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    堿處理對慈竹竹葉膳食纖維提取效果的研究

    2021-01-12 15:52:52雷福紅歐陽吾樂楊亞晉馬思雨李恩良郭愛偉
    關(guān)鍵詞:慈竹竹葉膳食

    雷福紅 歐陽吾樂 楊亞晉 馬思雨 李恩良 郭愛偉

    (1.西南林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,云南 昆明 650233;2.西岐桫欏省級自然保護區(qū)管護局,云南 普洱 654800)

    膳食纖維被定義為不能被人和動物內(nèi)源消化酶消化的食物成分,主要存在于植物細胞壁中,包括多糖、寡糖、木質(zhì)素等[1]。按膳食纖維溶解性,可將膳食纖維分為不溶性膳食纖維(IDF)和可溶性膳食纖維(SDF)[2]。目前的研究表明,膳食纖維對人和動物腸道健康具有重要的生理功能,膳食纖維具有降血糖、降血脂、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)、減肥、預(yù)防糖尿病和癌癥等諸多生理功能[3-5],被稱為人類的“第七大營養(yǎng)素”。

    云南是竹類資源最豐富的地區(qū)之一,竹類有25屬200余種,有“竹類故鄉(xiāng)”之譽,現(xiàn)有天然竹林面積有25萬hm2[6-8],豐富的竹類資源為提取竹葉膳食纖維提供了保障。相比較其他纖維類型,竹葉纖維具有許多優(yōu)勢,如流動性好,顆粒表面積大,結(jié)構(gòu)松散,其持水力、膨脹率高等特點[9-10],具有廣闊的開發(fā)和應(yīng)用價值。目前膳食纖維的提取方法有化學(xué)法、酶解法、化學(xué)-酶結(jié)合法、生物發(fā)酵法等,這幾種膳食纖維的提取方法都有很好的應(yīng)用前景,但考慮到提取成本和提取的纖維含量,其中化學(xué)法和酶法的應(yīng)用最為廣泛[11]。其中化學(xué)法提取膳食纖維方法簡單、快捷以及成本低等特點,是提取膳食纖維常見的一種方法。目前,從竹葉中提取膳食纖維的報道較少,本研究以慈竹竹葉為原料,用堿處理提取慈竹竹葉纖維,通過單因素試驗和正交試驗,篩選出慈竹竹葉膳食纖維提取的最優(yōu)工藝組合,分析了竹葉纖維中的不溶性膳食纖維和可溶性膳食纖維,為竹葉纖維的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集與處理

    研究所用慈竹(Neosinocalamus affinis)竹葉采自西南林業(yè)大學(xué)竹園,將采集的慈竹竹葉在實驗室陰干后粉碎,過40目篩,放置于4 ℃儲藏備用。

    1.2 試驗設(shè)計

    1.2.1 單因素試驗

    選取NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)、溫度、料液比和時間4個因素做單因素試驗,每個因素設(shè)4個水平(如表1),每個水平做3個重復(fù)。

    表1 單因素試驗設(shè)計Table 1 Single factor experiment design

    1.2.2 正交試驗

    在單因素試驗的基礎(chǔ)上,選用溫度、時間、NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)、料液比4個因素,每個因素設(shè)3個水平,采用4因素3水平的正交試驗設(shè)計[12],按L9(34)正交表試驗共9種組合(表2),每個組合做3個重復(fù),對試驗效果較佳的組合進行驗證,驗證試驗做3個重復(fù)。

    表2 正交試驗因素及水平Table 2 Factors and levels of the orthogonal experiment

    1.3 測定指標及方法

    稱取一定量的干竹葉粉(含水為(7.3±0.2)%),按以上單因素和正交試驗的方法提取竹葉纖維,提取后的竹葉纖維用蒸餾水沖洗至中性,放入65 ℃恒溫干燥箱中干燥8 h,然后回潮使其與周圍環(huán)境的空氣濕度保持平衡后稱量,再將其放入65 ℃烘箱內(nèi)烘2 h,再回潮和稱量,2次質(zhì)量之差小于0.5 g時為提取的竹葉纖維(含水為(7.0±0.1)%),并稱取一定量的竹葉纖維分析其膳食纖維的組成類型,竹葉纖維中粗纖維(CF)、SDF和IDF的測定方法參考AOAC推薦的方法[13],用FT 122纖維測定儀(FOSS,丹麥)測定。按公式(1)~(2)計算竹葉纖維的提取率和可溶性纖維和不溶性纖維的比值。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,正交試驗結(jié)果采用General Linear Model中的Univarate進行多因素重復(fù)試驗的方差分析。結(jié)果用平均數(shù)±標準差表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗結(jié)果

