不同品種山銀花花期有效成分含量研究

石前　庾韋花　蒙平　張向軍　潘穎南　樊永生

摘要 [目的]對4個廣西本地山銀花藥材的質(zhì)量及從河南引種的1個金銀花品種（對照）進行品質(zhì)評價，研究不同品種山銀花不同采收期與有效成分含量的關系，為廣西山銀花資源合理開發(fā)和綜合利用提供依據(jù)。[方法]采收4個品種山銀花白蕾期、銀花期、金花期的花器官進行處理，采用高效液相色譜法，分別測定其木犀草苷、綠原酸、氨基酸總量等有效成分含量。[結(jié)果]對比4個品種山銀花不同花期的有效成分含量，其中木犀草苷含量和氨基酸總量最高的是紅-RD，分別達0.023%和13.000%，但低于對照品種;木犀草苷含量最低的是HX-RD，僅為0.001%;氨基酸總量最低的是MH-RD，為8.240%;綠原酸含量最高的是HN-RD，達6.587%;最低的是MH-RD，僅為2.400%;不同品種之間的有效成分含量呈現(xiàn)顯著差異。從不同采收期來看，白蕾期的氨基酸含量均最高，木犀草苷含量不同采收期差異不顯著，綠原酸不同采收期含量差異水平不一。[結(jié)論]作為廣西鄉(xiāng)土品種，紅-RD和HN-RD的有效成分含量高，有很好的培育價值;對照品種H-RD（河南引進）是優(yōu)良的金銀花品種，適合在廣西栽培;山銀花最佳采收期為白蕾期，其有效成分含量最高，品質(zhì)最好。

關鍵詞 山銀花;花期;采收期;有效成分;含量測定

中圖分類號 R284文獻標識碼 A文章編號 0517-6611（2020）22-0170-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.22.044

Study on the Contents of Active Components of Different Varieties of Lonicera japonica Thunb. in the Flowering Stage

SHI Qian，YU Wei-hua，MENG Ping et al

（Institute of Biotechnology， Guangxi Academy of Agricultural Sciences， Nanning，Guangxi 530007）

Abstract [Objective]To study the relationship between different harvesting periods and the content of effective components of different varieties of Lonicera japonica by evaluate the quality of four Guangxi Lonicera japonica and one Lonicera japonica （CK） introduced from Henan， so as to provide the basis for the rational development and comprehensive utilization of Guangxi Lonicera japonica resources. [Method]The flower organs of four varieties were collected and treated in the different growing stage， HPLC was used to determine the contents of galuteolin， chlorogenic acid and total amino acid. [Results] By comparing the contents of active components in the four varieties of Lonicera japonica at different flowering stages， red-RD had the highest contents of galuteolin and the total amount of amino acid， but lower than the CK. The lowest contents of galuteolin was HX-RD of 0.001%， the lowest contents of amino acid was MH-RD of 8.240%， the highest contents of chlorogenic acid was HN-RD which up to 6.587%， the lowest was MH-RD which just at 2.400%.The contents of active components were significantly different among different varieties.From the perspective of different harvesting periods， the content of amino acids in the white bud stage was the highest， the content of luteolin was not significantly different at different harvesting stages， and the level of difference in the content of chlorogenic acid was different at different harvesting stages. [Conclusion]As native varieties in Guangxi， red-RD and HN-RD have high content of effective components and good breeding value. The H-RD （introduced from henan province） is suitable for cultivation in Guangxi. White bud period was the best harvest period for Lonicera japonica which has the highest content of active components and the best quality.

