噬菌體對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌骨髓炎的特異性治療

蘇子龍 文強(qiáng)強(qiáng) 劉 巖 谷 峰 隋鎮(zhèn)江 于鐵成

骨髓炎是一種以進(jìn)行性炎性反應(yīng)和骨質(zhì)破壞為特征的骨科疾病，臨床骨髓炎病例中最常見(jiàn)的病原菌是金黃色葡萄球菌，約占全部病例的60%～70%[1]。近年來(lái)，由于抗生素濫用出現(xiàn)了耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus,MRSA)，MRSA既能形成生物膜也能內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞，使得MRSA所致的骨髓炎極其難以治療[2]。目前尚無(wú)可靠的方法來(lái)治療這類(lèi)骨髓炎，迫切需要研究新的治療方法。

噬菌體療法可能是治療MRSA骨髓炎的一個(gè)理想選擇。1919年Felix D′Herelle最早將噬菌體應(yīng)用于人和動(dòng)物的感染性疾病，開(kāi)創(chuàng)了醫(yī)用噬菌體的先河。早期的研究發(fā)現(xiàn)噬菌體對(duì)金黃色葡萄球菌具有殺傷能力。但到20世紀(jì)40年代，由于研究人員對(duì)噬菌體基礎(chǔ)生物學(xué)研究認(rèn)識(shí)不足，同時(shí)抗菌效果好且使用方便的抗生素出現(xiàn)了，使得對(duì)噬菌體治療疾病的研究急劇衰退。然而，隨著MRSA的出現(xiàn)，以噬菌體為基礎(chǔ)的治療方法作為抗生素治療的替代方法，重新引起醫(yī)學(xué)界的重視。噬菌體是一種針對(duì)細(xì)菌的病毒，具有極高的特異性且易于應(yīng)用，針對(duì)MRSA的噬菌體只能殺死細(xì)胞內(nèi)外MRSA并清除生物膜，不影響正常菌群和機(jī)體細(xì)胞[3]。噬菌體具有自我調(diào)節(jié)功能，當(dāng)它們消滅宿主細(xì)菌后，很快會(huì)被免疫系統(tǒng)滅活，不會(huì)在機(jī)體內(nèi)存留。噬菌體與抗生素之間也存在著協(xié)同效應(yīng)，聯(lián)合應(yīng)用可放大殺菌效果[4]。通過(guò)基因工程，修飾后的噬菌體可增強(qiáng)殺菌作用并能靶向運(yùn)輸藥物，這延伸了噬菌體的治療領(lǐng)域，進(jìn)一步擴(kuò)展了醫(yī)療界對(duì)噬菌體的認(rèn)識(shí)[5]。

在骨科疾病的治療方面，由于MRSA導(dǎo)致的急性和慢性骨髓炎的出現(xiàn)，噬菌體所具有的細(xì)菌宿主特異性和對(duì)耐藥菌株的溶菌活性，重新引起了注意，并逐漸開(kāi)始使用噬菌體來(lái)治療MRSA骨髓炎，已取得了一定成果[6，7]。但目前已完成的少數(shù)正式的噬菌體臨床試驗(yàn)對(duì)噬菌體的治療效果沒(méi)有得出確定的結(jié)果，但越來(lái)越多地作為一種實(shí)驗(yàn)性療法，用于治療抗生素治療失敗的危重患者[8，9]。本綜述探討噬菌體在MRSA骨髓炎治療方面應(yīng)用的可行性，為進(jìn)一步將噬菌體用用于臨床治療提供一定的依據(jù)。

一、MRSA骨髓炎難治性原因

金黃色葡萄球菌是一種革蘭陽(yáng)性菌，是骨髓炎最主要的致病菌?？股氐臑E用將MRSA從臨床環(huán)境中分離出來(lái),其導(dǎo)致的骨髓炎極難治療，即使不斷引用新技術(shù)和新抗生素也未能取得滿意的治療效果[10]。

MRSA能夠侵入并在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)存活。MRSA進(jìn)入血液后幾分鐘內(nèi)會(huì)被宿主吞噬細(xì)胞(主要是中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)吞噬[11]。雖然大多數(shù)細(xì)菌能被這些細(xì)胞有效殺死，但部分MRSA不能被完全清除，受感染的細(xì)胞會(huì)將細(xì)菌從最初的感染部位傳播出去。MRSA一旦進(jìn)入組織，就可侵襲各種非吞噬細(xì)胞類(lèi)型，如成骨細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致慢性或復(fù)發(fā)性骨髓炎。此外，細(xì)胞內(nèi)MRSA還能破壞先天免疫反應(yīng)，并導(dǎo)致中性粒細(xì)胞破壞[12]。因此MRSA在吞噬細(xì)胞和其他細(xì)胞內(nèi)的侵襲和存活是導(dǎo)致MRSA骨髓炎治療失敗的原因之一。

