中重度宮腔粘連病因及治療研究進(jìn)展

關(guān)艷杰

天津和平新世紀(jì)婦兒醫(yī)院(天津300041)

宮腔粘連(Intrauterine adhesion,IUA)指各種因素導(dǎo)致子宮內(nèi)膜基底層受到損傷，引起宮腔部分或全部堵塞所致的一系列綜合征，其主要表現(xiàn)為月經(jīng)量稀少、下腹痛、繼發(fā)閉經(jīng)、不孕及復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等一系列癥狀，對女性生殖功能影響嚴(yán)重。目前女性不孕癥在人群中發(fā)病率為9%～18%，據(jù)WHO預(yù)測該疾病將成為第三大疾病，僅次于腫瘤和心血管疾病[1]。Evans等[2]研究發(fā)現(xiàn)它是繼發(fā)不孕常見病因之一，占疾病病因?qū)W的約8%。目前國內(nèi)一些學(xué)者研究方向集中在宮腔粘連病因中的高危因素、臨床治療學(xué)的手術(shù)及藥物上，而中重度宮腔粘連患者治療效果較差，重度宮腔粘連治療后再復(fù)發(fā)率高達(dá)20%～60%。針對該病的組織學(xué)、分子學(xué)研究較少，本文查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對宮腔粘連的病因及治療研究進(jìn)展做以綜述，以期從分子學(xué)及組織學(xué)角度上對中重度宮腔粘連的治療開拓新思路。

1 IUA病因

1.1 臨床病因 目前普遍認(rèn)為宮腔粘連的使動(dòng)因素是子宮內(nèi)膜基底層完整性被機(jī)械性損傷破壞。目前可查閱資料表明妊娠期宮腔內(nèi)操作造成的創(chuàng)傷是主要病因。Schenker等[3]回顧性分析了1856例宮腔粘連患者，發(fā)現(xiàn)妊娠期刮宮約占90%，其中66.5%為人工流產(chǎn)刮宮后，21.5%為產(chǎn)后刮宮后，2%發(fā)生于剖宮產(chǎn)術(shù)后，0.6%發(fā)生于葡萄胎清宮術(shù)后。但中重度宮腔粘連病例95%均存在妊娠期宮腔內(nèi)操作。對非妊娠期宮腔內(nèi)的操作造成創(chuàng)傷也可導(dǎo)致宮腔粘連[4]。宮腔粘連其他高危因素有生殖系統(tǒng)感染、先天性子宮畸形等[5]。亦有學(xué)者推測遺傳易感因素也可能是發(fā)病原因之一[6]。

1.2 組織學(xué)病因 妊娠期宮腔操作作為宮腔粘連主要因素，其原因可能是術(shù)后機(jī)體處于低雌激素水平，而子宮內(nèi)膜的再生依賴于雌激素水平的高低，從而子宮內(nèi)膜因低雌激素水平而使修復(fù)延遲。同時(shí)術(shù)前孕激素水平較高，使宮體變軟，子宮內(nèi)血管增生豐富，高孕激素水平的妊娠子宮極易受到損傷。此時(shí)任何宮腔內(nèi)操作都會使子宮內(nèi)膜的基底層受到損傷較非妊娠期增大，尤其是刮宮術(shù)[6]。子宮內(nèi)膜再生及修復(fù)與內(nèi)膜干細(xì)胞密切相關(guān)。刮宮后完全缺乏或僅殘留少量正常內(nèi)膜組織，內(nèi)膜萎縮、稀薄的狀態(tài)，細(xì)胞數(shù)目減少或功能受損，腺體缺乏活性，支持再生的間質(zhì)內(nèi)缺乏血管，局部的缺血低氧微環(huán)境，使子宮內(nèi)膜無法完全再生，而局部纖維細(xì)胞活性增強(qiáng)，促使大量纖維蛋白原聚集于損傷部位，導(dǎo)致過度增生纖維組織取代子宮內(nèi)膜，同時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)重塑及纖維化，最終宮腔粘連發(fā)生[7-8]。

1.3 分子學(xué)病因 創(chuàng)傷和感染是造成宮腔粘連的明確誘因，但深層次分子機(jī)制闡述內(nèi)容較少，目前考慮與以下分子學(xué)結(jié)構(gòu)或因子作用有關(guān)。

