抗宮炎片劑的質(zhì)量狀況分析及建議

鄔秋萍，吳燕紅，付輝政，姜軍華，許妍

江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，南昌 330029

抗宮炎片現(xiàn)收載于《中國(guó)藥典》2015 年版一部，為婦科類止帶劑下清熱化濕藥，由廣東紫珠干浸膏、益母草干浸膏、烏藥干浸膏三味藥組成，具有清熱，祛濕，化瘀，止帶之功效［1］。臨床用于濕熱下注所致的帶下病，癥見赤白帶下、量多臭味，宮頸糜爛見上述癥候者［2］?？箤m炎分散片由抗宮炎片改劑型研制而來(lái)，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

本次國(guó)家藥品抽檢共抽取145 批次樣品，包括片劑133 批次，分散片12 批次，涉及批準(zhǔn)文號(hào)12個(gè)（占總批準(zhǔn)文號(hào)80%）、生產(chǎn)企業(yè)9 家（占總生產(chǎn)企業(yè)81.8%），覆蓋31 個(gè)省、自治區(qū)、直轄市，其中生產(chǎn)企業(yè)16 批、經(jīng)營(yíng)企業(yè)117 批、醫(yī)療機(jī)構(gòu)12 批。首先，對(duì)不同抽樣環(huán)節(jié)的制劑進(jìn)行法定檢驗(yàn)，再以原料藥和制劑的質(zhì)量問(wèn)題為導(dǎo)向，在參考文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上［3-5］，圍繞真實(shí)性、有效性、均一性等方面對(duì)抗宮炎片劑開展探索性研究，對(duì)現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行補(bǔ)充完善，從而對(duì)抗宮炎片劑的整體質(zhì)量進(jìn)行客觀評(píng)價(jià)，并為該制劑的監(jiān)督管理和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高提供參考。同時(shí)，希望存在問(wèn)題的相關(guān)企業(yè)通過(guò)評(píng)價(jià)性抽檢結(jié)果的反饋信息，了解自身產(chǎn)品質(zhì)量現(xiàn)狀，持續(xù)地改進(jìn)和提高產(chǎn)品質(zhì)量。

1 儀器與試藥

SHIMADZU LC-20AT 高效液相色譜儀（Labsolution 工作站，PDA 檢測(cè)器）；Sartorius BSA 124S-CW 電子天平；Sartorius BS 223S 電子天平；Sartorius BT 25S 電子天平。

對(duì)照藥材烏藥（批號(hào)121096-201405）、益母草（批號(hào)120912-201008）及對(duì)照品去甲異波爾定（批號(hào)111825-201402，含量以95.7%計(jì)）、連翹酯苷B（批號(hào)111811-201002，含量以93.9%計(jì)）、金石蠶苷（批號(hào)111812-201303，含量以96.9%計(jì)）、鹽酸水蘇堿（批號(hào)110712-201513）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。硅膠G 薄層板購(gòu)于青島海洋化工廠分廠，中性氧化鋁購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，超純水為Milli-Q Direct16 超純水儀制備，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)

2.1 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

抗宮炎片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為《中國(guó)藥典》2015 年版一部，抗宮炎分散片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)共3 個(gè)，本次抽檢僅涉及其中2 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目各不相同，詳見表1。

表1 抗宮炎片劑的現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.2 標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)結(jié)果

對(duì)9 家生產(chǎn)企業(yè)共145 批次樣品，按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)性狀、鑒別、檢查及含量測(cè)定等項(xiàng)目，結(jié)果143批次合格（合格率為98.6%），2 批次抗宮炎片不合格（不合格率為1.4%），不合格樣品涉及D 和F 兩家企業(yè)各1 批樣品，不合格項(xiàng)目均為連翹酯苷B 含量不合格，由表2 可以看出，不同生產(chǎn)企業(yè)連翹酯苷B 和金石蠶苷含量測(cè)定結(jié)果差異較大，表明不同生產(chǎn)企業(yè)投料用的廣東紫珠干浸膏質(zhì)量差異較大。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)

