枸杞島養(yǎng)殖貽貝中諾如病毒污染情況調(diào)查與分析

時(shí)沙沙， 賈添慧， 楊明樹(shù)， 董 蕾， 李 聰， 王永杰， 喻勇新

(上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院，上海 201306)

諾如病毒(Norovirus, NoVs)隸屬于杯狀病毒科、諾如病毒屬，是主要的食源性病毒，能夠在全世界范圍內(nèi)所有年齡段人群中引起非細(xì)菌性急性腸胃炎[1]，常見(jiàn)癥狀包括腹瀉、嘔吐、惡心、腹部絞痛、發(fā)冷、頭痛、脫水和高燒[2]。諾如病毒分為十個(gè)基因類(lèi)群(GI～GX)[3]，其中GI、GII、GIV型諾如病毒能夠感染人類(lèi)，但GIV型諾如病毒很少被檢出，GI、GII型諾如病毒是引起人類(lèi)非細(xì)菌性急性腸胃炎的主要病原體[4]。諾如病毒具有很強(qiáng)的傳染性[5-6]，主要通過(guò)糞-口途徑進(jìn)入人體，直接與被污染的環(huán)境表面或感染者接觸而傳播[7]。在美國(guó)，每年約有550萬(wàn)人被諾如病毒感染，感染案例在31種主要的食源性病毒引起的疫情中占比約58%[8]。雙殼貝類(lèi)通過(guò)濾食作用從養(yǎng)殖的水環(huán)境中獲取食物，從而富集水環(huán)境中原有的或者人類(lèi)排泄到水環(huán)境中的污染物，污染物包含許多造成人類(lèi)疾病暴發(fā)的病原體[9]，濾食特性使雙殼貝類(lèi)成為諾如病毒的主要載體，是引起諾如病毒疫情暴發(fā)的高風(fēng)險(xiǎn)食物[10]。我國(guó)沿海地區(qū)的居民，有生食貝類(lèi)的習(xí)慣，引起諾如病毒疫情暴發(fā)與傳播在我國(guó)尤為嚴(yán)重[11]。近年來(lái)我國(guó)關(guān)于雙殼貝類(lèi)中諾如病毒的檢測(cè)工作主要圍繞牡蠣、貽貝等進(jìn)行[12-14]，但樣本大多來(lái)源于市場(chǎng)，僅少部分研究人員進(jìn)行過(guò)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)雙殼貝類(lèi)的污染狀況調(diào)查[13-14]，且相關(guān)研究中也鮮有將檢測(cè)到的諾如病毒進(jìn)行具體分型。因此中國(guó)沿海地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)貝類(lèi)中諾如病毒的污染情況和基因型分布特點(diǎn)有待進(jìn)一步研究。浙江省舟山市枸杞島貽貝養(yǎng)殖場(chǎng)屬于省級(jí)萬(wàn)畝貽貝養(yǎng)殖示范區(qū)。為了解該養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝諾如病毒的污染程度和基因型分布特點(diǎn)，進(jìn)一步探究主要常住居民活動(dòng)是否對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝中諾如病毒的污染存在一定影響，為我國(guó)貝類(lèi)諾如病毒污染的防控工作和貝類(lèi)養(yǎng)殖方式的優(yōu)化提供數(shù)據(jù)支持，本研究將浙江省舟山市枸杞島后頭灣(約11.81 km2)和龍泉村(約0.92 km2)兩個(gè)主要的海上養(yǎng)殖場(chǎng)作為采樣地，根據(jù)距離人類(lèi)活動(dòng)區(qū)域的遠(yuǎn)近，在每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)設(shè)定近岸和遠(yuǎn)岸采樣區(qū)域，于2019年4月和9月進(jìn)行樣本采集和諾如病毒檢測(cè)，并對(duì)諾如病毒污染率與基因型多樣性進(jìn)行了分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本 厚殼貽貝(Mytiluscoruscus)，采自浙江省舟山市枸杞島貽貝養(yǎng)殖場(chǎng)。