    由圖1可知,隨NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)的增加,竹葉纖維中CF含量有增加的趨勢,NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)達到10%時,提取的竹葉纖維中CF含量最高為75.87%,繼續(xù)增加NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù),竹葉纖維中的CF有下降的趨勢;當料液比為1∶15時提取的竹葉纖維中CF含量最高為76.37%;提取時間18 h時,提取的竹葉纖維中CF的含量最高為76.20%,增加提取時間其竹葉纖維中CF開始下降;隨著溫度的升高,提取的竹葉纖維中CF的含量逐漸升高,40 ℃時達到最大值為75.93%,超過40 ℃時竹葉纖維中的CF含量開始下降。

    圖1 不同因素對竹葉纖維中粗纖維含量的影響Fig.1 Effects of different factors on the content of crude fiber in bamboo leaves

    2.2 正交試驗結(jié)果

    由表3可知,按照極差的大小,確定影響竹葉纖維中CF含量的主次順序為D>B>A>C,即溫度>料液比>NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)>提取時間,以提取的竹葉纖維中CF為考察指標,慈竹竹葉膳食纖維提取的最佳工藝組合為A2B2C1D3,并做驗證試驗得到最優(yōu)條件下提取的竹葉纖維中CF含量為(82.27±0.35)%,正交試驗結(jié)果表明,影響提取竹葉纖維中CF含量因素的主次順序為溫度>料液比>時間>NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù),這與極差分析結(jié)果相一致,溫度、料液比、NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)、提取時間4個因素對竹葉纖維中CF含量的影響差異極顯著(P<0.01)(表4)。綜合以上因素,慈竹竹葉纖維提取的最佳工藝組合為A2B2C1D3,即NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)為10%、料液比為1∶15、提取時間為17 h、溫度為42 ℃,對此最佳工藝組合進行驗證,獲得慈竹纖維中CF含量為(82.27±0.35)%,竹葉纖維的提取率為(34.58±0.29)%。

    表3 竹葉纖維提取的正交試驗組合及其結(jié)果Table 3 Results of orthogonal experiments on the extraction of bamboo leaf fiber

    表4 竹葉纖維提取的正交試驗方差分析Table 4 Variance analysis of orthogonal experiment on the extraction of bamboo leaf fiber

    2.3 慈竹竹葉纖維中SDF和IDF

    由圖2可知,在最佳工藝下得到的竹葉纖維 中SDF含 量 為(12.86±0.26)%,IDF占(76.11±0.44)%,其 中SDF占14.45%,IDF占85.55%,SDF/IDF為0.17。

