淋巴結(jié)病理組織免疫組化技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化操作的效果分析

陳玉英 郭慧 曹秋霞

（韶關(guān)市第一人民醫(yī)院 廣東 韶關(guān) 512000）

淋巴結(jié)的活檢是比較復(fù)雜的活檢，H E 的診斷是對形態(tài)學(xué)的分析，主要是判斷淋巴結(jié)有沒有病變，若是產(chǎn)生病變則需要確認(rèn)是炎癥的病變還是腫瘤性的病變，淋巴結(jié)的腫瘤非常復(fù)雜，有60 多種類型，包括良性和惡性。淋巴瘤的分類，要借助免疫組織化學(xué)技術(shù)來完成。通過鑒定淋巴瘤存在的某種抗體來進(jìn)行初步分類，比如分霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤[1]。隨著科技和循證醫(yī)學(xué)的發(fā)展以及人類經(jīng)驗積累，每一個淋巴瘤的分類都認(rèn)為是一種疾病，必須用免疫組織化學(xué)的方法來鑒定淋巴瘤的確切分類，以便臨床醫(yī)生更精準(zhǔn)的治療疾病[2]。本文對免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法進(jìn)行比較，現(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月—2018年1月我院收治的40例淋巴結(jié)患者，隨機(jī)均分為給予免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法的實驗組和僅采用免疫組化技術(shù)但不進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作方法的對照組，各20 例。對照組中男性與女性比例為11 ∶9，患者年齡21 ～78 歲，平均年齡（49.5±6.4）歲，其中10 例頸部淋巴結(jié)，6 例鎖骨下淋巴結(jié)，4 例腹膜后淋巴結(jié)；實驗組中男性與女性比例為12 ∶8，患者年齡22 ～76 歲，平均年齡（48.4±6.8）歲，其中9 例頸部淋巴結(jié)，7 例鎖骨下淋巴結(jié)，4 例腹膜后淋巴結(jié)。兩組患者在一般資料上對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，所有患者及其家屬均知情同意，通過了倫理委員會審批[3]。

1.2 方法

實驗組采用免疫組化技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化操作方法，對照組采用免疫組化技術(shù)但不進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作方法。

標(biāo)準(zhǔn)化淋巴結(jié)組織HE 片方法如下：取材時根據(jù)要求的標(biāo)準(zhǔn)控制組織的厚度（0.18cm 適宜）。在4%中性甲醛放置淋巴結(jié)組織并進(jìn)行固定，當(dāng)使用1 例較多穿刺組織的標(biāo)本時，應(yīng)該通過過濾紙包裹每條組織，并在確認(rèn)組織處于同一平面后放置在脫水盒中。切片厚度2.5μm 較為適宜，將蠟片切成7 片，并隨機(jī)選擇其中一片進(jìn)行染色，作為HE 切片放置于載玻片上[4]。

免疫組化技術(shù)的具體方式如下：采用常規(guī)脫蠟后的切片放置于水中，保持室溫條件下使用3%甲醇液作用一定時間后，將切片使用蒸餾水和清水進(jìn)行清洗。在高壓鍋中放置pH6.0 的1.1L 的檸檬酸，加熱2min 后讓其自然冷卻，再取出使用PBS沖洗2 次，每次2min，添加二抗直至DAB 顯色，并比較抗體的陰陽性[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計記錄實驗組和對照組的染色切片的優(yōu)良率，主要評價標(biāo)準(zhǔn)如下：組織結(jié)構(gòu)無破壞，背景清晰、干凈，陽性物質(zhì)定位準(zhǔn)確，無特殊著色、脫色情況，此為優(yōu)；組織結(jié)構(gòu)幾乎無破損，背景存在雜質(zhì)，陽性物質(zhì)定位稍微偏移，特殊著色、脫色情況不明顯，此為良；組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重?zé)o法對陽性物質(zhì)進(jìn)行定位，存在特殊著色、脫色，此為差[6]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS20.00 軟件處理應(yīng)用免疫組化技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法在淋巴結(jié)病理組織的相關(guān)數(shù)據(jù)，P ＜0.05 表示差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

實驗組和對照組患者的優(yōu)良率見表1 所示，實驗組的優(yōu)良率為95.0%，顯著高于對照組的60.0%，差異顯著（P ＜0.05）。

表1 實驗組和對照組優(yōu)良率比較 [n(%)]

3.討論

免疫組化即為免疫組織化學(xué)，是應(yīng)用免疫學(xué)的基礎(chǔ)，是根據(jù)抗原和抗體特異結(jié)合的原理從而確定細(xì)胞內(nèi)多肽或蛋白質(zhì)的位置，并對其進(jìn)行定量以及定性的研究，從而診斷患者的病癥。因此，稱之為免疫組織化學(xué)技術(shù)，簡稱免疫組化，是病理學(xué)檢查的常用技術(shù)[7]。雖然在免疫組化技術(shù)最初發(fā)展階段由于技術(shù)的限制造成無法充分發(fā)揮其作用，但是近幾年隨著社會的發(fā)展、醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，免疫組化技術(shù)也取得了極大的進(jìn)步，對疾病判斷具有較高的敏感性。對比發(fā)展初期，抗體的稀釋程度較低僅僅只有幾十倍，但是隨著相關(guān)技術(shù)的突破目前抗體稀釋程度大大提升，最大可達(dá)到10000 多倍，抗體敏感性提升也極為巨大。但是由于現(xiàn)在缺乏相應(yīng)統(tǒng)一、確定的標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)致免疫組化技術(shù)結(jié)果差距較大，造成醫(yī)生診斷存在偏差。因此統(tǒng)一操作方式尤為重要，特別是利用高壓鍋加熱修復(fù)抗原，能夠排除多種方式的干擾，時間控制更加準(zhǔn)確，染色效果更佳，遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于微波加熱修復(fù)抗原的方法，通過逐步完善免疫組化技術(shù)能夠充分發(fā)揮其作用，為醫(yī)生的診斷提供更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

本文實驗組的優(yōu)良率為95.0%，顯著高于對照組的60.0%），差異顯著（P ＜0.05）。與王雅萍[1]的結(jié)果基本一致，觀察組患者的免疫組化染色切片優(yōu)良率為95.2%，對照組的免疫組化染色切片優(yōu)良率為56.1%，兩組患者之間對比差異顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。根據(jù)本文結(jié)果表明通過標(biāo)準(zhǔn)化操作方法能夠有效提高免疫組化技術(shù)的檢測結(jié)果，充分發(fā)揮免疫組化技術(shù)的優(yōu)勢，有利于臨床醫(yī)生進(jìn)一步掌握患者的病情，

綜上所述，應(yīng)用免疫組化技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化操作方法能明顯提高切片的優(yōu)良率，便于臨床準(zhǔn)確診斷患者的病情，值得在淋巴結(jié)病理組織的切片檢測中應(yīng)用。