尿素氮和肌酐在不同生化檢測系統(tǒng)上檢測結(jié)果可比性探討

陳美珺 馬澤粦

【摘要】 目的 探討同一臨床實驗室不同檢測系統(tǒng)間尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）檢測結(jié)果的可比性，為實驗室檢測結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化提供實驗數(shù)據(jù)。

方法 參考美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）的EP9-A2文件，以Cobas 8000生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品組成的檢測系統(tǒng)為比較方法，以Cobas 501生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品組成的檢測系統(tǒng)為實驗方法，用患者新鮮血清同時在兩個檢測系統(tǒng)上對BUN和Crea進行雙份平行測定。計算實驗方法（Y）和比較方法（X）之間的相對偏倚，以允許總誤差規(guī)定的室間質(zhì)量評價允許范圍的1/2為標(biāo)準(zhǔn)，判斷不同檢測系統(tǒng)的可比性。

結(jié)果 實驗系統(tǒng)Cobas 501和比較系統(tǒng)Cobas 8000具有良好的相關(guān)性，除BUN其醫(yī)學(xué)決定水平低值處的相對偏倚超出臨床可接受范圍，BUN和Crea其余測定結(jié)果在兩個檢測系統(tǒng)之間的誤差均在臨床可接受范圍。

結(jié)論 兩個檢測系統(tǒng)測定BUN和Crea結(jié)果具有可比性。當(dāng)同一實驗室同一項目在兩個以上的檢測系統(tǒng)檢測時，應(yīng)進行方法比對和偏倚評估，以保證同一檢測項目在不同檢測系統(tǒng)上檢驗結(jié)果的可比性。

【關(guān)鍵詞】 BUN;Crea;Cobas 8000;Cobas 501;可比性

中圖分類號：R446 ? 文獻標(biāo)志碼：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.11.011

【Abstract】 Objective To explore the comparability of the results of blood urea nitrogen（BUN） and creatinine （Crea） among different detection systems in the same clinical laboratory， so as to provide experimental data for the standardization of laboratory test results.

Methods According to EP9-A2 file of National committee for Clinical Laboratory standards （ NCCLS）， the detection system composed of Roche original reagent， c.f.a.s calibrator and controller of Roche was used as comparative method， and the detection system composed of Cobas 501 biochemical analyzer， Roche original reagent， c. f. a. s calibrator and controller of Roche was used as experimental method， and two parallel measurements of BUN and Crea were performed simultaneously on two detection systems using fresh serum from patients. Then relative bias between experimental method （Y） and comparison method （X） was calculated， and the comparability of different detection systems was judged by allowing 1/2 of the range of interventricular quality evaluation specified by total allowable error.

Results The experimental system Cobas 501 had a good correlation with comparison system Cobas 8000. Except the relative bias of BUN at the low value of medical decision level was beyond the clinical acceptable range， the errors of other detection results of BUN and Crea between the two detection systems were within clinical acceptable ranges.

Conclusion The results of BUN and Crea determined by the two detection systems are comparable. When the same item is tested in more than two detection systems in the same laboratory， the method comparison and bias evaluation should be carried out to ensure the comparability of the detection results of the same test item on different detection systems.

【Key words】 BUN; Crea; Cobas 8000; Cobas 501; comparability

隨著醫(yī)院規(guī)模的不斷擴大，許多醫(yī)院同時擁有兩臺以上自動生化分析儀，由于不同品牌試劑和校準(zhǔn)品不同，各自構(gòu)成不同的檢驗系統(tǒng);即使是同一公司生產(chǎn)的分析儀由于使用試劑和參數(shù)不同，對標(biāo)本產(chǎn)生不同的基質(zhì)效應(yīng)，都會造成檢測系統(tǒng)間偏倚的存在。這就需要通過一定的方法學(xué)比較實驗對不同檢測系統(tǒng)進行對比分析和預(yù)期偏倚評估，以確保檢測結(jié)果具有連續(xù)性和一致性。尿素氮（BUN）及肌酐（Crea）為兩個傳統(tǒng)的腎功能指標(biāo)，其結(jié)果的準(zhǔn)確與否影響腎臟疾病的療效判定和監(jiān)測。我們參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）的EP9-A2[1]文件，對我院平診和急診Cobas 8000全自動生化分析儀與Cobas 501全自動生化分析儀進行BUN和Crea測定的方法學(xué)比較和偏倚評估，報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑

Cobas 8000生化分析儀、羅氏原裝試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品;Cobas 501生化分析儀、羅氏原裝濃縮試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 標(biāo)本

以真空采血管收集本院住院患者新鮮血清，濃度覆蓋醫(yī)學(xué)決定水平的高、中、低值，要求無溶血、脂血、黃疸、凝塊，標(biāo)本量2.0～3.0 mL。

1.3 方法學(xué)比較實驗

參照EP9-A2文件進行[1]，以Cobas 8000為比較檢測系統(tǒng)（X），因其使用羅氏原裝試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，且多年來參與室間質(zhì)評取得良好的結(jié)果。Cobas 501為我院檢驗科新購入生化分析儀，作為實驗系統(tǒng)。實驗前由儀器廠家專業(yè)工程師對檢測系統(tǒng)進行校準(zhǔn)，評價其精密度，結(jié)果顯示，Cobas 8000和Cobas 501兩個檢測系統(tǒng)BUN和Crea批內(nèi)精密度均<1/4允許總誤差（TEa），批間精密度均<1/3 TEa。每日檢測前對儀器進行常規(guī)保養(yǎng)、維護和質(zhì)量控制，使儀器處于在控狀態(tài)。

每天收集8份標(biāo)本，在兩個檢測系統(tǒng)上分別進行雙份平行測定，在樣本的雙份測定中，指定第一次測定順序，按反向順序在同一個檢測系統(tǒng)檢測第二次，即為雙份測定，每天的測定在2小時內(nèi)完成。以上步驟重復(fù)5天。

1.4 數(shù)據(jù)收集與處理

剔除明確有誤差的結(jié)果。（1）方法內(nèi)和方法間離群值檢查：首先進行方法內(nèi)離群值檢查，然后進行散點圖和偏倚圖檢查，最后進行方法間離群值的檢查。（2）相關(guān)分析：用相關(guān)系數(shù)r或r2粗略判斷比較系統(tǒng)（X）的分布范圍是否合理，EP9-A2文件對此做了規(guī)定，若r≥0.975或r2≥0.95，則認為X范圍分布合理，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠。（3）線性回歸統(tǒng)計：計算線性回歸方程

？倴 =bX+a。通過線性方程，可以計算出相應(yīng)的預(yù)期偏倚和可信區(qū)間范圍、允許誤差和相對誤差，以1/2允許總誤差規(guī)定的允許誤差作為儀器比對的相對誤差范圍，通過比較對其臨床可接受性進行評價。（4）統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均在Excel 2007和SPSS 19.0軟件包上進行。不同檢測系統(tǒng)新鮮血清測定結(jié)果的統(tǒng)計采用配對t檢驗、相關(guān)分析和回歸分析。

2 結(jié) ?果

2.1 離群值檢查

按EP9-A2文件的要求進行離群值檢查，方法內(nèi)及方法間均未發(fā)現(xiàn)離群值。方法間及線性評估時的散點圖和偏倚圖見圖1、圖2。

2.2 統(tǒng)計分析結(jié)果

每日隨同樣本一起檢測的質(zhì)控品LevelⅠ、LevelⅡ、Level Ⅲ均在控。配對t檢驗顯示，Cobas 8000與Cobas 501結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（BUN t=0.095，P>0.05;Crea t=0.007，P>0.05）。相關(guān)分析表明，實驗系統(tǒng)Cobas 501與參考系統(tǒng)Cobas 8000間的相關(guān)系數(shù)r均大于0.975，說明數(shù)據(jù)分布較好，回歸方程的斜率及截距的估計較可靠，其相關(guān)分析見表1。

