絞股藍(lán)的化學(xué)成分和藥理作用及應(yīng)用研究新進(jìn)展

沈子琳，王振波，侯會(huì)芳，張 莉*，黃建軍*

（1.山東大學(xué)威海校區(qū)，海洋學(xué)院，威海264209；2.參園莊生物科技股份有限公司，威海264211）

絞股藍(lán)(Gynostemma Pentaphyllum(Thunb.)Makino)是葫蘆科、絞股藍(lán)屬草質(zhì)攀援植物，又名七葉膽、五葉參等，味甘、苦，性寒，歸肺、脾、腎經(jīng)。1986年，絞股藍(lán)被科技部列為“星火計(jì)劃”中待開發(fā)的第一位的“名貴中藥材”；2002年被衛(wèi)生部納入保健品名錄。現(xiàn)有研究表明，絞股藍(lán)的主要化學(xué)成分為皂苷、黃酮類化合物、多糖、氨基酸和多種微量元素，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理活性，如降血糖血脂、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、保護(hù)肝臟及心血管、抗氧化等作用。2006年至今已有9篇有關(guān)絞股藍(lán)的化學(xué)成分和藥理活性的綜述文章，但對(duì)其臨床應(yīng)用報(bào)道較少，在此基礎(chǔ)上，本文結(jié)合近幾年年新發(fā)表研究性論文，對(duì)其化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用作一綜述，為絞股藍(lán)的進(jìn)一步開發(fā)研究提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1 皂苷類

絞股藍(lán)中主要含達(dá)瑪烷型皂苷。1976年日本人永井正博等在絞股藍(lán)中分離得到了人參二醇和2α-羥基人參二醇，首次揭示了絞股藍(lán)中含有達(dá)瑪烷型皂苷類成分[1]，1976至2011年間，共分離得到165個(gè)絞股藍(lán)皂苷[2]。至2016年，又有一些新的皂苷被分離鑒定，現(xiàn)已明確結(jié)構(gòu)的絞股藍(lán)皂苷共201個(gè)[3]。2018年，周文超等人依次采用硅膠柱層析、超高效液相制備等多種色譜分離技術(shù)，首次從絞股藍(lán)種子中分離純化和鑒定得到葫蘆烷型皂苷單體化合物[4]。

1.2 黃酮類

目前有關(guān)絞股藍(lán)中黃酮類化合物的研究報(bào)道尚少。絞股藍(lán)中總黃酮含量為2%～5%，截至2014年，已報(bào)道的黃酮類成分僅有商陸素、蘆丁及槲皮素等10余種[5]。此后，石嫚嫚等首次在絞股藍(lán)全草中分離得到黃酮類化合物山奈酚-3-O-[2’-反式-香豆酰基-3’-O-β-D-葡萄糖基-3’-O-β-D-葡萄糖蕓香苷][6]。 王玉榮等首次在絞股藍(lán)屬中發(fā)現(xiàn)4’-O-甲基-山奈酚-3-O-蕓香糖[7]。

1.3 萜類

以前相關(guān)文獻(xiàn)中均很少出現(xiàn)對(duì)絞股藍(lán)中萜類成分的研究報(bào)道，2018年，Wang等通過多種色譜方法 （包括HPLC，Sephadex LH-20，硅膠和C18反相硅膠）進(jìn)行分級(jí)分離，得到12種三萜，并通過核磁共振（NMR），高分辨率質(zhì)譜（HR-MS），紅外光譜（IR），旋光度和化學(xué)轉(zhuǎn)化對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析[8]。

