白皮杉醇抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激保護(hù)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷

劉文靜高進(jìn)賢 錢 倩蒲君峰石 磊吳樹金*

(1.甘肅省人民醫(yī)院藥劑科,甘肅 蘭州 730000;2.蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000)

四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4) 誘導(dǎo)的化學(xué)性肝損傷模型被廣泛用于急性肝損傷病理生理學(xué)機制研究[1],其主要分子學(xué)基礎(chǔ)為CCl4經(jīng)肝細(xì)胞色素P450 酶系代謝為毒性產(chǎn)物三氯甲基自由基() 和過氧化三氯甲基自由基(),這2種高毒性、高反應(yīng)活性中間體可以損傷DNA 和生物膜,尤其是可以與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的磷脂分子發(fā)生共價結(jié)合,引起脂質(zhì)過氧化,從而啟動內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS) 這一通路,進(jìn)而誘導(dǎo)大量肝細(xì)胞過度凋亡,尤以中心靜脈周圍區(qū)域嚴(yán)重,成為CCl4誘導(dǎo)肝損傷的主要病理學(xué)改變[2-3]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum,ER) 是一種存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞器,主要負(fù)責(zé)合成、折疊、修飾和轉(zhuǎn)運蛋白,只有正確的折疊蛋白才能從ER 轉(zhuǎn)運至高爾基體中,任何干擾氧化還原的調(diào)控都能夠?qū)е翬RS；活性氧(reactive oxygen species,ROS) 水平過高會明顯誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中蛋白的錯誤折疊,更為重要的是ERS 又會反過來通過未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response,UPR) 以及與線粒體之間的相互作用產(chǎn)生更多的ROS,兩者之間形成負(fù)反饋,加速CCl4所致肝損傷,其中ROS成為觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進(jìn)而介導(dǎo)凋亡通路的關(guān)鍵上游信號分子,抗氧化應(yīng)激則成為打破這一環(huán)路保護(hù)肝損傷的關(guān)鍵所在[4-5]。

目前,臨床治療肝損傷的大多數(shù)藥物存在有效性差、不良反應(yīng)多等問題,故研發(fā)療效確切、安全性高的藥物尤為重要。白皮杉醇主要存在于葡萄皮、紅酒中,是多種傳統(tǒng)中草藥的有效成分,也為白藜蘆醇的羥基化類似物[6],但它相比白藜蘆醇具有更強的抗氧化活性,其原因除了含有4 個酚羥基,可以螯合氧自由基外[7],而且可主要通過一種新的蛋白激酶C 和酪氨酸激酶旁路來上調(diào)抗氧化酶血紅素加氧酶(heme oxygenase-1,HO-1) 表達(dá),該作用優(yōu)于姜黃素、槲皮素、大多數(shù)均二苯乙烯化合物,從而保護(hù)細(xì)胞功能[8]。課題組前期發(fā)現(xiàn),基于上調(diào)HO-1 抗氧化酶作用的藥物可抑制肝細(xì)胞凋亡[9],故本實驗在CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型中觀察白皮杉醇的保護(hù)作用,同時探討其機制是否與通過上調(diào)HO-1 抗氧化酶、抗氧化應(yīng)激來抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡有關(guān)。

1 材料

1.1 儀器 AU2700 型全自動生化分析儀、IX-70型熒光顯微鏡(日本Olympus 公司)；LS-50B 型熒光分光光度計(日本Shimadu 公司)。

1.2 試劑與藥物 白皮杉醇(純度≥98%,上海源葉生物科技有限公司),臨用時用1.5%DMSO 初溶后,0.9%生理鹽水配制成2 g/L 母液備用；水飛薊素(純度≥98%,成都曼斯特生物科技有限公司)。CCl4為分析純(上海凌峰化學(xué)試劑有限公司),臨用時用植物油配成1%溶液；DMSO (上海拜力生物科技有限公司)；SOD、GSH、MDA 檢測試劑盒 (南京建成生物工程研究所)；PERK、ATF4、CHOP、TRB3、caspase-12、β-ACTIN 抗體(美國Santa Cruz Biotechnology 公司)；TUNEL 試劑盒(瑞士Roche 公司)；其余試劑均為分析純。

1.3 動物 60 只SPF 級雄性昆明小鼠,體質(zhì)量18～22 g,購于甘肅省中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心,動物生產(chǎn)許可證號SCXK (甘) 2015-0002。

