、植物乳桿菌植物亞種 (Lactobacillus plantarum subsp.plantarum GIM 1.380)及糞腸球菌(Streptococcus faecalis GIM 1.389)購自廣東省微生物菌種保藏中心。半乳糖醛酸,Toronto Research Chemicals;α-淀粉酶、鹽酸羥胺、吡啶、醋酸酐、右旋糖酐等,美國Sigma 公司;氨基酸混合對照品,美國Agilent公司;考馬斯亮藍,南京建成生物工程研究所;其它試劑均為國產(chǎn)分析純級。

      1.2 儀器和設(shè)備

      UV-1800 紫外可見分光光度計,日本島津公司;Agilent 6890GC/5973 氣相色譜儀/質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國Agilent 公司;Agilent 1260 Infinity 高效液相色譜儀,美國Agilent 公司;S-3700N 掃描電子顯微鏡,日本日立公司;AR1500EX 流變儀,美國TA 公司。

      1.3 方法

      1.3.1 多糖的制備

      1.3.1.1 龍眼多糖的制備 在Yang 等[10]的龍眼多糖提取方法上有所改動。稱取一定量龍眼干,加入80%乙醇浸泡過夜,用榨汁機打漿獲得龍眼果肉漿,4 000 r/min 離心3 min,收集沉淀。沉淀按料液比1∶20 加入蒸餾水,80 ℃水浴浸提4 h,用紗布趁熱過濾,收集上清液。溶液在60 ℃旋蒸濃縮至原來體積的1/5,獲得多糖溶液。加入1/4 體積的Sevag 試劑(氯仿∶正丁醇=4∶1),磁力攪拌20 min后,4 000 r/min 離心15 min,脫除蛋白質(zhì),重復3次,直至基本無蛋白,收集上清液。旋蒸濃縮多糖溶液到原體積的1/4,向多糖溶液中逐漸加入乙醇,使體系中乙醇最終體積(φ)達到80%,4 ℃靜置過夜,抽濾獲得沉淀。沉淀加入蒸餾水溶解后再冷凍干燥得到粗多糖。

      1.3.1.2 燕麥多糖的制備 參考張民等[11]的燕麥多糖提取方法,稱取一定量的燕麥麥麩,按料液比1∶17 加入蒸餾水,按溶液總體積加入20 U/170 mL的α-淀粉酶,常溫反應(yīng)20 min。70~75 ℃水浴浸提2 h,紗布趁熱過濾,收集上清液。待上清液溫度降低,按溶液體積加入50 U/100 mL 的α-淀粉酶,反應(yīng)25 min 后,將上清液在60 ℃旋蒸濃縮至原來體積的1/5,取一定量的濃縮液加入1/4 體積的Sevag 試劑,后續(xù)操作與龍眼多糖提取方法相同。

      1.3.2 益生菌的培養(yǎng)及測定 參考Wichienchot等[12]的方法,按1%質(zhì)量分數(shù)濃度分別加入葡萄糖、菊粉、龍眼多糖、燕麥多糖至無碳源MRS 培養(yǎng)基振蕩溶解,高壓滅菌。分別取干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌及糞腸球菌接種于10 mL 滅菌的MRS 培養(yǎng)基中,接種量1%,培養(yǎng)12 h。再取1 mL 活化過的菌液,搖勻,加入9 mL 滅菌生理鹽水稀釋至106CFU/mL,取100 μL 分別接種于10 mL 添加不同碳源液體的培養(yǎng)基中,在兼氧條件下37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h 和72 h。

      1.3.2.1 菌落計數(shù) 采用平板計數(shù)法。用無菌生理鹽水將樣品稀釋至一定稀釋度,涂布平板,每個樣品涂布3 個平板,培養(yǎng)48 h 進行菌落計數(shù)。每毫升培養(yǎng)液中的菌數(shù)=3 個平板培養(yǎng)基菌落總數(shù)/3×10×培養(yǎng)液的稀釋倍數(shù)

      1.3.2.2 pH 值測定 在0,48,72 h 分別取樣2 mL,用pH 計測定。

      1.3.3 多糖樣品含量和組成測定 多糖含量采用苯酚-硫酸法[13]測定;糖醛酸含量采用間羥基聯(lián)苯比色法[14]測定;還原糖含量用DNS 比色法測定[15];蛋白質(zhì)含量用考馬斯亮藍試劑盒測定。

