抗菌肽在豬病防治中的科學(xué)應(yīng)用

萬(wàn)遂如

（中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)，吉林 長(zhǎng)春 130122）

抗菌肽（ABP）又稱(chēng)抗微生物肽或抗生素肽，它是生物體內(nèi)產(chǎn)生的具有抵抗外界微生物侵害、清除機(jī)體內(nèi)突變細(xì)胞的一類(lèi)陽(yáng)離子小分子多肽，是生物體天然免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分?？咕拇嬖谟诓溉閯?dòng)物、兩棲動(dòng)物、鳥(niǎo)類(lèi)、魚(yú)類(lèi)/貝類(lèi)、昆蟲(chóng)類(lèi)、真菌類(lèi)、細(xì)菌類(lèi)、病毒類(lèi)、植物類(lèi)及人類(lèi)細(xì)胞之中，來(lái)源十分廣泛。目前已從動(dòng)物、植物及原核生物中分離鑒定出1 700多種抗菌肽。天然的抗菌肽是由生物體內(nèi)基因編碼并通過(guò)核糖體合成的小分子肽，它具有廣譜的抗菌性且不易使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性、不會(huì)形成藥物在機(jī)體內(nèi)殘留和無(wú)毒副作用的特點(diǎn)。因此，抗菌肽已作為抗生素的替代品，在農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、食品工業(yè)和醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域中使用，顯示出了良好的應(yīng)用與發(fā)展前景。本文就目前養(yǎng)豬生產(chǎn)中使用抗生素產(chǎn)生耐藥性日益嚴(yán)重，許多抗生素已被禁止使用，如何運(yùn)用抗菌肽替代抗生素在豬病防治中的科學(xué)應(yīng)用問(wèn)題談點(diǎn)個(gè)人意見(jiàn)，僅供養(yǎng)豬場(chǎng)參考。

1 抗菌肽的分類(lèi)

根據(jù)抗菌肽的來(lái)源不同可將抗菌肽分為哺乳動(dòng)物抗菌肽、兩棲類(lèi)動(dòng)物抗菌肽、昆蟲(chóng)抗菌肽、細(xì)菌抗菌肽、海洋生物抗菌肽、植物抗菌肽等。根據(jù)其作用對(duì)象的不同，又可將抗菌肽分為抗細(xì)菌肽、抗真菌肽、抗腫瘤肽、既抗細(xì)菌又抗真菌的抗菌肽、既抗腫瘤又抗微生物的抗菌肽等類(lèi)型。

2 抗菌肽的作用機(jī)理

2.1 抗菌肽的抗細(xì)菌作用

抗菌肽分子的氨基酸大多數(shù)帶正電荷，具有兩性電解性質(zhì)，細(xì)菌的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)是其作用的靶位?？咕姆肿油ㄟ^(guò)正電荷與細(xì)胞膜的質(zhì)膜磷脂分子上的負(fù)電荷形成靜電吸附而結(jié)合在脂質(zhì)膜上，并能插入到質(zhì)膜中去，擾亂質(zhì)膜上蛋白質(zhì)和脂質(zhì)原有的排列形式，使得膜外正電荷增多，達(dá)到閾值時(shí)導(dǎo)致膜去極化，致使細(xì)胞膜通透性增高，細(xì)菌不能保持正常滲透壓而死亡；抗菌肽能通過(guò)將疏水端插入細(xì)胞膜的輸水區(qū)域來(lái)改變膜的結(jié)構(gòu)或使膜蛋白發(fā)生凝聚失去活性，進(jìn)入磷脂雙分子層后親水端發(fā)生結(jié)合并形成離子通道，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外泄導(dǎo)致菌體的死亡；還能通過(guò)抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，使細(xì)菌不能維持正常的細(xì)胞形態(tài)而生長(zhǎng)受阻，并造成細(xì)胞壁穿孔，導(dǎo)致細(xì)菌死亡；還可通過(guò)干擾編碼菌體細(xì)胞外膜蛋白的基因轉(zhuǎn)錄，使蛋白質(zhì)的含量減少，細(xì)胞的生長(zhǎng)受到抑制；部分抗菌肽還可通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)酶的活性來(lái)影響菌體的能量代謝，使菌體生長(zhǎng)速度下降以及誘發(fā)胞內(nèi)蛋白酶和鈣離子外流，刺激細(xì)胞色素C釋放，通過(guò)酶促反應(yīng)使細(xì)胞凋亡。其次，抗菌肽對(duì)細(xì)菌和真菌的極強(qiáng)的殺傷作用還表現(xiàn)在能使菌體線粒體出現(xiàn)腫脹、空泡化、排列不規(guī)范、核膜界限不清、核破裂、內(nèi)容物溢出，提示抗菌肽可通過(guò)抑制細(xì)胞呼吸作用將細(xì)菌和真菌殺死。

