感染性疾病甲肝、戊肝的免疫學(xué)檢驗(yàn)效果

陳桂林

（解放軍92493 部隊(duì)醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 葫蘆島 125000）

0 引言

甲肝和戊肝等屬于急慢性肝病，其疾病類型在當(dāng)前世界臨床發(fā)展中都是較為普遍的，也是對(duì)人體健康具有嚴(yán)重威脅的疾病種類之一，對(duì)病毒感染性肝病進(jìn)行快速，準(zhǔn)確的診斷，有利于對(duì)病癥的治療。根據(jù)臨床相關(guān)研究數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，甲肝和戊肝等是具有感染性的疾病，其工作在當(dāng)前已經(jīng)受到多方人士的廣泛關(guān)注，需要給予患者準(zhǔn)確的診斷，對(duì)患者的病情發(fā)展進(jìn)行了解，進(jìn)而保證其所采取的措施足夠有效[1]。本研究將以此進(jìn)行入手，在對(duì)甲肝和戊肝感染性疾病患者進(jìn)行診斷的過(guò)程中，將不同的診斷方法進(jìn)行應(yīng)用，探究診斷率更高的診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料。以2018年5月至2019年5月期間在我院接受免疫學(xué)檢驗(yàn)的感染性疾病甲肝和戊肝患者，共有患者80例，將其隨機(jī)分為兩組，分別為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，其中給予酶聯(lián)免疫法的為對(duì)照組，給予化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)的為對(duì)照組，每組患者人數(shù)均為40人。兩組患者均病理診斷為甲肝和戊肝患者，其中，實(shí)驗(yàn)組患者均為戊肝患者，對(duì)照組患者均為甲肝患者。實(shí)驗(yàn)組的40例患者中，年齡25 -77歲，平均（45.44±3.26）歲。對(duì)照組的40例患者中，年齡24-79歲，平均（44.96±3.22）歲，兩組患者資料不存在顯著差異，可進(jìn)行組間比較。

1.2 方法。兩種標(biāo)本患者均給予酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢驗(yàn)，并對(duì)其檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性進(jìn)行比較。

就酶聯(lián)免疫檢測(cè)法來(lái)說(shuō)，在將其進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，需要從實(shí)際說(shuō)明書(shū)進(jìn)行入手，嚴(yán)格遵循其相關(guān)規(guī)定，將雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法和間接酶聯(lián)免疫法進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)過(guò)程。實(shí)際操作過(guò)程為：將相關(guān)試劑和微孔反應(yīng)條放置在室內(nèi)溫度環(huán)境中30 min左右，在微孔反應(yīng)條中放入等待檢測(cè)的血清樣本，繼而將封片進(jìn)行應(yīng)用，給予其封鎖處理，并在此基礎(chǔ)上，將其放置在溫度為37℃的水浴箱中，處理60 min，然后將微孔反應(yīng)條中的液體去除，進(jìn)行反復(fù)洗滌，隨后在其中加入試劑，進(jìn)行封鎖，再次放入到水浴箱中進(jìn)行處理30 min，在取出后給予其中終止液處理[2]。在獲得其血清值大于等于臨界值時(shí)，則表明其檢測(cè)為陽(yáng)性。

磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法則將化學(xué)發(fā)光原理進(jìn)行應(yīng)用，對(duì)血清中的戊型肝炎病毒進(jìn)行測(cè)定，確定其特異性IgM抗體，將捕獲法原理進(jìn)行應(yīng)用，促進(jìn)人IgM抗體包被磁微粒，其中所具有辣根過(guò)氧化酶就會(huì)產(chǎn)生標(biāo)記效果，主要是對(duì)hev抗原制備酶結(jié)合物進(jìn)行標(biāo)記，從而促進(jìn)免疫反應(yīng)的生成，在這種情況下，就會(huì)促進(jìn)固相二抗-抗體-酶抗原復(fù)合物的生成，就這種復(fù)合物來(lái)說(shuō)，其主要是促進(jìn)發(fā)光底物發(fā)出光子，具有催化作用，而且其發(fā)光的光強(qiáng)度會(huì)與HEV-IgM抗體中所具有的含量表現(xiàn)出正比例關(guān)系。就甲型肝炎化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)來(lái)說(shuō)，在具體操作過(guò)程中，需要對(duì)試劑盒進(jìn)行選擇，分別為M，R1，R2，在對(duì)其展開(kāi)分析工作的過(guò)程中，需要將時(shí)間控制在18 min，具體的操作步驟可以從分為兩步。第一步，對(duì)抗Fdy試劑進(jìn)行預(yù)處理，將其中的10μL促進(jìn)自動(dòng)生成效果，將其稀釋為400倍的樣本，并采用釕復(fù)合物進(jìn)行標(biāo)記，促進(jìn)抗甲型肝炎病毒單克隆抗體的出現(xiàn)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)特異性IgG進(jìn)行阻斷[3]。第二步，需要在其中加入生物素化特異性IgM單克隆抗體，其中的甲型肝炎病毒抗原便會(huì)在此環(huán)境下，與鏈霉親和素包被微粒進(jìn)行結(jié)合，這時(shí)的樣本中抗甲型肝炎病毒IgM和甲型肝炎病毒抗原會(huì)被釕標(biāo)記，促進(jìn)抗甲型肝炎病毒抗體，促進(jìn)夾心復(fù)合物生成，同時(shí)，在此基礎(chǔ)上，使其經(jīng)過(guò)生物素和鏈霉的親和素進(jìn)行反應(yīng)，促進(jìn)于固相的生成，在接入電極和電壓后，就會(huì)促進(jìn)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的生成，在經(jīng)過(guò)光電倍增管實(shí)現(xiàn)測(cè)定即可。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。本次統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS 19.2.0軟件，計(jì)量資料以（±s）表示，采取t檢驗(yàn)法。P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的檢測(cè)結(jié)果。對(duì)兩組患者的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，得出化學(xué)發(fā)光法的檢測(cè)準(zhǔn)確率更高，而且其組間差異顯著，表示為P＜0.05，詳見(jiàn)表1。

表1 檢測(cè)結(jié)果情況比較[n(%)]

2.2 兩組患者的檢驗(yàn)靈敏度和特異性。實(shí)驗(yàn)患者和對(duì)照組患者的診斷靈敏度，特異度對(duì)比差異均不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表現(xiàn)為P＞0.05，其差異較小，詳見(jiàn)表2。

表2 兩組患者檢驗(yàn)靈敏度和特異性情況比較[n(%)]

