金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響

◆作者：張冰坤 沈永強(qiáng),2 盧壽運(yùn).2 安芝穎

在現(xiàn)代規(guī)模養(yǎng)殖生產(chǎn)中，人們普遍使用抗生素、激素、化學(xué)合成藥物等，以達(dá)到防治或者減輕腹瀉等疾病促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的目的。但是，長(zhǎng)期使用抗生素、激素、化學(xué)合成藥物等不但會(huì)影響肉蛋產(chǎn)品質(zhì)量，還會(huì)造成畜禽產(chǎn)品的藥物殘留，危害人類健康。隨著人們生活水平的改善和提高，消費(fèi)者對(duì)綠色、營(yíng)養(yǎng)的畜禽產(chǎn)品日益關(guān)注和渴望。在各方的推動(dòng)下，行業(yè)進(jìn)入無抗飼料新時(shí)代，無抗養(yǎng)殖在走來，經(jīng)政策推動(dòng)，化藥飼料添加劑已退出了飼料市場(chǎng)。這是發(fā)展綠色、健康畜牧業(yè)的使然，也符合人類健康食品的理念。

近年來，隨著中國(guó)養(yǎng)殖業(yè)的不斷快速發(fā)展，長(zhǎng)期高強(qiáng)度提高生長(zhǎng)速度的選育方式及集約化的養(yǎng)殖模式，造成家禽免疫功能與生長(zhǎng)性能下降、抗病力減弱、易應(yīng)激等一系列問題。對(duì)于長(zhǎng)期習(xí)慣性依賴抗生素、化藥添加劑的企業(yè)來說，“無抗養(yǎng)殖”無疑就是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，同時(shí)對(duì)于動(dòng)保企業(yè)來說也是一個(gè)亟待解決的課題，都急需尋找一個(gè)最優(yōu)“替抗”技術(shù)和產(chǎn)品，而在酶制劑、酸化劑、微生態(tài)制劑、肽制劑、精油、提取物和中草藥等眾多選項(xiàng)中，中草藥無疑是優(yōu)良的選擇。合理應(yīng)用中草藥綠色飼料添加劑，具有抗菌、抗應(yīng)激、增強(qiáng)免疫力、改善肉蛋品質(zhì)、有效提高生產(chǎn)性能、無殘留、基本無抗藥性、無毒副作用等優(yōu)點(diǎn)，是替代現(xiàn)代化學(xué)藥物的綠色功能飼料添加劑。

高山中藥研究院對(duì)高山集團(tuán)生產(chǎn)的“金蕎麥粗提物”產(chǎn)品，在已被廣泛用于促進(jìn)家禽生長(zhǎng)健康、提高機(jī)體免疫功能、抗應(yīng)激、改善糞便異常、提高生產(chǎn)潛能和改善肉蛋品質(zhì)等功能基礎(chǔ)上，進(jìn)一步對(duì)其提高肉蛋雞生產(chǎn)性能、生長(zhǎng)養(yǎng)分的利用率和提高免疫功能等方面進(jìn)行深入探討。供大家參考，以引導(dǎo)推廣應(yīng)用在更廣泛的養(yǎng)殖生產(chǎn)中，為推動(dòng)綠色養(yǎng)殖提供解決方案。