2 方法與結(jié)果

2.1 動物肝損傷模型的制備 參考文獻(xiàn)[10]報道,將60 只雄性昆明小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d,隨機分為對照組,CCl4組,水飛薊素陽性對照組,低、中、高劑量白皮杉醇保護(hù)組,每組10 只。水飛薊素組給予腹腔注射(20 mg/kg),基于白皮杉醇對抗氧化酶HO-1 的作用為時間依賴性,根據(jù)以往文獻(xiàn)報道及我們前期預(yù)實驗的結(jié)果,白皮杉醇保護(hù)組分別腹腔注射給予10、20、40 mg/kg,每天1 次、共計7 d[11],對照組、模型組分別腹腔注射等體積生理鹽水。末次給藥1 h 后,對照組小鼠腹腔注射植物油(10 mL/kg),其余組小鼠腹腔注射給予5% CCl4(10 mL/kg) 油溶液。24 h 后小鼠眼眶采血、離心(2 000 r/min,15 min) 取血清-20 ℃凍存待測；解剖取肝臟組織,保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 21.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以表示,多組間比較采用方差分析,病理分級統(tǒng)計數(shù)據(jù)釆用Mann-Whitney U 檢驗。 P ＜0.05 或P＜0.01 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.3 白皮杉醇對CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清指標(biāo)的影響 使用全自動生化分析儀檢測AST、ALT、TP、Alb 和A/G 比。由表1 可知,與正常對照組相比,CCl4模型組小鼠血清ALT、AST 值顯著升高(P ＜0.01),TP、Alb、A/G 比明顯降低；不同劑量的白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 和水飛薊素均可有效抑制急性肝損傷小鼠血清ALT、AST 值的增高和TP、Alb、A/G 比的降低 (P ＜0.05,P＜0.01)。

表1 白皮杉醇對CCl4 誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清指標(biāo)的影響（，n=10）Tab.1 Effects of piceatannol on levels of serum indexes of mice with CCl4-induced acute liver injury （，n=10）

注:與對照組比較,**P＜0.01；與模型組比較,+P＜0.05,++P＜0.01。

2.4 白皮杉醇對CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠肝臟病理組織學(xué)的影響 取小鼠肝右葉條形組織200 mg,福爾馬林溶液固定24 h、石蠟包埋、切片(厚度為4 μm),常規(guī)HE 染色,中性樹脂封片,光鏡下觀察肝組織結(jié)構(gòu)的病理變化。由病理科專業(yè)醫(yī)師分析鑒定。依據(jù)肝損傷程度評分標(biāo)準(zhǔn)[10]:0級,正常肝組織細(xì)胞；1 級,肝細(xì)胞輕微腫脹,散發(fā)炎性細(xì)胞浸潤,個別肝細(xì)胞壞死；2 級,肝小葉不超過1/3 的局灶或斑塊性肝細(xì)胞壞死,聚集性炎性細(xì)胞浸潤；3 級,肝小葉1/3 至1/2 的廣泛肝細(xì)胞壞死,大量炎性細(xì)胞浸潤；4 級,肝小葉超過1/2的肝細(xì)胞壞死,廣泛炎性細(xì)胞浸潤。

由圖1 可見,對照組小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、排列整齊,細(xì)胞核大小正常,核質(zhì)淡染。模型組小鼠大量肝細(xì)胞變性腫脹,匯管區(qū)可見大量炎性細(xì)胞浸潤,肝索排列紊亂,肝細(xì)胞脂肪變性,胞漿疏松呈空泡狀,散在凋亡小體。白皮杉醇 (10、20、40 mg/kg) 組和水飛薊素組小鼠變性壞死肝細(xì)胞和浸潤的炎癥細(xì)胞均不同程度減輕,病理損傷級別降低(表2)。該結(jié)果提示白皮杉醇能顯著降低小鼠急性肝損傷程度。

圖1 白皮杉醇對CCl4 誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠的肝臟病理組織學(xué)影響（×200）Fig.1 Histopathological analysis of mice with CCl4-induced acute liver injury subjected to piceatannol treatment （×200）

表2 白皮杉醇對CCl4 誘導(dǎo)的急性小鼠肝損傷病理組織學(xué)評分影響（n=10）Tab.2 Histopathological grades of mice with CCl4-induced liver injury subjected to piceatannol treatment （n=10）