除上述兩方面原因外，MRSA能在醫(yī)療器械上形成生物膜。生物膜阻礙抗生素和宿主免疫系統(tǒng)對(duì)細(xì)菌的殺傷作用，為MRSA發(fā)展成持續(xù)性、慢性和復(fù)發(fā)性感染提供了可能性[13]。生物膜形成一般要經(jīng)歷4個(gè)階段：初始階段，細(xì)菌的浮游表型通過(guò)范德華力、空間相互作用和靜電相互作用可逆地附著在固體或非生物基質(zhì)上；之后由于細(xì)菌與表面之間的疏水和親水相互作用，可逆吸附的細(xì)菌保持不動(dòng)并成為不可逆吸附，形成微型菌落；一旦微型菌落形成并處在最佳生長(zhǎng)條件下，生物膜就進(jìn)入成熟期，成為一個(gè)更為復(fù)雜的生物膜結(jié)構(gòu)；最后，一些細(xì)菌從生物膜中分離出來(lái)，成為浮游狀態(tài)，開(kāi)始新的感染。因此生物膜的形成使得骨髓炎難以治療。

二、噬菌體治療MRSA骨髓炎

1.噬菌體的殺菌機(jī)制：噬菌體由蛋白質(zhì)外殼及包裹在其中的DNA或RNA組成，所有噬菌體感染目標(biāo)細(xì)菌都要經(jīng)歷:吸附、核酸從蛋白外殼中分離、核酸的表達(dá)和復(fù)制、病毒粒子組裝、釋放和傳播的過(guò)程[14]。噬菌體是細(xì)菌特有的病毒，其高度特異性使得只感染和殺死目標(biāo)細(xì)菌，這防止了正常菌群的破壞和微生物菌群的失調(diào)[3]。

噬菌體主要以裂解和溶原周期兩種方式殺滅細(xì)菌。在裂解周期中，裂解性噬菌體使用細(xì)菌的養(yǎng)分產(chǎn)生子代噬菌體，這些子代噬菌體裂解細(xì)菌后，釋放出來(lái)繼續(xù)感染其他致病細(xì)菌[15]。溫和噬菌體通過(guò)溶原周期進(jìn)行復(fù)制，噬菌體基因組整合到細(xì)菌基因組中，或作為質(zhì)粒與細(xì)菌宿主一同進(jìn)行復(fù)制，噬菌體基因組也可以脫離細(xì)菌基因組進(jìn)入裂解周期，最終溶解細(xì)菌[14]。一些噬菌體同時(shí)具備裂解和溶原這兩種周期，其殺菌作用因而變得復(fù)雜。除此之外，Pearl等[16]的研究還發(fā)現(xiàn)，雖然大多數(shù)噬菌體只能感染和裂解代謝活躍的細(xì)菌，但少數(shù)噬菌體可以感染處于休眠狀態(tài)的細(xì)菌，待休眠細(xì)菌在恢復(fù)到代謝活躍狀態(tài)后，噬菌體裂解周期激活，這種感染方式能夠消除細(xì)菌重新傳播的風(fēng)險(xiǎn)?；谝陨系难芯浚谥委烳RSA骨髓炎實(shí)驗(yàn)中，通常會(huì)直接使用裂解MRSA的噬菌體，其可有效殺滅MRSA。

噬菌體不僅可以殺死裸露的致病菌，也能殺死進(jìn)入細(xì)胞的內(nèi)化致病菌。利用熒光標(biāo)記噬菌體和金黃色葡萄球菌的研究發(fā)現(xiàn)，噬菌體能通過(guò)上皮細(xì)胞的胞吞作用隨機(jī)地進(jìn)入牛乳腺上皮細(xì)胞，并能清除細(xì)胞內(nèi)金黃色葡萄球菌[17]。噬菌體可以通過(guò)巨噬細(xì)胞吞噬作用直接進(jìn)入巨噬細(xì)胞，也可以通過(guò)感染金黃色葡萄球菌的方式間接進(jìn)入巨噬細(xì)胞，這兩種方式都能顯著殺死金黃色葡萄球菌并降低金黃色葡萄球菌引起的細(xì)胞毒性損害。實(shí)驗(yàn)性噬菌體療法不會(huì)降低患者吞噬細(xì)胞殺死細(xì)菌的能力，也不影響正在殺死細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌的吞噬細(xì)胞活性。這種殺菌方式使利用噬菌體殺滅內(nèi)化的MRSA成為可能。