1.3.1 轉(zhuǎn)化生長因子(Transforming growth factor-1，TGF-β1)：TGF-β1是一種纖維源性細(xì)胞因子，轉(zhuǎn)化生長因子在基質(zhì)細(xì)胞中在向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中起著關(guān)鍵調(diào)控作用[8]。它與細(xì)胞膜上的I型及II型受體結(jié)合后形成復(fù)合物，與一般信號傳導(dǎo)機(jī)制相同，受體復(fù)合物觸發(fā)信號越過細(xì)胞膜向細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)。其生物學(xué)效應(yīng)為促進(jìn)纖溶酶原活化因子與基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子合成，抑制細(xì)胞外基質(zhì)合成并促使其沉積[9]。有研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)化生長因子生理作用是使成纖維細(xì)胞和炎性細(xì)胞趨化，從而纖連蛋白及膠原蛋白合成均增加，細(xì)胞外基質(zhì)異常沉積，組織內(nèi)纖維結(jié)締組織增加，最終導(dǎo)致內(nèi)膜纖維化形成[10]。推測中重度宮腔粘連患者粘連組織中轉(zhuǎn)化生長因子通路過度增強(qiáng)，導(dǎo)致宮腔粘連嚴(yán)重。

1.3.2 細(xì)胞外基質(zhì)降解相關(guān)因子金屬蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9)：MMP-9是降解相關(guān)因子金屬蛋白酶家族中強(qiáng)大膠原蛋白水解活性作用的成員之一，其生理作用是通過水解細(xì)胞外基質(zhì)中膠原蛋白，降低組織纖維化程度。有研究對中重度宮腔粘連組織中蛋白酶活性分析發(fā)現(xiàn)：宮腔粘連組織中纖維化程度與降解相關(guān)因子金屬蛋白酶9呈負(fù)相關(guān)[11]。宮腔粘連局部纖維化組織成分分析中，提示大量的細(xì)胞外基質(zhì)成分如膠原蛋白、纖維連接蛋白、層黏連蛋白等，在各種理化因素及感染等刺激下所形成復(fù)合物可抑制降解相關(guān)因子金屬蛋白酶9活性，蛋白酶水解過程受阻，從而抑制基質(zhì)降解，最終導(dǎo)致內(nèi)膜纖維化形成[12]，表現(xiàn)為中重度宮腔粘連。

1.3.3 解聚素金屬蛋白酶(ADAMs)：解聚素金屬蛋白酶家族成員目前研究較多的是解聚素金屬蛋白酶-l5和解聚素金屬蛋白酶-l7。解聚素金屬蛋白酶-15可增強(qiáng)纖維蛋白與炎癥細(xì)胞及血小板的粘附并阻礙纖維蛋白水解，解聚素金屬蛋白酶-l7能夠增加細(xì)胞因子及白細(xì)胞介素-6及細(xì)胞增殖因子-1的釋放，促進(jìn)纖維蛋白沉積[13]。創(chuàng)傷、感染等因素刺激下所形成復(fù)合物可增加局部解聚素金屬蛋白酶-l5和解聚素金屬蛋白酶-l7的含量，導(dǎo)致內(nèi)膜纖維化形成，表現(xiàn)為中重度宮腔粘連[14]。

1.3.4 金屬蛋白酶組織抑制分子(Tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP)：其生理作用能夠減弱蛋白酶水解活性，使纖維組織水解過程受阻，間接地促進(jìn)組織發(fā)生纖維化[15]。相關(guān)的粘連組織中蛋白酶活性研究分析提示：宮腔粘連組織中纖維化程度與解聚素金屬蛋白酶-l5、解聚素金屬蛋白酶-l7、金屬蛋白酶組織抑制分子呈正相關(guān)[12]。

1.3.5 叉頭框F2(FoxF2)：叉頭框F2是叉頭框家族成員，它具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子生物活性，在組織纖維化形成過程中，可增強(qiáng)成纖維細(xì)胞分泌功能，調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)水解吸收的環(huán)節(jié)，一般表現(xiàn)為抑制水解吸收。已有離體研究證實(shí)：中重度宮腔粘連患者宮腔粘連組織中叉頭框F2的mRNA表達(dá)量顯著升高[12，16]。高表達(dá)叉頭框F2能夠影響蛋白酶活性及加強(qiáng)轉(zhuǎn)化生長因子-β1通路功能，能夠增加抑制分子表達(dá)，從而使水解蛋白酶生物活性降低，阻礙水解吸收新形成的纖維組織，導(dǎo)致中重度宮腔粘連發(fā)生。