      1.3.4 多糖樣品單糖組成測定 參考黃曉蘭等[16]的測定方法,取水解后的多糖,蒸干水分,加入70 mg 鹽酸羥胺,5 mL 吡啶,于90 ℃水浴加熱1 h;取出稍冷,加入5 mL 醋酸酐,再于90 ℃水浴加熱1 h;冷卻,加10 mL 水破壞醋酸酐,用氯仿萃取乙?;a(chǎn)物,萃取液濃縮定容至1 mL,進行GC-MS 分析。色譜條件:SE-30 (15 m×0.2 mm×0.33 μm)石英毛細管柱,初始柱溫100 ℃,以10 ℃/min 程序升溫至280 ℃,保持10 min。載氣He,柱前壓70 kPa,分流比10∶1,溶劑延遲2min,進樣量1.0 μL。EI 離子源,電子能量70 eV,四極桿溫度150 ℃,離子源溫度230 ℃,電子倍增器電壓1 900 V,GCMS 接口溫度280 ℃,質(zhì)量掃描范圍29~500 u。

      1.3.5 氨基酸組成測定 參考高效液相色譜-熒光法[17],取適量多糖加6 mol/L 的鹽酸(約4 mL)置于安瓿瓶中,封口,放入恒溫烘箱于110 ℃水解反應(yīng)約10 h,冷卻,再把安瓿瓶中的樣品用水轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中,蒸干,殘渣用水溶解定容50 mL,搖勻,過濾,濾液進行HPLC-FLD 分析。色譜條件:AgilentHPH-C18 (2.5 μm,4.6 mm×100 mm)色譜柱,柱溫40 ℃;流動相A∶甲醇∶乙睛∶水,體積比為9∶9∶2;流動相B:終濃度為10 mmol/L 的Na2HPO4和NaBO3溶液(pH=8.2);流速:1.2 mL/min;熒光檢測器(一級氨基酸:激發(fā)波長=340 nm,發(fā)射波長=450 nm;二級氨基酸:脯氨酸,激發(fā)波長=266 nm,發(fā)射波長=305 nm)。

      1.3.6 相對分子質(zhì)量分布分析 取100 mg 多糖樣品,加流動相10 mL 溶解,室溫靜止過夜,經(jīng)0.45 μm 濾膜過濾,濾液注入凝膠色譜儀分析。色譜條件:TOSOH TSK gel G5000PWXL 和TSK G4000PWXLTSK 和G2000SWXL 串聯(lián),流動相:終濃度為25 mmol/L 的Na2HPO4和NaH2PO4緩沖鹽溶液,含有0.05%的NaN3;流速:0.7 mL/min;示差折光檢測器,恒溫30 ℃;進樣量:100 μL。使用Agilent GPC 數(shù)據(jù)分析軟件,根據(jù)樣品的出峰時間在校正曲線上求得多糖峰的平均分子質(zhì)量及其分布[18]。

      1.3.7 掃描電鏡觀察[19]取2 mg 多糖粉末樣品,分別粘于實驗臺的導電膠上,用洗耳球吹去浮樣,真空噴金,用S-3700N 掃描電子顯微鏡觀察,在200 倍、500 倍、5 000 倍下拍照。

      1.3.8 多糖溶液流變性測定[20]

      1.3.8.1 質(zhì)量分數(shù)對溶液流體性能的影響 分別配制質(zhì)量分數(shù)0.5%,1.0%,3.0%的多糖溶液,測定條件溫度25 ℃,椎板60 mm,2°,測定采用流動模式,以剪切速率為變量,變量范圍0.1~1 000 s-1,變量掃描為線性模式,采集50 個變量點。

      1.3.8.2 溫度對糖溶液流體特性的影響 分別配制質(zhì)量分數(shù)0.5%,1.0%,3.0%的多糖溶液,測定多糖水溶液的黏度受溫度的影響曲線。測定條件為:椎板60 mm,2°,測定為流體模式,數(shù)據(jù)獲取為溫度遞增模式,掃描范圍從10~80 ℃,在10 min 內(nèi)完成,采集50 個變量點,控制變量為剪切速率500 s-1。

      1.3.9 數(shù)據(jù)處理及分析 采用SPSS 19.0 軟件,組間差異LSD 檢驗分析,P<0.05 表示差異顯著。試驗結(jié)果用均數(shù)±標準差表示,每組試驗重復3 次。