在噬菌體殺滅細(xì)菌的過(guò)程中離不開(kāi)肽聚糖水解酶的溶膜作用，該酶分為兩種類(lèi)型:外溶酶和內(nèi)溶酶。在噬菌體吸附細(xì)菌后，噬菌體外溶酶通過(guò)降解肽聚糖，在細(xì)胞壁上形成破損，將遺傳物質(zhì)注入細(xì)菌內(nèi)。在噬菌體裂解周期結(jié)束時(shí)內(nèi)溶酶降解細(xì)胞壁，溶解細(xì)菌，幫助子代噬菌體的釋放[18]。帶有雙鏈基因組的噬菌體可釋放穿孔酶和內(nèi)溶素介導(dǎo)細(xì)菌溶解。而單鏈基因組的噬菌體由于缺乏內(nèi)溶酶的編碼基因，通過(guò)生成裂解效應(yīng)體，抑制細(xì)菌細(xì)胞壁生物合成，使宿主細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中裂解。由于噬菌體療法的某些不確定性，單獨(dú)使用肽聚糖水解酶治療金葡菌感染或許也是一種不錯(cuò)的選擇。

2.噬菌體清除生物膜：噬菌體清除生物膜的機(jī)制是多樣的。噬菌體能夠產(chǎn)生胞外多糖解聚酶，該酶可降解構(gòu)成生物被膜基質(zhì)的胞外多糖成分，從而破壞生物被膜的網(wǎng)絡(luò)連接，侵染被膜菌[19]。當(dāng)噬菌體的遺傳物質(zhì)進(jìn)入宿主菌后，能誘導(dǎo)宿主菌產(chǎn)生降解胞外多聚物的酶類(lèi)[20]。噬菌體也能通過(guò)產(chǎn)生降解細(xì)菌之間交流信號(hào)的酶，阻止細(xì)菌進(jìn)一步聚集形成生物膜[21]。噬菌體還能穿透細(xì)菌生物被膜的輸水通道進(jìn)入生物被膜內(nèi)部，裂解被膜內(nèi)的細(xì)菌，從源頭上減少生物膜的產(chǎn)生。

體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌噬菌體是有效的生物膜破壞劑，噬菌體K(有廣泛的宿主范圍)及其6種修飾衍生物的混合物可完全抑制金黃色葡萄球菌生物膜的形成。噬菌體K與噬菌體DRA88(有廣泛的宿主范圍)的混合物對(duì)MRSA有強(qiáng)大的裂解活性，可顯著減少由3種不同金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的生物膜[22]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明，植入物表面噬菌體涂層顯著降低了細(xì)菌對(duì)植入物的黏附和相鄰組織中細(xì)菌負(fù)荷[7]。

研究還發(fā)現(xiàn)噬菌體聯(lián)合其他治療方法對(duì)清除生物膜效果要比單純應(yīng)用噬菌體效果好。生物膜的機(jī)械破壞可以促進(jìn)噬菌體感染。噬菌體對(duì)金黃色葡萄球菌完整的生物膜沒(méi)有活性，但在清創(chuàng)后進(jìn)行噬菌體治療，細(xì)菌數(shù)量顯著減少，并且改善了傷口的愈合[23]。Rahman等[24]研究發(fā)現(xiàn)噬菌體SAP-26和抗生素聯(lián)合治療有強(qiáng)大的生物膜去除作用，能誘導(dǎo)生物膜基質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化和細(xì)菌數(shù)量的大幅減少，尤其是噬菌體和利福平的混合物可有效清除金黃色葡萄球菌生物膜。Kelly等發(fā)現(xiàn)在72h內(nèi)噬菌體雞尾酒對(duì)金黃色葡萄球菌生物膜的破壞十分明顯，生物膜量降低至與陰性對(duì)照相當(dāng)?shù)乃?。其他的研究還發(fā)現(xiàn)噬菌體雞尾酒可預(yù)防金黃色葡萄球菌生物膜形成并顯著減少生物膜生物量[22]。此外清除生物膜的敏感度還取決于細(xì)菌和生物膜的成熟程度，時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)菌外物質(zhì)積累越多，因而越難清除，故應(yīng)盡早使用噬菌體。