1 金蕎麥的功能與營(yíng)養(yǎng)成分

“味微辛、澀，性涼。歸肺經(jīng)。具有清熱解毒，排膿祛瘀的功能。用于肺癰吐膿，肺熱喘咳，乳蛾腫痛”，這是傳統(tǒng)中醫(yī)對(duì)金蕎麥的功能性描述。但隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)金蕎麥活性成分的深入研究，其活性成分藥理作用已經(jīng)涉及免疫作用（金蕎麥乙醇提取物）、抗氧化（黃酮類化合物：表兒茶素等）、抗炎（雙聚黃烷醇，根莖含量約為4%至5%）、抗菌（酚酸類及部分黃酮類化合物）、解熱、降脂、抗突變、抗癌等諸多方面，超越了金蕎麥的傳統(tǒng)功效范圍。同時(shí)研究還表明，金蕎麥中除含有以上的活性成分外，還含有高達(dá)1.29%鈣，0.39%磷，以及其它動(dòng)物生命活動(dòng)必需的Cu、Fe、Zn、Se等多種微量元素及VB1、VB2、VE、VA、VD6等多種維生素，同時(shí)還含有17種氨基酸，其中谷氨酸含量最高，其次為天門冬氨酸、亮氨酸和賴氨酸。亮氨酸等8種必需氨基酸含量為9.74%，天門冬氨酸等9種非必需氨基酸含量10.40%，氨基酸總量高達(dá)20.14%。由此可見金蕎麥?zhǔn)且环N同時(shí)具備著豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和藥理活性成分的藥食同源藥材。這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及活性成分都能很好地改善機(jī)體營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)抗病能力。阮涌等（2015）在三穗麻鴨日糧中添加一定量(1%、2%、3%)的金蕎麥，能促進(jìn)禽流感疫苗對(duì)鴨群的體液免疫和細(xì)胞免疫水平。鄧蓉（2012年）等用野生金蕎麥代替日糧中的部分精料飼喂豬，可提高豬屠宰率、瘦肉率、熟肉率，降低6至7胸椎間膘厚（見表1），并使胴體長(zhǎng)增加，降低滴水損失，增加肌內(nèi)脂肪含量。系水力、嫩度，并能提高豬肉中的粗蛋白、灰分、磷的含量，從而大大提高肉品風(fēng)味和品質(zhì)。張潔等（2014）利用金蕎麥替代部分精料飼喂育肥豬，在育肥前期（30～60kg），可減少12%的精料使用量；在育肥后期（60～90kg），可減少16%的精料使用量，因此可節(jié)省精料，節(jié)約成本，每增重1kg的飼料成本可降低0.61元，每頭豬1天可增加收益0.31元。用金蕎麥為主的中藥飼料添加劑飼喂仔豬，可有效降低仔豬直腸糞便中的大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量，從而降低仔豬腹瀉率，增加仔豬腸道健康。這些，都在我們的生產(chǎn)應(yīng)用中都得到驗(yàn)證。

雖然金蕎麥有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和藥理活性成分，但如果只是粗加工打粉添加至飼料中，金蕎麥的自身優(yōu)點(diǎn)還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能發(fā)揮出來，一方面金蕎麥自身的纖維一定程度影響了機(jī)體的吸收，另一方面，粗粉的有效濃度相對(duì)較低，需添加較大的比例，規(guī)模養(yǎng)殖使用不方便。這就需要對(duì)金蕎麥進(jìn)一步加工處理，使有效成分富集。然而，傳統(tǒng)的提取加工對(duì)金蕎麥的有效成分破壞極大，特別是易氧化活性成分；同時(shí)有效成分豐富，其中部分成分又不易提取。為此，高山中藥研究院采用先進(jìn)的瞬時(shí)超微破壁技術(shù)，以特定的溫度、壓力、時(shí)間和濕度等作用下，能最低限度的減少有效成分的破壞，同時(shí)，作用直抵至細(xì)胞，破壞細(xì)胞的纖維物理支撐保護(hù)，最大限度釋放有效成分。最后將提取液進(jìn)行低溫減壓濃縮后，再與一定比例的金蕎麥超微粉拌合，強(qiáng)速冷風(fēng)吹干制成粗提物。這樣的金蕎麥粗提物具有有效成分提取率高，生物吸收度好，藥效更強(qiáng)，效果更佳的特點(diǎn)。其在生產(chǎn)過程中以“難提取，易破壞”的有效成分——“表兒茶素”為質(zhì)量把控目標(biāo)，產(chǎn)品質(zhì)量可監(jiān)測(cè)，更可控。下面以100kg金蕎麥按常規(guī)提取生產(chǎn)工藝與爆破兩種不同工藝生產(chǎn)干膏的對(duì)比，結(jié)果是超微破壁工藝表兒茶素含量達(dá)到0.040%，干膏重量達(dá)到35.1kg；而常規(guī)工藝表兒茶素只有0.032%，干膏重量25.0kg。