1.1.2 試劑與儀器 RNA酶抑制劑(南京諾維贊生物有限公司)；動(dòng)物組織RNA提取試劑盒(上海捷瑞生物工程有限公司)；一步法逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction， RT-PCR)試劑盒、PCR Master Mix(大連寶生物工程有限公司)；100 bp DNA Ladder(北京天根生化科技有限公司)；FastPre-24 MP組織均質(zhì)器(美國(guó)MP Biomedicals公司)；超凈工作臺(tái)(ACB-4A1，新加坡ESCO公司)；生物安全柜(AC2-4S1-CN，新加坡ESCO科技有限公司)；5331 PCR儀、5382000074恒溫混勻金屬浴、5702R臺(tái)式低溫離心機(jī)(艾本德中國(guó)有限公司)；PowerPac HC電泳儀、ChemiDoc XRS+凝膠成像系統(tǒng)和凝膠成像分析儀(上海伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 采樣點(diǎn)設(shè)計(jì) 根據(jù)2018年11月進(jìn)行的實(shí)地考察情況，在浙江省舟山市枸杞島貽貝養(yǎng)殖場(chǎng)設(shè)定兩種采樣區(qū)域：后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)和龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)，將每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)劃分近岸和遠(yuǎn)岸采樣線，根據(jù)GPS測(cè)量?jī)x測(cè)定的具體位置(圖1)(https://earth.google.com/web/)，在較大的后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)設(shè)定10個(gè)近岸采樣點(diǎn)(A1～A10)及8個(gè)遠(yuǎn)岸采樣點(diǎn)(B1～B8)，同時(shí)在較小的龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)第一次采樣設(shè)置6個(gè)近岸(C1～C6)和6個(gè)遠(yuǎn)岸采樣點(diǎn)(D1～D6)，第二次采樣適當(dāng)增加采樣點(diǎn)，設(shè)置8個(gè)近岸(C1～C8)和8個(gè)遠(yuǎn)岸采樣點(diǎn)(D1～D8)。

1.2.2 樣本采集 于各采樣點(diǎn)采集貽貝并標(biāo)記采樣信息，置于冰上暫時(shí)保存，用于后續(xù)檢測(cè)。第一次采樣，在各采樣點(diǎn)采集11只貽貝樣本，總數(shù)為330只。第二次采樣，在各采樣點(diǎn)采集10只貽貝樣本，總數(shù)為340只。兩次共采集670只貽貝樣本。

1.2.3 樣本預(yù)處理 于超凈工作臺(tái)中進(jìn)行貽貝解剖，取約50 mg的消化腺組織放入已加入RNA酶抑制劑的離心管中，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4 樣本總RNA提取 采用MP組織破碎儀將冷凍保存的消化腺組織破碎均勻并依據(jù)動(dòng)物組織RNA提取試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行總RNA的提取，將提取所得總RNA溶液置于冰上并立即進(jìn)行巢式RT-PCR檢測(cè)。

1.2.5 巢式RT-PCR檢測(cè) 巢式RT-PCR使用諾如病毒GI型引物(COGIF/GISKR和 NGIOF/NGIOR)和GII型引物(COG2F/G2SKR和G2SKF/G2SKR)(見(jiàn)表1)[4,15-16]進(jìn)行，采用瓊脂糖凝膠電泳對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)(GI: 168 bp, GII: 343 bp)。參照逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑盒操作說(shuō)明配制體系，具體反應(yīng)體系如下：取 1 μL逆轉(zhuǎn)錄酶、12.5 μL 2×RT-PCR 緩沖液、1 μL上、下游GI和GII型引物于PCR 反應(yīng)管中，加入1 μL RNA 模板，RNase-free ddH2O 補(bǔ)足至25 μL。第一輪RT-PCR程序?yàn)?0 ℃保持 30 min，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，將單鏈 RNA 反轉(zhuǎn)錄成 cDNA(complementary-DNA)，94 ℃預(yù)變性2 min，30個(gè)循環(huán)：94 ℃變性 0.5 min，55 ℃退火0.5 min，72 ℃延伸0.5 min。將第一輪 RT-PCR 的產(chǎn)物稀釋10倍并取1 μL作為Nested-PCR的模板，Nested-PCR反應(yīng)體系如下：取12.5 μL的2×PCR 緩沖液、1 μL上、下游GI和GII型引物(見(jiàn)表1)、1 μL的模板于PCR反應(yīng)管中，ddH2O補(bǔ)足至25 μL。 Nested-PCR反應(yīng)程序如下：94 ℃預(yù)變性5 min，40個(gè)循環(huán)：94 ℃變性0.5 min，55 ℃退火保持0.5 min，72 ℃延伸0.5 min。最后在72 ℃保溫15 min加poly-A尾，以便進(jìn)行后續(xù)的TA 連接和測(cè)序試驗(yàn)。