3.噬菌體在殺菌過(guò)程中的演進(jìn)：以往應(yīng)用噬菌體需要不斷監(jiān)測(cè)目標(biāo)細(xì)菌的噬菌體敏感度，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)菌產(chǎn)生了新的耐藥性，需要及時(shí)更新噬菌體制劑，或使用由同種異型噬菌體混合成的噬菌體雞尾酒來(lái)克服耐藥性。有時(shí)細(xì)菌可能對(duì)噬菌體相對(duì)不敏感，可將噬菌體在不敏感菌株中傳代培養(yǎng)后，獲得的修飾型噬菌體突變體可以克服這一問(wèn)題。

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，在噬菌體和細(xì)菌相互作用的過(guò)程中，噬菌體感染和細(xì)菌防御機(jī)制都在不斷共同演進(jìn)。細(xì)菌通過(guò)受體的表面修飾抑制噬菌體的吸附，利用RM系統(tǒng)(限制性修飾系統(tǒng))降解噬菌體基因組，對(duì)噬菌體入侵CRISPR(短回文重復(fù)序列)系統(tǒng)免疫，利用Abi(Abi相互作用因子)系統(tǒng)使細(xì)菌凋亡。噬菌體也相應(yīng)地演進(jìn)出幾種策略，克服細(xì)菌防御機(jī)制。包括識(shí)別細(xì)菌的可變基序或新的受體，修改它們的限制位點(diǎn)或抑制RM系統(tǒng)，干擾CRISPR/Cas系統(tǒng)或通過(guò)編碼抗毒素噬菌體基因抑制Abi系統(tǒng)。噬菌體普遍存在這種演進(jìn)能力，針對(duì)MRSA的噬菌體演進(jìn)不但能克服MRSA的抗性，還能使MRSA對(duì)噬菌體保持敏感成為可能，同時(shí)可能會(huì)減少很多額外的監(jiān)控。

4.噬菌體的臨床應(yīng)用和給藥方式：大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，早期、大劑量、反復(fù)多次局部使用噬菌體能產(chǎn)生很好的治療效果。疾病早期致病菌還未發(fā)展成復(fù)雜的感染，越早使用噬菌體越能更好地控制感染。由于體積為50～200nm的噬菌體可以擴(kuò)散到機(jī)體各個(gè)部位，因此選擇此類(lèi)噬菌體能盡早地產(chǎn)生殺菌效果。此外，人體實(shí)驗(yàn)性治療發(fā)現(xiàn)，噬菌體在血漿中的半衰期約2.3h，在器官中半衰期約9h。將噬菌體直接注射到感染部位，連續(xù)4天的注射比單次注射能更有效地降低細(xì)菌負(fù)荷。在已感染的動(dòng)物模型上，連續(xù)3天的噬菌體治療，對(duì)感染的治療也是有效的[10]。

要使噬菌體治療起作用，感染部位的噬菌體濃度必須足夠高。原因在于，即使感染部位易受感染的細(xì)菌濃度很高，低濃度的噬菌體也不能快速擴(kuò)增，因而不能實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌的快速殺滅。另外，在體內(nèi)宿主免疫反應(yīng)或其他機(jī)制也會(huì)導(dǎo)致噬菌體濃度的降低，如若早期使用高濃度的噬菌體可能使每個(gè)細(xì)菌吸附多個(gè)噬菌體，可導(dǎo)致細(xì)菌更快裂解。若口服給藥，胃部的酸性環(huán)境及胃蛋白酶會(huì)影響噬菌體的活性，因而到達(dá)感染部位的噬菌體將減少。故可通過(guò)術(shù)前術(shù)后噬菌體制劑清洗傷口，噬菌體制劑浸泡創(chuàng)面繃帶，定期通過(guò)引流管導(dǎo)入噬菌體、噬菌體制劑浸泡引流條置于創(chuàng)面切口內(nèi)等方式增加局部噬菌體濃度。對(duì)于更深的傷口，除使用噬菌體沖洗創(chuàng)面外，還常將噬菌體包埋到可降解的聚合物內(nèi)置入傷口中。此外，成功的噬菌體治療還需要嚴(yán)格應(yīng)用所有有效的傷口護(hù)理技術(shù)，包括:根治性壞死切除和開(kāi)放傷口，提供足夠的引流，持續(xù)控制噬菌體與病原體的最佳比例，早期閉合傷口。