2.5 白皮杉醇對CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠肝細(xì)胞凋亡的影響 TUNEL 法檢測肝細(xì)胞凋亡。按照試劑盒說明書操作,將肝組織石蠟切片采用二甲苯常規(guī)脫蠟,乙醇梯度水化,PBS (pH 7.4) 漂洗3次,每次5 min；加入蛋白酶K 工作液37 ℃反應(yīng)30 min,PBS 漂洗3× 5 min,4% 多聚甲醛 (pH 7.4 的PBS) 室溫固定30 min,PBS 漂洗3× 5 min,浸入封閉液(3% H2O2) 室溫封閉10 min,PBS 漂洗3× 5 min；樣品上加入適量TUNEL 檢測液,37 ℃避光孵育60 min,PBS 漂洗3× 5 min,去除PBS 液,每張切片加50～100 μL DAPI 染液,室溫避光孵育5 min。PBS 洗3 次,每次5 min。滴加適量的抗熒光淬滅劑于組織上,蓋玻片封片,熒光顯微鏡下使用激發(fā)波長450 nm、發(fā)射波550 nm 觀察。凋亡細(xì)胞由于DNA 斷裂暴露出3’ -羧基末端而被標(biāo)記為綠色,每張切片隨機選取5 個視野計數(shù)凋亡細(xì)胞數(shù),實驗結(jié)果采用Image Pro plus 6.0 圖像分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計,結(jié)果以陽性細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%表示。

由圖2 可見,與對照組比較,CCl4模型組小鼠肝細(xì)胞凋亡顯著增加(P＜0.01),尤其以中心靜脈周圍處明顯,白皮杉醇 (10、20、40 mg/kg)組和水飛薊素組與CCl4模型組比較,細(xì)胞凋亡顯著減少(P＜0.05,P＜0.01),且隨白皮杉醇濃度的升高,細(xì)胞凋亡明顯下降。

2.6 白皮杉醇對急性肝損傷小鼠肝組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[12]取肝組織,裂解液裂解,7 000 r/min 低溫離心10 min,取上清液待測。取80 μg 蛋白,加入上樣緩沖液煮沸變性,10% SDS-PAGE 電泳,將蛋白轉(zhuǎn)印到PVDF 膜上,5%的脫脂奶粉室溫封閉1 h。加入相應(yīng)一抗4 ℃孵育過夜,再加二抗室溫孵育1 h,ECL 顯色,拍照。Gel-Pro analyzer 4.0 軟件分析結(jié)果。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路是機體內(nèi)細(xì)胞凋亡的三大重要途徑之一,為了驗證白皮杉醇是否通過抑制ERS保護(hù)CCl4所致肝細(xì)胞凋亡,本研究采用Western blot 法檢測了ERS 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡途徑中的關(guān)鍵相關(guān)凋亡因子的表達(dá)。結(jié)果如圖3 所示,與對照組相比,CCl4模型組小鼠肝組織中PERK、ATF4、CHOP 蛋白表達(dá)水平顯著增高(P＜0.01)；與模型組相比,白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 與水飛薊素均可顯著抑制小鼠肝組織ERS 通路相關(guān)蛋白PERK (圖3A)、ATF4 (圖3B)、CHOP (圖3C)的表達(dá)(P＜0.01),提示白皮杉醇可能通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)PERK-ATF4-CHOP 途徑抑制CCl4所致肝細(xì)胞凋亡。

2.7 白皮杉醇對CCl4致急性肝損傷小鼠肝組織TRB3 蛋白表達(dá)的影響 CHOP 通路是ERS 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵環(huán)節(jié),為了進(jìn)一步明確ERS 在白皮杉醇保護(hù)肝損傷中的作用,本研究直接檢測了CHOP 的下游靶基因TRB3 的表達(dá)。結(jié)果如圖4 所示,與對照組相比,CCl4模型組小鼠肝組織中TRB3 蛋白表達(dá)水平顯著增高(P＜0.01)；與模型組相比,白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 與水飛薊素均可顯著抑制TRB3 的表達(dá)(P＜0.01)。

2.8 白皮杉醇對CCl4致急性肝損傷小鼠肝組織caspase-12 蛋白表達(dá)的影響 鑒于caspase-12 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡為ERS 特異性的,本研究使用Western blot,進(jìn)一步檢測了活化形式的cleaved Caspase-12蛋白表達(dá),結(jié)果如圖5 所示,與正常對照組相比,CCl4模型組小鼠肝組織中cleaved caspase-12 蛋白表達(dá)水平顯著增高(P＜0.01)；與模型組相比,白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 與水飛薊素均可顯著抑制cleaved caspase-12 的表達(dá)(P＜0.01)。

2.9 白皮杉醇對CCl4致急性肝損傷小鼠肝組織SOD、GSH、MDA 的影響 取左前葉肝組織(約0.5 g),冷生理鹽水沖洗,濾紙吸干,稱定質(zhì)量,剪碎,冰浴勻漿,制成10%組織勻漿,4 000 r/min低溫離心15 min,取上清液待測。按照試劑盒說明書,采用硫代巴比妥酸比色法檢測MDA 含有量,TNB 法檢測GSH 水平,黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性。