圖1 各養(yǎng)殖場(chǎng)采樣點(diǎn)分布示意圖Fig.1 Sampling location of each farma：后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)； b：龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)(第一次采樣)； c: 龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)(第二次采樣)。A1～A10:后頭灣近岸采樣點(diǎn)； B1～B8:后頭灣遠(yuǎn)岸采樣點(diǎn)；C1～C6/C1～C8:龍泉村近岸采樣點(diǎn)； D1～D6/D1～D8：龍泉村遠(yuǎn)岸采樣點(diǎn)；采樣點(diǎn)下方為GPS定位信息a: Houtou Bay farm; b: Longquan Village Farm(First time); c: Longquan Village Farm(Second time). A1-A10: near-shore sampling sites at Houtou Bay; B1-B8: off-shore sampling sites at Houtou Bay; C1-C6/C1-C8: near-shore sampling sites at Longquan Village; D1-D6/D1D8: off-shore sampling sites at Longquan Village location information by GPS of each sites was shown at the bottom of the sampling sites

表1 本研究所用引物

1.2.6 測(cè)序與基因型確定 經(jīng)濃度測(cè)定和電泳檢測(cè)后，將顯示陽(yáng)性條帶的PCR產(chǎn)物送至生工(上海)生物工程有限公司進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序引物為Nested-PCR。測(cè)序成功的序列導(dǎo)入Norovirus Genotyping Tool(http://www.rivm.nl/mpf/norovirus/typingtool)在線軟件中進(jìn)行在線分析，初步確定該株諾如病毒的基因型。

2 結(jié)果與分析

分別在2019年4月和9月對(duì)枸杞島后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)和龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行兩次樣本采集，共檢測(cè)貽貝670只，其中諾如病毒陽(yáng)性率約為9.9%(66/670)。

2.1 第一次采樣結(jié)果

2.1.1 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng) ①諾如病毒檢出率：檢測(cè)貽貝198只，每個(gè)采樣點(diǎn)的樣本檢測(cè)情況如表2所示，其中近岸與遠(yuǎn)岸貽貝樣本諾如病毒陽(yáng)性率分別為11.6%(23/198)和3.5%(7/198)； ②諾如病毒基因型分布：共檢出諾如病毒陽(yáng)性貽貝30只，覆蓋的基因型包括GI.4(43.3%)、GI.3(30%)、GII.3(13.3%)、GII.17(10%)和GII.12(3.3%)(圖2)。

圖2 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)第一次采樣貽貝諾如病毒基因型及所占比例Fig.2 Genotypes and proportion of norovirus in mussels for the first sample at Houtou Bay

表2 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)各采樣點(diǎn)第一次采樣貽貝諾如病毒檢測(cè)結(jié)果

2.1.2 龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng) ①諾如病毒檢出率：檢測(cè)貽貝132只。每個(gè)采樣點(diǎn)的樣本檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。其中近岸與遠(yuǎn)岸樣本諾如病毒陽(yáng)性率分別為9.8%(13/132)和6.1%(8/132)。②諾如病毒基因型分布：檢出諾如病毒陽(yáng)性貽貝21只，覆蓋的基因型包括GII.12(52.4%)、GII.17(19%)、GII.3(14.3%)、GI.3(9.5%)和GII.2(4.8%)(圖3)。

