超高效液相色譜法在藥物檢驗分析中的應(yīng)用分析

薛祎璐，聞娣娣，劉守彬，吳艷波，樂昭

（正大天晴藥業(yè)集團股份有限公司，江蘇 南京 210023）

0 引言

在化學當中對混合物進行分離的方法有許多種，而在上面的文章當中我們提到過的超高效液相色譜法是一種極為重要的分離技術(shù)。相比起其他對混合物進行分離的方法而言，該種方法不僅僅可以更快、更簡便的對混合物進行分離，而且該種技術(shù)對于藥物的敏感性更高。這也就意味著該種技術(shù)可以對多種藥物進行檢測，而且由于這種方式的簡便性，在最近幾年隨著計算機的發(fā)展，這種對混合物進行分離和檢測的方法逐漸的實現(xiàn)了自動化，可以極為簡便而高效的對混合物進行分離和檢測[1]。在下面的文章當中將簡要地談一談超高效液相色譜法對混合物進行分離的原理和本質(zhì)。

1 技術(shù)的原理和本質(zhì)

超高效液相色譜法其實是從高效液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。所以，要想了解超高效液相色譜法的基本原理和本質(zhì)，需要先去了解什么是高效液相色譜。高效液相色譜法其實是屬于色譜法的一個分支。該種對物質(zhì)進行分離的方法運用的原理主要是依靠液體極性的不同。在該種方法里面是以液體為流動相的，然后通過高壓輸液系統(tǒng)，一些混合溶劑融入到色譜柱當中。需要注意的是在將混合物泵路到色譜柱之前，需要在色譜柱內(nèi)部裝入固定相。如果沒有提前在色譜柱當中裝入固定相，那么在后續(xù)就不能對混合物進行有效的分離。而超高效液相色譜法就是在這種高效液相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。與高效液相色譜法不同的是超高效，液相色譜分離法利用了一些全新的技術(shù)，例如增加小顆粒填料等等，通過這些方式或全新的技術(shù)可以提高分離方法的靈敏度。同時超高效液相色譜法還利用了凡德米特方程。在我們利用小顆粒填料對高效液相色譜法進行改進的時候，我們可以知道如果小顆粒填料的直徑越小，那么在利用這種技術(shù)之后對混合物進行分離之后，可以得到具有更高清晰度的色譜柱。同時在固定下當中的顆粒的直徑還會對色譜柱的流速造成影響，在色譜柱當中，如果我們使用的粒徑越大，那么在色譜柱進行流動的時候，色譜柱的最高柱效點會下流速最低的地方移動。同時，微粒的直徑還會對色譜柱的寬度范圍造成影響。如果微粒的直徑越小，那么色譜柱當?shù)膶挾确秶驮綇V。而隨著色譜柱當中寬度范圍越來越大，相應(yīng)的線速度范圍也會變大。所以在實際的應(yīng)用過程當中，如果我們想要在檢測之后得到更為清晰的色譜柱，我們就需要盡量的降低顆粒的直徑。通過相關(guān)的調(diào)查研究，我們發(fā)現(xiàn)相比起其他的微粒直徑來說，當微粒的粒徑為2 um 的時候，對混合物進行檢測之后得到的色譜柱是最為清晰的。

2 超高效液相色譜法的優(yōu)點和缺點

2.1 優(yōu)點。相比起傳統(tǒng)的分離方法來說，超高效液相色譜法可以更快的將混合物進行分離。而且在對混合物進行檢測的過程當中，可以進行更快的反應(yīng)，也就是說這種方法具有高效性。另外，利用這種方法在對混合物進行分離的過程當中，可以將混合物分離的更為徹底，得到更高的分離度。我們都知道再利用超高效液相色譜法對混合物進行分離的過程當中，如果微粒的粒徑越小，那么就能夠?qū)⒒旌衔锓蛛x的更加的徹底。通過大量的實驗數(shù)據(jù)表明，當顆粒的粒徑處于2 um 的時候，我們對混合物進行分離之后，可以得到最為清晰的色譜柱。而當顆粒的粒徑降低到1.7 um 的時候，超高效液相色譜法的優(yōu)勢可以得到最好的發(fā)揮。通過對比，我們發(fā)現(xiàn)相比起超高效液相色譜法顆粒為5 um 的時候，1.7 um 的顆?？梢约臃至Χ忍岣呷兑陨?。另外在分離速度上也更為的快速，也能夠達到三倍以上。在過去我們對某些樣品進行檢測的過程當中，如果需要對某些成分進行分離，常是利用某些儀器來實現(xiàn)的。但是相比起超高效液相色譜法而言，這些儀器的成本是非常高昂的。而隨著超高效液相色譜法的出現(xiàn)，則大大的降低了相關(guān)機構(gòu)在對樣品進行檢測過程的成本，顛覆了傳統(tǒng)對混合物進行分離的方法。通過這樣的超高效液相色譜法中顆粒的粒徑，可以大大的提高分離過程的速度。