對(duì)法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)較多，檢驗(yàn)項(xiàng)目不統(tǒng)一；項(xiàng)目設(shè)置不合理、不完善，如抗宮炎分散片（標(biāo)準(zhǔn)YBZ03152009）中僅測(cè)定鹽酸水蘇堿的含量，對(duì)君藥廣東紫珠未進(jìn)行定量控制，可能存在偽品投料情況，且未設(shè)置烏藥的TLC 鑒別項(xiàng)和含量測(cè)定項(xiàng)，難以有效控制烏藥的質(zhì)量；檢測(cè)指標(biāo)專屬性差，如抗宮炎分散片（標(biāo)準(zhǔn)YBZ03152009）設(shè)置了鹽酸水蘇堿的TLC 鑒別和含量測(cè)定項(xiàng)，但鹽酸水蘇堿為廣東紫珠和益母草共有成分［6,7］，而未設(shè)置益母草專屬性定性或定量測(cè)定項(xiàng)目，難以對(duì)益母草質(zhì)量進(jìn)行有效控制。

3 探索性研究及分析

3.1 有效性研究

3.1.1 烏藥薄層色譜鑒別的修訂/增訂及統(tǒng)一烏藥理氣止痛，為方中之佐藥，抗宮炎片及分散片（標(biāo)準(zhǔn)YBZ07532009）中設(shè)置了烏藥的薄層鑒別項(xiàng)，但兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法不一致，故參照藥典標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其方法進(jìn)行了修訂統(tǒng)一。具體方法如下：取本品適量，包衣片除去包衣，研細(xì)，取3 g，加甲醇25 mL，加熱回流30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL，加熱使溶解，用三氯甲烷振搖提取2 次，每次20 mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL 使溶解，作為供試品溶液。另取烏藥對(duì)照藥材2 g，加水煎煮30 min，離心，取上清液濃縮至約20 mL，自“用三氯甲烷振搖提取2 次”起，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2015 年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 μL、對(duì)照藥材溶液4 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶20∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。按上述方法進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果145 批次樣品中10 批次抗宮炎分散片未檢出烏藥，不合格率為6.9%，且10 批次樣品均來(lái)自生產(chǎn)廠家H。

3.1.2 益母草的薄層色譜鑒別的修訂/增訂及統(tǒng)一益母草為方中臣藥，抗宮炎片及分散片（標(biāo)準(zhǔn)YBZ03152009）中設(shè)置了以鹽酸水蘇堿為對(duì)照的薄層鑒別項(xiàng)，但鹽酸水蘇堿為廣東紫珠和益母草的共有成分，專屬性不強(qiáng)，故參照文獻(xiàn)［8］新建了以益母草對(duì)照藥材和鹽酸水蘇堿對(duì)照品為指標(biāo)的薄層鑒別方法，并對(duì)其方法進(jìn)行了統(tǒng)一。具體方法如下：取本品適量，包衣片除去包衣，研細(xì)，取2 g，加乙醇50 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液加在中性氧化鋁柱（100～200 目，5 g，內(nèi)徑為2 cm）上，用乙醇20 mL 洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖? mL 使溶解，作為供試品溶液。取益母草對(duì)照藥材1 g，加水100 mL 煎煮30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?0 mL使溶解，按供試品溶液的制備方法，取乙醇液自“加在中性氧化鋁柱……”起操作，制成對(duì)照藥材溶液；另取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL 含2 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2015 年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材及對(duì)照品溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以乙酸乙酯-無(wú)水乙醇-甲酸（3∶2∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，在105℃加熱10 min 使薄層板上殘留甲酸完全揮盡，放冷，噴以稀碘化鉍鉀試液-1%三氯化鐵乙醇溶液（3∶2）后立即冷風(fēng)吹干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)。按上述方法進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果145 批次樣品均檢出益母草和鹽酸水蘇堿，合格率為100%。

3.1.3 廣東紫珠中連翹酯苷B 和金石蠶苷的含量測(cè)定廣東紫珠為方中君藥，連翹酯苷B 和金石蠶苷為其主要活性成分［9］，此次被抽樣品中，僅抗宮炎片設(shè)置了連翹酯苷B 和金石蠶苷的含量測(cè)定，分散片僅一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置了紫珠苷（連翹酯苷B）的含量，但提取方法各異，限度差異也較大。因此，參照抗宮炎片標(biāo)準(zhǔn)對(duì)抗宮炎片劑中連翹酯苷B 和金石蠶苷的含量測(cè)定方法及其限度進(jìn)行了修訂統(tǒng)一?？箤m炎分散片的限度根據(jù)處方量折算，暫擬定為連翹酯苷B 不得少于2.0 mg/片（廠家H）和3.0 mg/片（廠家I）；金石蠶苷不得少于1.0 mg（廠家H）和1.5 mg/片（廠家I）。經(jīng)檢驗(yàn)：133 批次抗宮炎片樣品中有2 批次不合格，12 批次抗宮炎分散片樣品全部不合格，尤其是H 廠家的抗宮炎分散片均未檢出連翹酯苷B 和金石蠶苷，抗宮炎片劑總合格率為90.3%，各企業(yè)測(cè)定結(jié)果見表2。