5.噬菌體聯(lián)合抗生素治療骨髓炎：除了單獨(dú)使用噬菌體，也可以將噬菌體與抗生素聯(lián)合使用。這種方式的顯著優(yōu)勢(shì)是能夠發(fā)揮噬菌體和抗生素之間的協(xié)同作用，協(xié)同效應(yīng)可將體內(nèi)細(xì)菌數(shù)量降低到免疫系統(tǒng)能夠成功應(yīng)對(duì)的水平，同時(shí)能夠減少抗菌素的使用劑量，限制了可能的不良反應(yīng)[4]。1945年Himmelweit將噬菌體和青霉素結(jié)合成功地治療了葡萄球菌感染。噬菌體通常毒性較低，一般可應(yīng)用高濃度的噬菌體，并在相對(duì)較低的標(biāo)準(zhǔn)濃度下系統(tǒng)地應(yīng)用抗生素，兩者相互搭配能達(dá)到較好的治療效果，即使存在血液循環(huán)不良或纖維顆粒屏障的情況，噬菌體也能透過(guò)此類(lèi)屏障進(jìn)入骨髓炎的最深處，增強(qiáng)多重耐藥細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感度。

聯(lián)合治療的效果會(huì)受施藥順序的影響，噬菌體治療先于抗生素治療能獲得較好的治療效果。原因有多種，如噬菌體水解酶降解MRSA的細(xì)胞壁，可輔助抗生素結(jié)合細(xì)菌藥物結(jié)合位點(diǎn)[15]。噬菌體能破壞生物膜基質(zhì)結(jié)構(gòu)，將隱藏的細(xì)菌釋放出來(lái)，受到噬菌體和抗生素的共同攻擊[24]。噬菌體穿透生物膜后在細(xì)菌密集環(huán)境中快速?gòu)?fù)制，使噬菌體密度增高，進(jìn)一步破壞生物膜，此時(shí)添加抗生素，藥物能深度滲透，在亞致死性抗生素濃度就可刺激噬菌體感染的細(xì)菌裂解，引起更強(qiáng)的細(xì)菌死亡[10]。與此相反的情況是，先使用抗生素，后使用噬菌體，由于噬菌體可感染的細(xì)菌數(shù)減少，其感染動(dòng)力學(xué)會(huì)受到負(fù)面影響，最終影響殺菌效果。

通過(guò)一項(xiàng)人體回顧性研究發(fā)現(xiàn)，MRSA噬菌體口服制劑可顯著降低抗生素治療失敗的骨髓炎患者體內(nèi)C反應(yīng)蛋白血清濃度和白細(xì)胞計(jì)數(shù)，但平均ESR沒(méi)有明顯變化，表明兩者聯(lián)合治療可能具有抗炎作用。某些抗生素會(huì)影響吞噬細(xì)胞的殺菌功能，可能導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降。相比之下，噬菌體對(duì)患者外周血吞噬細(xì)胞的殺菌能力無(wú)不良影響，更不會(huì)影響骨髓內(nèi)粒細(xì)胞的生成。兩者聯(lián)合使用可減少對(duì)免疫反應(yīng)的影響。

但二者的聯(lián)合使用也會(huì)產(chǎn)生不良反應(yīng)，抗生素是特異性噬菌體誘導(dǎo)劑，會(huì)誘導(dǎo)噬菌體編碼的整合酶基因數(shù)量增加。此外抗生素治療增加了噬菌體和細(xì)菌之間的相互作用，使噬菌體-細(xì)菌基因交換網(wǎng)絡(luò)高度連接，豐富了噬菌體編碼的基因，包括對(duì)藥物的不同抗菌機(jī)制產(chǎn)生耐藥性的基因，噬菌體編碼的抗生素耐藥基因再轉(zhuǎn)移到原始細(xì)菌中，產(chǎn)生與抗藥有關(guān)的細(xì)菌基因，從而產(chǎn)生耐藥性。