1.3.6 賴氨酰氧化酶(Lysyl oxidase，LOX)：賴氨酰氧化酶生理作用是通過氧化脫氨基作用改變分子結(jié)構(gòu)，使膠原纖維與彈性纖維相互交聯(lián)形成纖維結(jié)締組織[17]。賴氨酰氧化酶活性改變相應(yīng)的改變細(xì)胞外基質(zhì)蛋白降解能力，使結(jié)締組織纖維化。賴氨酰氧化酶活性與蛋白降解能力呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性，即活性升高可降低降解能力，而活性降低升高降解能力。相關(guān)研究表明，抑制賴氨酰氧化酶活性后細(xì)胞外基質(zhì)交聯(lián)強(qiáng)度就會下降[18]。其原理描述為膠原蛋白合成過程中，在細(xì)胞內(nèi)形成前體轉(zhuǎn)移至細(xì)胞外，在細(xì)胞外基質(zhì)中各種酶及LOX催化下形成纖維膠原，從而形成纖維結(jié)締組織。賴氨酰氧化酶1(LOXL1)在膠原形成中起到極其重要的作用[19]。有研究發(fā)現(xiàn)，如去除賴氨酰氧化酶1可抑制成纖維細(xì)胞分化，使組織纖維化程度降低[20]。亦有研究表明，中重度宮腔粘連患者子宮內(nèi)膜中賴氨酰氧化酶1表達(dá)增加，子宮內(nèi)膜纖維化程度相應(yīng)增加，呈現(xiàn)正相關(guān)性[21]。關(guān)于賴氨酰氧化酶2(LOXL2)，蔣沫怡等曾報(bào)道采用免疫組織化學(xué)法檢測賴氨酰氧化酶及賴氨酰氧化酶2在中重度宮腔粘連子宮內(nèi)膜中表達(dá)增加，認(rèn)為賴氨酰氧化酶2與宮腔粘連形成相關(guān)[22]。

1.3.7 內(nèi)皮生長因子-1(IGF-1)：炎性細(xì)胞分泌的單鏈多肽，其結(jié)構(gòu)與胰島素相似，生物學(xué)效應(yīng)為調(diào)節(jié)生長激素活性，促進(jìn)生長發(fā)育，途徑形式為自分泌及旁分泌，分泌量增多時(shí)細(xì)胞增生加快。研究推測：內(nèi)皮生長因子-1在上皮細(xì)胞聚集，分泌增多，活性增強(qiáng)，纖維蛋白大量合成，水解減弱，內(nèi)膜持續(xù)增生；IGF-1誘導(dǎo)炎性細(xì)胞出現(xiàn)病理改變，形成大量復(fù)合物，從而使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變[23]。有研究結(jié)果分析，監(jiān)測宮腔粘連患者內(nèi)皮生長因子-1含量，中重度粘連組內(nèi)皮生長因子-1含量明顯高于輕度粘連組。由此推斷內(nèi)皮生長因子-1共同參與了中重度宮腔粘連形成[24]。

2 IUA治療目前宮腔鏡下宮腔粘連分解手術(shù)被認(rèn)為是宮腔粘連治療的標(biāo)準(zhǔn)術(shù)式，理想的宮腔鏡手術(shù)是術(shù)后預(yù)防再粘連的基礎(chǔ)[25]，但術(shù)后后繼治療，預(yù)防復(fù)發(fā)及子宮內(nèi)膜修復(fù)亦是研究熱點(diǎn)。

2.1 藥物治療

2.1.1 雌激素：雌激素已被臨床廣泛應(yīng)用于預(yù)防宮腔粘連術(shù)后復(fù)發(fā)。雌激素可加速宮腔鏡術(shù)后創(chuàng)面裸露區(qū)上皮化，可使創(chuàng)面內(nèi)膜加快增生，修復(fù)愈合減少預(yù)防再粘連形成[26]。雌激素藥物作用機(jī)制主要是通過對轉(zhuǎn)化生長因子-β1、降解相關(guān)因子金屬蛋白酶-9產(chǎn)生反向調(diào)節(jié)作用來實(shí)現(xiàn)的[27]。但有研究顯示高于生理劑量雌激素可能會促進(jìn)粘連和纖維化細(xì)胞因子釋放，從而促進(jìn)子宮內(nèi)膜纖維化，加劇宮腔粘連形成[28]。也有研究顯示在手術(shù)前給予雌激素，可以使內(nèi)膜細(xì)胞增生，轉(zhuǎn)化生長因子-β1局部含量減少和降解相關(guān)因子金屬蛋白酶-9局部含量增加，從而減輕宮腔粘連復(fù)發(fā)[27]。中西醫(yī)結(jié)合方法治療中重度宮腔粘連的研究顯示取得較好療效，推測與一些中藥的類雌激素作用有關(guān)[29]。