2.2 抗菌肽的抗病毒作用

抗菌肽的抗病毒作用主要表現(xiàn)在3個(gè)方面：一是通過(guò)抗菌肽直接與病毒粒子相結(jié)合發(fā)揮作用，比如對(duì)皰疹病毒和人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）的作用；二是抑制病毒的繁殖；三是通過(guò)模仿病毒的侵染過(guò)程起作用，如蜂毒蛋白與煙草花葉病毒包被蛋白具有相似性，這樣蜂毒蛋白分子就可以偽裝成病毒包被蛋白被病毒RNA結(jié)合，導(dǎo)致RNA構(gòu)象改變，不能與正常蛋白結(jié)合，病毒顆粒無(wú)法進(jìn)行正常組裝。

2.3 抗菌肽的抗寄生蟲(chóng)作用

昆蟲(chóng)防御素對(duì)瘧原蟲(chóng)的卵囊期與子孢子期有殺滅作用，因?yàn)榉烙胤肿优c蟲(chóng)體外膜結(jié)合引起蟲(chóng)體內(nèi)部形成大空泡，造成子孢子膜通透性受到破壞，形態(tài)受到損傷，流動(dòng)性降低而死亡。Diaz Achilrica等發(fā)現(xiàn)一種合成的天蠶素-蜂毒素雜合體對(duì)萊什曼原鞭毛蟲(chóng)有殺傷作用，能很快降低目標(biāo)靶細(xì)胞質(zhì)膜H+/OH-的通透性，使細(xì)胞的ATP合成下降、呼吸減弱、外膜坍塌、原生質(zhì)膜形態(tài)遭到破壞，而殺滅原蟲(chóng)。

2.4 抗菌肽的抗腫瘤作用

抗菌肽的抗腫瘤作用主要是使腫瘤細(xì)胞膜上形成孔洞，內(nèi)容物外泄。同時(shí)，還能使線粒體出現(xiàn)空泡化、嵴脫落、核膜界限模糊不清、有的核膜破損、核染色體DNA斷裂，還可抑制染色體DNA的合成，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，腫瘤體積縮小。

近幾年來(lái)有試驗(yàn)證實(shí)，抗菌肽還具有改善動(dòng)物機(jī)體免疫調(diào)節(jié)的功能，提高免疫力的作用?？咕闹粴缥⑸锒粫?huì)殺死宿主細(xì)胞的原因在于抗菌肽僅與微生物的磷脂、LPS（脂多糖）及胞壁酸相互作用。

3 抗菌肽在豬病防治中的科學(xué)應(yīng)用

3.1 發(fā)病豬的治療

3.1.1 由病毒與細(xì)菌共感染與繼發(fā)感染引發(fā)的豬急性熱性傳染性疫病的治療

方案1：大敗毒注射液（連翹、紫花地丁、白芷、蒲公英、板藍(lán)根等，每千克體重0.1毫升）、豬用排疫肽（5種高免球蛋白，每50千克體重1毫升，重癥可加量）、豬用轉(zhuǎn)移因子（每40千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4天。

方案2：清開(kāi)靈注射液（金銀花、板藍(lán)根、牛黃、水牛角、黃芪、珍珠母、梔子等），小豬每頭每次10毫升、中豬15毫升、大豬20毫升，免疫核糖核酸（每70千克體重1毫升，重癥可加量）、白細(xì)胞介素-4（每30千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

方案3：復(fù)方柴胡注射液（每千克體重0.2毫升）、豬用干擾素（每40千克體重1毫升，重癥加量）、豬用轉(zhuǎn)移因子，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

3.1.2 豬呼吸道病綜合征的治療

方案1：復(fù)方板藍(lán)根注射液（每千克體重1毫升）、豬用干擾素、白細(xì)胞介素-4，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