      2 結(jié)果

      2.1 龍眼多糖和燕麥多糖的體外益生活性

      2.1.1 不同碳源對4 種益生菌增殖情況的影響龍眼多糖和燕麥多糖對干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌及糞腸球菌的促增殖作用如表1所示。培養(yǎng)48 h,2 種多糖培養(yǎng)基的活菌數(shù)均增加,且龍眼多糖培養(yǎng)基中各益生菌的活菌數(shù)均大于燕麥多糖培養(yǎng)基中各益生菌的活菌數(shù),具有顯著性差異(P<0.05);培養(yǎng)72 h,龍眼多糖培養(yǎng)基中嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、糞腸球菌活菌數(shù)下降,干酪乳桿菌活菌數(shù)增加,燕麥多糖培養(yǎng)基中嗜酸乳桿菌活菌數(shù)下降,干酪乳桿菌、植物乳桿菌和糞腸球菌活菌數(shù)則保持穩(wěn)定。

      表1 不同碳源對益生菌增殖的影響【lg(CFU/mL)】Table 1 Effects of different carbon sources on the proliferation of probiotics【lg(CFU/mL)】

      2.1.2 不同碳源對4 種乳桿菌生長過程中培養(yǎng)基pH 值變化的影響 4 種益生菌在不同碳源培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h 和72 h 后,培養(yǎng)基的pH 值變化如圖1所示。經(jīng)過48 h,葡萄糖、龍眼多糖培養(yǎng)基pH值明顯下降,而對空白對照和菊粉、燕麥多糖的培養(yǎng)基的pH 值改變不明顯。72 h 后,各培養(yǎng)基pH值無明顯變化。

      圖1 干酪乳桿菌(a)、嗜酸乳桿菌(b)、植物乳桿菌植物亞種(c)及糞腸球菌(d)的pH 值變化Fig.1 The change of pH value about Lactobacillus casei (a),Lactobacillus acidophilus (b),Lactobacillus plantarum subsp.plantarum (c)and Streptococcus faecalis (d)

      2.2 龍眼多糖和燕麥多糖的化學組成

      龍眼多糖和燕麥多糖的總糖含量、蛋白質(zhì)含量、糖醛酸含量及還原糖含量如表2所示。龍眼多糖和燕麥多糖的總糖含量分別為61.2%和68.3%;2 種多糖蛋白質(zhì)含量均較低,分別為2.2%和2.9%;龍眼多糖、燕麥多糖的糖醛酸含量分別為10.1%和5.9%;龍眼多糖、燕麥多糖中還原糖含量分別為16.0%和5.4%,龍眼多糖中糖醛酸、還原糖的含量均高于燕麥多糖。

      從GC/MS 面積歸一化法測定結(jié)果來看,2 種多糖的單糖組成相同,但龍眼多糖主要由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖組成,燕麥多糖主要由葡萄糖和少量甘露糖等其它單糖組成。

      2 種多糖中水解的氨基酸總量差異不大。2 種多糖中均檢測出16 種氨基酸,及纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、蘇氨酸5 種人體必需氨基酸。龍眼多糖中主要氨基酸是谷氨酸、精氨酸。燕麥多糖中主要是谷氨酸和天冬氨酸。

      表2 龍眼多糖(LP)和燕麥多糖(OP)的化學組成(%)Table 2 The chemical composition of longan polysaccharide (LP)and oat polysaccharide (OP)(%)

      2.3 龍眼多糖和燕麥多糖的相對分子質(zhì)量分布

      凝膠色譜分析結(jié)果見圖2。根據(jù)多糖的出峰時間在校正曲線上求得多糖峰的平均分子質(zhì)量及其分布,龍眼多糖的分子質(zhì)量分布較寬,分子質(zhì)量為6.38×106u;燕麥多糖是由2 個分子質(zhì)量較集中的多糖組成,分子質(zhì)量分別為5.42×103,2.45×106u。

      圖2 龍眼多糖(a)和燕麥多糖(b)的凝膠滲透色譜圖Fig.2 GPC profiles of longan polysaccharide and oat polysaccharide

      2.4 龍眼多糖和燕麥多糖的形態(tài)學觀察

      2 種多糖不同放大倍數(shù)的掃描電鏡圖像如圖3所示。在低倍率下(200×,500×),龍眼多糖呈片狀結(jié)構(gòu)表面光滑;燕麥多糖呈片狀結(jié)構(gòu)表面粗糙,有網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)。在高倍率下(5 000×),可見龍眼多糖表面呈現(xiàn)不規(guī)則孔狀;燕麥多糖呈現(xiàn)分散的顆粒狀。