2.1.2 血管擴(kuò)張劑：低劑量阿司匹林、硝酸甘油、枸櫞酸西地那非 等藥物作用主要是通過促進(jìn)內(nèi)膜腺上皮生長，同時(shí)改善血流灌注，增加內(nèi)皮生長因子-1，共同促進(jìn)子宮內(nèi)膜增生修復(fù)。國外相關(guān)研究顯示，應(yīng)用血管擴(kuò)張劑，可增加 A 型內(nèi)膜形成，降低宮腔鏡術(shù)后再次宮腔粘連率，理論上可以提高妊娠率[30]。進(jìn)一步研究表明，阿司匹林作用效果與劑量無明顯關(guān)系，小劑量阿司匹林即可達(dá)到預(yù)定效果[31]。國內(nèi)的一些研究表明中西醫(yī)結(jié)合方法對部分中重度宮腔粘連女性治療有效，原因考慮為某些中藥有促進(jìn)并改善局部血流[32]。

2.1.3 孕激素及維生素E：有研究報(bào)道，孕激素及維生素E能提高薄型子宮內(nèi)膜患者的妊娠率，治療中重度宮腔粘連有效。其藥物作用機(jī)制主要通過減少轉(zhuǎn)化生長因子-β1形成，加強(qiáng)降解相關(guān)因子金屬蛋白酶-9活性，產(chǎn)生逆調(diào)節(jié)作用來，減少粘連復(fù)發(fā)[33]。

2.2 干細(xì)胞治療 干細(xì)胞具有極強(qiáng)的自我更新能力，并具備多向分化潛能的一類細(xì)胞總稱。目前促進(jìn)內(nèi)膜再生的研究主要集中在人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞及多功能干細(xì)胞上。干細(xì)胞治療宮腔粘連目前尚處于研究的起步階段，但一經(jīng)發(fā)現(xiàn)就表現(xiàn)出重大的臨床意義，其精深的研究前景成為目前細(xì)胞治療的熱點(diǎn)，同時(shí)為重度宮腔粘連患者治療帶來新的方向和成為可選用的治療方法之一。但其應(yīng)用過程中存在一些不容忽視的問題，比如細(xì)胞的來源存在倫理爭議；比如提高干細(xì)胞移植成活率；比如優(yōu)化定向誘導(dǎo)分化；比如干細(xì)胞及衍生物中未分化細(xì)胞有向腫瘤細(xì)胞分化的潛能；比如數(shù)量少不能滿足治療需求，比如效率差、治療費(fèi)用高等問題。干細(xì)胞治療的可能性、有效性及應(yīng)用方法問題需要大量的臨床研究分析討論來驗(yàn)證。

2.2.1 人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞(Human endometrialstem cells,hEDSCs)：生理上，子宮內(nèi)膜表現(xiàn)為周期性及高度的增殖活性和自我更新修復(fù)能力，因此提示子宮內(nèi)膜中可能存在內(nèi)膜干細(xì)胞。多項(xiàng)研究結(jié)果已證實(shí)并成功分離、培養(yǎng)出子宮內(nèi)膜干細(xì)胞[34]。Singh等[35]對6例宮腔鏡診斷宮腔粘連Ⅲ～Ⅳ級治療失敗患者應(yīng)用自體干細(xì)胞移植，有5例患者恢復(fù)月經(jīng)。2011年Nagori等應(yīng)用自體內(nèi)膜干細(xì)胞成功治療 1 例重度宮腔粘連患者，治療6個(gè)月后內(nèi)膜厚度增加，并通過輔助生殖技術(shù)實(shí)現(xiàn)妊娠[36]。Tan等[37]采用自體經(jīng)血干細(xì)胞治療中重度宮腔粘連患者，其中1名患者自然妊娠，2名患者經(jīng)輔助生殖技術(shù)成功妊娠。

2.2.2 胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cells,ESC)：來自胚胎的干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用上有廣闊前景，它具有向各種組織和器官分化的能力。利用胚胎干細(xì)胞在體外分化成子宮內(nèi)膜樣細(xì)胞，將移植分化的內(nèi)膜樣細(xì)胞植入大鼠體內(nèi)(其進(jìn)行預(yù)處理：子宮角部重度損傷)，成功修復(fù)大鼠子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)，回復(fù)子宮相應(yīng)生理功能[38]。