方案2：香菇多糖注射液（每千克體重1毫升）、免疫核糖核酸、豬用轉(zhuǎn)移因子，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

方案3：金銀花注射液（金銀花、黃芪、柴胡、連翹等，每千克體重0.2毫升）、豬用排疫肽（5種高免球蛋白）、豬用轉(zhuǎn)移因子，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

3.1.3 由病毒與細(xì)菌引發(fā)的豬腹瀉性疫病的治療

方案1：雙黃連注射液（每千克體重0.2毫升）、豬用干擾素、白細(xì)胞介素-4，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

方案2：復(fù)方穿心蓮注射液（每千克體重0.2毫升）、免疫核糖核酸、豬用轉(zhuǎn)移因子，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用4天。

方案3：高免血清療法，選用本豬場(chǎng)發(fā)生病毒性腹瀉后痊愈20天的老母豬或大的肥育豬無(wú)菌靜脈采血，分離血清，加入一定量的抗生素（如阿莫西林或頭孢噻呋等）給病豬肌注，每日1次，連用2天；同時(shí)肌注抗菌肽，每日1次，連用3天。

方案4：楊樹(shù)花口服液100毫升對(duì)水200千克給大豬自然飲用5天；小豬每頭口服楊樹(shù)花口服液3～5毫升，每日上、下午各口服1次，連用3～4天。

3.1.4 母豬乳腺炎、子宮內(nèi)膜炎、陰道炎的治療

方案1：魚(yú)腥草注射液（每千克體重0.2毫升）、抗菌肽（每60千克體重1毫升，重癥可加量），混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注頭孢噻呋鈉（每千克體重5毫克），每日1次，連用4天。

方案2：雙黃連注射液（每千克體重0.2毫升）、抗菌肽，混合肌注，每日1次，連用4天；同時(shí)肌注頭孢拉定（每千克體重2毫克），每日1次，連用4天。

方案3：干魚(yú)腥草80～100克、鐵馬鞭50～100克，研成粉，加入2～3倍清水煎熬（煮沸后再熬10分鐘），藥液口服，藥渣拌料飼喂，每天1劑，連用3～4次。

3.1.5 豬附紅細(xì)胞體病的治療

方案1：血蟲(chóng)凈（貝尼爾，每千克體重5～7毫克），用生理鹽水稀釋成5%溶液肌注，每日1次，連用2次；同時(shí)配合肌注抗菌肽與豬用轉(zhuǎn)移因子的混合物，每日1次，連用4天。

方案2：紅弓鏈康注射液（每千克體重0.1毫升，重癥可加量），每日1次，連用4天；同時(shí)配合肌注抗菌肽與白細(xì)胞介素-4混合物，每日1次，連用4天。

治療中途補(bǔ)注補(bǔ)血針1次，同時(shí)在飼料中補(bǔ)充維生素C與B族維生素等，使其康復(fù)加快，可減少病后僵豬的發(fā)生。

3.1.6 對(duì)癥治療 在結(jié)合養(yǎng)豬場(chǎng)生產(chǎn)實(shí)際與發(fā)病狀況選用上述方案實(shí)施治療時(shí)，請(qǐng)注意對(duì)癥治療。

（1）病豬氣喘、咳嗽嚴(yán)重者，應(yīng)肌注冰蟾熊膽注射液（每千克體重0.1毫升），每2日使用1次，連用2次。

（2）重癥病豬應(yīng)實(shí)施支持療法，用10%葡萄糖鹽水溶液 300～500毫升、10%維生素C 5～10毫升、10%樟腦磺酸鈉溶液5～10毫升，混合1次靜注，每日1次，連用3天。

（3）病豬不吃料、飲水少時(shí)，下午加注復(fù)合維生素B注射液1次（每千克體重0.1毫升），每日1次，連用2次，可促進(jìn)病豬開(kāi)胃采食，加快康復(fù)。

（4）病豬一律改飲：電解質(zhì)多維800克、黃芪多糖粉800克、溶菌酶400克、維生素C 200克，對(duì)水1噸，連續(xù)飲用7天。

3.2 保健預(yù)防

方案1：柴葛解肌散（柴胡、葛根、甘草、黃芩、羌活、白芷、桔梗等）800克、白細(xì)胞介素-4（400克）、抗菌肽400克，拌入1噸料中，連續(xù)飼喂7～12天。

