石榴皮總黃酮超臨界萃取及萃余物黃色素提取

尹春光，宋文路，李明麗，劉亞文，2，王曉強，王森

（1.濟寧學(xué)院生命科學(xué)與工程系，山東 曲阜 273155；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東 廣州 510640）

石榴皮富含黃酮、多酚、萜類等活性物質(zhì)，有抗氧化、抗流感病毒、抗菌、抗癌、保護心腦血管、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種作用，具有較大的藥用價值[1-2]。石榴皮約占石榴重量的1/5，研究表明石榴皮中的主要化學(xué)成分是黃酮類物質(zhì)[3-4]。植物黃酮的提取來自根、莖、葉、果實、果皮，石榴皮黃酮的提取純化常見方法有浸提、超聲波輔助、微波輔助、酶法等[5-8]?？?cè)频奶崛≡谒幱弥参镏醒芯枯^多，常使用微波輔助提取、超聲波輔助萃取、超臨界萃取等方法[9]，石榴皮中未見三萜類提取研究。

石榴果皮含有天然黃色素，關(guān)于石榴皮黃色素近些年研究集中在其穩(wěn)定性，提取純化等有少量報道。超臨界CO2技術(shù)可使活性成分與浸提溶劑充分結(jié)合，有利于活性成分的溶出與釋放，從而提高提取率，可用于黃酮、多酚、萜類物質(zhì)的提取分離[10]，但是萃取殘渣的活性物質(zhì)如何進一步提取少有研究，超臨界CO2技術(shù)同步提取石榴皮黃酮、三萜及萃取殘渣中黃色素提取尚未見報道。近幾年，使用同一工藝流程同步提取植物中多種活性物質(zhì)開始受到關(guān)注，例如使用溶劑浸提法同步提取山楂皮[11]、石榴花總黃酮、總多酚和三萜類物質(zhì)[12]，可有效提高生產(chǎn)產(chǎn)出及效益。

山東魯西南地域石榴品種豐富、產(chǎn)量大，為實現(xiàn)對石榴皮的高效利用，本研究以地方資源石榴的剩余物石榴皮為研究對象，根據(jù)物質(zhì)溶解性、極性的差異，利用超臨界萃取法充分萃取總黃酮、三萜類物質(zhì)。同時發(fā)現(xiàn)在篩選到的超臨界萃取條件下黃酮類提取率高，黃色素萃取極微，進一步利用超聲波輔助提取萃余物（超臨界萃取殘渣）中活性物質(zhì)黃色素，并實現(xiàn)石榴皮的高值化利用，本研究首次利用超臨界萃取法同步獲取石榴皮中總黃酮、三萜類，并獲取濃縮在殘渣中的黃色素。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

石榴：魯西南地區(qū)晚秋市售，石榴皮經(jīng)50℃干燥，粉碎機粉碎，過100目篩；標準品蘆丁、熊果酸（分析純）：生工生物工程（上海）有限公司；乙醇、乙醚：天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；NaNO2（5%）、Al（NO3）3（10%）、NaCO3（10%）、NaOH（1 mol/L）：國藥集團化學(xué)試劑有限公司；香草醛：江蘇采薇生物科技有限公司；高氯酸、冰醋酸：萊陽經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)精細化工；所有分離用有機溶劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

超臨界 CO2萃取儀（SPE-ED SAFE BASIC）：美國APPLIED SEPARATIONS（ASI）公司；紫外分光光度計（T6）：北京普析通用儀器有限公司；電子分析天平（ME54）：上海恒平科技有限公司；醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器（KQ-250DE）：昆山市超聲儀器有限公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-4）：邦西儀器科技有限公司；中藥粉碎機（FW135）：天津市泰斯特儀器有限公司；真空濃縮離心儀（SCIENTZ-1LS）：寧波新芝生物科技股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 總黃酮、三萜類超臨界萃取

取石榴皮粉末10 g加入超臨界萃取儀，0.5 mL乙醇作為夾帶劑，設(shè)定壓力、溫度、時間條件，以2 mL/min收集[10]，留萃余物備用。加入10 mL乙醇溶解，測定總黃酮、三萜類提取率。

