臨床微生物快速檢驗技術(shù)研究進(jìn)展

天津第四中心醫(yī)院（300140）趙群莉

近年來感染性疾病有逐年上升的發(fā)病趨勢，感染性疾病對于人體的身體機能影響較大，引發(fā)感染性疾病的微生物較多。當(dāng)前臨床上對于微生物化驗快速檢驗技術(shù)的研究較多，以下為有關(guān)檢驗方法。

1 自動化培養(yǎng)鑒定技術(shù)

傳統(tǒng)的微生物檢驗技術(shù)中需要制作染色體圖片，進(jìn)行一系列的培養(yǎng)和生化鑒定，檢驗操作過程非常繁雜且需要花費大量的時間，無法滿足臨床上治療患者需求。為解決這一難題，開發(fā)了各種自動化的培養(yǎng)以及鑒定系統(tǒng)，用于完善微生物檢驗方法?？衫梦⑸镨b定專家系統(tǒng)進(jìn)行微生物快速檢驗，利用不同微生物的酶系統(tǒng)不同的特點，其分解的物質(zhì)不同?？赏ㄟ^間接檢測微生物代謝產(chǎn)物的方法，檢測微生物。利用菌類特殊的生化反應(yīng)，根據(jù)其工作原理制作微生物鑒定專家系統(tǒng)，檢測到細(xì)菌所使用的底物后，根據(jù)反應(yīng)液中色原性、pH值以及酶降解反應(yīng)進(jìn)行判斷。將需要檢測的細(xì)菌制作成懸浮液注入相應(yīng)的鑒定卡中，將其插入培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，通過定時掃描比較陽性閾值，最后采取計算機系統(tǒng)分析培養(yǎng)數(shù)據(jù)，自動形成鑒定報告。血培養(yǎng)儀器是在傳統(tǒng)的血液細(xì)菌培養(yǎng)方法之上增加雙向增菌培養(yǎng)瓶，能夠省略細(xì)菌轉(zhuǎn)種過程而直接形成菌落，可自動感應(yīng)細(xì)菌生成的二氧化碳物質(zhì)，檢測的靈敏性得到有效提升，可達(dá)到快速診斷的檢驗效果。分枝桿菌培養(yǎng)是在90年代初使用的熒光標(biāo)記系統(tǒng)上配合熒光檢測和二氧化碳?xì)怏w檢測，根據(jù)氣體壓力變化，快速分析細(xì)菌的生物學(xué)特征，采取數(shù)據(jù)處理的方式制作檢驗報告[1]。

2 免疫學(xué)檢測技術(shù)

免疫學(xué)檢驗技術(shù)已經(jīng)較為成熟，其中酶免疫分析法是采用高效酶催化劑與抗原抗體免疫反應(yīng)結(jié)合，當(dāng)酶催化底物發(fā)生有關(guān)化學(xué)反應(yīng)后，溶液顏色變化，可清晰顯示抗原抗體，常用于檢測肺炎球菌和大腸埃希菌。熒光免疫分析在抗原抗體反應(yīng)檢驗中的特異性非常高，使用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，借助熒光顯微鏡進(jìn)行快速觀察，其特異性非常高，但是受限于操作流程繁雜、標(biāo)本保存時間短問題，該項技術(shù)仍然需要進(jìn)行完善。

3 分子生物學(xué)檢測技術(shù)

對于培養(yǎng)難度高或者不能進(jìn)行培養(yǎng)的微生物，可采取分子生物學(xué)檢驗技術(shù)，臨床檢驗中常使用的分子生物學(xué)檢驗技術(shù)有聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和核酸雜交技術(shù)，聚合酶鏈技術(shù)模擬天然的DNA復(fù)制過程，將待檢測基因在數(shù)小時之內(nèi)擴(kuò)增百萬倍，可實現(xiàn)快速檢測。核酸雜交技術(shù)利用核酸復(fù)性、變性特性，根據(jù)堿基對互補原則，固相或液相中形成異質(zhì)雙鏈，使用DNA探針進(jìn)行檢測，該項技術(shù)不受病菌的影響，可快速檢驗出待測細(xì)菌[2]。

4 生物傳感器檢驗技術(shù)

生物傳感器檢驗技術(shù)的操作步驟較為簡單且檢驗準(zhǔn)確性高，可廣泛用于實驗室檢驗中。DNA生物傳感器屬于臨床中應(yīng)用最廣的病毒微生物檢驗傳感器，與核酸檢驗技術(shù)相比，檢驗準(zhǔn)確性更高，在臨床中推廣的難度更小，臨床應(yīng)用的發(fā)展空間較大。

5 生物芯片檢驗技術(shù)

生物芯片檢驗技術(shù)是將蛋白質(zhì)、多肽以及基因片段等生物大分子，固定在支持物上，形成生物大分子點陣，當(dāng)生物大分子與芯片中的探針分子發(fā)生相互作用后，獲取檢測樣品的序列信號以及分子數(shù)量，根據(jù)檢測探針分子雜交信號的強度，可實現(xiàn)高通量快速檢測。生物芯片的探針種類有DNA、蛋白質(zhì)以及細(xì)胞等類型，以DNA芯片為例，可快速有效獲取檢驗物質(zhì)的遺傳信息，用于檢測變異的細(xì)菌、耐藥機制、基因序列抗感染藥物的研究中，基因芯片分析技術(shù)分析速度快，對檢測樣品的污染程度非常小，可進(jìn)行多樣品處理，檢測的樣本用量非常少，一次使用一張芯片，即可對混合感染標(biāo)本進(jìn)行檢驗，能夠在極短的時間內(nèi)獲取大量的檢驗信息。病原微生物發(fā)生變異、種類復(fù)雜會對患者藥物敏感性產(chǎn)生影響，應(yīng)用基因檢測技術(shù)可快速查清患者病情，可為臨床醫(yī)生制定治療方案提供有效的醫(yī)學(xué)診斷信息，能夠減輕患者的治療痛苦。

6 質(zhì)譜檢測技術(shù)

質(zhì)譜是一種與光譜并列的譜學(xué)方法，通常意義是指廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域中通過制備、分離、檢測氣象離子來鑒定化合物的一種專門技術(shù)。應(yīng)用于微生物檢測，具有快速準(zhǔn)確的特點。

7 結(jié)束語

感染性疾病傳播速度加劇，對于人體的身體健康損害較大，醫(yī)學(xué)界為解決這一問題，需要采取快速準(zhǔn)確的微生物檢驗技術(shù)。當(dāng)前計算機技術(shù)發(fā)展非?？?，微生物檢驗技術(shù)可結(jié)合計算機技術(shù)，向自動化、高速化方向發(fā)展。多學(xué)科的融合能夠促使微生物檢驗技術(shù)不斷發(fā)展，可為臨床微生物檢驗提供較高的診療價值。