具有解肌清熱、潤(rùn)肺止咳、生津止渴、保肝利膽、抗病毒、抗細(xì)菌、抗氧化、抗應(yīng)激、提高機(jī)體免疫力之功能。用于感冒發(fā)熱、流感、口蹄疫與水皰病，以及多種病毒與細(xì)菌混合感染等疫病的防治。

方案2：仙方活命散（板藍(lán)根、大青葉、白芷、紫花地丁、蒲公英等）1 000克、免疫核糖核酸600克、豬用轉(zhuǎn)移因子400克、抗菌肽400克，拌入1噸料中，連續(xù)飼喂7～12天。

具有清瘟敗毒、解熱鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗菌消炎、抗應(yīng)激、提高機(jī)體免疫力之功能?？捎糜谪i高熱綜合征、附紅細(xì)胞體病、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、偽狂犬病、腹瀉性疾病、乳腺炎以及病毒與細(xì)菌共感染引發(fā)的疫病防治。

方案3：銀翹散（金銀花、連翹、薄荷、荊芥、淡豆豉、牛蒡子、桔梗、蘆根、淡竹葉、甘草）1 000克、排疫肽（5種高免球蛋白，600克）、豬用轉(zhuǎn)移因子400克、抗菌肽400克，拌入1噸料中，連續(xù)飼喂7～12天。

具有清熱解毒、辛涼透表、宣肺祛痰、利咽止咳、生津止渴、抗病毒、抗細(xì)菌、抗過(guò)敏、抗應(yīng)激以及增強(qiáng)機(jī)體免疫力之功能。可用于呼吸道病綜合征、流感、乙型腦炎、附紅細(xì)胞體病以及急性熱性傳染性疾病的防治。

方案4：雙黃連浸膏粉（金銀花、黃芩、連翹等）500克對(duì)水1 200升、電解質(zhì)多維800克、干擾素800克、抗菌肽400克，對(duì)水1噸，連續(xù)飲水12天。

具有清熱燥濕、瀉火解毒、辛涼透表、疏散肺邪、抗病毒、抗菌消炎、抗內(nèi)毒素以及提高機(jī)體免疫力之功能?？捎糜诓《九c細(xì)菌混合感染引發(fā)的急性熱性傳染病防治。

以上保健預(yù)防方案可結(jié)合養(yǎng)豬場(chǎng)生產(chǎn)中存在的實(shí)際問(wèn)題，豬群的健康狀況，或發(fā)生疫情以及季節(jié)的變化而選用。一般用于仔豬斷奶前后12天、保育仔豬轉(zhuǎn)群至肥育舍前后12天，肥育中期（出欄上市前2個(gè)月）、生產(chǎn)母豬配種前20天與產(chǎn)仔前后12天可實(shí)施藥物保健預(yù)防。注射弱毒活疫苗以及母豬妊娠初期不要實(shí)施藥物保健。

4 抗菌肽使用注意事項(xiàng)

（1）抗菌肽作為蛋白質(zhì)，易受外界各種不良因素的影響，會(huì)造成失活，因此一定要按照產(chǎn)品規(guī)定的條件保存與運(yùn)輸。

（2）抗菌肽制劑不能與酸堿性溶液和葡萄糖鹽水溶液混合使用，否則失去生物活性。

（3）抗菌肽可與抗生素配合使用，但不能混合注射，應(yīng)分別注射。

（4）抗菌肽分子在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)容易被蛋白酶降解，因此口服給藥時(shí)一定要使用經(jīng)過(guò)微囊包被的腸溶型產(chǎn)品，拌料或飲水即可，能避免蛋白酶的降解。

（5）抗菌肽與細(xì)胞因子制劑及中獸藥制劑聯(lián)合使用，無(wú)頡頏作用，可有效增強(qiáng)藥效，提高防治效果。

（6）抗菌肽分子量?。ㄔ?4 000～7 000 Da）、水溶性好、熱穩(wěn)定性高，可耐受飼料制粒時(shí)的高溫而不變性，又具有廣譜的抗菌性。因而作為畜禽飼料添加劑替代抗生素，可以減少抗生素產(chǎn)生耐藥性與藥物殘留帶來(lái)的危害。