表3 第一次采樣龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)各采樣點(diǎn)貽貝感染諾如病毒檢測(cè)結(jié)果

圖3 龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)第一次采樣貽貝感染諾如病毒基因型及所占比例Fig.3 Genotypes and proportion of norovirus in mussels for the first sample at Longquan Village

2.2 第二次采樣結(jié)果

2.2.1 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng) ①諾如病毒檢出率：檢測(cè)貽貝180只。每個(gè)采樣點(diǎn)的樣本檢測(cè)情況見(jiàn)表4。其中近岸樣本諾如病毒陽(yáng)性率為3.9%(7/180)，遠(yuǎn)岸貽貝未檢出諾如病毒。②諾如病毒基因型分布：共檢出諾如病毒陽(yáng)性貽貝7只，覆蓋GI.3(71.4%)和GII.17(28.6%)兩種基因型(圖4)。

圖4 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)第二次采樣采樣貽貝感染諾如病毒基因型及所占比例Fig.4 Genotypes and proportion of norovirus in mussels for the second sample at Houtou Bay

表4 后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)第二次采樣各采樣點(diǎn)貽貝感染諾如病毒檢測(cè)結(jié)果

2.2.2 龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng) ①諾如病毒檢出率：檢測(cè)貽貝160只。每個(gè)采樣點(diǎn)的樣本檢測(cè)情況如表5所示。其中近岸與遠(yuǎn)岸樣本諾如病毒陽(yáng)性率分別為3.1%(5/160)和1.9%(3/160)。②諾如病毒基因型分布：共檢出諾如病毒陽(yáng)性貽貝8只，均為GI.3(100%)型諾如病毒。

枸杞島的后頭灣和龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)的兩次檢測(cè)結(jié)果表明，四月份共檢測(cè)到51只諾如病毒陽(yáng)性貽貝，九月份僅檢測(cè)到15只諾如病毒陽(yáng)性貽貝。枸杞島兩個(gè)貽貝養(yǎng)殖場(chǎng)中檢測(cè)的諾如病毒均具有較高的基因多樣性(圖5)，涉及6種諾如病毒基因型：GI.3(36.4%)、GI.4(19.7%)、GII.12(18.2%)、GII.17(13.6%)、GII.3(10.6%)和GII.2(1.5%)。

表5 第二次采樣龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)各采樣點(diǎn)貽貝感染諾如病毒檢測(cè)結(jié)果

續(xù)表5

圖5 兩次采樣檢測(cè)的所有諾如病毒基因型及所占比例Fig.5 Genotypes and proportion of noroviruses detected at Gouqi Island

3 討 論

目前，我國(guó)雙殼貝類(lèi)的養(yǎng)殖并未進(jìn)行規(guī)范化管理，養(yǎng)殖區(qū)域水質(zhì)監(jiān)控的方法仍在建設(shè)中，這導(dǎo)致市場(chǎng)上的雙殼貝類(lèi)品質(zhì)參差不齊，加之消費(fèi)者在食用貝類(lèi)時(shí)很少了解其養(yǎng)殖區(qū)域的實(shí)際污染狀況，使得雙殼貝類(lèi)中因諾如病毒污染帶來(lái)的疫情問(wèn)題較為嚴(yán)重。因此，對(duì)貝類(lèi)養(yǎng)殖區(qū)域病原體檢測(cè)數(shù)據(jù)的補(bǔ)充尤為重要[17]。本研究在浙江省舟山市枸杞島后頭灣和龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)，分別對(duì)近岸和遠(yuǎn)岸區(qū)域的貽貝進(jìn)行樣本采集和諾如病毒檢測(cè)，分析各采樣點(diǎn)諾如病毒的檢出率與基因型，以此反映養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)貽貝的諾如病毒污染情況和基因型分布特點(diǎn)，同時(shí)分析養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)距離人類(lèi)活動(dòng)較近區(qū)域以及較遠(yuǎn)區(qū)域的貽貝感染諾如病毒的檢測(cè)結(jié)果，以深入探究養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)貽貝的污染受當(dāng)?shù)鼐用窕顒?dòng)的影響情況。