2 金蕎麥粗提物的生理作用及生產(chǎn)應(yīng)用

金蕎麥粗提物主要依靠豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和已知的藥物活性成分來改善動(dòng)物機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況，增加機(jī)體的抗病能力。目前，金蕎麥提取物在各大養(yǎng)殖企業(yè)主要用于促進(jìn)家禽對(duì)疫苗的體液免疫和細(xì)胞免疫的應(yīng)答水平，增加家禽的腸道健康，有效提高家禽生產(chǎn)性能，并能提高肉、蛋中的粗蛋白、灰分、磷的含量，從而大大提高肉、蛋品的品質(zhì)和風(fēng)味。

為了確證金蕎麥粗提物作為飼料添加劑在改善家禽生產(chǎn)性能、養(yǎng)分利用率、抗氧化及增強(qiáng)免疫功能等方面的作用，并獲取相關(guān)數(shù)據(jù)指標(biāo)，本研究以三黃母仔雞作為試驗(yàn)對(duì)象，在日糧中添加金蕎麥粗提物進(jìn)行飼喂，觀察其對(duì)三黃母仔雞改善生產(chǎn)性能、養(yǎng)分利用率和免疫功能的影響。

表1 豬的屠宰性能指標(biāo)比較

2.1 材料與方法

2.1.1 材料

天金蕎麥粗提物，由高山集團(tuán)旗下信宜市金方子生物科技有限公司生產(chǎn)提供。

2.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取體重相近的1日齡三黃母仔雞3000只，在信宜市東東養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行試驗(yàn)。

將上述母仔雞隨機(jī)分為5組，每組600只。Ⅰ組為空白對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，不添加任何抗生素；Ⅱ組在基礎(chǔ)日糧中添加吉他霉素5mg／kg；Ⅲ、IV、V組在基礎(chǔ)日糧中分別添加低、中、高劑量分別為0.1%、0.2%和0.4%金蕎麥粗提物。試驗(yàn)期25d。

2.1.3 試驗(yàn)飼養(yǎng)管理

基礎(chǔ)日糧為不添加任何抗生素的玉米-豆粕型日糧，將母仔雞飼養(yǎng)于同一雞舍內(nèi)，每組分隔，24h光照，保持良好通風(fēng)，自由采食與飲水，日常管理與衛(wèi)生防疫按常規(guī)進(jìn)行，每天3次定時(shí)飼喂試驗(yàn)日糧，試驗(yàn)期間保證日糧不受潮、不結(jié)塊、無霉變、不添加任何其他的抗生素和促生長(zhǎng)劑。詳細(xì)記錄試驗(yàn)期間試驗(yàn)雞的死亡、淘汰和發(fā)病情況。

2.1.4 樣品采集

于試驗(yàn)第25天，將每組雞稱總重，求出每組雞平均體重，再分別從每組中隨機(jī)挑選20只接近平均體重的雞，空腹稱重，翅靜脈采血3mL，4℃、3000r/min離心15min，制備血清，備用；采血后放血后屠宰，取脾臟、胸腺和法氏囊，剔除脂肪組織并稱重。截取空腸，用濾紙輕輕擦拭黏膜表面的食糜內(nèi)容物，用滅菌的載玻片刮取黏膜液于滅菌的離心管中待測(cè)。

2.1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

2.1.5.1 生長(zhǎng)性能

于試驗(yàn)開始時(shí)和試驗(yàn)第25天空腹測(cè)定各組的總體重，記錄每組總耗料量，計(jì)算試驗(yàn)期間每組的平均日增重、平均日采食量、死淘率。

2.1.5.2 免疫器官指數(shù)

取脾臟、胸腺和法氏囊，剔除脂肪組織并稱重，測(cè)定各免疫器官指數(shù)。免疫器官指數(shù)（g/kg）＝免疫器官重（g）／活體重（kg）。

2.1.5.3 免疫因子

腸道黏膜分泌型免疫球蛋白A（sIgA）采用比色法檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司）。血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）含量均采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定，所需酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒均購自北京華英生物技術(shù)研究所，具體檢測(cè)步驟參照試劑盒說明書進(jìn)行。