3 討論

甲肝和戊肝在臨床中較為常見(jiàn)，其通常是由甲肝和戊肝病毒所導(dǎo)致的，對(duì)應(yīng)的傳染性相對(duì)較強(qiáng)，甲肝和戊肝病毒會(huì)在人的身體內(nèi)進(jìn)行長(zhǎng)期潛伏，很多攜帶相關(guān)病毒患者會(huì)因?yàn)槠潴w內(nèi)甲肝和戊肝病毒被激活而導(dǎo)致甲肝和戊肝問(wèn)題的發(fā)生，甚至?xí)?dǎo)致患者出現(xiàn)肝硬化，肝癌和肝衰竭等問(wèn)題的發(fā)生，對(duì)患者的生命健康造成嚴(yán)重威脅。甲肝和戊肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)在臨床是對(duì)甲肝和戊肝進(jìn)行診斷的主要手段方法，臨床中的免疫學(xué)檢驗(yàn)主要是指將免疫學(xué)抗原和抗體發(fā)生反應(yīng)的原理進(jìn)行應(yīng)用，并在此基礎(chǔ)上，促進(jìn)病原體檢驗(yàn)，是一種有效的檢驗(yàn)技術(shù)，這種技術(shù)是在近些年站起來(lái)的，在將其進(jìn)行應(yīng)用時(shí)，需要在抗原和抗體發(fā)生反應(yīng)的基礎(chǔ)上，將放射性同位素，熒光素和激素，藥物等存在特異性的物質(zhì)進(jìn)行應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。在對(duì)人體當(dāng)中的各種病理和生物方面的免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，將免疫學(xué)檢驗(yàn)方法進(jìn)行應(yīng)用，其意義顯著。在我國(guó)生物學(xué)技術(shù)得以不斷發(fā)展的社會(huì)背景下，化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)得以廣泛應(yīng)用，其對(duì)應(yīng)的檢驗(yàn)方法不同，所對(duì)應(yīng)的檢驗(yàn)結(jié)果和準(zhǔn)確率也存在一定的差異[4]。其中酶聯(lián)免疫法是將酶進(jìn)行應(yīng)用，對(duì)指示物進(jìn)行標(biāo)志，其可被當(dāng)做一種固相吸附測(cè)定方法，但是前提是抗原抗體免疫反應(yīng)。在應(yīng)用過(guò)程中需要將待測(cè)標(biāo)本和酶所標(biāo)記的抗體抗原根據(jù)相關(guān)步驟，注意加入到反應(yīng)系統(tǒng)中，從而使其在固相載體上進(jìn)行結(jié)合，在其發(fā)生反應(yīng)后，得到固相化的抗原抗體-沒(méi)復(fù)合物，在將其進(jìn)行洗滌后，可根據(jù)一定的比例對(duì)標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)的量和固相載體上的酶量進(jìn)行確定，添加酶反應(yīng)底物后，借助固相載體進(jìn)行酶催化，使其底物形成一種有色產(chǎn)物，而這種產(chǎn)物的量則與標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)的量相關(guān)，因此可根據(jù)顏色的深度對(duì)其的進(jìn)行測(cè)量分析。對(duì)兩組患者的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，化學(xué)發(fā)光法的檢測(cè)準(zhǔn)確率更高，而且其組間差異顯著，表示為P＜0.05，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組患者和對(duì)照組患者的診斷靈敏度，特異度對(duì)比差異均不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表現(xiàn)為P＞0.05，其差異較小。與此同時(shí)，有關(guān)學(xué)者曾認(rèn)為對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量造成影響的除了檢驗(yàn)方法，還表現(xiàn)在多個(gè)方面，像人員操作等因素，需要給予操作人員有效的培訓(xùn)管理，并將檢驗(yàn)流程進(jìn)行完善和規(guī)范，從而提高檢驗(yàn)質(zhì)量。也就是說(shuō)，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響的因素確實(shí)是多方面的，都會(huì)造成一定程度的影響，需要在接下來(lái)的工作中，對(duì)每個(gè)檢驗(yàn)環(huán)節(jié)都加強(qiáng)管理，并定期開(kāi)展人員技能考核工作，從考核結(jié)果和實(shí)際的工作情況進(jìn)行出發(fā)，對(duì)人員進(jìn)行篩選，只有合格者才能上崗工作[5]。并對(duì)標(biāo)本的存放時(shí)間和溫度進(jìn)行嚴(yán)格控制，能夠從患者的年齡，病史和所在就診科室進(jìn)行綜合出發(fā)，進(jìn)而對(duì)患者進(jìn)行詳細(xì)的標(biāo)注，促進(jìn)檢驗(yàn)質(zhì)量不斷規(guī)范和提高，以便于為臨床提供更多合格的檢驗(yàn)結(jié)果，為臨床診斷和治療工作奠定基礎(chǔ)，提供基礎(chǔ)依據(jù)，減少患者安全問(wèn)題的出現(xiàn)[6]。

綜上所述，給予感染性疾病甲肝，戊肝展開(kāi)免疫學(xué)檢查工作，需要將發(fā)光化學(xué)法進(jìn)行應(yīng)用，其所對(duì)應(yīng)的檢驗(yàn)效果更為顯著，能夠?qū)⑴R床檢驗(yàn)準(zhǔn)確性進(jìn)行提高，值得臨床進(jìn)行積極推廣并使用。