1.3.2 萃余物提取黃色素

將萃余物放入錐形瓶中，按照料液比1∶5（g/mL）加入20%乙醇，在恒溫水浴鍋中50℃浸提1 h，經(jīng)超聲波（頻率100 kHz）處理20 min或微波（350 W）處理70 s，靜置棄去下層沉淀，以4 000 r/min離心上清液10 min，得到含有黃色素的乙醇提取液[13-14]。

移液器取超聲波[15-16]或微波處理[17]的2種提取液2 mL，過AB-8大孔樹脂柱，蒸餾水清洗樹脂柱后用20%乙醇洗柱，洗脫速率0.8倍柱體積/h、吸附時間3 h、洗脫體積為3倍柱體積，得到黃色素提取液，減壓抽濾濃縮至原體積1/5，在0.08 MPa下，35℃減壓干燥8 h，得黃色素粉末。

1.3.3 總黃酮、三萜類及黃色素提取率測定

總黃酮的測定根據(jù)文獻[1，18]稍作修改。準確稱取蘆丁標準品0.5 g，乙醇（65%）定容至50 mL，取5 mL定容至100 mL作為標準溶液（0.5 mg/mL）。取不同體積溶液至10 mL容量瓶，各加入0.5 mL NaNO2（5%），混勻靜置反應(yīng)6 min后，加入0.5 mL Al（NO3）3（10%），混勻再靜置反應(yīng) 6 min，加入 4 mL NaOH（1 mol/L），65%乙醇定容至10 mL，混勻靜置至少15 min后510 nm處測定吸光度，以蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標制作標準曲線，線性回歸方程：y=0.010 6x+0.008 6，R2=0.999 7。取樣品提取液，測量吸光度，根據(jù)回歸方程及樣品稀釋倍數(shù)計算總黃酮提取率。

三萜類測定根據(jù)文獻[9，19]稍作修改，準確稱取熊果苷0.5 g，無水乙醇溶解至50 mL定容，取2 mL定容至100 mL作為標準溶液（0.2 mg/mL）。取不同體積溶液至試管中，提取液揮干，加入0.2 mL香草醛乙酸溶液，0.8 mL高氯酸，60℃水浴15 min，加入4 mL冰醋酸定容至10 mL，混勻后靜置10 min在548 nm下測定吸光度。以熊果苷質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標制作標準曲線，線性回歸方程：y=0.010 7x-0.032 8，R2=0.999 6。取樣品提取液，測量吸光度，根據(jù)回歸方程及樣品稀釋倍數(shù)計算三萜類提取率。

黃色素測定參照文獻[13-14]稍作修改，石榴皮粉末 10 g，按照料液比 1∶5（g/mL）加入 20%乙醇，在恒溫水浴鍋中 50℃浸提 1 h，超聲（100 kHz）20 min，靜置棄去下層沉淀，以4 000 r/min離心上清液10 min，得到含有黃色素的乙醇提取液，根據(jù)1.3.1經(jīng)超臨界萃取后去萃取殘渣（萃余物）抽濾濃縮洗柱，分光光度計掃描測定黃色素最大吸收波長。取0.5 g真空濃縮粉末，20%乙醇溶解定容至50 mL，取1 mL定容至100 mL，作為標準溶液（0.1 mg/mL）配制成不同濃度標準液[13]。分光光度計進行掃描確定最大吸收波長，掃描確定最大吸收波長為372 nm，檢測波長與朱慶書等的結(jié)果一致[14]。在該波長下測吸光度，以黃色素質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標制作標準曲線，線性回歸方程：y=0.0102x+0.003 4，R2=0.999 5。取樣品提取液，測量吸光度，根據(jù)回歸方程及樣品稀釋倍數(shù)計算黃色素提取率。