2.2.3 骨髓干細(xì)胞(Bone mesenchymal stem cells，BMSCs)：其具備分化及增殖修復(fù)促進(jìn)子宮內(nèi)膜再生功能。Cervelloi等報(bào)道骨髓移植后女性子內(nèi)膜中有10%的血管內(nèi)皮細(xì)胞為骨髓供者來源 ，提示骨髓干細(xì)胞是誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜細(xì)胞再生，但僅為有限來源[39]。Du等[40]研究報(bào)道，在雌鼠體內(nèi)骨髓干細(xì)胞(雄鼠來源)能分化形成子宮內(nèi)膜上皮，提示骨髓干細(xì)胞的移植在宮腔粘連內(nèi)膜修復(fù)中可作為子宮外干細(xì)胞補(bǔ)充來源，使子宮內(nèi)膜重建。

2.2.4 多功能干細(xì)胞(Induced pluripotent stem cells,IPS)：其原理可能為在細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)下使子宮內(nèi)膜細(xì)胞逆行轉(zhuǎn)變?yōu)槎喙δ芨杉?xì)胞，實(shí)現(xiàn)其部分功能。IPS與胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程大致類似，具有多向分化及極強(qiáng)的自我更新能力。多功能干細(xì)胞取自于患者自身的特定細(xì)胞，利用基因工程方法重新編程獲得多功能干細(xì)胞，轉(zhuǎn)換為定向內(nèi)膜樣細(xì)胞，用于患者子宮內(nèi)膜修復(fù)治療。

2.3 組織工程學(xué)生物材料 組織工程學(xué)生物材料[細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)]目前用于組織即器官再生和修復(fù)方面，臨床治療效果較為肯定的是在整形外科領(lǐng)域：皮膚再造、腹壁缺損、口腔重建、乳腺整形等。來源于哺乳動(dòng)物組織工程學(xué)生物材料的支架其為子宮內(nèi)膜再生修復(fù)提供了一種新的選擇，在中重度宮腔粘連患者治療中前景廣闊[41]。

2.3.1 羊膜：由滋養(yǎng)細(xì)胞分化而來，表面光滑有一定的彈性和韌性，無血管、神經(jīng)和淋巴管，半透明狀。目前臨床研究中應(yīng)用的兩種類型預(yù)防宮腔粘連：新鮮羊膜和凍干羊膜。Gan等研究顯示：重度宮腔粘連患者術(shù)后使用凍干羊膜，有效減少宮腔再次粘連形成[42]，未見妊娠相關(guān)研究。Amer等研究表明重度宮腔粘連的患者術(shù)后將球囊作為支架，將新鮮羊膜或凍干羊膜移植入宮腔，可預(yù)防再次宮腔粘連發(fā)生，促進(jìn)子宮內(nèi)膜再生，且新鮮羊膜比凍干羊膜效果好。

2.3.2 膀胱黏膜層基底膜(UBM)：它是一種衍生細(xì)胞外基質(zhì)生物材料，其保留了完整的基底膜，而這正是內(nèi)膜實(shí)現(xiàn)自我功能性修復(fù)的基礎(chǔ)。膀胱黏膜層基底膜免疫原性接近天然豁免，耐受感染，有很高的生物活性和組織再生誘導(dǎo)能力。它被吸收過程中可以促進(jìn)自我細(xì)胞增殖、再生，新鮮的有活力的具備自我修復(fù)功能的細(xì)胞和組織取代手術(shù)后創(chuàng)傷后待修復(fù)的組織，使器官組織細(xì)胞功能性得以修復(fù)，實(shí)現(xiàn)結(jié)構(gòu)及功能的重建。有研究報(bào)道堿性成纖維細(xì)胞生長因子及血管內(nèi)皮生長因子在組織細(xì)胞受損時(shí)能夠趨化多種細(xì)胞遷移，并促進(jìn)細(xì)胞增殖，能誘導(dǎo)新生血管形成并促進(jìn)內(nèi)膜功能性修復(fù)[42]。而膀胱黏膜層基底膜也正是通過釋放此類信號分子來實(shí)現(xiàn)自我調(diào)控，修復(fù)內(nèi)膜。

3結(jié) 語目前，宮腔粘連貫穿于計(jì)劃生育、婦科、產(chǎn)科和生殖等所有婦產(chǎn)科亞學(xué)科，對女性健康有巨大影響。但其病因不明，治療方式目前為多種方法綜合治療，宮腔鏡下手術(shù)結(jié)合多種預(yù)防復(fù)發(fā)性粘連措施取得一定效果，但存在不足，中重度宮腔粘連患者復(fù)發(fā)率仍較高，成為婦產(chǎn)科同仁的關(guān)注熱點(diǎn)。相信隨著組織學(xué)及分子學(xué)研究進(jìn)展，終會找到治療的最佳方式，給女性健康帶來福音。