兩次采樣檢測(cè)的諾如病毒陽(yáng)性率差別較大，經(jīng)進(jìn)一步調(diào)查與分析發(fā)現(xiàn)，每年5至10月是枸杞島當(dāng)?shù)芈糜瓮荆?月處于貽貝生長(zhǎng)發(fā)育旺盛時(shí)期，此階段的絕大部分貽貝已經(jīng)在海里生長(zhǎng)8～9個(gè)月，體內(nèi)諾如病毒富集量達(dá)到較高水平，所以4月采集的貽貝感染諾如病毒檢出率較高，且4月處于當(dāng)?shù)芈糜蔚?，枸杞島養(yǎng)殖場(chǎng)的水環(huán)境處于沒(méi)有外來(lái)游客“干擾”的時(shí)段，因此這些諾如病毒極有可能是當(dāng)?shù)鼐用衽判刮锼斐傻奈廴尽６?至9月是收割貽貝、養(yǎng)殖新苗階段，枸杞島養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)大部分區(qū)域的成熟貽貝均已被收割，貽貝新苗尚未成熟，新苗對(duì)水環(huán)境中的諾如病毒富集時(shí)間較短，有的甚至還未開(kāi)始富集諾如病毒，這使得9月的檢測(cè)結(jié)果與4月相差較大。因此，探究枸杞島養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝感染諾如病毒污染情況以及基因型分布的最佳時(shí)段應(yīng)是每年的1至7月。

整體來(lái)看，養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的貽貝受到人類(lèi)活動(dòng)不同程度的影響，并且該影響與養(yǎng)殖面積具有一定關(guān)系。較大的養(yǎng)殖場(chǎng)，由于地理因素，人類(lèi)活動(dòng)所能覆蓋的養(yǎng)殖區(qū)域有限，對(duì)近岸貽貝影響較大，對(duì)遠(yuǎn)岸貽貝影響較小，使得近岸區(qū)域貽貝的諾如病毒檢出率較高。較小的養(yǎng)殖場(chǎng)，人類(lèi)活動(dòng)區(qū)域覆蓋的養(yǎng)殖面積相對(duì)較大，影響的貽貝面積也隨之增大，使檢測(cè)到的近岸和遠(yuǎn)岸貽貝的諾如病毒差距并不突出。另一方面，面積較大的后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)是捕撈人員進(jìn)出海、游客垂釣、漁民作業(yè)的主要區(qū)域，因此推測(cè)這些人為因素是后頭灣養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝感染諾如病毒檢出率高于龍泉村養(yǎng)殖場(chǎng)的主要原因。

除了近岸、遠(yuǎn)岸貽貝感染諾如病毒檢出率具有“近高遠(yuǎn)低”的趨勢(shì)以外，枸杞島貽貝養(yǎng)殖場(chǎng)中檢測(cè)的諾如病毒也具有較高的基因多樣性。在全部貽貝樣本中，GI.3型諾如病毒所占比例最高，其次是GI.4型，這兩類(lèi)諾如病毒并不是引起人類(lèi)疫情暴發(fā)的主要流行株，因此推測(cè)GI.3和GI.4型諾如病毒可能是人類(lèi)的隱形攜帶株，在人類(lèi)與環(huán)境之間傳播，目前并不會(huì)像主要流行株那樣具有較高的危害性。由于貽貝僅僅是諾如病毒在環(huán)境中傳播的載體，并非其真正的宿主，因此推測(cè)這兩類(lèi)檢出率最高的諾如病毒基因型主要來(lái)自于當(dāng)?shù)鼐用衽欧诺奈鬯蚺判刮?。由于其在養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝中檢出率較高，說(shuō)明GI.3和GI.4型諾如病毒可能在當(dāng)?shù)鼐用耋w內(nèi)攜帶量較高且長(zhǎng)期穩(wěn)定存在。