1.4 多糖

絞股藍(lán)多糖是絞股藍(lán)中另一種含量較多的化學(xué)成分，因此對(duì)絞股藍(lán)多糖的研究也日益受到人們的關(guān)注。在之前的研究中，馬麗萍等對(duì)絞股藍(lán)不同部位多糖含量測(cè)定的結(jié)果表明絞股藍(lán)葉中多糖含量為 (1.78±0.6)%，莖中多糖的含量為(0.84±0.23)%，全草中多糖含量葉高于莖[9]。王昭晶等對(duì)堿提絞股藍(lán)水溶性多糖進(jìn)行了研究，經(jīng)葡聚糖凝膠(G-100)柱層析檢測(cè)其糖分布情況，表明其可能由兩種多糖組成，其中一種含有結(jié)合蛋白質(zhì)[10]。此后，宋淑亮等對(duì)絞股藍(lán)多糖進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，共分離出了3種絞股藍(lán)多糖Gps-2、Gps-3和Gps-4，并對(duì)其中的兩種Gps-2、Gps-3進(jìn)行了深入的研究，確定了Gps-2的分子量為10700Dal，Gps-3的分子量為9100 Dal[11]。2018年，吳秀麗等人采用水加熱回流提取法對(duì)絞股藍(lán)中多糖進(jìn)行提取，采用蒽酮-硫酸比色法對(duì)不同產(chǎn)地絞股藍(lán)中多糖含量進(jìn)行測(cè)定，不同產(chǎn)地絞股藍(lán)總多糖含量為:陜西＞內(nèi)蒙古＞云南＞江西＞四川＞廣東＞湖北＞福建[12]。

1.5 氨基酸類

已有研究表明，絞股藍(lán)含有18種氨基酸，其中包含了8種人體必需氨基酸[13]，總氨基酸含量達(dá)到6.5824 μg·g-1[14]。鄧世林等的研究發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)中賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸的含量都遠(yuǎn)高于多種果蔬[15]。最近，馬赟等建立了UFLC-QTRAP-MS/MS法同時(shí)測(cè)定絞股藍(lán)中11種氨基酸類成分的含有量，為其內(nèi)在質(zhì)量的綜合評(píng)價(jià)和全面控制提供了科學(xué)依據(jù)[16]。

1.6 微量元素

絞股藍(lán)中微量元素含量因產(chǎn)地而異，但各地生產(chǎn)的絞股藍(lán)測(cè)定結(jié)果表明，絞股藍(lán)含有23種無機(jī)元素，其中含13種人體必需的微量元素和鈣、磷、鉀、鈉、鎂等5種人體必需的常量元素[17]。陳劍平等從絞股藍(lán)中測(cè)定了19種微量元素，其中含量最高的為Ca，達(dá)23352μg/g，其次為 Mg，達(dá) 3181μg/g，第三為 P，含量達(dá)2900μg/g，最低的為Co，僅為0.38μg/g,這19種無機(jī)元素的含量依次為:Ca＞Mg＞P＞Al＞Fe＞Ti＞Sr＞Ba＞Mn＞B＞Zn＞Cu＞Ni＞Pb＞Cr＞V＞ Li＞Cd＞Co[18]。

1.7 其他

絞股藍(lán)中除含有皂苷類、黃酮類、萜類、氨基酸及微量元素等外，還含有許多其他化學(xué)成分，如生物堿、有機(jī)酸、維生素、磷脂、蛋白質(zhì)等。

2 藥理活性

2.1 抗腫瘤作用

絞股藍(lán)皂苷的水解產(chǎn)物有顯著的抗腫瘤活性。胡春華等人研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)中提取的黃酮類化合物可通過下調(diào)MTA1 mRNA的表達(dá)，從而發(fā)揮抑制乳腺腫瘤MCF-7細(xì)胞株轉(zhuǎn)移與抗乳腺腫瘤作用[19]。魏依蘭等研究發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總苷具有抑制U87細(xì)胞生長(zhǎng)及減弱癌細(xì)胞遷移能力，尤以10 mg/mL的絞股藍(lán)總苷效果更佳，其機(jī)制可能與其可抑制IL-6蛋白表達(dá)有關(guān)[20]。Xing等研究發(fā)現(xiàn)一種來自絞股藍(lán)的達(dá)瑪烷型皂苷Damulin B可通過在G0/G1期早期阻斷細(xì)胞周期并抑制遷移從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且對(duì)人肺癌A549細(xì)胞具有最強(qiáng)的活性[21]。Zhang等還發(fā)現(xiàn)一種新型的達(dá)瑪烷型三萜Gypensapogenin H能顯著抑制人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231 的生長(zhǎng)[22]。