式中：n為總黃酮、三萜類、黃色素質(zhì)量，mg；m為石榴粉末質(zhì)量，mg。

1.3.4 抗氧化活性

1.3.4.1 1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl，DPPH）自由基清除能力測定

DPPH自由基清除能力測定參照文獻[20-21]。取最優(yōu)條件下獲取的超臨界萃取液0.5 mL，加入DPPH甲醇溶液，定容，以總黃酮提取率為依據(jù)換算，根據(jù)1.3.2取最優(yōu)條件下獲得的黃色素粉末，精確稱取1 mg，經(jīng)甲醇溶解，定容，換算為10 μg/mL樣品溶液備用。將上述兩種樣品液與DPPH甲醇液以1∶4體積比混合，充分混勻，避光室溫（25℃）靜置后分光光度計517 nm測定。提取液中活性物質(zhì)質(zhì)量換算公式：m=（V/M）×N×A（式中：m為活性物質(zhì)質(zhì)量，mg；V為萃取液體積，mL；M為石榴皮粉末質(zhì)量，mg；N為萃取物稀釋倍數(shù)；A為活性物質(zhì)提取率，%）。以阿魏酸（ferulic acid，F(xiàn)ERA）濃度（μmol/L）為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制標準曲線，線性回歸方程：y=0.937 5x+29.081（R2=0.995 4）。以 DPPH溶液自身吸光值（ADPPH）與樣品溶液吸光值（A樣品）之差與DPPH溶液自身吸光值比值表示，DPPH自由基清除率/%=[（ADPPH-A樣品）/ADPPH]×100。FERA微摩爾數(shù)相當(dāng)于每克樣品中DPPH自由基清除能力（μmol FERA/g）。

1.3.4.2 2，2'-二氮-雙（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）[（2，2'-azino-di-（3-ethylbenz-thiazoline-6-sulfonicacid），ABTS+）自由基清除能力測定

ABTS+自由基清除能力測定參照文獻[20-21]，根據(jù)1.3.4.1樣品處理方法，準備總黃酮樣品液和黃色素樣品液。取K2S2O8與ABTS以體積比1∶1混合，4℃過夜經(jīng)充分混合得工作液。分別取2種樣品液各0.1 mL，加入工作液，室溫（25℃）放置5 min，734 nm波長下測吸光度。以Trolox濃度（μmol/L）為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制標準曲線，線性回歸方程：y=5.199x+4.005 6，R2=0.9986。以ABTS溶液自身吸光值（AABTS）與樣品溶液吸光值（A樣品）之差與ABTS溶液自身吸光值比值表示，ABTS+·清除率/%=[（AABTS-A樣品）/AABTS]×100。Trolox微摩爾數(shù)為每克樣品中ABTS+·清除能力（μmol Trolox/g）。

1.4 工藝條件確定

1.4.1 單因素試驗

采用1.3.1及1.3.2的方法提取總黃酮、三萜類及黃色素，考察萃取條件對總黃酮、三萜類的影響，由于黃色素的提取是利用萃余物（超臨界萃取后的殘渣）經(jīng)超聲波輔助提取，由超臨界萃取條件變化決定萃余物提取率，因此將黃色素提取率與總黃酮、三萜類提取率一起考察，考察超臨界萃取條件（時間、濃度、壓力、溫度）對超臨界萃取總黃酮、三萜類提取率及萃余物黃色素提取率影響。參考文獻設(shè)定參數(shù)[10，19，22]，提取條件為：萃取時間設(shè)置為 50、70、90、120、150 min 進行試驗，35 MPa，75℃，加入0.5 mL 75%乙醇溶液作夾帶劑，考察時間對提取率的影響；固定時間90 min，將乙醇濃度設(shè)置為75%、80%、85%、90%、95%，35MPa，75℃，進行試驗，考察濃度對提取率影響；固定時間90 min，乙醇濃度90%，溫度75℃，將壓力設(shè)置為20、25、30、35、40MPa，考察壓力對提取率的影響；固定時間90min，乙醇濃度90%，壓力30 MPa，將溫度設(shè)置為65、70、75、80、85℃，考察溫度對提取率影響。

1.4.2 萃余物中黃色素提取方法

根據(jù)1.3.2使用超聲波、微波輔助提取萃余物中黃色素，以確定本研究超臨界萃取與超聲波結(jié)合、超臨界萃取與微波處理結(jié)合的最優(yōu)組合提取萃余物中黃色素。

1.4.3 正交試驗

基于1.4.1試驗結(jié)果，以提取條件為變量，以總黃酮、三萜類及黃色素提取率為指標，選擇最優(yōu)組合，L9（34）正交表見表1。

表1 正交試驗設(shè)計Table 1 Design of orthogonal

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)分析使用SPSS statistics 19軟件，結(jié)合Excel 2013和GraphPad Prism 7繪圖，正交設(shè)計助手II進一步驗證正交試驗結(jié)果。單因素試驗及驗證試驗數(shù)據(jù)（平均值±標準偏差）經(jīng)3次重復(fù)試驗獲得，SPSS進行方差分析，Duncan′s差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗

2.1.1 時間對總黃酮、三萜類及萃余物黃色素提取率影響

時間對總黃酮、三萜類及萃余物黃色素提取率影響見圖1。

圖1 時間對總黃酮、三萜類提取率及萃余物超聲處理黃色素提取得率的影響Fig.1 Effect of time on extraction rate of total flavonoid，triterpenoids and yellow pigment

隨萃取時間變化，總黃酮、三萜類提取率呈先上升后降低曲線變化，總黃酮、三萜類90 min時提取率達到最大，分別是（5.794±0.001 15）%，（0.434±0.001 73）%。研究表明萃取時間會影響部分黃酮、三萜類結(jié)構(gòu)，影響活性物質(zhì)提取[22-23]。檢測發(fā)現(xiàn)本條件下超臨界萃取黃色素萃取極微，將萃余物進行超聲波處理并提取到較為豐富的黃色素。在經(jīng)超臨界萃取90 min后，超聲波處理萃余物，黃色素提取率達到（5.885±0.002 40）%。利用Duncan法分析，不同時間的總黃酮、三萜類提取率差異顯著（P<0.05），此時萃余物經(jīng)超聲波處理的黃色素提取率也差異顯著（P<0.05），因此選取90 min為最適萃取時間。

2.1.2 濃度對總黃酮、三萜類及萃余物黃色素提取率影響

經(jīng)不同濃度乙醇做夾帶劑總黃酮、三萜類及萃余物黃色素的提取率見圖2。

乙醇濃度90%時總黃酮提取率最高為（8.691±0.002 89）%，乙醇濃度85%時三萜類提取率最高為（0.387±0.001 15）%，乙醇濃度90%時次之為（0.379±0.000 88）%。超臨界萃取中對極性化合物選擇性加入一定濃度的極性夾帶劑，通過氫鍵的作用，根據(jù)相似相容原理，可以改變物質(zhì)的溶解性[24]?？傸S酮、三萜類分子間引力較大，難溶于水，加入極性溶劑可提高溶解度進而提高提取率[25]。黃酮類物質(zhì)通常選用乙醇做夾帶劑，水分子可以增加溶劑與材料的接觸面，由于低濃度乙醇中水分相對較高，可以增加極性物質(zhì)的溶解性，因此合適的水與乙醇比例可獲得較高提取率[26]，乙醇濃度較高時反而導(dǎo)致溶解度降低[26]。

圖2 乙醇濃度對總黃酮、三萜類提取率及萃余物超聲處理黃色素提取得率的影響Fig.2 Effect of alcohol concentration on extraction rate of total flavonoid，triterpenoids and yellow pigment

進一步利用超聲波輔助提取萃余物中黃色素，在90%乙醇濃度下獲得的萃余物經(jīng)超聲波輔助提取后黃色素得率達到（6.044±0.004 62）%。也說明超臨界萃取黃色素提取量極微，而黃色素在萃余物中殘留多。該結(jié)果與朱慶書等的結(jié)果一致[14]。利用Duncan法分析，不同濃度下總黃酮、三萜類提取率差異顯著，此時萃余物中黃色素提取率也差異顯著（P<0.05）；綜合考慮企業(yè)生產(chǎn)效益，選取90%乙醇為最適濃度。

2.1.3 壓力對總黃酮、三萜類及萃余物黃色素提取率影響

壓力對總黃酮、三萜類及萃余物黃色素提取率影響見圖3。

圖3 壓力對總黃酮、三萜類提取率及萃余物超聲處理黃色素提取得率的影響Fig.3 Effect of pressure on extraction rate of total flavonoid，triterpenoids and yellow pigment