表2 不同企業(yè)連翹酯苷B和金石蠶苷含量測(cè)定結(jié)果 mg/片

12 批次抗宮炎分散片樣品均低于擬定限度，分析原因?yàn)镠 廠家生產(chǎn)的分散片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中廣東紫珠僅設(shè)有薄層鑒別而未設(shè)有連翹酯苷B 和金石蠶苷含量控制項(xiàng)，造成法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)與探索性研究結(jié)果不一致，說(shuō)明法定標(biāo)準(zhǔn)廣東紫珠薄層鑒別方法專屬性不強(qiáng)，無(wú)法控制本品的質(zhì)量，導(dǎo)致生產(chǎn)企業(yè)可能使用了廣東紫珠藥材混淆品投料生產(chǎn)。I 廠家生產(chǎn)的分散片，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中僅設(shè)有連翹酯苷B 的含量測(cè)定，但法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)與探索性研究結(jié)果不一致，原因?yàn)榉ǘ?biāo)準(zhǔn)限度比按《中國(guó)藥典》2015 年版一部抗宮炎片處方量折算的擬定限度低1 倍，兩種方法前處理又不一致，且法定標(biāo)準(zhǔn)未對(duì)金石蠶苷進(jìn)行控制。

3.1.4 烏藥中去甲異波爾定的含量測(cè)定烏藥主要含有揮發(fā)油、異喹啉生物堿及呋喃倍半萜及內(nèi)酯等化學(xué)成分，其中生物堿類成分為其主要活性成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其具有抗菌、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗氧化等廣泛的藥理活性［10,11］。原標(biāo)準(zhǔn)無(wú)烏藥含量測(cè)定項(xiàng)，處方中烏藥干浸膏是烏藥藥材經(jīng)水提取得到，研究表明其主要成分以異喹啉生物堿去甲異波爾定為主［12］，為更好地控制抗宮炎制劑中烏藥質(zhì)量，參照《中國(guó)藥典》2015 年版一部烏藥藥材中去甲異波爾定的含量測(cè)定方法，新建了抗宮炎片劑烏藥中去甲異波爾定的HPLC 含量測(cè)定方法，并對(duì)其限度按制劑處方量進(jìn)行了統(tǒng)一。

《中國(guó)藥典》2015 年版一部烏藥的限度為“含去甲異波爾定不得少于0.40%”，烏藥干浸膏為水煎煮液濃縮制備而成，根據(jù)企業(yè)調(diào)研得知烏藥實(shí)際生產(chǎn)中去甲異波爾定轉(zhuǎn)移率在10～20%之間，故轉(zhuǎn)移率按10%計(jì)，暫擬定抗宮炎片限度為規(guī)格（1）和（2）分別不得少于0.28 mg/片和0.56 mg/片，分散片限度為廠家H、I 分別不得少于0.28 mg/片、0.42 mg/片。按新建的含量測(cè)定方法檢驗(yàn)，結(jié)果133 批抗宮炎片樣品僅14 批合格，119 批不合格，不合格率高達(dá)89.5%；12 批分散片樣品僅2 批合格，其余10 批樣品中均未檢出去甲異波爾定，含量為0，不合格率高達(dá)83.3%。各企業(yè)含量測(cè)定結(jié)果見表3。