Key words Lonicera japonica Thunb.;Flowering stage;Harvest time;Active components;Content determination

基金項目 廣西農(nóng)業(yè)科學院基本科研業(yè)務專項（桂農(nóng)科2020YM64）;廣西忻城金銀花試驗站項目（桂TS201428）;廣西農(nóng)業(yè)科學院優(yōu)勢學科團隊項目（2015YT56）。

作者簡介 石前（1982—），女，湖南衡陽人，高級工程師，碩士，從事藥用植物利用研究。*通信作者，副研究員，碩士，從事特色中藥材組織培養(yǎng)及品種選育研究。

收稿日期 2020-02-10

金銀花（Flos lonicerae），又名忍冬花、銀花、對花、雙花，為忍冬科忍冬屬忍冬（Lonicera japonica Thunb.）半常綠多年生藤本灌木，其干燥花蕾是我國大宗常用藥材，具有清熱解毒、疏散風熱的作用，用于治療外感風熱或溫病初起、熱毒下痢、肺熱咳嗽等[1-2]。有關金銀花化學成分以及藥效藥理研究已探明，金銀花含有揮發(fā)油、黃酮類、有機酸、萜類、多酚類、氨基酸和維生素等多種成分，并且金銀花有效成分會受到品種、產(chǎn)地、部位及加工方式的影響[3-8]。近年來，大量研究集中在金銀花有效成分測定方面，研究表明，金銀花的抑菌、抗病毒的活性成分是其有機酸類和黃酮類[9-11]。2010年版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《藥典》）規(guī)定以其綠原酸和木犀草苷含量作為判斷金銀花品種品質(zhì)優(yōu)劣的指標[1]。

我國主要金銀花種質(zhì)資源有忍冬屬植物98種、5亞種、18變種，可供藥用的達49種，作為中藥金銀花流通及使用的品種非常復雜[2-3]。自2005年版和2010年版《藥典》中將金銀花和山銀花作為2個品種[1-2]分別收載后，金銀花的主產(chǎn)區(qū)變?yōu)樯綎|、河南和河北巨鹿，這一變動使得以栽培山銀花為主的我國西南地區(qū)面臨著巨大的市場挑戰(zhàn)。在保護好地方品種的同時，如何篩選和培育本土優(yōu)質(zhì)山銀花品種對包括廣西在內(nèi)的西南地區(qū)勢在必行。該試驗通過對廣西本地栽培的不同品種山銀花和區(qū)外引進的金銀花不同花期的有效成分含量進行對比分析，為篩選出廣西本地優(yōu)質(zhì)栽培品種以及山銀花資源合理開發(fā)和綜合利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

從廣西區(qū)內(nèi)外收集并種植于廣西農(nóng)業(yè)科學院生物所種質(zhì)資源圃內(nèi)的5個山銀花品種，包括H-RD、HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD。試驗材料來源見表1。

1.2 試驗方法

對HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD這4個山銀花品種及H-RD（對照）在不同花期（白蕾期、銀花期、金花期）分別進行花器官采摘、殺青烘干處理，樣品送廣西測試中心進行木犀草苷、綠原酸、氨基酸總量的測定。氨基酸總量采用茚三酮比色法進行測定;綠原酸、木犀草苷含量采用高效液相色譜法測定，參照《藥典》2005年版一部所收載山銀花的質(zhì)量標準項下的含量測定方法。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用DPS統(tǒng)計軟件和Excel軟件進行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種不同花期山銀花含量測定

從表2可以看出，木犀草苷含量最高的是H-RD（對照），最高達0.034%，其次是紅-RD（10～12號），最低的是HX-RD（7～9號），僅為0.001%;綠原酸含量最高的是HN-RD（4～6號），最高達6.587%，其次是H-RD（對照），最低的是MH-RD（13～15號），僅為2.400%;氨基酸總量最高的是H-RD（對照），最高達13.747%，最低的是MH-RD，僅為8.240%。從不同采收期來看，木犀草苷、綠原酸、氨基酸含量最高值均出現(xiàn)在白蕾期。

2.2 不同品種不同花期山銀花綠原酸含量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，HN-RD（4～6號）、HX-RD（7～9號）、紅-RD（10～12號）、MH-RD（13～15號）這4個山銀花品種之間的綠原酸含量達到顯著差異水平。HN-RD的綠原酸含量最高，MH-RD的綠原酸含量最低。

