丹參活性成分在抗動(dòng)脈粥樣硬化中的作用與機(jī)制研究進(jìn)展

秦 魏,邢 露,楊智慧,賈禮伊,靳 潔,郭 蒙,孫曉瑩,曹慧玲,

(1.西安醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究所 陜西省缺血性心血管疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 西安 710021；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712046)

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,As)是導(dǎo)致各種心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。As發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，主要危險(xiǎn)因素包括脂質(zhì)代謝異常，血管內(nèi)皮損傷，機(jī)體炎癥反應(yīng)等。血脂水平異常以血漿總膽固醇(Total cholesterol,TC)和低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)升高，高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)降低為特征，是誘發(fā)As的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷可導(dǎo)致其滲透壓升高，使促進(jìn)血管收縮的細(xì)胞因子釋放增加，導(dǎo)致血管痙攣甚至壞死，誘發(fā)As。長(zhǎng)期慢性炎癥可刺激內(nèi)膜增生，平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞源性泡沫化細(xì)胞數(shù)量增多，血管局部產(chǎn)生各種炎癥細(xì)胞因子，誘發(fā)As。此外，家族遺傳、不良生活方式、心理因素、年齡等也會(huì)影響As的發(fā)生發(fā)展[1]。臨床上主要通過(guò)降脂、降壓、降糖、抗凝等藥物治療As。這些化學(xué)藥物療效單一，價(jià)格昂貴，不良反應(yīng)較大。作用靶點(diǎn)多、不良反應(yīng)少、價(jià)廉易得的中草藥已成為防治心腦血管疾病的研究熱點(diǎn)，丹參作為代表藥物在As防治方面具有獨(dú)特作用。本文從中醫(yī)與As關(guān)系和丹參主要有效組分抗As方面，綜述了丹參抗As的藥理學(xué)研究進(jìn)展，以期為丹參抗As應(yīng)用提供參考。

1 中醫(yī)與As關(guān)系

在傳統(tǒng)中醫(yī)藥的歷史發(fā)展中并沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)As這一病名，但現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中As患者其臨床癥狀表現(xiàn)對(duì)應(yīng)中醫(yī)辨證理論中“痰濁”“血瘀”“眩暈”“中風(fēng)”“胸痹”“脾虛”等癥候。在中醫(yī)看來(lái)，As由于先天不足，腎虛精虧，或后天喜食肥甘厚膩之物，使脾胃難以正常運(yùn)作，或情志損傷，或者毒邪侵襲機(jī)體，使臟腑功能受損，津液氣不能正常運(yùn)輸，痰熱瘀滯，進(jìn)而導(dǎo)致有形之邪阻塞血道，或?yàn)樘碉?，或?yàn)轲鲅?，?dǎo)致體內(nèi)氣血運(yùn)行不暢[2]。中醫(yī)診斷學(xué)以為本病屬于標(biāo)實(shí)本虛之證，標(biāo)實(shí)指表面癥狀：血瘀寒凝，氣滯痰濁；本虛指疾病源頭：氣虛、陽(yáng)虛、陰虛。根據(jù)中醫(yī)辨證學(xué)，治療As中草藥主要分為兩大類(lèi)：活血化瘀藥和補(bǔ)虛藥。據(jù)統(tǒng)計(jì)，丹參是這兩大類(lèi)藥物中使用最多，治療效果最為突出的藥材[3-4]。臨床研究表明，丹參可調(diào)節(jié)As患者的C-反應(yīng)蛋白(C reactive protein,CRP)表達(dá)，降低甘油三酯(Triglyceride,TG)、TC、LDL-C，升高HDL-C，展示出良好的抗As活性。