除GI型諾如病毒外，從貽貝中檢測(cè)到的諾如病毒還有GII.12、GII.17、GII.3和GII.2型，檢出率由高到低。針對(duì)中國(guó)GI和GII型諾如病毒流行情況的研究發(fā)現(xiàn)[18]，GII.4、GII.17和GII.3型諾如病毒占我國(guó)所有諾如病毒基因型數(shù)據(jù)的70%[18]。2014至2015年和2016至2017年冬季，GII.17和GII.2在我國(guó)出現(xiàn)并導(dǎo)致疫情病例持續(xù)增加[19]。GII.17型諾如病毒株已成為亞洲幾個(gè)國(guó)家暴發(fā)急性胃腸炎的主要基因型[20]，我國(guó)諾如病毒檢出率從4.0%上升至79.6%[21]。2016年秋季之前，GII.2是一種罕見(jiàn)的基因型，在中國(guó)感染率低于1%[22]，在全球流型毒株中僅占1.5%[23]，由于缺乏群體免疫性，GII.2型諾如病毒在年幼兒童群體中更易感染[24]。對(duì)不同諾如病毒流行病學(xué)和臨床特征研究發(fā)現(xiàn)，GII.2型諾如病毒暴發(fā)主要發(fā)生在幼兒園、小學(xué)和高中，主要通過(guò)人與人接觸傳播[19]。基于1999至2011年間諾如病毒基因型分析發(fā)現(xiàn)[11]，GII.12(15.1%)的檢出率僅次于GII.4(70%)。本研究中發(fā)現(xiàn)的所有GII型諾如病毒大多為導(dǎo)致疫情暴發(fā)的主要病毒株，這一檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明在非諾如病毒暴發(fā)季，許多諾如病毒基因型仍然在人與人或者人與環(huán)境中持續(xù)存在和傳播，當(dāng)人體中諾如病毒含量較多時(shí)，排泄到環(huán)境中的諾如病毒也在增加，貽貝體內(nèi)的富集量也隨之增加，因此對(duì)環(huán)境和養(yǎng)殖場(chǎng)的貝類(lèi)定期進(jìn)行諾如病毒檢測(cè)，有助于對(duì)人類(lèi)諾如病毒的監(jiān)測(cè)、預(yù)警和防控。

本研究還存在不足之處，首先未充分考慮貽貝養(yǎng)殖周期的影響。不同于全年供應(yīng)量充足的水產(chǎn)市場(chǎng)，養(yǎng)殖場(chǎng)的貝類(lèi)養(yǎng)殖具有周期性，樣本采集需要考慮貽貝生長(zhǎng)周期。當(dāng)養(yǎng)殖場(chǎng)處于旅游景點(diǎn)內(nèi)時(shí)，外來(lái)游客會(huì)干擾原有的養(yǎng)殖環(huán)境，這一影響需作為采樣的重點(diǎn)考慮因素。其次，雖然兩次采樣檢測(cè)已獲得初步結(jié)果，但若想更深入且更全面地探究枸杞島養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)諾如病毒的污染規(guī)律，相關(guān)采樣工作仍需重復(fù)進(jìn)行，并進(jìn)一步將枸杞島養(yǎng)殖場(chǎng)貽貝的諾如病毒污染情況更詳盡地反映出來(lái)。最后是尚未對(duì)當(dāng)?shù)鼐用裢僖夯蚣S便樣本進(jìn)行檢測(cè)。因此在后續(xù)的監(jiān)測(cè)工作中，需盡可能地與當(dāng)?shù)卣疁贤?，嘗試對(duì)當(dāng)?shù)鼐用竦臉颖具M(jìn)行檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果與貽貝感染諾如病毒情況進(jìn)行對(duì)比，進(jìn)一步確認(rèn)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)諾如病毒的來(lái)源，以期為我國(guó)貝類(lèi)養(yǎng)殖和貝類(lèi)中諾如病毒的防控工作提供數(shù)據(jù)支持和監(jiān)測(cè)思路。