      圖3 龍眼多糖(a-c)和燕麥多糖(a′-c′)的多糖試樣SEM 像Fig.3 SEM images of polysaccharide sample of longan polysaccharide (a-c)and oat polysaccharide (a′-c′)

      2.5 龍眼多糖和燕麥多糖的流變學特性

      2.5.1 多糖質(zhì)量分數(shù)對溶液黏度的影響 龍眼、燕麥多糖的流體曲線如圖4,在0.1~1 000 s-1剪切速率范圍內(nèi),隨著剪切速率的增大,低質(zhì)量分數(shù)的多糖溶液由剪切稀化的假塑性流體向牛頓流體轉(zhuǎn)變,相同質(zhì)量分數(shù)下,燕麥多糖溶液的表觀黏度均大于龍眼多糖。當燕麥多糖質(zhì)量分數(shù)為3%時,在剪切速率0.1~400 s-1范圍內(nèi),溶液均呈現(xiàn)明顯的非牛頓流體的剪切稀化現(xiàn)象。

      2.5.2 溫度對多糖溶液黏度的影響 溫度影響分子的熱運動,同時影響分子間的相互作用。溫度對2 種多糖黏度影響結(jié)果如圖5,在10~80 ℃范圍內(nèi),隨著溫度升高,不同質(zhì)量分數(shù)的多糖溶液黏度均逐漸下降,并趨于平穩(wěn)。2 種多糖質(zhì)量分數(shù)越大,則黏度隨溫度變化越明顯。3%燕麥多糖溶液,隨著溫度升高溶液黏度明顯降低。

      圖4 濃度對龍眼多糖和燕麥多糖流體性能的影響Fig.4 Effects of mass fraction of longan polysaccharides and oat polysaccharides on flow curve

      圖5 溫度對龍眼多糖、燕麥多糖溶液流體性能的影響Fig.5 Effects of temperature on flow curve of longan polysaccharides and oat polysaccharides

      3 討論

      腸道是人體的消化吸收場所,腸道菌群在宿主內(nèi)參與人體內(nèi)營養(yǎng)和活性成分的代謝、轉(zhuǎn)化和吸收,影響著人體的健康和疾病的發(fā)展。干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌亞種、糞腸球菌是人體腸道內(nèi)的益生菌,有促進人體消化吸收、阻止致病菌的定殖和入侵等作用。葡萄糖是糖酵解起始物,能夠被直接利用,但也能被非益生菌利用。菊粉作為典型多糖益生元代表,被益生菌利用擴大腸道內(nèi)益生菌定殖數(shù)量形成生物屏障調(diào)節(jié)腸道,而非益生菌無法利用。本研究發(fā)現(xiàn)龍眼多糖作為唯一碳源對干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌增殖作用明顯優(yōu)于菊粉,對植物乳桿菌亞種、糞腸球菌的增殖作用與菊粉益生元作用相似。燕麥多糖對干酪乳桿菌無明促進增殖作用,對嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌亞種、糞腸球菌的增殖作用優(yōu)于空白對照組。這一結(jié)果與Jaskari 等[21]研究發(fā)現(xiàn)燕麥β-葡聚對嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌的增殖效果相符合。此外益生菌消耗碳源增殖并代謝產(chǎn)酸導致培養(yǎng)基溶液的pH 值下降,當4 種菌以龍眼多糖為發(fā)酵底物時,48 h 時培養(yǎng)基的pH 值已顯著降低,這有利于抑制大腸桿菌的增殖[22]。而4 種益生菌以燕麥多糖為發(fā)酵底物時,培養(yǎng)72 h 培養(yǎng)基的pH 值無明顯變化。

