固相萃取在飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)中常見問題分析

宮秀杰

（新疆獸藥飼料監(jiān)察所 830063）

固相萃取技術(shù)主要采用固相填料對(duì)檢測(cè)樣品的組分進(jìn)行選擇性吸附和解析，降低樣品基質(zhì)干擾，從而提升檢測(cè)靈敏度及結(jié)果可靠性。目前固相萃取技術(shù)已經(jīng)在飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用，應(yīng)加強(qiáng)技術(shù)研究，充分發(fā)揮固相萃取技術(shù)優(yōu)勢(shì)。

1 固相萃取在飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)中易出現(xiàn)的問題

1.1 填料選擇

固相萃取技術(shù)的固相填料選擇對(duì)檢測(cè)結(jié)果有重要影響。在飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)過程中使用的固相填料可分為4 種類型，即鍵合硅膠類、高分子聚合物、吸附型和混合型填料。在選擇過程中主要根據(jù)被保留組分的被保留強(qiáng)度讓分析物與固定相極性接近。同時(shí)可以采用C4、C8、C18 等物質(zhì)作為反相固定相，萃取非極性物質(zhì)。如果填料選擇不當(dāng)無(wú)法滿足保留強(qiáng)度等方面的要求，會(huì)導(dǎo)致固相萃取結(jié)果誤差較大[1]。

1.2 基質(zhì)影響

在采用固相萃取方法對(duì)飼料和畜產(chǎn)品檢驗(yàn)時(shí)，要充分考慮檢測(cè)樣品基質(zhì)可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響。如蘇丹紅染料中的蘇丹紅一號(hào)主要成分為1-苯基偶氮-2-萘酚，根據(jù)其結(jié)構(gòu)和極性，可采用反相C18-SPE 小柱。但由于蘇丹紅染料的脂溶性強(qiáng)、色澤鮮艷，在測(cè)定蛋黃蘇丹紅含量時(shí)會(huì)遇到油脂干擾。雖然C18-SPE 小柱對(duì)蘇丹紅具有較強(qiáng)的保留效果，但大量油脂也會(huì)被保留，難以達(dá)到凈化目的。

1.3 過載問題

在分析檢測(cè)樣品物質(zhì)含量時(shí)，由于萃取柱填料固定、填料容量有限，因此有對(duì)保留組分的吸附上限。如果被測(cè)組分含量過高，超出萃取柱保留上限，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的回收率偏低。針對(duì)這種情況應(yīng)通過降低樣品濃度使保留組分在萃取柱吸附上限以內(nèi)。具體可根據(jù)色譜圖峰形判斷萃取柱是否過載，當(dāng)出現(xiàn)過載問題時(shí)，色譜圖的峰形會(huì)出現(xiàn)鈍化現(xiàn)象，峰形頂部圓滑或平行，而且會(huì)出現(xiàn)峰形不對(duì)稱現(xiàn)象。此時(shí)的線性相關(guān)系數(shù)無(wú)法滿足要求，不能采用檢測(cè)結(jié)果，需要調(diào)整后重新檢測(cè)[2]。

2 固相萃取在飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)中的優(yōu)化應(yīng)用措施

2.1 固定相活化

針對(duì)上述固相萃取過程中容易遇到的問題，需要對(duì)固相萃取流程進(jìn)行優(yōu)化。首先在固定相活化過程中要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)能與樣品溶劑相容的環(huán)境，去除掉萃取柱雜質(zhì)，一般需要采用兩種溶液達(dá)到這一效果，即初溶劑和終溶劑。其中，初溶劑的作用實(shí)施對(duì)固定相進(jìn)行凈化，終溶劑則用來創(chuàng)造適合的固定相環(huán)境，對(duì)樣品分析組分進(jìn)行保留。其中，終溶劑不能選擇過強(qiáng)的溶劑，否則會(huì)影響回收率。應(yīng)選擇一種弱于樣品溶液的終溶劑，同時(shí)應(yīng)防止在活化過程中將固定相抽干，否則會(huì)產(chǎn)生填料床裂縫問題。通過控制好固定相活化過程中的溶劑使用，可以使樣品得到充分凈化，同時(shí)有利于提升回收率。

2.2 上樣處理

固相萃取方法的上樣過程就是將樣品加入固相萃取柱，讓樣品溶劑通過固定相。在此過程中，樣品分析組分和干擾物質(zhì)會(huì)保留在固定相中，為有效保留分析物，樣品溶劑不能過強(qiáng)，否則會(huì)導(dǎo)致萃取結(jié)果的回收率較低，即出現(xiàn)穿漏現(xiàn)象。以此為出發(fā)點(diǎn)，應(yīng)盡可能選擇最弱的樣品溶劑，讓溶質(zhì)充分保留在萃取相中。但對(duì)于部分固體樣品而言，只能采用強(qiáng)溶劑萃取，此時(shí)萃取液不能直接上樣，否則會(huì)出現(xiàn)穿漏問題。對(duì)于這種情況需要在上樣時(shí)采用弱溶劑對(duì)萃取液進(jìn)行稀釋，得到適中的溶劑強(qiáng)度，然后再進(jìn)行上樣檢測(cè)。

2.3 淋洗和脫洗

在固相萃取淋洗和洗脫過程中，也需要充分考慮溶劑選擇對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響。淋洗過程中主要是為了洗掉其他樣品組分，防止分析組分受到干擾。因此需要采用洗脫強(qiáng)度略高于上樣溶劑的淋洗溶液。同時(shí)在洗脫過程中應(yīng)避免洗脫溶劑對(duì)分析組分產(chǎn)生洗脫效果。為達(dá)到最好的淋洗效果，一般也采用強(qiáng)、弱溶劑緩和使用的方法。在具體操作過程中要保證兩種溶劑互溶，并將體積控制為0.5～0.8ml/100mg 固定相溶劑體積的水平。經(jīng)過淋洗后還要洗脫分析組分，此時(shí)如果溶劑過強(qiáng)會(huì)導(dǎo)致不必要的組分被洗脫出來，而溶劑太弱會(huì)大幅度增加洗脫液使用量，因此需要準(zhǔn)確控制洗脫溶劑用量。此外，還要注意控制不同溶液在混合過程中的加入速度，控制好操作技術(shù)，一般不需要使用抽氣機(jī)等輔助裝置，讓液體依靠重力流出即可。通過把握好這些細(xì)節(jié)可以提升固相萃取檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在采用固相萃取方法對(duì)飼料和畜產(chǎn)品檢測(cè)過程中，需要注意各方面影響因素，通過對(duì)檢測(cè)過程進(jìn)行優(yōu)化，提高檢測(cè)結(jié)果的可靠性。具體可通過對(duì)固定相活化、上樣處理、淋洗和脫洗等環(huán)節(jié)進(jìn)行優(yōu)化，提高檢測(cè)精確度。