表3 不同企業(yè)去甲異波爾定含量測(cè)定結(jié)果

由表3 結(jié)果分析，133 批次抗宮炎片119 批次不合格，涉及5 家生產(chǎn)企業(yè)，D 廠家和E 廠家不合格率均為100%，C 廠家不合格率達(dá)97.8%，A 廠家和G 廠家全部樣品均合格。從133 批片劑7 家生產(chǎn)企業(yè)的箱式圖（詳見圖1）看，不同企業(yè)樣品及同一企業(yè)不同批次樣品中去甲異波爾定含量差異均較大。說(shuō)明同一企業(yè)和不同企業(yè)間所用烏藥藥材原料質(zhì)量參差不齊。12 批次分散片中10 批次不合格且均未檢出去甲異波爾定，不合格樣品均來(lái)自H 廠家，說(shuō)明該企業(yè)所用烏藥藥材原料不正確或未投料生產(chǎn)。

圖1 不同企業(yè)抗宮炎片去甲異波爾定含量分布箱式圖

3.2 整體質(zhì)量控制研究

前面已建立的廣東紫珠和烏藥干浸膏含量測(cè)定方法，但僅針對(duì)個(gè)別指標(biāo)成分，為了進(jìn)一步對(duì)抗宮炎片劑的整體質(zhì)量進(jìn)行控制，參照《中國(guó)藥典》2015 年版一部抗宮炎片標(biāo)準(zhǔn)中指紋圖譜的方法，建立了抗宮炎片劑的指紋圖譜方法。

結(jié)果145 批次樣品涉及9 家企業(yè)，除H 廠家生產(chǎn)的10 批抗宮炎分散片未檢測(cè)到廣東紫珠特征成分連翹酯苷B 和金石蠶苷，同時(shí)未檢出烏藥中特征成分去甲異波爾定外，其它樣品均合格。不同企業(yè)間、同一企業(yè)不同批次之間相似度在0.91～0.99之間。提示：各企業(yè)所用原料質(zhì)量差異大，同一企業(yè)不同批次間差異顯著。

4 討論

4.1 總體評(píng)價(jià)

綜合上述檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，抗宮炎片劑總體質(zhì)量一般，按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，145 批次樣品2 批次連翹酯苷B 不合格，合格率為98.6%，但按探索性研究方法進(jìn)行檢驗(yàn)，僅有14 批次抗宮炎片合格，抗宮炎分散片全部不合格，合格率僅為9.7%。

4.2 主要問(wèn)題及原因分析

綜合法定檢驗(yàn)和探索性研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)抗宮炎片劑主要存在以下幾方面問(wèn)題：首先，發(fā)現(xiàn)存在原料未投料或使用混淆品投料的重大問(wèn)題，如H 廠家生產(chǎn)的10 批次樣品均未檢測(cè)到廣東紫珠和烏藥的特征成分，可能原因?yàn)閺V東紫珠使用大葉紫珠、裸花紫珠等混淆品投料，該企業(yè)所用烏藥藥材原料不正確或可能未投料生產(chǎn)。其次，現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較多且不統(tǒng)一，部分標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置不完善，檢測(cè)指標(biāo)專屬性差、設(shè)置不合理，含量限度設(shè)置不合理等。第三，原藥材存在非藥用部位投料的問(wèn)題，如烏藥使用莖枝，質(zhì)老、不成紡錘狀的直根等非藥用部位投料，研究發(fā)現(xiàn)9 家生產(chǎn)企業(yè)僅3 家企業(yè)烏藥中特征成分去甲異波爾定含量全部合格，4 家企業(yè)全部樣品均不合格。

4.3 建議

基于以上發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，提出以下建議：建議完善抗宮炎片劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立以益母草對(duì)照藥材為指標(biāo)的專屬性薄層鑒別方法，增加烏藥中去甲異波爾定的含量測(cè)定項(xiàng)，統(tǒng)一修訂抗宮炎片劑中烏藥、益母草的薄層鑒別及廣東紫珠、烏藥的含量測(cè)定項(xiàng)，加強(qiáng)整體質(zhì)量控制；建議有關(guān)監(jiān)管部門對(duì)涉嫌違法違規(guī)生產(chǎn)的企業(yè)留樣進(jìn)行核查；建議政府加強(qiáng)企業(yè)GMP 核查中原藥材的監(jiān)查，引導(dǎo)、規(guī)范企業(yè)生產(chǎn)，企業(yè)加強(qiáng)對(duì)中藥材及飲片專業(yè)鑒定人才的培養(yǎng)，提高從業(yè)人員的業(yè)務(wù)素質(zhì)，從源頭防止劣質(zhì)藥材；建議企業(yè)建立廣東紫珠和烏藥GAP 種植基地。