2.3 臨床可接受性評價

按照1/2允許總誤差允許誤差的標(biāo)準(zhǔn)，BUN的允許誤差為4.5%，Crea的允許誤差為7.5%。Cobas 501的相對偏倚見表2。結(jié)果表明，實驗系統(tǒng)對BUN和Crea檢測結(jié)果與參考系統(tǒng)之間檢測結(jié)果的差異，除BUN其醫(yī)學(xué)決定水平低值的相對偏倚不在臨床可接受范圍內(nèi)，BUN和Crea醫(yī)學(xué)決定水平其余值均在臨床可接受范圍內(nèi)。

3 討 ?論

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展及其被廣泛應(yīng)用于檢驗醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，同一實驗室同時擁有不同的檢測系統(tǒng)檢測同一項目是普遍存在的現(xiàn)象[2]。不同生化檢測系統(tǒng)對同一生化檢測項目的結(jié)果是否具有可比性，能否都為臨床所接受，是實驗室工作人員所關(guān)注的問題?！夺t(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準(zhǔn)則》（ISO15189）中明確提出：對于使用不同程序或設(shè)備和（或）不同地點進行的檢驗工作，應(yīng)有確定的機制在適當(dāng)?shù)呐R床范圍來驗證這些結(jié)果的可比性，這種驗證應(yīng)根據(jù)程序或儀器的特性定期進行;實驗室應(yīng)記載、記錄這些比對結(jié)果，適當(dāng)時對結(jié)果迅速作出反應(yīng)，對存在的問題和不足應(yīng)進行糾正并保留記錄。

針對我院臨檢中心和急診檢驗科使用不同型號羅氏生化儀分別負責(zé)平診和急診項目的檢測，我們采用EP9-A2[1]文件提供的方法，探討B(tài)UN和Crea在Cobas 8000全自動生化分析儀與Cobas 501全自動生化分析儀上的檢測結(jié)果是否具有一致性或檢測結(jié)果的偏倚是否在允許誤差范圍內(nèi)。因Cobas 8000多年來參加衛(wèi)生部、省臨檢中心的室間質(zhì)評均取得較好的結(jié)果，因此我們以其作為比較系統(tǒng)，而把新購買的Cobas501作為實驗系統(tǒng)來進行研究。在本研究前對兩個檢測系統(tǒng)進行了精密度評價，各檢測系統(tǒng)BUN和Crea批內(nèi)精密度均<1/4 TEa，批間精密度均<1/3 Tea，兩個系統(tǒng)精密度符合臨床要求。對于結(jié)果的允許誤差范圍，美國臨床實驗室改進修正案[3]給定的BUN可接受范圍是靶值±0.71 mmol/L或±9%（取大者），Crea的可接受范圍是靶值±0.265 μmol/L（0.3 mg/dL）或±15%（取大者）。我們參照余文輝等采用的方法[4]：以1/2允許總誤差作為方法學(xué)比較結(jié)果系統(tǒng)誤差的限值，以1/3允許總誤差為日間不精密度的限值進行了比對。實驗結(jié)果顯示，BUN其醫(yī)學(xué)決定水平在3.0 mmol/L時，其相對偏倚為-5.01%，超出臨床可接受范圍，當(dāng)BUN醫(yī)學(xué)決定水平在7.1 mmol/L和14.2 mmol/L時，其相對偏倚為-2.43 %和-1.49 %，其偏倚能被臨床接受。Crea醫(yī)學(xué)決定水平在40.0 μmol/L、141.0 μmol/L、530.0 μmol/L時，其相對偏倚為-0.20%、0.14%、0.23%，均可被臨床接受。通過比對試驗，可以發(fā)現(xiàn)兩個檢測系統(tǒng)間相同項目BUN、Crea的檢測結(jié)果部分存在偏倚，BUN在醫(yī)學(xué)決定水平低值的偏倚不在臨床可接受范圍內(nèi)，應(yīng)尋找問題所在，進一步采取相應(yīng)的改正措施，保證同一實驗室相同檢測項目在不同檢測系統(tǒng)上的檢測結(jié)果具有可比性。李佳等人[5]的研究也發(fā)現(xiàn)低濃度BUN在不同分析系統(tǒng)中不可比，認為可能原因一方面是試劑成分、檢測參數(shù)并不完全相同，可能會造成結(jié)果的偏倚，這種偏倚在較低濃度水平時更加凸顯;另一方面，BUN的允許誤差本身較小，使其評價標(biāo)準(zhǔn)較高，也不容易達到要求。也有學(xué)者認為，因為血清BUN濃度降低在臨床上缺乏必要的實際意義，所以，雖然血清BUN濃度在低值處的相對偏倚>1/2允許總誤差規(guī)定的允許誤差，也可認為實驗系統(tǒng)與目標(biāo)檢測系統(tǒng)具有可比性[6]。筆者認為BUN低值偏倚不可接受，其原因還有可能是當(dāng)醫(yī)學(xué)決定水平為低值時，絕對偏倚即使很小，但相對偏倚已經(jīng)很大，引起超出臨床可接受范圍的假象。