經(jīng)不同壓力處理，隨壓力變化曲線變化趨勢明顯，30 MPa時總黃酮提取率最高達到（8.126±0.000 58）%，三萜類提取率在35 MPa最高為（0.978±0.001 45）%，30 MPa時提取率次之（0.971±0.002 31）%。在25 MPa～30MPa壓力下，夾帶劑與黃酮類溶質(zhì)分子作用活躍，黃酮溶解度更高，萃取率更高。壓力過大時，氫鍵被破壞，導(dǎo)致溶解性下降[27-28]。30 MPa時萃余物經(jīng)超聲波處理提取的黃色素提取率也達到最高（2.991±0.003 46）%。利用Duncan法分析，不同壓力下，總黃酮、三萜類提取率差異顯著（P<0.05），萃余物中黃色素提取率也差異顯著（P<0.05）。因此取30 MPa壓力條件為最適壓力。

2.1.4 溫度對總黃酮、三萜類及萃余物中黃色素提取率影響

溫度對總黃酮、三萜類及萃余物中黃色素提取率影響見圖4。

隨溫度從低到高變化各物質(zhì)提取率從低到高然后降低，80℃時黃酮提取率最高為（11.376±0.002 89）%；75℃三萜類提取率最高為（1.020±0.002 31）%；萃取過程中溫度升高能加速分子運動和相互作用，溶解度升高。溫度過低時，總黃酮、三萜類分子與溶液分子間作用不充分溶出少[10]。

75℃時萃余物中黃色素經(jīng)超聲波處理提取率最高可達（6.043 3±0.005 21）%，80℃時次之為（5.864±0.005 77）%。利用Duncan法分析，不同溫度下，總黃酮、三萜類提取率差異顯著（P<0.05），萃余物中黃色素提取率也差異顯著（P<0.05）。綜合考慮工業(yè)生產(chǎn)的效益及目前黃色素提取及純化在應(yīng)用中的價值，石榴皮黃酮苷類物質(zhì)是其主要成分[29]，80℃黃酮類提取率最高，黃色素提取率雖未達到最高，其提取率僅次于75℃條件。因此取80℃為最適溫度。

圖4 溫度對總黃酮、三萜類提取率及萃余物超聲處理黃色素提取得率的影響Fig.4 Effect of temperature on extraction rate of total flavonoid，triterpenoids and yellow pigment

2.2 超聲波及微波輔助提取黃色素方法比較

在本試驗篩選的濃度、時間、溫度、壓力條件下經(jīng)超臨界萃取后，萃余物經(jīng)超聲波輔助提取和微波輔助提取黃色素進行提取方法選擇，結(jié)果見圖5。

圖5 萃余物中黃色素超聲波、微波處理提取率Fig.5 Extraction rate of yellow pigment by ultrasonic wave and microwave

由圖5可見萃余物中的黃色素經(jīng)超聲波輔助提取法提取率均高于微波輔助法，其中不同溫度、壓力條件下差異極顯著（P<0.01）；不同夾帶劑濃度條件下，除了95%乙醇條件均差異顯著；不同時間條件下，除50 min作用時間差異顯著（P<0.05）外，其余處理時間均差異極顯著（P<0.01）。單因素篩選的夾帶劑濃度90%乙醇，萃取時間90 min，萃取壓力30 MPa，萃取溫度75℃條件下經(jīng)超聲波輔助提取黃色素提取率為（6.043 3±0.009 02）%，經(jīng)微波輔助提取提取率為（5.748 3±0.001 25）%，2種方法提取率差異極顯著（P<0.01）。結(jié)果表明在本研究設(shè)定的濃度、時間、溫度、壓力條件下進行超臨界萃取后進行的超聲波輔助提取與微波輔助法比較，超聲波輔助提取（100 kHz，20 min）可以使黃色素更充分釋放[16]，因此選擇超聲波輔助（100 kHz，20 min）提取萃余物中黃色素。