從不同采收期來看，同一品種不同采收期綠原酸差異水平不一，其中，HN-RD的3個不同采收期的綠原酸含量差異顯著;HX-RD金花期與銀花期含量差異顯著，銀花期與白蕾期含量差異顯著;紅-RD金花期與銀花期含量差異顯著;MH-RD與H-RD（對照）不同采收期的綠原酸含量差異不顯著。4個山銀花品種中，HN-RD白蕾期的綠原酸含量最高;隨著山銀花開放，綠原酸含量逐漸降低;HX-RD為銀花期綠原酸含量最高;紅-RD則是金花期綠原酸含量最高;MH-RD的3個時期綠原酸含量不變。

2.3 不同品種不同花期山銀花木犀草苷含量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，4個山銀花品種之間的木犀草苷含量差異水平表現(xiàn)不一，木犀草苷含量較高的紅-RD（10～12號）和H-RD（對照1～3號），兩者差異不顯著，HN-RD（4～6號）和MH-RD（13～15號）差異不顯著，其余品種之間木犀草苷含量差異達到顯著水平。

從不同采收期來看，4個品種的不同采收期木犀草苷含量差異均不大，基本都呈現(xiàn)不顯著差異;4個山銀花品種中，HN-RD、紅-RD、MH-RD 3個品種均是金花期的木犀草苷含量最高;HX-RD品種為銀花期木犀草苷含量最高。木犀草苷含量隨著山銀花開放，含量逐漸升高，在金花期和銀花期達到最高。

2.4 不同品種不同花期山銀花氨基酸總量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，氨基酸總量較高的是H-RD（對照）和紅-RD（10～12號），4個品種的氨基酸總量與對照差異均達顯著水平，紅-RD和MH-RD（13～15號）之間的氨基酸總量也呈現(xiàn)顯著差異，其余品種之間氨基酸總量差異不明顯。

從不同采收期來看，4個品種不同采收期氨基酸總量差異不大，只有紅-RD不同花期氨基酸總量差異顯著，其余品種不同花期氨基酸總量差異均不顯著。從總體上來看，4個品種均是白蕾期的氨基酸總量最高，銀花期最低。

3 結(jié)論與討論

對HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD這4個山銀花品種及H-RD（對照）不同花期的有效成分含量進行對比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，木犀草苷含量和氨基酸總量最高的是紅-RD，但低于對照品種，木犀草苷含量最低的是HX-RD，氨基酸總量最低的是MH-RD;綠原酸含量最高的是HN-RD，最低的是MH-RD;HX-RD的3種有效成分均較低。4個品種之間的有效成分含量達顯著差異水平?？偟膩碚f，作為廣西鄉(xiāng)土山銀花品種，紅-RD和HN-RD的有效成分含量高，有很好的培育價值，對照品種H-RD（河南引進）是優(yōu)良的金銀花品種，適合在廣西栽培。

從4個山銀花品種不同采收期來看，氨基酸總量在白蕾期均最高，隨著山銀花開放，氨基酸總量逐漸降低，銀花期最低，到金花期又呈現(xiàn)上升趨勢;木犀草苷含量則隨著山銀花開放，含量逐漸升高，在金花期和銀花期達到最高;而綠原酸含量不同品種不同采收期差異水平不一。綜合以上不同采收期有效成分對比結(jié)果，山銀花最佳采收期選擇白蕾期為宜，其有效成分氨基酸總量均最高，木犀草苷含量不同采收期差異不顯著，綠原酸含量不同采收期含量差異水平不一。

中藥材栽培過程中既要努力達到產(chǎn)量最高，又要努力實現(xiàn)有效成分的最優(yōu)。由于山銀花以花為藥用部位，花期集中，造成了采摘不及時、藥材質(zhì)量參差不齊等一系列問題。 因此，山銀花的適宜采收期是備受關注的重點。劉志陽[12]和張燕等[13]分別在不同時間對不同產(chǎn)區(qū)金銀花的最佳采收期進行了研究，均認為金銀花最佳的采收期為“二白”至“大白”期，這與該研究結(jié)果一致。山銀花優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)研究需多因素、多角度進一步深入研究，并制定穩(wěn)定可控的標準化操作規(guī)程來實現(xiàn)。

參考文獻

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