2.2 抗炎、抗病毒活性

方磊涵等結(jié)果表明，斷奶仔豬在接種疫苗同時(shí)在飼料添加不同劑量的絞股藍(lán)多糖，在第14天、第28天，試驗(yàn)組的抗體效價(jià)水顯著高于對(duì)照組，其中試驗(yàn)C組(添加0.8%絞股藍(lán)多糖)免疫效果最好，抗體效價(jià)最高，表明絞股藍(lán)多糖對(duì)豬的免疫功能具有明顯的增強(qiáng)作用[23]。周文超等利用硅膠柱層析和半制備高效液相色譜技術(shù)在絞股藍(lán)中得到一種三萜皂苷，并通過氫譜碳譜及二維核磁，高分辨質(zhì)譜，紅外光譜鑒定其結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)為 25-O-acetyl-cucurbitacin-L-2-O-[αrhamnopyranosyl(1→2)][α-L-arabinopyranosyl(1→3)]-β-glucopyranoside.通過對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW 264癥模型測(cè)試新化合物抑制炎癥因子的能力，發(fā)現(xiàn)其具有一定的抗炎活性[24]。

2.3 調(diào)節(jié)血脂作用

Lu等研究表明，絞股藍(lán)總皂苷具有顯著的降低血脂的作用，且其降脂作用的潛在靶點(diǎn)可能與FXR介導(dǎo)的膽汁酸代謝通路有關(guān)[25]。雷婧等人用不同含量的絞股藍(lán)進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)，研究結(jié)果表明，不同含量絞股藍(lán)皂苷(40%、80%、98%)均能有效降低高脂血癥大鼠血脂水平并與皂苷的含量呈負(fù)相關(guān)，且絞股藍(lán)皂苷98%含量組改善更明顯[26]。

2.4 降血糖作用

張瓊等人發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總皂苷能夠顯著改善II型糖尿病小鼠糖脂代謝水平，并說明其發(fā)揮作用的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)肝臟自噬基因Beclin-1及LC3B的表達(dá)有關(guān)[27]。歐守珍等研究了四氧嘧啶誘發(fā)高血糖小鼠模型，證實(shí)海南絞股藍(lán)乙醇提取物能明顯抑制葡萄糖引致的小鼠血糖的升高，但對(duì)正常小鼠血糖無明顯影響[28]。

2.5 保護(hù)肝臟

南瑛等人實(shí)驗(yàn)證明絞股藍(lán)皂苷可通過激活Nrf2/NF-κB信號(hào)通路有效地保護(hù)小鼠急性酒精性肝損傷[29]。彭心怡等人研究發(fā)現(xiàn)一定劑量川楝子連續(xù)給藥可導(dǎo)致ICR小鼠慢性肝損傷,影響肝細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)，而絞股藍(lán)與川楝子配伍有減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物、抗肝損傷的作用[30]。吳柳松等人研究發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總苷能抑制肝臟PCSK9表達(dá)，并增加LDLR表達(dá)量，與辛伐他汀聯(lián)用可降低藥物對(duì)肝臟的影響，從而起到保護(hù)肝臟的作用[31]。

2.6 心血管保護(hù)作用

孫立峰等人研究表明絞股藍(lán)總黃酮可以顯著改善缺血再灌注大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少心肌梗死面積，起到保護(hù)心肌作用[32]。馬翔等研究證實(shí)絞股藍(lán)總苷具有保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞活性、維持線粒體膜電位水平、提高血管內(nèi)皮細(xì)胞抗氧化活性等藥理作用，并通過以上作用機(jī)制起到對(duì)氧化低密度脂蛋白損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[33]。宋囡等人基于對(duì)mTOR/ULK1自噬信號(hào)通路的研究，探討了絞股藍(lán)總苷改善動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠主動(dòng)脈脂質(zhì)沉積的作用機(jī)制，并指出絞股藍(lán)總苷可能通過調(diào)控自噬緩解動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，進(jìn)而起到防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用[34]。

2.7 抗衰老作用

王潔等人研究表明絞股藍(lán)總苷可通過抑制細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生以及Bax的表達(dá)，以及激活Bcl-2、Caspase-3信號(hào)通路而逆轉(zhuǎn)UVA誘導(dǎo)的HSF細(xì)胞凋亡，進(jìn)而延緩HSF細(xì)胞的光老化現(xiàn)象[35]。杜楠等人通過注射D-半乳糖建立衰老模型，同時(shí)以絞股藍(lán)籽油作為抗衰老試驗(yàn)藥物，按2.0,3.0,4.0mL/kg的劑量進(jìn)行灌胃給藥，60天后檢測(cè)小鼠體質(zhì)量、各臟器指數(shù)及血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)濃度，以及小鼠肝臟、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化氫酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量，并觀察小鼠肝臟組織的病理變化，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，表明絞股藍(lán)籽油可能通過增強(qiáng)機(jī)體的總抗氧化能力從而有效清除多余的自由基，降低機(jī)體細(xì)胞損傷程度，間接保護(hù)正常細(xì)胞，從而起到抗衰老作用[36]。