    圖2 慈竹竹葉膳食纖維組成Fig.2 Dietary fiber composition of N.affinis leaves

    3 結(jié)論與討論

    本研究結(jié)果表明,NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)達到10%時,料液比為1∶15,提取時間為18 h,溫度為40 ℃時提取的竹葉纖維中CF含量最高,而正交試驗表明,慈竹竹葉纖維提取的最優(yōu)工藝為NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)10%,料液比為1∶15,提取時間為17 h,溫度為42 ℃,最佳工藝條件下慈竹竹葉纖維的提取率為(34.58±0.29)%,竹葉纖維中CF含量為(82.27±0.35)%。研究表明,NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)高于14%時,提取的膳食纖維中纖維含量降低,可能是高濃度堿使部分纖維降解而導(dǎo)致的[14],這與本研究結(jié)果相一致,本試驗提取的慈竹葉膳食纖維的最佳NaOH溶液質(zhì)量體積分數(shù)為10%,質(zhì)量體積分數(shù)超過10%后,提取的膳食纖維中CF含量下降;料液比也會影響膳食纖維的提取,研究表明,料液比大于1∶20時,提取的膳食纖維中纖維顯著降低,說明堿液的加入量對于纖維素含量增加的促進作用存在飽和點,超過該飽和點纖維素可能會由于被堿液部分降解而導(dǎo)致其含量降低[15],本研究表明,當料液比為1∶15時提取的膳食纖維中CF的含量最高為76.37%,料液比過高或過低均會影響膳食纖維的提取效果;提取時間也會影響膳食纖維的提取,因為纖維素是一種高聚合度物質(zhì),提取纖維所需的時間較長,與其本身的性質(zhì)息息相關(guān)。陳雪峰等[16]研究表明,提取蘋果渣纖維素15 h以后,提取的膳食纖維中纖維素含量顯著增加,20 h時纖維素含量最高,表明提取纖維15 h后有效反應(yīng)才真正開始。本研究通過正交試驗確定的慈竹的最佳提取時間為17 h,與其結(jié)果相一致;提取溫度也會影響膳食纖維的提取,研究表明,較低的提取溫度有利于膳食纖維的提取,過高溫度會使膳食纖維潤脹程度降低,堿反應(yīng)活性隨之下降,致使纖維含量也下降[16],陳姍姍等[17]研究表明,堿液浸提法提取花生殼膳食纖維,其最佳提取溫度為40 ℃,與本研究結(jié)果一致。

    膳食纖維的生理功能與其中IDF與SDF的比例有關(guān)系,膳食纖維中IDF和SDF在體內(nèi)的生理功能不盡相同,IDF表現(xiàn)為增加糞便體積、減少腸道運輸時間,其持水能力,吸油能力和毒素吸附能力較強[18-19]。而SDF除具有較好的溶脹性外,還是一類可發(fā)酵的膳食纖維,其在后腸中被微生物發(fā)酵產(chǎn)生短鏈脂肪酸(SCFAs,包括乙酸、丙酸和丁酸)和氣體,SCFAs可修復(fù)腸黏膜,通過激活G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)和抑制組蛋白去乙?;福℉DACs)基因表達,使促炎因子基因表達下調(diào),從而抑制腸道的炎癥反應(yīng)[20],改善人和動物腸道健康。因此,膳食纖維中有一定比例的SDF對人和動物腸道健康有益。本研究提取的慈竹竹葉纖維中SDF含量為(12.86±0.26)%,IDF含量為(76.11±0.44)%。有研究表明,優(yōu)質(zhì)膳食纖維中IDF和SDF的組成比例適宜,一般膳食纖維中含有30%~50%的SDF和50%~70%的IDF被認為是一個較好的比例[21]。Rosell等[22]研究了幾種商業(yè)纖維的纖維組成,結(jié)果表明菊粉中97%為SDF,瓜爾膠中SDF為85%,蘋果膳食纖維中SDF為15%,IDF為45%,燕麥纖維中SDF為5%,IDF為85%,小麥纖維中SDF為2.5%,IDF為94.5%。Li等[23]用水提法提取了竹筍的膳食纖維,結(jié)果表明,提取的竹筍膳食纖維中IDF含量為(73.4±0.89)%,SDF含量為(1.12±0.29)%,IDF占膳食纖維的98.50%,SDF占1.50%。李楊等[24]研究表明,生物解離法提取的大豆膳食纖維純度可高達82.58%,SDF約占總膳食纖維含量的60%,提取的纖維屬于優(yōu)質(zhì)膳食纖維。Felisberto等[10]用3種幼竹稈作為一種潛在的膳食纖維源,結(jié)果表明,其竹纖維中總纖維為64.12%~90.21%,其中IDF為在62.54%~89.79%,表明幼竹竿膳食纖維中以IDF為主,SDF較少。許多研究證實,甜菜漿是膳食纖維組成比較適宜的一種優(yōu)質(zhì)纖維,其包含13.1%~28.6%的SDF,46.9%~68.9%的IDF,其SDF和IDF組成比例適宜[25],被廣泛應(yīng)用到人類和寵物食品中。而本研究提取的慈竹竹葉 纖 維 中SDF為(12.86±0.26)%,IDF為(76.11±0.44)%,是一種具有開發(fā)價值的膳食纖維。

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