2.3 正交試驗

2.3.1 正交試驗結(jié)果

正交試驗結(jié)果見表2，方差分析見表3。

表2 正交試驗結(jié)果Table 2 The result of orthogonal test

從表2、表3可以看出，總黃酮最優(yōu)方案為A1B2C2D3，即 70 min、90%乙醇、30 MPa、85 ℃，各因素影響次序為 B（濃度）>C（壓力）>D（溫度）>A（時間）。三萜類主次順序：B（濃度）>A（時間）>D（溫度）>C（壓力），最優(yōu)水平A2B2C3D1，即提取條件為90 min、90%乙醇、35 MPa、75℃，此時三萜類提取率1.013%、總黃酮提取率10.654%、萃余物中黃色素提取率5.434%。同時考察了超臨界萃取條件對萃余物中超聲波輔助提取黃色素的影響，最優(yōu)組合為A1B2C3D3，即提取條件為70 min、90%乙醇、35 MPa、85℃，各因素的影響次序為D（溫度）>B（濃度）>C（壓強）>A（時間）。此時，需要對總黃酮及黃色素提取進行驗證試驗，由最優(yōu)組合條件可知，總黃酮提取最優(yōu)條件與萃余物黃色素提取最優(yōu)條件均為70 min、90%乙醇、85℃，只有壓力條件不一致。

表3 方差分析Table 3 The result of variance analysis

2.3.2 驗證試驗

驗證試驗結(jié)果見表4。

根據(jù)表4，組Ⅰ（70 min、90%乙醇、30 MPa、85℃）條件下，超臨界萃取總黃酮提取率為（12.482±0.00209）%，三萜類提取率（0.780±0.003 76）%，此時萃余物中黃色素提取率為（5.870±0.00346）%。組Ⅱ（70 min、90%乙醇、35 MPa、85℃）條件下總黃酮、三萜類及黃色素提取率與組I均差異不顯著（P>0.05）?？紤]到動力學(xué)熱力學(xué)因素及企業(yè)生產(chǎn)安全實際，建議選取壓力30MPa更為合適，建議取70 min、90%乙醇、30 MPa、85℃組合。

表4 驗證試驗結(jié)果Table 4 The test result

石榴及其衍生物在食品與人類健康方面有很多潛在應(yīng)用價值[29]，尤其是石榴皮的活性物質(zhì)提取日益受到關(guān)注，本研究關(guān)于石榴皮的提取物結(jié)果表明超臨界萃取石榴皮總黃酮提取率達到12.482%，高于超聲波輔助與半仿生酶法（7.34%），與酸石榴皮中總黃酮超聲波微波輔助法提取的提取率（11.16%）相當(dāng)，高于甜石榴皮提取率（10.02%）[5.17-18，30]，此條件下對萃余物中黃色素進行提取純化，提取率達到5.870%，由于是提取總黃酮等活性物質(zhì)后再提取萃余物中的黃色素，該提取率與已知的文獻中直接利用石榴皮提取黃色素結(jié)果相當(dāng)[13-14]，萃余物提取率高，進行生產(chǎn)與應(yīng)用的可行性好，且解決了生產(chǎn)廢渣廢料萃余物的使用問題。

2.4 抗氧化活性

對超臨界萃取液的抗氧化活性及萃余物中提取的黃色素進行了抗氧化活性檢測，經(jīng)超臨界萃取后提取液及萃余物超聲波處理及微波處理后黃色素抗氧化活性見表5。

表5 抗氧化能力測定Table 5 Determination of antioxidant capacity

由表5可知，經(jīng)超聲波處理的黃色素抗氧化能力顯著高于微波處理組（P<0.01），超聲波處理的黃色素DPPH自由基清除能力及ABTS+自由基清除能力分別為（27 335.16±8.550 1）μmol FERA/g和（4 164.10±4.657 6）μmol Trolox/g，可見經(jīng)超臨界萃取后的萃余物提取的黃色素具有較強的抗氧化活性。

3 結(jié)論

以企業(yè)生產(chǎn)實際為出發(fā)點，超臨界萃取時間70min，夾帶劑乙醇濃度90%，萃取壓力30MPa，萃取溫度85℃時，總黃酮提取率為12.482%，同步獲取三萜類提取率為0.780%，萃余物中黃色素提取率為5.870%，超聲波處理的提取率顯著高于微波輔助法（P<0.01）,黃色素抗氧化活性檢測DPPH自由基清除能力及ABTS+自由基清除能力分別為（27 335.16±8.550 1）μmol FERA/g和（4 164.10±4.657 6）μmol Trolox/g。研究可有效提高工業(yè)生產(chǎn)的效率和效能，并能充分利用超臨界萃取殘渣（萃余物），達到高值化利用石榴皮的目的，同時緩解企業(yè)生產(chǎn)廢渣污染問題。