2 丹參主要有效組分的抗As活性與作用機(jī)制

2.1 丹參水溶性組分

2.1.1 丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB):SAB具有降脂活性。趙桂峰等[5]采用ApoE-/-小鼠高脂飼料與腹腔注射鏈脲佐菌素，構(gòu)建糖尿病As模型。研究發(fā)現(xiàn)，SAB治療可降低小鼠血糖與血脂水平，縮小As斑塊面積。遲曉君等[6]發(fā)現(xiàn)，SAB可增加膽固醇和膽汁酸在糞便中的排出量，作用機(jī)制可能是SAB阻斷LDL氧化所致細(xì)胞對(duì)于膽固醇的大量攝入，從而使膽固醇以其他途徑轉(zhuǎn)化排出體外。

SAB可保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。Ren等[7]研究發(fā)現(xiàn)，SAB治療可明顯改善糖尿病大鼠的內(nèi)皮功能損傷，恢復(fù)內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性，增加一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量，明顯減少血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡數(shù)量。Joe等[8]發(fā)現(xiàn)，SAB可增加小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW264.7中的血紅素加氧酶-1的表達(dá)，SAB通過(guò)抑制精氨酸酶活性，減少活性氧的產(chǎn)生而增加離體小鼠主動(dòng)脈NO的生成，發(fā)揮抗As活性。

SAB具有良好的抗炎作用。Xu等[9]研究發(fā)現(xiàn)，SAB可抑制血小板活化，即使在血小板已被激活的情況下，也可削弱由血小板引發(fā)的一系列內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)，同時(shí)其抗炎作用也與抑制核因子κB蛋白(Nuclear factor-κB,NF-κB)活化有關(guān)。表明SAB可能對(duì)那些同時(shí)引起血栓和炎癥的疾病更有益。Stumpf等[10]發(fā)現(xiàn)，SAB可顯著抑制腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor,TNF)誘導(dǎo)的黏附分子、細(xì)胞因子和趨化因子表達(dá)，抑制二磷酸腺苷誘導(dǎo)的血小板中P-選擇素表達(dá)，發(fā)揮抗炎、抗As活性。

晚期糖基化終末產(chǎn)物(Advanced glycation end products,AGEs)可促進(jìn)糖尿病大鼠主動(dòng)脈內(nèi)脂滴積聚。鄭紡等[11]研究發(fā)現(xiàn)，SAB可通過(guò)降低斑塊內(nèi)AGEs與其相應(yīng)受體表達(dá)，減少糖尿病As斑塊面積。王麗[12]研究發(fā)現(xiàn)，SAB可增加三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)的表達(dá)，使巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇或脂質(zhì)含量減少。氧化型低密度脂蛋白(Oxidative low density lipoprotein,ox-LDL)與炎癥反應(yīng)發(fā)生密不可分，SAB可通過(guò)激活過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體γ，有效抑制ox-LDL誘導(dǎo)的人單核細(xì)胞來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞成熟，避免其向巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化而誘發(fā)炎癥反應(yīng)。

2.1.2 丹酚酸A(Salvianolic acid A,SAA):核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域(Nucleotide binding oligomerization domain,NOD)樣受體家族3 (NOD-likereceptors 3,NLRP3)炎癥小體的激活是促進(jìn)As 病變的關(guān)鍵因素。Ma等[13]研究發(fā)現(xiàn)，采用高脂飲食和維生素D3注射誘導(dǎo)形成的雄性祖克糖尿病性脂肪肝大鼠模型，給予SAA治療后，可降低其血清高敏CRP水平，抑制主動(dòng)脈組織中NLRP3炎癥小體和NF-κB表達(dá)。Xiang等[14]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)SAA治療后，可明顯下調(diào)P-選擇素、白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、細(xì)胞間黏附因子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和NF-κB表達(dá)，表明SAA可通過(guò)抑制血小板活化和炎癥因子表達(dá)，減輕組織細(xì)胞損傷。Song等[15]發(fā)現(xiàn)，SAA可明顯改善血脂異常，顯著降低其主動(dòng)脈內(nèi)脂質(zhì)沉積，阻止大鼠As病變的發(fā)生與發(fā)展。同時(shí)，通過(guò)抑制Toll樣受體4和NF-κB，降低相關(guān)炎癥因子表達(dá)，可提高體內(nèi)抗氧化酶活性，減弱體內(nèi)氧化應(yīng)激水平。此外，SAA可使因ox-LDL引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(Lectin-like oxidized LDL receptor-1,LOX-1)的表達(dá)下降，減少NF-κB、ICAM-1和血管細(xì)胞黏附因子-1表達(dá)水平，抑制還原型輔酶Ⅱ氧化酶亞單位4(NADPH-oxidase 4,NOX4)介導(dǎo)的ROS產(chǎn)生。