本研究顯示，在Cobas 8000和Cobas 501兩個檢測系統(tǒng)上分別檢測BUN和Crea兩個生化項目，其相關(guān)系數(shù)r均>0.975，說明這兩個系統(tǒng)所采用實驗方法的精密度和系統(tǒng)間的可比性較好。但對BUN和Crea兩個生化項目檢測結(jié)果臨床可接受性的研究，表明兩個系統(tǒng)間存在一定的差距，說明即使室內(nèi)質(zhì)控CV滿足要求并且相關(guān)性好，也不能證明在對病人新鮮血清檢測時其結(jié)果相關(guān)性和可被接受性都滿足要求。覆蓋測定方法測量范圍的多份患者新鮮血清是進行比對試驗的最佳標(biāo)本來源。

綜上所述，在醫(yī)學(xué)檢驗實現(xiàn)自動化的今天，各實驗室應(yīng)高度重視不同分析系統(tǒng)之間檢驗結(jié)果存在是否一致性的問題，當(dāng)實驗室內(nèi)同一檢測項目在兩套以上分析系統(tǒng)檢測或使用一些新方法、試劑、儀器時，必須對其進行比對實驗和偏倚評估。通過比對實驗，可以發(fā)現(xiàn)同一實驗室不同檢測系統(tǒng)間是否具有可比性，若存在偏倚，不在臨床可接受范圍，必須對檢測系統(tǒng)進行校準(zhǔn)、溯源，必要時，在不同系統(tǒng)建立各自的參考區(qū)間，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[7～8]。

參 考 文 獻

[1] ?KROUWER J S，THOLEN D W，GARBER C C，et al. Method of Comparision and Bais Estimation Using Patient Sample， Approved Guideline-Second Edition[J]. NCCLS， Ep9-A2， 2002，22（19）：1-57.

[2] ?王丹晨，禹松林，尹逸叢，等.4種促甲狀腺素免疫法檢測系統(tǒng)結(jié)果的一致性評價[J].臨床檢驗雜志，2019，37（1）：62-66.

[3] ?U.S. Department of Health and Human Services.Medicare， Medicaid and CLIA programs; regulations implementing the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 （CLIA）--HCFA. Final rule with comment period[J]. Fed Regist，1992，57（40）：7002-7186.

[4] ?余文輝，吳惠璇，莫其農(nóng)，等.同一醫(yī)療機構(gòu)不同檢測系統(tǒng)檢驗結(jié)果可比性的驗證與偏倚評估[J].中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2017，11（6）：931-937.

[5] ?李佳，嚴(yán)翠娥，高佳，等.26項血清生化指標(biāo)在2種不同生化分析系統(tǒng)中的檢測結(jié)果可比性分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2017，27（14）：2066-2069.

[6] ?王軍.2種儀器和試劑測定尿肌酐對比研究及偏倚評估[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（16）：2298-2299.

[7] ?馮仁豐.臨床檢驗管理技術(shù)基礎(chǔ)[M].上海：上海科學(xué)文獻出版社，2003：5-8.

[8] ?劉綱毅，歐紅娟，容亓.國產(chǎn)板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)與羅氏cobasE602免疫分析系統(tǒng)對腫瘤標(biāo)志物檢測結(jié)果的比對分析[J].右江醫(yī)學(xué)，2017，45（3）：285-288.

（收稿日期：2019-10-21 修回日期：2020-09-09）

（編輯：潘明志）