圖2 白皮杉醇對CCl4 誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠肝細(xì)胞凋亡的影響（×200，，n=10）Fig.2 Hepatic cells apoptosis of mice with CCl4-induced acute liver injury subjected to piceatannol treatment （×200，，n=10）

為了探討白皮杉醇對ERS 抑制的作用機制,本研究檢測了氧化酶系的相關(guān)酶含有量表達(dá)。由表3 可知,與對照組比較,CCl4模型組小鼠肝組織SOD、GSH 水平明顯降低(P＜0.01),MDA 水平明顯增高(P ＜0.01)；與模型組比較,白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 和水飛薊素組可明顯抑制急性肝損傷小鼠肝組織SOD 的降低和MDA 水平的升高(P＜0.01),10 mg/kg 白皮杉醇組與CCl4模型組相比GSH 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05),20、40 mg/kg 白皮杉醇組與CCl4模型組比較,GSH 水平顯著升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01)。

2.10 白皮杉醇對急性肝損傷小鼠肝組織HO-1 蛋白表達(dá)的影響 為了明確白皮杉醇抗氧化損傷的機制,本研究使用Western blot 檢測了HO-1 蛋白的表達(dá)。結(jié)果如圖6 所示,與對照組比較,CCl4模型組小鼠肝組織中HO-1 蛋白表達(dá)水平顯著降低(P＜0.01)；與模型組比較,白皮杉醇(10、20、40 mg/kg) 與水飛薊素均可顯著抑制HO-1 的表達(dá)(P＜0.01)。

3 討論

CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷首先體現(xiàn)在血清生化指標(biāo)的變化,氧化應(yīng)激時因肝細(xì)胞膜脂質(zhì)化,進(jìn)而通透性增加,導(dǎo)致大量AST、ALT 從肝臟轉(zhuǎn)移入血,故AST、ALT 是反映肝損傷最早、最敏感的指標(biāo),其升高程度與肝損傷程度呈正相關(guān)[13]。本實驗顯示,不同劑量白皮杉醇可明顯抑制CCl4誘導(dǎo)ALT、AST 水平的增高,以及TP、Alb、A/G 比的降低；白皮杉醇保護(hù)組肝細(xì)胞疏松化程度、炎癥細(xì)胞浸潤及脂肪變性情況均有不同程度的緩解,并呈一定的量效關(guān)系,并與血清學(xué)改變結(jié)果相一致,表明該成分可抑制CCl4誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡。

表3 白皮杉醇對CCl4 致急性肝損傷小鼠肝組織SOD、GSH、MDA 的影響（，n=10）Tab.3 Effects of piceatannol on hepatic SOD，GSH and MDA levels of mice with CCl4-induced liver injury（，n=10）

表3 白皮杉醇對CCl4 致急性肝損傷小鼠肝組織SOD、GSH、MDA 的影響（，n=10）Tab.3 Effects of piceatannol on hepatic SOD，GSH and MDA levels of mice with CCl4-induced liver injury（，n=10）

注:與對照組比較,**P＜0.01；與模型組比較,++P＜0.01。

機體內(nèi)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的途徑主要為死亡受體、線粒體、ERS,而CCl4經(jīng)肝細(xì)胞色素P450 酶系代謝的毒性產(chǎn)物具有強氧化性,極易與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜磷脂結(jié)合,導(dǎo)致錯誤折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)聚集,引起ERS,最終誘導(dǎo)肝細(xì)胞大量凋亡,故氧化應(yīng)激與ERS 是CCl4所致肝損傷的中心事件。ERS 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要信號分子為CHOP。CHOP 是ERS 特異的轉(zhuǎn)錄因子,屬于C/EBP 轉(zhuǎn)錄因子家族成員,其編碼的蛋白參與細(xì)胞凋亡過程,在非應(yīng)激狀態(tài)下,表達(dá)水平很低,而在ERS 時則大量表達(dá)[5,14]。本實驗發(fā)現(xiàn),CCl4可誘導(dǎo)肝細(xì)胞CHOP 大量表達(dá),而不同劑量白皮杉醇可顯著抑制CCl4誘導(dǎo)CHOP的表達(dá),提示該成分對CCl4誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的抑制作用與ERS 相關(guān)。為了進(jìn)一步探討白皮杉醇對ERS 的作用機制,本實驗檢測了CHOP 上游調(diào)控因子PERK、ATF4 的表達(dá),發(fā)現(xiàn)ERS 時PERK、ATF6、IRE-1 都能誘 導(dǎo)CHOP 轉(zhuǎn)錄,但PERKATF4 是CHOP 蛋白表達(dá)所必需的,而且是ERS 誘導(dǎo)CHOP 轉(zhuǎn)錄最重要的一條通路,PERK 信號通路的激活在ERS 早期因抑制蛋白質(zhì)合成而發(fā)揮的是細(xì)胞保護(hù)作用,但隨著ERS 時間延長,它通過誘導(dǎo)CHOP 的大量表達(dá)反而促進(jìn)細(xì)胞凋亡[15-16]。有研究表明[17-18],TRB3 是新鑒定的CHOP 靶基因,ERS 可誘導(dǎo)TRB3 的表達(dá),其表達(dá)要晚于CHOP,可能參與了CHOP 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,本實驗顯示,白皮杉醇可顯著抑制CCl4誘導(dǎo)PERK-ATF4、TRB3的表達(dá),初步驗證了該成分可通過PERK-ATF4-CHOP-TRB3 抑制ERS 誘導(dǎo)的肝細(xì)胞的凋亡。