2.1.3 丹參素(Danshensu,DSS):王蓉等[16]研究發(fā)現(xiàn)，DSS可通過(guò)調(diào)節(jié)核因子E2相關(guān)因子、NF-κB和核因子κB的抑制蛋白信號(hào)通路，抑制炎癥反應(yīng)和降低氧化應(yīng)激水平。Gao等[17]發(fā)現(xiàn)，DSS可通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)，降低脂質(zhì)堆積，延緩As進(jìn)程。DSS可顯著降低脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)體CD36及其同源物B族I型清道夫受體的表達(dá)，提高ABCA1和ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體 G1的表達(dá)水平，減少細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積。此外，還可通過(guò)影響CD36和ABCA1表達(dá)，減少RAW264.7泡沫細(xì)胞的脂質(zhì)沉積。

丹參素冰片脂(Danshensu bingpian zhi,DBZ)是DSS的衍生物，在體外有抑制由脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化和脂質(zhì)蓄積的作用。Wang等[18]研究發(fā)現(xiàn)，DBZ可通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)和減少巨噬細(xì)胞向血管壁浸潤(rùn)，顯著減少ApoE-/-小鼠As斑塊面積，其作用機(jī)制包括抑制炎癥反應(yīng)、巨噬細(xì)胞遷移、白細(xì)胞黏附和泡沫細(xì)胞形成等方面。

2.2 脂溶性組分

2.2.1 丹參酮ⅡA(Tanshinone IIA，TSA):TSA可降脂與保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。趙秋宇等[19]發(fā)現(xiàn)，TSA可通過(guò)調(diào)控ABCA1及CD36等與控制膽固醇內(nèi)流相關(guān)基因表達(dá)，減少細(xì)胞對(duì)膽固醇吸收，抑制ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈斑塊形成。唐林等[20]研究表明，TSA可通過(guò)降低丙二醛含量，提高超氧化物歧化酶活性，提高HUVECs抗氧化應(yīng)激和抗損傷的能力，保護(hù)血管。曹慧敏等[21]發(fā)現(xiàn)，對(duì)于ox-LDL誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(EA.Hy926)氧化應(yīng)激模型所產(chǎn)生的自噬，TSA治療有效并具有時(shí)效性。TSA可通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞自噬，減少ox-LDL對(duì)細(xì)胞的氧化應(yīng)激損害，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。

TSA可抗炎。陳萍等[22]發(fā)現(xiàn)，TSA 可增加M2型巨噬細(xì)胞的抗炎因子分泌，同時(shí)抑制M1型巨噬細(xì)胞分泌促炎因子，協(xié)同發(fā)揮抗As作用。同時(shí)，TSA可有效激活磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子6 磷酸化，使巨噬細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)化，減少炎癥因子釋放，提高As斑塊穩(wěn)定性。Gao等[23]發(fā)現(xiàn)，TSA可增強(qiáng)M2巨噬細(xì)胞代表物精氨酸酶1 和炎癥區(qū)域分子1的表達(dá)，降低M1巨噬細(xì)胞極化相關(guān)標(biāo)志物誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和IL-1β的表達(dá)。同時(shí)，TSA可有效抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的微小核酸核糖-155的表達(dá)。Chen等[24]研究表明，TSA治療的ApoE-/-小鼠，可通過(guò)抑制微小核酸核糖-375，抑制As進(jìn)程，激活Krüppel樣因子4，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的自噬和M2極化。另有研究發(fā)現(xiàn)，在高脂飲食后ApoE-/-小鼠形成的頸動(dòng)脈粥樣硬化模型中，TSA可減少機(jī)體及某些血管外膜處炎癥因子如5-羥色胺、TNF-α和IL-6的表達(dá)與釋放，減輕肥大細(xì)胞對(duì)血管外膜的影響，減少As面積。