3 臨床應(yīng)用

3.1 治療高血脂癥

徐洪等選取2013年5月～2014年12月某院收治的高脂血癥患者100例，通過一系列研究證實(shí)絞股藍(lán)復(fù)方制劑治療高脂血癥的臨床療效顯著，不良反應(yīng)小，安全性高[37]。禹震霞等通過研究36例以甘油三酯升高為主的混合型高脂血癥患者，證實(shí)阿昔莫司膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總苷片治療以甘油三酯升高為主的混合型高脂血癥療效確切，可使糖尿病合并混合型高脂血癥患者的血糖顯著降低[38]。

3.2 治療口腔疾病

宣靜等將105例口腔扁平苔蘚患者分為濕熱內(nèi)阻、陰虛內(nèi)燥、氣滯血瘀、氣血虧虛及肝陽上亢等五型，各證型均給予復(fù)方絞股藍(lán)膠囊，濕熱內(nèi)阻證加用枳術(shù)寬中丸，陰虛內(nèi)燥證加用六味地黃丸，氣滯血瘀證加用獨(dú)一味膠囊，氣血虧虛證加用貞芪扶正膠囊，肝陽上亢證加用天麻鉤藤顆粒，所有患者連續(xù)服藥3個(gè)月為1個(gè)療程，共治療2個(gè)療程，分別于每個(gè)療程后觀察臨床療效。證實(shí)復(fù)方絞股藍(lán)膠囊聯(lián)合使用中成藥可以有效地治療口腔扁平苔蘚[39]。孫寧某院口腔門診已確診為復(fù)發(fā)性口腔潰瘍的患者81例，采用隨機(jī)數(shù)表法將患者分為試驗(yàn)組41例和對(duì)照組40例，對(duì)照組予貝復(fù)濟(jì)局部噴于潰瘍面，試驗(yàn)組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用維生素B12片和絞股藍(lán)煎劑聯(lián)合治療，研究發(fā)現(xiàn)維生素B12聯(lián)合絞股藍(lán)煎劑能有效調(diào)節(jié)復(fù)發(fā)性口腔潰瘍患者免疫功能，改善臨床癥狀，降低復(fù)發(fā)率，對(duì)臨床治療復(fù)發(fā)性口腔潰瘍具有重要意義[40]。

3.3 治療非酒精性脂肪性肝病

馬海芝等選取100例非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期的患者，觀察血脂康膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)及小劑量二甲雙胍對(duì)于非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期的臨床療效，研究結(jié)果表明，聯(lián)合治療對(duì)非酒精性脂肪性肝病伴糖尿病前期具有一定的臨床價(jià)值，并對(duì)有肝郁脾虛證和痰濕內(nèi)阻證的患者療效尤為顯著[41]。

3.4 治療腫瘤

現(xiàn)有研究表明，絞股藍(lán)總苷對(duì)胃癌、直腸癌、子宮癌、食管癌及膽、胰、腎、肺、肝、舌、膽癌及肉瘤等均有效。據(jù)報(bào)道，19例惡性腫瘤患者服用絞股藍(lán)沖劑(每包含總皂苷400mg)1個(gè)月后，患者癥狀均有改善，總有效率為89.47%，并且其不僅能提高惡性腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能，而且還能降低Ig G、Ig M含量，誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分化致敏為T淋巴細(xì)胞，直接與相應(yīng)靶腫瘤細(xì)胞接觸后起殺傷作用[42]。

4 結(jié)語與展望

就目前的研究結(jié)果而言，絞股藍(lán)的化學(xué)成分和藥理已有較為深入的研究，對(duì)其臨床應(yīng)用的研究仍較少。絞股藍(lán)含有包括皂苷類、萜類等在內(nèi)的多種化學(xué)成分，且多具有顯著的藥理活性，如抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖，保護(hù)肝臟等，但許多藥理活性的研究?jī)H停留在試驗(yàn)階段，臨床相關(guān)藥物開發(fā)相對(duì)較少，因此，有必要對(duì)絞股藍(lán)的藥理活性及臨床應(yīng)用進(jìn)行深層次的研究，有望帶來良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。