圖4 白皮杉醇對CCl4 致急性肝損傷小鼠肝組織TRB3表達(dá)的影響（，n=10）Fig.4 Effect of piceatannol on expression of TRB3 in mice with CCl4-induced acute liver injury （，n=10）

圖5 白皮杉醇對CCl4 致急性肝損傷小鼠肝組織cleaved caspase-12 蛋白表達(dá)的影響（，n=10）Fig.5 Effect of piceatannol on expression of cleaved caspase-12 in mice with CCl4-induced acute liver injury （，n=10）

圖6 白皮杉醇對CCl4 致急性肝損傷小鼠肝組織HO-1 表達(dá)的影響（，n=10）Fig.6 Effect of piceatannol on expression of hepatic HO-1 of mice with CCl4-induced acute liver injury （，n=10）

同時,本實驗直接檢測了caspase-12 表達(dá),其定位于ER 外膜,是ERS 介導(dǎo)的凋亡特有的關(guān)鍵分子,在死亡受體或線粒體凋亡途徑中不被活化,而ERS 可引起其激活,后者切割并激活caspase-9,進(jìn)而激活caspase 級聯(lián)途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[19]。結(jié)果,白皮杉醇可以顯著抑制CCl4誘導(dǎo)caspase-12的表達(dá),進(jìn)一步驗證了該成分保護(hù)CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷與其抑制ERS 有關(guān)。

在病理情況下,體內(nèi)氧自由基產(chǎn)生過多或清除不足,過度激活的氧自由基可引起肝細(xì)胞膜、線粒體膜、溶酶體膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化物及其降解產(chǎn)物(MDA),進(jìn)一步加重細(xì)胞膜損傷,最終引起肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能障礙[20-21],血清SOD 活性和GSH 含有量是肝臟中最有效的抗氧化劑,可提高肝臟解毒能力、消除自由基、保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整[22-23]。為了探討白皮杉醇抑制ERS 的作用機制,本研究檢測了肝組織相關(guān)抗氧化酶及脂質(zhì)化合物的水平,發(fā)現(xiàn)該成分可明顯升高GSH、SOD 水平,同時降低MDA 水平,減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)。

SOD、GSH、MDA 水平主要間接反映了白皮杉醇對機體抗氧化能力的改變,為了進(jìn)一步明確該成分的抗氧化作用機制,本實驗直接檢測了肝組織HO-1 的表達(dá)。結(jié)果顯示,白皮杉醇可顯著改善CCl4對HO-1 的下調(diào)作用,可能是通過一種新的蛋白激酶C 和酪氨酸激酶旁路來上調(diào)抗氧化酶血紅素加氧酶(HO-1) 的表達(dá),亦有相關(guān)報道通過激活NRF2 進(jìn)而誘導(dǎo)HO-1 的表達(dá)[8],尚需進(jìn)一步實驗來證實。

綜上所述,白皮杉醇對CCl4誘導(dǎo)急性肝損傷具有一定的保護(hù)作用,其機制可能與該成分上調(diào)HO-1、抑制ERS 介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡有關(guān)。鑒于白皮杉醇相比其他均二苯乙烯化合物有著更優(yōu)的藥理作用,而且基于HO-1 靶點的相關(guān)藥物被越來越多地應(yīng)用于臨床相關(guān)疾病的診療中,本實驗可為該成分在化學(xué)性肝損傷中的應(yīng)用提供了一定的依據(jù),而且基于其對HO-1 的強效作用,也能為考察HO-1是否是化學(xué)性肝損傷的關(guān)鍵干預(yù)靶點提供依據(jù)。