付鑫等[25]發(fā)現(xiàn)，TSA可降低TC、TG、LDL-C等水平，增高HDL-C水平，下調(diào)TNF-α、p38絲裂原活化蛋白激酶、NF-κB及視黃醇結(jié)合蛋白4的表達(dá)，明顯減少As斑塊面積。陳卓[26]發(fā)現(xiàn)，TSA可降低血脂水平，減少炎癥反應(yīng)發(fā)生，使斑塊穩(wěn)定，延緩ApoE-/-小鼠的As進(jìn)程。

2.2.2 隱丹參酮(Cryptotanshinone，CTS):ox-LDL可使HUVECs通透性增加，使單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附性增加，而CTS降低內(nèi)皮細(xì)胞通透性可能是與恢復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞NO生物利用度，減少黏附因子表達(dá)，降低內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞間黏附性相關(guān)。Liu等[27]發(fā)現(xiàn)，CTS可通過(guò)減少LOX-1和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)，抑制ROS產(chǎn)生和NF-κB激活，明顯減少ApoE-/-小鼠As斑塊面積，增強(qiáng)斑塊穩(wěn)定性。CTS治療可顯著降低血清中促炎因子和黏附分子表達(dá)，減少由ox-LDL引發(fā)的LOX-1 mRNA表達(dá)，從而抑制單核細(xì)胞與HUVECs黏附，但卻不改變血脂水平。另外，CTS還能抑制NOX4介導(dǎo)的HUVECs的ROS產(chǎn)生和NF-κB激活。

2.2.3 二氫丹參酮Ⅰ(Dihydrotanshinone Ⅰ，DHT):李春霞[28]研究發(fā)現(xiàn)，ApoE-/-小鼠模型的DHT高劑量組(25 mg/kg)可顯著降低血清血脂水平，增加血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽含量，減少丙二醛含量，表明DHT可通過(guò)降低血清中脂質(zhì)的水平和氧化應(yīng)激水平，減少相關(guān)炎癥因子在斑塊區(qū)域表達(dá)，防治As。Zhao等[29]發(fā)現(xiàn)，DHT(10或25 mg/kg)可改善ApoE-/-小鼠的血脂水平，降低氧化應(yīng)激，顯著減緩As斑塊形成，縮小壞死核心區(qū)。As改善作用與降低LOX-1和NOX4的表達(dá)、ROS產(chǎn)生、NF-κB核轉(zhuǎn)位和單核細(xì)胞的黏附密切相關(guān)。

3 結(jié)語(yǔ)與展望

As發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，是多種因素共同作用的結(jié)果，而目前化學(xué)藥物治療As的療效單一，價(jià)格昂貴，不良反應(yīng)較大。中醫(yī)是從整體入手，中藥具備多成分與多靶點(diǎn)治療特點(diǎn)，對(duì)于As這類(lèi)復(fù)雜疾病具有良好療效。丹參現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于心血管疾病治療，雖然其影響As發(fā)生發(fā)展的機(jī)制逐漸清晰，但如何將相關(guān)作用靶點(diǎn)或信號(hào)通路與As臨床治療結(jié)合起來(lái)，仍舊是一個(gè)難題。丹參或丹參制劑如何在整體觀指導(dǎo)下，解釋其抗As的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，還需深入研究。此外，多成分與多靶點(diǎn)之間的復(fù)雜對(duì)應(yīng)關(guān)系也有待進(jìn)一步的探索。相信隨著丹參抗As作用機(jī)制的深入闡明，丹參在As的預(yù)防與治療方面將發(fā)揮更重要作用。