6.基因工程噬菌體治療骨髓炎：通過(guò)基因工程修飾噬菌體，不但可以增強(qiáng)其殺死MRSA的能力，還能開(kāi)發(fā)出治療骨髓炎藥物運(yùn)輸?shù)妮d體。由于噬菌體具有免疫原性，在體循環(huán)中逐漸減少。Merril等運(yùn)用基因工程技術(shù)設(shè)計(jì)出一種可長(zhǎng)期存在的噬菌體突變體，可在小鼠循環(huán)系統(tǒng)中存活超過(guò)1個(gè)月，不僅達(dá)到了治療目的，也把噬菌體應(yīng)用擴(kuò)展到感染的預(yù)防。此外，溶解性噬菌體治療可導(dǎo)致大量的細(xì)菌裂解，細(xì)菌成分和毒素的釋放可能引發(fā)免疫反應(yīng)。通過(guò)同源重組對(duì)MRSA溫和性噬菌體P954進(jìn)行了改造，使負(fù)責(zé)細(xì)菌裂解的內(nèi)溶酶基因編碼失活。體外研究表明，缺乏內(nèi)溶酶的噬菌體P954具有與野生型噬菌體相同的細(xì)菌殺傷能力。體內(nèi)研究顯示，使用該基因工程噬菌體可完全治療MRSA感染的小鼠，且沒(méi)有明確的免疫反應(yīng)。

基因工程設(shè)計(jì)的酶促噬菌體在感染過(guò)程中能表達(dá)生物膜降解酶，同時(shí)攻擊生物膜和生物膜基質(zhì)中的細(xì)菌細(xì)胞。其去除生物膜的功效明顯大于非酶促噬菌體治療的功效，可將細(xì)菌生物膜細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低約4.5個(gè)數(shù)量級(jí)。

此外，基因改造的噬菌體在與藥物結(jié)合的同時(shí)仍能維持著宿主細(xì)菌靶向性，可用于靶向藥物遞送。Yacoby等用基因工程在絲狀噬菌體被膜蛋白上顯示目標(biāo)特異性肽段，再通過(guò)一種不穩(wěn)定的連接劑將噬菌體與氯霉素或新霉素化學(xué)結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)可控釋放。噬菌體-藥物偶聯(lián)物發(fā)現(xiàn)目標(biāo)細(xì)菌后，噬菌體與目標(biāo)細(xì)菌結(jié)合，抗生素被釋放出來(lái)后幾乎完全抑制了金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，對(duì)MRSA骨髓炎的治療有一定的作用。

三、展 望

隨著抗生素的濫用，出現(xiàn)了越來(lái)越多的由MRSA導(dǎo)致的骨髓炎，使得骨髓炎越發(fā)難以治療。常規(guī)抗生素治療弊端顯現(xiàn)，因此迫切需要找到新的治療方法。一些臨床報(bào)告、體外和體內(nèi)研究表明，噬菌體療法可能是治療MRSA骨髓炎的一種可行的方法。

目前噬菌體治療MRSA骨髓炎的研究取得了一定的進(jìn)展。主要的研究集中在噬菌體以裂解的方式殺死MRSA，以及噬菌體產(chǎn)生的各類(lèi)酶降解細(xì)胞壁和生物膜，暴露隱藏的致病菌，為后續(xù)殺菌過(guò)程提供條件這兩個(gè)方面。而對(duì)噬菌體進(jìn)入細(xì)胞，殺死內(nèi)化的MRSA的研究相對(duì)較少，這種殺菌作用對(duì)治療骨髓炎至關(guān)重要，但其安全性有待進(jìn)一步研究。此外，通過(guò)將噬菌體與抗生素合理配伍，可以?xún)?yōu)化噬菌體治療效果。一些新的研究發(fā)現(xiàn)基因工程噬菌體對(duì)殺死MRSA效果良好，極大地發(fā)揮了噬菌體治療潛力。綜述目前研究，噬菌體治療優(yōu)勢(shì)使其成為治療MRSA骨髓炎最重要的選擇。

噬菌體作為一種有效的抗生素替代品，對(duì)MRSA骨髓炎治療效果顯著，應(yīng)用潛力巨大。但目前還缺乏定義明確且使用安全的噬菌體制劑和使用方法，因此仍需要通過(guò)謹(jǐn)慎而科學(xué)的方法使用噬菌體，并不斷研究其治療潛力。該研究領(lǐng)域的不斷發(fā)展，有望實(shí)現(xiàn)噬菌體療法的臨床轉(zhuǎn)化，開(kāi)啟MRSA骨髓炎治療的新時(shí)代。