2.1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel2019進(jìn)行初步處理后，采用SPSS20軟件進(jìn)行單因素方差（One-WayANOVA）分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果

3.1 金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，在1-25d時(shí)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組母仔雞死淘率、平均日采食量、料重比、平均日增重差異不顯著（P＞0.05）。IV、V組料重比顯著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05），IV、V組平均日增重顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05）。

表2 “金蕎麥粗提物”對(duì)三黃母仔雞生長(zhǎng)性能的影響

3.2 金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞免疫器官指數(shù)的影響

由表3可知，25d時(shí)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組之間胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)均差異不顯著（P＞0.05）；IV、V組胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05）；IV、V組脾臟指數(shù)均顯著高于Ⅰ、Ⅱ組（P＜0.05）。

3.3 金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞腸道主要免疫因子分泌型免疫球蛋白sIgA的影響

由表4可知，25d時(shí)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組之間母仔雞腸道分泌免疫球蛋白sIgA無顯著差異（P＞0.05）；IV、V組母仔雞腸道分泌免疫球蛋白sIgA顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05）。

表3 “金蕎麥粗提物”對(duì)三黃母仔雞免疫器官指數(shù)的影響

表4 金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞腸道主要免疫因子的影響

3.4 “金蕎麥粗提物”對(duì)三黃母仔雞血清免疫球蛋白的影響

由表5可知，25d時(shí)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV、V五組間的母仔雞血清中IgM差異均不顯著（P＞0.05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中母仔雞血清IgG、IgA之間差異不顯著（P＞0.05）；IV、V組 中 母 仔 雞 血 清IgG、IgA與Ⅰ、Ⅱ組之間有顯著差異（P＜0.05）。

4 討論

4.1 金蕎麥粗提物對(duì)母仔雞生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，Ⅰ（對(duì)照組）、Ⅱ（抗生素組）、Ⅲ（低劑量試驗(yàn)組）、IV(中劑量試驗(yàn)組)、V（試高劑量驗(yàn)組）五組間三黃母仔雞的死淘率、平均日采食量均無顯著差異，但試驗(yàn)組0.2%中劑量組、0.4%高劑量組顯著降低了母仔雞的料重比、提高了平均日增重，其原因可能是金蕎麥粗提物中含豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)含有大量的黃酮類物質(zhì)，具有較強(qiáng)的抑菌作用，可以抑制母仔雞腸道有害微生物的產(chǎn)生，改善其腸道微生態(tài)環(huán)境。增加機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用轉(zhuǎn)化，以上結(jié)果說明金蕎麥粗提物對(duì)三黃母仔雞的生長(zhǎng)性能有顯著的影響，同時(shí)可降低飼養(yǎng)成本。

4.2 金蕎麥粗提物對(duì)母仔雞免疫功能的影響

4.2.1 免疫器官指數(shù)

免疫器官是實(shí)現(xiàn)免疫功能的器官和組織，胸腺、脾臟、法氏囊作為禽類重要的免疫器官，其重量指數(shù)作為機(jī)體免疫功能的高低的重要指標(biāo)。研究表明，金蕎麥可提高動(dòng)物免疫功能。王航等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，金蕎麥超微粉可提高小鼠脾臟指數(shù)，促進(jìn)免疫器官發(fā)育。本研究結(jié)果表明，日糧中添加中、高劑量的“金蕎麥粗提物”可顯著提高三黃母仔雞25日齡胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)，促進(jìn)三黃母仔雞的免疫器官發(fā)育。原因可能是①金蕎麥粗提物作用于宿主細(xì)胞，刺激動(dòng)物免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育，激活機(jī)體免疫功能，進(jìn)而促進(jìn)母仔雞免疫器官發(fā)育；②金蕎麥粗提物中含有大量的抗氧化酚類物質(zhì)，可提高機(jī)體清除自由基的能力，從而起到保護(hù)機(jī)體組織和延緩器官衰老的作用，進(jìn)而提高了母仔雞的免疫器官指數(shù)。