      多糖因其單糖組成、糖苷鍵種類、聚合度的不同,導致其溶解性、流變學特性及生理功能不同。分析表明龍眼多糖和燕麥多糖差異主要涉及單糖組成、相對分子質(zhì)量分布及流變學特性。2 種多糖總糖含量均高于60%。并且脫蛋白后2 種多糖的蛋白含量均較低;在龍眼多糖中糖醛酸含量為10.1%,其結(jié)果略高于Yang 等[10]、王雪艷等[23]的測定結(jié)果;燕麥多糖中糖醛酸含量為5.9%,低于龍眼多糖。龍眼多糖中還原糖含量為16.0%,說明在龍眼多糖中有一定比例的游離醛基或酮基的糖類存在。從GC/MS 面積歸一化法測定結(jié)果來看,龍眼多糖中葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖占總相對含量的90%以上,與先前研究結(jié)果相一致[24];燕麥多糖中葡萄糖和少量甘露糖占總相對含量的91%。本研究采用凝膠色譜法測定的龍眼多糖分子質(zhì)量為6.38×106u,且分子質(zhì)量分布較寬;藍海波[25]經(jīng)排阻層析得到5 種龍眼多糖分子,分子質(zhì)量在3.58×104~8.38×107u 之間,因此推測龍眼多糖可能是由多種不同分子質(zhì)量的雜多糖組成。燕麥多糖分子質(zhì)量分別為5.42×102,2.45×106u,其中分子質(zhì)量為2.45×106u 的多糖部分在Wood[26]和Bhatty[27]報道的燕麥β-葡聚糖分子質(zhì)量范圍內(nèi)(4.4×104u~3.0×106u),此外結(jié)合GC/MS 結(jié)果也表明葡萄糖在燕麥多糖占比高,β-葡聚糖是以D-葡萄糖為單糖通過β-(1→4)和β-(1→3)糖苷鍵鏈接而成,因此推測分子質(zhì)量為2.45×106u 的多糖部分很可能為燕麥β-葡聚糖。通過掃描電鏡觀察,在放大200 倍下,2 種多糖均無固定形態(tài),符合多糖的結(jié)構(gòu)特性;放大500 倍,龍眼多糖表面光滑,說明物質(zhì)排列緊密;燕麥多糖表面粗糙,網(wǎng)孔分布呈結(jié)構(gòu)類似海綿;放大5 000 倍,龍眼多糖呈現(xiàn)孔狀結(jié)構(gòu);燕麥多糖呈現(xiàn)有空隙結(jié)構(gòu)的不規(guī)則顆粒,排列松散,表面變粗糙。采用流變儀分別測定2 種多糖的表觀黏度,發(fā)現(xiàn)2 種多糖溶液的表觀黏度隨質(zhì)量分數(shù)升高而增大,說明2 種溶液黏度具有明顯的質(zhì)量分數(shù)依賴性;在相同質(zhì)量分數(shù)下,燕麥多糖溶液的表觀黏度高于龍眼多糖溶液;此外,2 種多糖溶液的,黏度均隨溫度的增加而下降,可能是溫度升高所導致的聚糖分子鏈柔順程度增強使流動性提高[20],且燕麥多糖溶液的黏度對溫度變化更敏感。

      龍眼多糖主要以1→6 鍵,1→4 鍵連接的多種單糖組成,其中的多糖組分復雜,主要是以較多分支的酸性吡喃多糖存在形式[28-29]。燕麥多糖主要由燕麥β-葡聚糖構(gòu)成,它是由β-D-吡喃葡萄糖通過β-(1→3)糖苷鍵和β-(1→4)糖苷鍵連接而成的無分支黏多糖[30]。多糖結(jié)構(gòu)復雜,益生菌需要產(chǎn)生糖苷酶來利用碳源,因此葡萄糖為碳源時益生菌快速增殖并且耗凈碳源不利于活菌數(shù)維持較長時間,而多糖為碳源時消耗較慢,維持益生菌活菌數(shù)穩(wěn)定[31]。此外,多糖分子質(zhì)量的大小影響物質(zhì)的溶解性和黏度,與多糖跨越細胞膜障礙相關(guān)。2種多糖重均分子質(zhì)量相差不大,但龍眼多糖溶解性優(yōu)于燕麥多糖,良好的溶解性是發(fā)揮生物活性的首要條件,當燕麥多糖質(zhì)量分數(shù)大于3%時,黏度明顯增大。有研究表明,燕麥β-葡聚糖在體內(nèi)作益生效果隨分子質(zhì)量增大而減小,隨劑量提高而增大,黏度過高也不利于多糖的擴散及吸收[32]。

      4 結(jié)論

      龍眼多糖對干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌及糞腸球菌的增殖作用明顯,燕麥多糖對以上4 種益生菌的增殖作用存在差異,通過測定2種多糖的理化性質(zhì),比較后發(fā)現(xiàn)2 種多糖的差異主要為單糖組成、分子質(zhì)量分布和黏度。雖然燕麥多糖的體外益生效果不如龍眼多糖,但燕麥多糖中β-葡聚糖在低質(zhì)量分數(shù)時就具有較高的黏度,在體內(nèi)能刺激腸促胰肽酶釋放增加小腸蠕動調(diào)節(jié)腸道環(huán)境[22],若將兩者混合搭配加入食品中很可能會產(chǎn)生協(xié)同調(diào)節(jié)腸道的作用。

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