2.2 缺點。雖然說利用超高效液相色譜法具有很多優(yōu)點，但是這種方法也有其本身的缺點所在。超高效液相色譜法的缺點主要有兩個方面，一個是價格較為昂貴，另外一個則是對技術(shù)要求較為高。文章當中，我們雖然說過相比起一些對藥物進行分析的儀器來說，超高效液相色譜法的價格是比較低的。但是就其本身的價格來說，其實還是略微貴的，價格方面是限制超高效液相色譜法推廣的重要原因。超高效液相色譜法相比起傳統(tǒng)的高效液相色譜法來說，要求生產(chǎn)商有著更高的技術(shù)。然后就國內(nèi)的形勢而言，真正可以掌握超高效液相色譜法生產(chǎn)技術(shù)的廠家并不多。同時在上面的文章當中，我們也講到過在超高效液相色譜法當中的顆粒直徑會起到很大的作用。如果在生產(chǎn)超高效液相色譜柱的過程當中，相關(guān)廠家所使用的微粒直徑不能達到要求，要么就有可能造成超高效液相色譜柱堵塞的問題的，堵塞問題的出現(xiàn)也就意味著超高效液相色譜柱生產(chǎn)失敗。生產(chǎn)方面的技術(shù)要求問題，也是限制超高效液相色譜法進行推廣的原因之一。

3 超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

3.1 在藥物分析中的應(yīng)用。在傳統(tǒng)對藥物成分進行分析的環(huán)節(jié)當中，進行分析的速度往往都比較慢，耗費的時間比較長。而超高效液相色譜法被利用到藥物分析當中，大大地提高了這個分析過程的效率。相比起其他的檢測手段來說，這種檢測手段的精密度更高。而且在對藥物成分檢測的過程當中，可以使用一些輔助的藥物來提高這種檢測方法的精密度。我們通過一些研究發(fā)現(xiàn)。利用這種方法，在對藥物進行分離檢測的過程當中，超高效液相色譜法的分離率可以達到百分之百。由此可見這種方法的分離效果，同時在利用這種方法的應(yīng)用當中，可以對中間體和降解產(chǎn)物進行檢測的效率更高。

3.2 在藥物代謝動力學檢測中的應(yīng)用。這比超高效液相色譜法本身具備的一些特點，我們在對藥物進行分析的過程當中，可以將該種方法引入[2]。但是需要注意的是利用該種技術(shù)檢測藥物效果的時候，需要充分的考慮三個方面的問題，這三方面分別是：藥物在人體內(nèi)的吸收情況、藥物在人體內(nèi)的分布情況以及藥物在人體內(nèi)的代謝情況，相關(guān)人員在對這三個方面進行考慮的過程當中，可以利用藥物代謝動力學的方式來進行思考與計算。同時，我們要想利用藥物代謝動力學的方式來對問題進行考慮的話就需要對代謝物進行提取。需要注意的是在我們提取代謝物的時候，可以從藥物的基質(zhì)中獲得。當我們將代謝物提取出來之后，就可以利用我們所說的超高效液相色譜法來對我們提取的代謝物進行分離。通過對代謝物的分離，我們就可以知道代謝物內(nèi)部的各種成分。通過這樣檢測的方法，就可以知道藥物在人體內(nèi)產(chǎn)生的效果。相比起傳統(tǒng)的方法來說，這種方法的簡直速度極為的快，而且檢測的結(jié)果也極為準確，不會產(chǎn)生太大的偏差。

4 結(jié)論

我們所說的超高效液相色譜法其實仍然是屬于色譜法的一種，它是依據(jù)于高效液相色譜法的原理發(fā)展而來的。但是相比起高效液相色譜法的分離速度與效果來看，超高效液相色譜法的效果都要更好。而且利用到藥物檢測領(lǐng)域當中，即便只是對微量的藥物進行分離，使用該種方法的分離速度仍然極為的迅速，而且分離的效果也很好，不會產(chǎn)生太大的偏差給后續(xù)工作帶來困難[3]。但是該種檢測技術(shù)存在著優(yōu)點的同時也具備了一定的缺點，這些缺點主要體現(xiàn)在價格高、技術(shù)要求高兩個方面。這兩個方面的缺點限制了該種技術(shù)的推廣和應(yīng)用，相關(guān)人員應(yīng)該加緊研究，努力攻克這兩個方面的缺點，尋找可以解決這兩個缺點的方法，以便該種方法的推廣和應(yīng)用，降低醫(yī)院在對藥物檢測過程當中的成本，幫助我國在藥學領(lǐng)域可以得到更大的發(fā)展。