4.2.2 腸道黏膜免疫因子

腸道黏膜免疫在對(duì)抗有害日糧抗原和腸道病原微生物方面發(fā)揮著重要的作用，其中腸道相關(guān)淋巴組織是發(fā)揮免疫功能的主要部分，可防止病原體通過黏膜免疫系統(tǒng)侵害機(jī)體。機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)時(shí)，激活的輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）從而進(jìn)行一系列的免疫反應(yīng)。sIgA是腸道黏膜表面分泌的主要免疫球蛋白，是黏膜免疫的核心，其分泌物可降低對(duì)蛋白酶的敏感性，保證黏膜免疫清除功能的充分發(fā)揮，從而阻止外源蛋白和病原微生物的入侵。據(jù)報(bào)道，金蕎麥可促進(jìn)禽流感疫苗感染鴨群血清IFN-γ和IL-2水平，增強(qiáng)其體液免疫和細(xì)胞免疫水平；金蕎麥提取物可提高慢性阻塞性肺疾?。–OPD）大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8水平，下調(diào)氣管組織中核因子-κB（NF-κB）的表達(dá)，抑制COPD大鼠炎癥反應(yīng)；大量研究表明，中草藥中含有多糖、甙類、生物堿、揮發(fā)性成分和有機(jī)酸等有效成分，可激活腸道黏膜免疫細(xì)胞，誘生細(xì)胞因子，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的黏膜免疫功能。

表5 “金蕎麥粗提物”對(duì)三黃母仔雞血清免疫球蛋白的影響

本試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，在三黃母仔雞日糧中添加中、高劑量的金蕎麥粗提物可顯著提高腸道黏膜中sIgA含量，可能原因是：①金蕎麥粗提物中含有大量的黃酮類物質(zhì)、酚類等有效成分，這些物質(zhì)可激活腸道黏膜免疫細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的黏膜免疫功能；②金蕎麥粗提物中含有大量的抗菌類物質(zhì)，可以抑制母仔雞腸道有害微生物的產(chǎn)生，改善其腸道微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)腸道免疫因子的分泌，進(jìn)而增強(qiáng)腸道免疫功能。

4.2.3 血清免疫球蛋白

免疫球蛋白具有抗體活性，與動(dòng)物機(jī)體的抗體相關(guān)，在體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。家禽體內(nèi)的免疫球蛋白主要是IgA、IgG、IgM。IgA存在于血清、膽汁和其他分泌液中。主動(dòng)免疫后，機(jī)體主要產(chǎn)生單體形式的IgG，在體液免疫中尤為重要。IgM是血清中分子質(zhì)量最大的免疫球蛋白，在機(jī)體染病初期免疫防護(hù)中占重要地位。因此，血清中免疫球蛋白含量的變化與動(dòng)物的免疫功能直接相關(guān)。本試驗(yàn)中，在母仔雞日糧中添加金蕎麥粗提物對(duì)IgM含量影響不顯著，其原因可能系Ⅲ組（金蕎麥粗提物組）提高了機(jī)體免疫，雞只感染疾病少，從而對(duì)在感染初期顯著升高的IgM影響不大。而Ⅰ（對(duì)照組）雞只之間的IgM含量差異大（精神差的含量高），從而拉高了整組的IgM含量水平。但該試驗(yàn)中金蕎麥粗提物顯著提高了母仔雞血清IgA、IgG含量，其可能原因是金蕎麥粗提物中含有大量的氨基酸（氨基酸總量可達(dá)32.2%），為淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)生免疫球蛋白提供更平衡的氨基酸組成，促進(jìn)免疫球蛋白的合成，從而提高機(jī)體的免疫功能。

5 結(jié)論

通過已知金蕎麥化學(xué)成分以及生理作用的研究，其中主要活性成分為黃酮類化合物，并且金蕎麥在抗氧化、抗癌、抗菌等方面都有很好的作用。同時(shí)通過已知金蕎麥營(yíng)養(yǎng)成分分析發(fā)現(xiàn)，金蕎麥?zhǔn)且环N蛋白質(zhì)、微量元素含量較高、氨基酸種類豐富的優(yōu)質(zhì)中草藥資源。